Lysophosphatidic acid increases mesangial cell proliferation in models of diabetic nephropathy via Rac1/MAPK/KLF5 signaling

Kim, Donghee,Li, Hui Ying,Lee, Jong Han,Oh, Yoon Sin,Jun, Hee-Sook Nature Publishing Group UK 2019 Experimental and molecular medicine Vol.51 No.2

<▼1><P>Mesangial cell proliferation has been identified as a major factor contributing to glomerulosclerosis, which is a typical symptom of diabetic nephropathy (DN). Lysophosphatidic acid (LPA) levels are increased in the glomerulus of the kidney in diabetic mice. LPA is a critical regulator that induces mesangial cell proliferation; however, its effect and molecular mechanisms remain unknown. The proportion of α-SMA<SUP>+</SUP>/PCNA<SUP>+</SUP> cells was increased in the kidney cortex of <I>db/db</I> mice compared with control mice. Treatment with LPA concomitantly increased the proliferation of mouse mesangial cells (SV40 MES13) and the expression of cyclin D1 and CDK4. On the other hand, the expression of p27<SUP>Kip1</SUP> was decreased. The expression of Krüppel-like factor 5 (KLF5) was upregulated in the kidney cortex of <I>db/db</I> mice and LPA-treated SV40 MES13 cells. RNAi-mediated silencing of KLF5 reversed these effects and inhibited the proliferation of LPA-treated cells. Mitogen-activated protein kinases (MAPKs) were activated, and the expression of early growth response 1 (Egr1) was subsequently increased in LPA-treated SV40 MES13 cells and the kidney cortex of <I>db/db</I> mice. Moreover, LPA significantly increased the activity of the Ras-related C3 botulinum toxin substrate (Rac1) GTPase in SV40 MES13 cells, and the dominant-negative form of Rac1 partially inhibited the phosphorylation of p38 and upregulation of Egr1 and KLF5 induced by LPA. LPA-induced hyperproliferation was attenuated by the inhibition of Rac1 activity. Based on these results, the Rac1/MAPK/KLF5 signaling pathway was one of the mechanisms by which LPA induced mesangial cell proliferation in DN models.</P></▼1><▼2><P><B>Kidney disease: Mechanisms of diabetes-related damage</B></P><P>A potent molecular mediator of diabetic kidney disease induces its pathogenic effects via proteins that could be targeted with future drug therapies. Yoon Sin Oh
from Eulji University in Seongnam-si and Hee-Sook Jun from Gachon University in Incheon, both in South Korea, and colleagues treated certain cells found in the kidney’s glomerulus, the organ’s filtering unit, with a signaling molecule called lysophosphatidic acid (LPA) that is elevated in the blood of diabetic mice. They showed that LPA stimulated cellular proliferation and boosted the expression of proteins involved in regulating the cell cycle and a multipurpose signaling pathway. They then inhibited the activity of these proteins to prevent the kidney cells’ hyperproliferation, both in cell culture and in diabetic mice. The results highlight the potential of blocking mediators of LPA signaling to treat kidney-related complications of diabetes.</P></▼2>

복합 운동프로그램이 초등학생의 신체구성, 혈중지질 및 체력에 미치는 영향

전종귀,이왕록,박희근,정준현,이영란,신동원,이경숙 충남대학교 체육과학연구소 2006 體育科學硏究誌 Vol.23 No.1

The purpose of the present study was to examine the effects of combined training on the changes of body composition, blood lipid profile and fitness in elementary school students. Thirty subjects participated in the present study. The subjects were divided into two groups either exercise group for 10weeks(15n) or control group for 10weeks(l5n) The results were described as follows; 1) There were significant differences in the body weight and lean body mass after the exercise program between two groups. 2) There were no significant differences in the blood TC, HDL-C, LDL-C, TG concentration after the exercise program between two groups. 3) There were significant differences in the sit-up and flexibility after the exercise group between two groups. In conclusion, it might be thought that the combined training improved the levels of body composition and health-related fitness in elementary subjects.

페야쿠르트병을 이용한 오수정화시설의 유기물 처리 특성 및 서식 미생물 분류

전진화,김희숙,허시선,민병윤 경남대학교 환경문제연구소 1995 환경연구 Vol.17 No.-

The average concentration of BOD, SS, TKN and T-P of influent were 94.81, 105.58, 9.72㎎/L, respectively. Also, these average concentration of effluent were 7.94, 2.98, 18.21 and 4.95㎎/L, respectively. The corresponding removal efficiencies were 91.33% in BOD, 97.18% in SS, 67.30% in TKN and 49.0% in T-P. The process of this system was maintained stably because of flowing by gravity. The media used for this study was Yakult filter with specific surface area of 130㎡/㎥ and surface loading rate of 28㎡/㎥. In this system, the removal efficiencies of SS and sludge were higher than those of activated sludge process. Twenty eight senora and sixty eight species of aerobic bacteria were identified from floating water and Yakult filters in the septic tank. Especially, only two strains of the bacteria were found from the effluent. Alcaligenes, Corynebacterium, Flavobacterium, Pseudomonas, and Staphylococcus of the bacteria were found, and they were known as excellent bacteria for the degradation of organic matter. Also, Alcaligenes, Bacillus, Flavobacterium, Micrococcus, Proteus and Pseudomonas, which can denitrification organic matter, were found and phosphorus removal bacteria, Acinetobacter was identified.

일산화탄소 폭로후 고압산소 재폭로시 흰쥐 신장 및 심장의 SOD 활성 변동에 관한 연구

전영희,백두진,황세진,박준숙,정호삼 한양대학교 의과대학 1997 한양의대 학술지 Vol.17 No.1

Carbon monoxide is generated from the incomplete combustion of carbon-containing materials. Carbon monoxide cause muscle necrosis leading to myoglobinuria and acute renal failure. The hyperbaric oxygen exposure is increased production of active free radicals. Free radicals which promoted peroxidation of unsaturated fatty acids may destroy essential cellular components and itself cytotoxic materials. Superoxide dismutase, one of the protective mechanisms against tissue damage, catalyzed the dismutation of superoxide anion to less toxic product. The author performs the present study to investigate on Mn-SOD and Cu, Zn-SOD immunoreactivities in kidney and heart carbon monoxide (CO) and hyperbaric oxygen (HBO) exposure. The animals were divided CO exposure group, air release after CO exposure group, HBO exposure group and, CO and HBO exposure group. The specimen were sectioned in 16㎛ with cryostate. The Mn-SOD and CuZn-SOD immunohistochemistry was performed in renal corpuscle, proximal and distal convoluted tubules of kidney and, in sarcoplasm and sarcolemma of heart muscle. The results obtained were as follows: 1. The immunoreactivity of Mn-SOD were increased in renal corpuscles and distal convoluted tubules, were similar to control group in proximal convoluted tubules. 2. The immunoreactivity of Cu, Zn-SOD were increased than that of control group in renal corpuscles and distal convoluted tubules, were same that of the control group in proximal convouted tubules. 3. The immunoreactivity of Mn-SOD were increased at all experimental group of sarcoplasms of heart muscle. 4. The immunoreactivity of Cu,Zn-SOD were increased than that of control group in sarcolemma of heart muscle. These results suggest that the immunoreactivity of SOD after CO or HBO exposure is greatly increased in kidney and heart.

고수의 유리 아미노산, 무기성분 및 정유성분에 관한 연구

한준희,신미경,서은숙 圓光大學校 1995 論文集 Vol.30 No.2

고수의 일반성분, 유리 아미노산, 무기성분 및 정유성분을 분석한 결과는 다음과 같다. 1. 일반성분은 수분 82.1%, 단백질 4.06%, 지방 1.83%, 섬유소 2.52%, 회분 2.27%이었다. 2. 확인된 아미노산은 glutamic acid, leucine, aspartic acid, phenylalanine, glycine, alanine, lysine, isoleucine, threonine, valine, arginine, serine, proline, histidine, tyrosine, methionine 등 총 16종으로 이들중 glutamic acid의 함량이 가장 높고, methionine이 가장 낮은 수준이었으며 필수아미노산인 tryptophan은 검출되지 않았다. 데쳤을 경우 아미노산의 손실율은 총 아미노산 함량의 약 16.7% 이었다. 3. 무기성분 중 Ca함량이 53.7mg으로 가장 많았으며, Cd이 3.6mg으로 가장 적었다. 데쳤을 경우 Na, K, Mg함량은 생것과 큰 차이가 없었으나 Ca과 Cd 함량은 생것의 각각 13%, 44.5%가 감소되었다. 4. 정유성분으로는 linalool, isopulegol, terpinen-4-ol, α-terpineol이 확인되었으며 이중 α-terpineol의 함량이 13,982㎍으로 가장 많았고, terpinen-4-ol 8,285㎍, linalool 5,142㎍, isopulegol 3,579㎍순이었으며 데쳤을 경우 isopulegol은 거의 존재하지 않았다. This study was carried out in order to investigate the content of amino acids, minarals and essential oil in coriander. The contents of moisture, protein, lipid, crude fiber and ash were 82.12%, 4.06%, 1.83%, 2.52% and 2.27%, repectively. 16 Kinds of amino acid were analyzed by amino acid autoanalyzer and total free amino acid content was 15,733mg/100g, after blanching, that was 13,099mg/100g and decreased to 83.3%. glutamic acid(2,004mg/100g) was the richest among amino acids and total amounts of the essential amino acids was 6,612mg/100g and was 40.03% of total amino acids. contents of Na, K, Ca, Mg and Cd in raw coriander were 26.8mg, 24.6mg, 53.7mg, 17.6mg and 3.6mg, respectively and Ca content was the richest. Na, K and Mg contents in banching coriander were similiar to raw coriander, but Ca and Cd content were lower than raw coriander. the essential oil components of coriander were α-terpineol, terpinen-4-ol, linalool and isopulegl, and α-terpineol content was richest and isopulegl content was lowest.

DNA 및 유전자 발현의 전자현미경 관찰

박민희,이숙영,박열,김성준 조선대학교 기초과학연구소 1989 自然科學硏究 Vol.12 No.1

본 연구는 전자현미경에 의해서 플라스미드 DNA의 모양과 크기 및 염색체 DNA의 유전자 발현 과정을 관찰하였다. 전자현미경 관찰을 위하여 본 연구에서는 Miller chromatin-spreading법과 micapress adsorption법을 이용하여, pBN_18, pBN_18A, pBN_18B 그리고 pBR_322 플라스미드 DNA들을 관찰하였다. 그 결과 이들의 크기가 각각 1.87±0.28(5.6kb)μm, 1.53±0.12(4.6Kb)μm, 1.53±0.12(4.6Kb)μm, 그리고 1.50±0.03(4.50Kb)μm이었음을 micapress adserption법에 의하여 측정하였다. 그리고 Miller chromatin-spreading법을 이용한 chromosomal DNA의 유전자 발현과정의 관찰로 transcription을 관찰함으로써 전사과정이 활발한 유전자 부위와 전사과정이 활발하지 않은 유전자 부위를 관찰할 수 있었다. 따라서 세포내에서 방출된 플라스미드 DNA를 선별적으로 관찰헐 수 있는 micapress adsorption법을 이용하여 분자량이 작은 플라스미드의 관찰을 신속하고 유용하게 할 수 있었으며, 플라스미드 DNA들은 2가 양이온이 없어도 mica에 잘 흡착되어졌다. 또한 Miller chromatin-spreading법은 E. coli에서 유전자 발현에 고나한 초미세구조적 관찰로 개개의 유전자 수준에서 조절기작을 연구할 수 있게 하며 유전자들의 replication과 transcription 수준에서의 물리적 상호작용을 관찰하는데 적용될 수 있을 것으로 사료된다. This study was visualized the transcriptional activity, the size and the model of plasmid DNA by electron microscopy. Micapress adsorption method that allows selective visualization of the plasmid DNA released in situ from the bacterial cell is rapid and useful for visualization of plasmids. The released plasmid DNA was adsorbed preferentially on mica in a divalent cation-free solution, and the Muller chromatin-spreading method may allow the physical interaction and transcription to be visualized. Therefore micapress adsorption method and Miller chromatin-spreading method used to visualize the plasmid DNA, chromosomal DNA and gene expression. As a result, their estimated sizes of plasmid pBN18, pBN18A, pBN18B and pBR322 were 1.87±0.28(5.6Kb)㎛, 1.53±0.12(4.6Kb)㎛, 1.53±0.12(4.6Kb)㎛, and 1.50±0.03(4.50Kb)㎛, respectively, and transcriptional activity was observed by the visualization of gene expression of chromosomal DNA.

국내에서 발생하고 있는 사람 브루셀라증의 임상적 특성

김연숙,최영실,오원섭,권기태,이혁,이선희,손준성,김신우,장현하,정숙인,고관수,박미연,백경란,송재훈 대한감염학회 2006 감염과 화학요법 Vol.38 No.6

배경 : 2002년 내국인에서의 첫 사람 브루셀라증의 증례 보고 이후 국내에서 사람 브루셀라증이 빠른 증가를 보이고 있다. 이에 연구자들은 국내에서 발생하는 브루셀라증의 임상적 특성을 연구하고자 하였다. 방법 : 2003년부터 2006년 7월까지 7개 대학병원에 내원한 환자들을 대상으로 WHO의 진단기준에 의하여 확진된 브루셀라증 환자들의 의무기록을 후향적으로 조사분석 하였다. 배양된 균은 삼성서울병원에 의뢰하여 16S rRNA 유전자 분석방법을 이용하여 종을 확인하였고, 표준시험관응집검사는 국립보건원에 의뢰하여 시행하였다. 결과 : 34예의 환자들이 브루셀라증으로 확진되었고, 31명이 남자였다. 혈액에서 B. abortus가 증명된 경우가 8예, 표준시험관 응집검사상 의미 있는 항체가 상승을 보인경우가 26예이었다. 환자들은 대부분 축산업관련 종사자였고, 추후 브루셀라증으로 확진된 소와의 직접 접촉을 통해 감염된 것으로 여겨진다. 국내 사람 브루셀라증의 가장 흔한 증상은 발열이었고, 위장관계 합병증이 가장 흔히 동반되었다. 치료로는 doxycycline/rifampicin이 24예의 환자에서 doxycycline/aminoglycoside (streptomycin 혹은 gentamicin)이 10예의 환자에서 6주 이상의 기간 동안 투여되었다. 치료에 반응을 보이지 않는 환자는 없었고, 재발이 1예 있었다. 결론 : 국내에서 발생하는 사람 브루셀라증의 원인균으로 현재까지 분리 동정된 것은 B. abortus이며, 소 브루셀라증의 증가로 인해 인체감염사례가 함께 증가하는 것으로 사료된다. 위험 직업군 종사자들에서 감염된 소와의 직접 접촉을 통해 주로 발생하고 있는 브루셀라증의 임상종상은 국외에서 발생하는 경우와 유사한 양상을 보이고 있으며 치료에 대한 반응은 비교적 좋은 편이긴 하나, 추후 보다 많은 환자들을 대상으로 한 연구가 필요하리라 사료된다. 사람 브루셀라증의 조절을 위해서는 소 브루셀라증의 조절이 필수적이며, 브루셀라증의 조절에 성공한 선진국의 사례를 적극적으로 도입해야 할 것으로 생각된다. Background : Since the first Korean case of human brucellosis was reported in 2002, the incidence of human brucellosis has been rapidly increasing. We performed this study to evaluate the clinical characteristics of human brucellosis occurring in South Korea. Materials and Methods : Demographic features, clinical manifestations, and therapeutic outcomes of cases confirmed as brucellosis according to WHO diagnostic criteria were evaluated. Species of Brucella isolates were identified with 16S rRNA gene sequencing method. Serologic diagnosis was performed with standard tube agglutination test (STA). Results : A total of 34 cases were enrolled from 2003 to 2006 in six hospitals. Eight cases were confirmed with the isolation of Brucella from blood and 26 cases were confirmed with titer of antibodies ≥1:160 by STA. Male (31) was predominant and most of the patients were cattle farmers. The most common transmission route was direct contact with infected or their cattle byproducts. Fever was the most prominent symptom and fatigue followed. Gastrointestinal and musculoskeletal systems were commonly complicated. Patients were treated with doxycycline and rifampin or aminoglycosides for more than 6 weeks. All patients responded well to the therapeutic regimens, but one patient relapsed 10 months after treatment. Conclusion : Brucellosis occurring in Korea has been caused by B. abortus, whose preferred natural host animals are cattle. Korean patients were infected through direct contact with bovine brucellosis. Clinical manifestations of brucellosis were similar to those occurring worldwide. Therapeutic outcomes were good among patients with brucellosis in Korea. In order to prevent human brucellosis, measures to eradicate bovine brucellosis should precede.

장티푸스 진단에 있어서 Vi-Indirect Fluorescent Antibody Test의 민감도 및 특이도

장경희,류동렬,박성하,박병규,이준구,염준섭,최영화,송영구,김현숙,정윤섭,김준명 대한감염학회 1998 감염 Vol.30 No.4

목 적 : 장티푸스는 체액의 세균배양검사에서 Salmonella typhi의 분리로 확진하지만 조기진단을 위해서는 혈청학적인 검사가 도움이 된다. 저자 등은 1989년 이후 장티푸스진단에 S. typhi의 Vi항원을 이용한 간접형광항체법 (Vi-indirect fluorescent antibody test : Vi-IFAT)을 도입하였다. 이에 지난 7년간의 검사결과를 토대로 Vi-IFAT의 민감도 및 특이도를 규명하고자 하였다. 방 법 : 1989년부터 1996년까지 연세대학교 의과대학 세브란스 병원에 발열을 주소로 내원하여 Vi-IFAT가 의뢰된 환자 중 발열의 원인이 확진된 744명의 환자를 대상으로 하였으며, Vi-IFAT에 있어서 양성반응은 1:64이상으로 하였다. 결 과 : 1) 세균배양검사에서 확진된 장티푸스 환자 178예 중 168예에서 양성반응을 보여 민감도는 94.4%이었다. 항체가는 1:64가 89예, 1:128이 36예, 1:256이 27예, 그리고 1:512가 16예이었다. 위음성이었던 10예의 항체가는 1:32가 7예, 1:16이하가 3예이었다. 2) 발열을 주소로 내원한 환자 중 장티푸스 이외의 다른 질환으로 확진된 566예 중 538예에서 음성반응을 보여 특이도는 95.1%이었다. 항체가는 1:32가 117예, 1:16이하가 421예이었다. 위양성이었던 28예의 항체가는 1:64가 23예, 1:128이 5예이었으며, 장티푸스 이외의 살모넬라증이 4예, 요로계감염이 10예, 소화기계감염이 6예, 호흡기 계감염이 5예, 악성 종양이 2예, 그리고 바이러스 감염이 1예이었다. 3) Vi-IFAT 양성인 196예 중에서 장티푸스는 168예로 양성예측율은 85.7%이었으며, Vi-IFAT 음성인 548예 중 장티푸스 이외의 발열질환은 538예로 음성예측율 98.2%이었다. 4) 배양검사와 Widal test 사이의 일치율 (Kappa value)는 0.28로 poor agreement를 보였으며 Vi-IFAT와 Widal test 사이의 Kappa value는 0.74로 good agreement를 보였다. 그러나 배양검사와 Vi-IFAT 사이의 Kappa value는 0.86으로 excellent agreement를 보여 일치율이 가장 높은 검사는 배양검사와 Vi-IFAT라 할 수 있겠다. 5) 장티푸스 환자에 있어서 Vi-IFAT의 양성율은 발열기간이 1중 미만인 환자에서는 68%, 1내지 2주인 환자에서는 89.5%, 2주이상인 환자에서는 100%이었다. 결 론 : Vi 항원을 이용한 간접형광항체법 (Vi-IFAT)은 장티푸스 진단에 높은 민감도 및 특이도를 가지며, 또한 조기진단에 있어서도 임상적으로 유용함을 확인할 수 있었다. Background : Typhoid fever is diagnosed by culture or serological study. The confirmative diagnosis of typhoid fever is made by culture of the causative organism usually from body fluids. Serological test is a supportive diagnositic tool, which is useful for early diagnosis. In Severance Hospital, Vi-indirect foluorescent antibidy test(Vi-IFAT) using the Vi-antigen of Salmonella typhi has been used in the diagnosis of typhoid fever since 1989. We investigated the test results from the past 7 years, in order to clarify the sensitivity and specificity of Vi-IFAT. Methods : A retrospective study was done on patients whose chief complaint was fever and who were tested using Vi-IFAT in the Severance Hospital from 1989 to 1996. The positive value for Vi-IFAT was defined as 1:64 or higher. Results : The sensitivity and specificity of Vi-IFAT for typhoid fever was 94.4% and 95.1%, respectively. The positive and negative predictive values were 85.7% and 98.2% respectively. Positive rates of Vi-IFAT after fever onset increased with time and 68% were positive before the first week. From the first to the second week, 89.5% were positive and after the second week, 100% were positive. Conclusion : Vi-IFAT is not only a valuable serologic test for the diagnosis of typhoid fever, but also useful in the early diagnosis of the disease.

팥과 녹두의 이소플라빈 함량과 항산화 및 혈전용해 활성

오혜숙,김준호,이명희 한국조리과학회 2003 한국식품조리과학회지 Vol.19 No.3

팥과 녹두는 떡의 소나 앙금 등 주로 전분의 특성을 이용하는 형태로 소비가 제한적인 편이다. 식생활을 통해 질병의 예방 및 개선 가능성이 대두되면서 각종 식물체로부터 여러 생리활성물질의 활성 탐구 및 추출에 많은 노력이 이루어지고 있으나, 대두와 같은 두류로 분류되는 팥과 녹두의 경우 이들 생리활성물질에 대한 연구는 거의 없는 실정이다. 본 연구에서는 대두에 비해 상대적으로 연구가 미진한 팥과 녹두의 생리활성 및 이소플라본 함량을 조사하였고, 그 결과는 다음과 같다. 1. 팥과 녹두에서는 daidzein이 검출되지 않았고, genistein은 건조중량 1㎏당 40.7 mg과 27.8 mg이 들어있었다. 2. 팥과 녹두의 전자공여능은 90%의 활성을 보인 팥이 84.6%의 활성을 나타낸 녹두에 비해 유의적으로 높았다. 3. 팥과 녹두의 SOD 유사활성 역시 거의 같은 수준으로 높았고, 매우 안정적이었다. 4. 혈전용해능은 팥의 경우 원액에서는 활성이 없었으나, 추출액의 pH를 6.4로 조절한 후 18시간 동안 냉장처리한 결과 비교적 큰 활성을 보였으며, pH 3.0으로 조절시 더욱 증가하였다. 녹두는 추출액을 pH 6.4와 3.0으로 조절시 모두 비활성도가 증가하였으나 pH 3.0에서는 pH 6.4보다 활성이 낮았다. 이들 시료는 36℃에서 배양시 14시간 까지는 반응을 거의 보이지 않다가 15시간이 지나면서 활성이 크게 나타나는 특이성을 보였다. 5. 열처리가 혈전용해활성에 미치는 영향을 비교해 보면, 팥과 녹두 모두 100℃에서 10분 처리시 가장 활성이 컸고, 그 다음이 55℃에서 30분, 100℃에서 30분 순으로 유사한 양상을 보였다. 특히 100℃에서 10분간의 열처리시 55℃에서 30분 처리한 것에 비해 혈전용해활성이 증가한 것으로 미루어 팥과 녹두의 혈전용해활성은 열에 대한 안정성이 크다고 할 수 있다. 반면 100℃에서 30분간의 과도한 열처리는 활성의 저하를 초래했다. This study was conducted to investigate the isoflavone (daidzein and genistein) contents. and the antioxidative and fibrinolytic activities of red and mung beans. Daidzein was not found in either the red or mung beans. The genistein contents of the red and mung beans were 40.7 and 27.8 mg/kg, respectively. Both samples had very high electron donating abilities and SOD-like activities. Fibrinolytic activities were not detected in the crude mung bean extract, but fibrinolytic substances were purified or activated under various pH conditions and with heat treatments. With heat treatment at 100℃ for 10 min. the specific activity was increased 4.61 fold. This study revealed that. although red and mung beans were poor in isoflavone, they could be good sources for functional products due to their strong antioxidative activities and heat- and acid-resistant proteolytic abilities.

폐 Cryptococcosis

이미숙,우준희 대한감염학회 1998 감염 Vol.30 No.1

과거 수십 년간 Cryptococcus neoformans의 발병은 호흡기로의 유입이 주된 감염 경로로 여겨져 왔으나, 폐 cryptococcosis는 모든 cryptococcosis의 10% 정도 밖에 되지 않는다. 수막염을 동반한 파종성 cryptococcosis 감염이 임상적으로 흔하지만 최근에는 폐렴 단독으로 발현하는 예들이 증가되고 있다. 또한 1980년대 이후 후천성 면역 결핍증의 발생과 함께 이들 환자에서 진균성 기회 감염의 흔한 원인균이다.