대장균에서 재조합 Rat Guanine deaminase 유전자의 발현, 정제 및 분석

성연선,곽상준,박대성,김향원,이희영 단국대학교 1998 論文集 Vol.33 No.-

Guanine deaminase(EC, 3.5.4.3, ;Guanine aminohydrolase, GAH, GDA) catalyzes the deamination reaction of guanine to xanthine irreversibly. The cDNA encoding rat guanine deaminase had been isolated from a λZAPII rat brain expression library using antibody generated against purified rat guanine deaminase. Toe obtain recombinant GDA and analyze the property of catalytically conserved retion, here we expressed the recombinant GDA in E.coli and showed the retention of its catalytic activity similar to native rat GDA. To make the construct carrying coding region to GDA in pGEX4T prokaryotic expression vector, the region encompassing open reading frame of pBlue-GDA was PCR amplified and subcloned into pGEX4T prokaryotic expression vector with correct reading frame of fusion carrier glutathione S-transferase. After transformation to E.coli DH5a. The bacteria carrying pGEX-GDA was grwon in the condition of IPTG induction. The fusion protein GST-GDA was purified with GSH-sepharose affinity chromatography. The purified GST-GDA was subsequently digested with biotin-conjugated thrombin, and thrombin was removed by streptavidin agarose. Then sample were treated with GSH-sepharose affinity chromatography to remove the contaminant GST and GST-GDA. The purified recombinant GDA showed 70% of specific activity relative to that of purified rat GDA. The recombinant GDA showed identical molecular weight with rat GDA in SDS-PAGE.

말기심부전 환자의 부전심장에서의 장바이러스와 인형 거대세포바이러스 감염양상

최성준,김석연,홍석근,김효수,오병희 대한순환기학회 1998 Korean Circulation Journal Vol.28 No.9

국내에서 발생하고 있는 사람 브루셀라증의 임상적 특성

김연숙,최영실,오원섭,권기태,이혁,이선희,손준성,김신우,장현하,정숙인,고관수,박미연,백경란,송재훈 대한감염학회 2006 감염과 화학요법 Vol.38 No.6

배경 : 2002년 내국인에서의 첫 사람 브루셀라증의 증례 보고 이후 국내에서 사람 브루셀라증이 빠른 증가를 보이고 있다. 이에 연구자들은 국내에서 발생하는 브루셀라증의 임상적 특성을 연구하고자 하였다. 방법 : 2003년부터 2006년 7월까지 7개 대학병원에 내원한 환자들을 대상으로 WHO의 진단기준에 의하여 확진된 브루셀라증 환자들의 의무기록을 후향적으로 조사분석 하였다. 배양된 균은 삼성서울병원에 의뢰하여 16S rRNA 유전자 분석방법을 이용하여 종을 확인하였고, 표준시험관응집검사는 국립보건원에 의뢰하여 시행하였다. 결과 : 34예의 환자들이 브루셀라증으로 확진되었고, 31명이 남자였다. 혈액에서 B. abortus가 증명된 경우가 8예, 표준시험관 응집검사상 의미 있는 항체가 상승을 보인경우가 26예이었다. 환자들은 대부분 축산업관련 종사자였고, 추후 브루셀라증으로 확진된 소와의 직접 접촉을 통해 감염된 것으로 여겨진다. 국내 사람 브루셀라증의 가장 흔한 증상은 발열이었고, 위장관계 합병증이 가장 흔히 동반되었다. 치료로는 doxycycline/rifampicin이 24예의 환자에서 doxycycline/aminoglycoside (streptomycin 혹은 gentamicin)이 10예의 환자에서 6주 이상의 기간 동안 투여되었다. 치료에 반응을 보이지 않는 환자는 없었고, 재발이 1예 있었다. 결론 : 국내에서 발생하는 사람 브루셀라증의 원인균으로 현재까지 분리 동정된 것은 B. abortus이며, 소 브루셀라증의 증가로 인해 인체감염사례가 함께 증가하는 것으로 사료된다. 위험 직업군 종사자들에서 감염된 소와의 직접 접촉을 통해 주로 발생하고 있는 브루셀라증의 임상종상은 국외에서 발생하는 경우와 유사한 양상을 보이고 있으며 치료에 대한 반응은 비교적 좋은 편이긴 하나, 추후 보다 많은 환자들을 대상으로 한 연구가 필요하리라 사료된다. 사람 브루셀라증의 조절을 위해서는 소 브루셀라증의 조절이 필수적이며, 브루셀라증의 조절에 성공한 선진국의 사례를 적극적으로 도입해야 할 것으로 생각된다. Background : Since the first Korean case of human brucellosis was reported in 2002, the incidence of human brucellosis has been rapidly increasing. We performed this study to evaluate the clinical characteristics of human brucellosis occurring in South Korea. Materials and Methods : Demographic features, clinical manifestations, and therapeutic outcomes of cases confirmed as brucellosis according to WHO diagnostic criteria were evaluated. Species of Brucella isolates were identified with 16S rRNA gene sequencing method. Serologic diagnosis was performed with standard tube agglutination test (STA). Results : A total of 34 cases were enrolled from 2003 to 2006 in six hospitals. Eight cases were confirmed with the isolation of Brucella from blood and 26 cases were confirmed with titer of antibodies ≥1:160 by STA. Male (31) was predominant and most of the patients were cattle farmers. The most common transmission route was direct contact with infected or their cattle byproducts. Fever was the most prominent symptom and fatigue followed. Gastrointestinal and musculoskeletal systems were commonly complicated. Patients were treated with doxycycline and rifampin or aminoglycosides for more than 6 weeks. All patients responded well to the therapeutic regimens, but one patient relapsed 10 months after treatment. Conclusion : Brucellosis occurring in Korea has been caused by B. abortus, whose preferred natural host animals are cattle. Korean patients were infected through direct contact with bovine brucellosis. Clinical manifestations of brucellosis were similar to those occurring worldwide. Therapeutic outcomes were good among patients with brucellosis in Korea. In order to prevent human brucellosis, measures to eradicate bovine brucellosis should precede.

전국 단위 감시체계의 현황과 전망

강성규,안연순,지영구,김형옥,하미나,권호장,백남종,김성아,홍윤철,김재용,강대희,정혜선,하은희 대한산업의학회 2001 대한직업환경의학회지 Vol.13 No.2

Chlorpromazine이 백서 해마에서 전기경련 충격에 의한 MAPK 타이로신 인산화에 미치는 영향

주연호,정성훈,전송희,강웅구,김용식,김상욱,박주배 大韓神經精神醫學會 1997 신경정신의학 Vol.36 No.2

Object : In order to examine the interaction mechanisms of electroconvulsive shock(ECS) and antipsychotic drug at the level of molecular biology, we observed the effect of chlorpromazine pre-treatment on the activation of mitogen activated protein kinase(MAPK) induced by electroconvulsive shock(ECS) in rat hippocampus Method : Male Sprague-Dawley rats were divided into 2 groups. To the experimental group chlorpromazine(20㎎/㎏) was given intraperitoneally, and to the control distilled water was given instead. Thirty minutes later, ECS was given and the hippocampus was dissected out 2 minutes thereafter. Immunoblotting with antiphosphotyrosine antibody was carried out, and the signal intensity at 42kDa band was quantitized using densitometer. The obtained result was compared by student t-test between the experimental and the control group. The absolute amount of MAPK was measured by immunoblotting with anti-MAPK antibody. Result : The tyrosine phosphorylation of MAPK reached peak at 2 minutes after ECS. However, in the chlorpromazine pre-treated group, the peak level of MAPK tyrosine phosphorylation was significantly attenuated(t=-3.12, df=14, p=0.008) compared to the control. In contrast to this, the absolute amount of MAPK did not differ between the pretreated and the control group. Conclusion : Chlorpromazine attenuated the tyrosine phosphorylation of MAPK by ECS. This finding seems to be related to the fact that chlorpromazine pre-treatment changed the cfos expression by ECS in rat brain. Antipsychotic drug and ECS might interact at the level of MAPK signal transduction system, and this might explained the observed synergistic effect of two treatment modality.

참깨의 栽이 收量構成要素, 脂肪酸組成 및 잎마름病 發生에 미치는 影響

李徹熙,朴然圭,朴栽成 충북대학교 농업과학기술연구소 1994 農業科學硏究 Vol.12 No.1

This experiment was carried out to investigate the effect of planting time on growth character, yield components, fatty acid composition and leaf blight caused by Corynespora cassiicola in sesame. Dry weight of plant was the highest in sowing on April 25 and it was reduced with delaying sowing dates. Growth stage which increased dry weight of plant most rapidly was maturation period and capsule weight was drastically increased on 60 to 70 days after sowing. Corynespora leaf blight was severe with delaying the sowing date. Ansan variety had the highest occurrence rate of Corynespora leaf blight in sowing on June 25, 70 days after sowing and Danbaek variety in sowing on June 10, 80 days after sowing. Period when showed rapid increase of Corynespora leaf blight was from August 10 to August 20. Yield components were decreased with delaying the sowing date and capsule number per plant was most severely decreased with planting after June 10. Weight of 1,000 grains was decreased to 0.4-0.5g in sowing on June 25 compared to 2.8g of 1,000 grain weight in sowing on April 25. Maturation rate was also reduced from 87 to 97% in sowing on April 25 to 29-32% in sowing on June 25. Yield with sowing on April 25 was 81 and 89kg/10a with Ansan and Danbaek varieties, respectively, while it was decreased to 36 and 37kg/10a with sowing on June 25. Concentration of linoleic acid was high in sowing on June 25, while concentration of oleic acid was high in sowing on both May 10 and May 25.

産褥期 感染 誘發 細菌의 生育을 억제하는 韓藥材 探索에 關한 硏究

임재연,성연수,김희진,이태균 동국대학교 한의학연구소 1997 東國韓醫學硏究所論文集 Vol.6 No.1

産褥期 感染이란 分娩後 生殖器의 細菌에 의한 感染을 意味하며, 産後 體溫上昇의 大部分은 骨盤感染에 의한 것으로 産褥期 感染의 重要한 指漂가 된다. 한의학에서 産後發熱의 病因病耭는 주로 邪毒感染, 血瘀, 外感, 血虛 등으로 보았으며, 치료는 一般的으로 産後疾患에는 處證이 많아 發表攻裏를 過度하게 하지 않고, 氣血과 營衛의 調和에 위주로 하나, 外感과 裏實證을 疏怒히 하면 안된다. 따라서 産後發熱을 惹起하는 各種 原因菌에 對한 客觀的인 抑制效果의 檢證은 産後發熱의 治療率을 높이는데 중요하다. 그 결과 산욕기감염을 유발하는 各種 細菌에 對해 黃連, 烏梅, 五味子 등의 水溶性 抽出物이 杭菌活性이 相對的으로 좋은 效果를 보였다. 따라서 産褥期 感染의 治療에 이들 韓藥材를 이용하면 보다 效果的일 것으로 생각된다. Deparment of Oriental Medicine, Graduate School of Dongguk University, Major in Oriental Ob & Gy. Various kinds of medicinal herbs and prescribed herb medicines which have usually been used for treatment of reducing fever, purging intense heat, and detoxication were secreened for antibacterial activity against Proteus vulgaris, S. aureus, and E. faecalis which causing puerperal infection. Minimal inhibitory concentrations of water- and ethanol-soluble extracts of Hwangyon(C. japonica), Omae(P. mume), and Omiza(S. chinensis) were determined and using thin-layer chromatography the extracts of Hwangyon and Omiza were separated. The results obtained were as follows: 1. The water-soluble extracts of Keumeunhwa(L. japonica), Chiza(G. jasminoides), Hwangyon(C. japonica), Dansam(S. miltiorrhiza), Omae(P. mume) and Omiza(S. chinensis) showed antibacterial activities against P. vulgaris ; among them, the extracts of Hwangyon, Omae, and Omiza showed high antibacterial activities. The water-soluble extracts of Keumeunhwa(L. japonica), Hwangyon(C. japonica), Hwangkeum(S. baicalensis), Hwangbaek(P. amurense), Dansam(S. miltiorrhiza), Daehwang(R. coreanum), Omae(P. mume), Omiza(S, chinensis), Gingseng(P. ginseng), and Gamcho(G. uralensis) showed antibacterial activities against S. aureus ; among them, the extracts of Hwangyon and Omiza showed high antibacterial activities. The water-soluble extracts of Banggi(C. trilobus), Daehwang(R. coreanum), Omae(P. mume), Omiza(S. chinensis), and Gamcho(G. uralensis) inhibited the cell growth of E. faecalis ; among them, Omae and 0miza showed high antibacterial activities. The extract of Hwangyon(C. japonica) and Omae(P. mume) showed no inhibition against E. coli. However, the extract of Omiza(S. chinensis) inhibited cell growth of both E. coli and B. subtilis. 2. The water- and ethanol-soluble extract of Hwangyon(C. japonica) showed antibacterial activities against P. vulgaries and S. aureus, those of Omae(P. mume) against P. vulgaris and E. faecalis, and those of Omize(S. chinensis) against all species tested, P. vulgaris, S. aureus, and E. faecalis. With the exception that ethanol-soluble extract of Hwangyon(C. japonica) showed much higher antibacterial activity against S. aureus than water-soluble one, antibacterial activities of both water- and ethanol-soluble ones were similar to each of other two medicinal herbs. 3.When the prescribed herb medicines were tested, Sambohwan showed antibacterial activities against P. vulgaris and S. aureus. No prescribed herb medicine inhibited the cell growth of E. faecalis. 4. Minimal inhibitory concentrations(MICs) of both water- and ethanol-soluble extracts of Hwangyon (C. japonica), Omae(P. mume), and Omiza (S. chinensis) against P. vulgaris were 2.5㎎/㎖, 10㎎/㎖, and 20㎎/㎖, respectively. Those of both Hwangyon (C. japonica) and Omiza(S. chinensis) against S. aureus were 1.25㎎/㎖ and 10㎎/㎖, respectively. MICs of water-soluble extracts of Omae(P. mume) and Omiza(S. chinensis) aganist E. faecalis were 2.5㎎/㎖ and 5㎎/㎖, and those of ethanol-soluble extracts were 5㎎/㎖ and 10㎎/㎖, respectively. Except for those of E. faecalis, the cell growth of P. vulgaris and S. aureus were inhibited by much lower concentration of ethanol-soluble extracts used. As a result, the antibacterial compounds against P. vulgaris, S. aureus, and E. aecalis are contained in the extracts of Hwangyon(C, japonica), 0mae(P. mume), 0miza(S. chinensis), the prescribed herb medicine, Sambohwan, and might be used for treatment of puerperal infection. Further study should be carried out to identify which compounds affect the cell growth inhibition of P. vulgaris, S. aureus, and E. faecalis.

mecA 양성 메티실린 내성 포도구균의 mec 조절유전자에 대한 분자역학적 연구 및 다양성 분석

우희연,이남용,맹성호,한승훈,인경수,김상욱,성승용,김익상,최명식 대한화학요법학회 2000 대한화학요법학회지 Vol.18 No.3

목적 : 병원 감염과 지역 감염의 원인균으로서의 중요성이 증가되고 있는 MRSA와 MRCNS의 메티실린 내성 관련 유전자에 대해 분자역학적인 조사를 시행하고 mec 조절유전자의 다양성을 분석하여 분자유전학적 연구와 감염 관리에 기본적 자료를 제공하고자 연구를 시행하였다. 방법 : 본 연구에서는 국내 동일 대학병원에서 분리된 mecA 양성 MRSA 78균주와 MRCNS 36균주를 대상으로 항균제 감수성 검사와 중합효소연쇄반응을 시행하여 표현형과 유전형의 분포를 알아보고 내성 정도와 유전형의 상관성을 분석하였다. 결론 : 최소억제농도를 측정하여 oxacillin 감수성 양상을 알아본 결과 총 90개의 MRSA 임상검체 중 3균주에서 감수성을 보였고, MRCNS 36균주는 모두 내성을 보였으며, 고도 내성을 보이는 균주일수록 다제내성을 보이고 있었다. 중합효소연쇄반응으로 mecA 유전자 유무를 분석하여 mecA 양성을 보인 MRSA 78균주와 MSCNS 36균주 만을 대상으로 mec 조절유전자에 대한 중합효소연쇄반응을 시행하여 유전형의 분포를 조사하였다. 그 결과 MRSA와 MRCNS 모두에서 mecA-Pr-mecA-mecR1-mecI형, mecA-Pr-mecA-mecR1형과 mecA-Pr-mecA-mecR-1의 5′말단형의 3가지 유전형이 공통적으로 관찰되었는데, 이외에 MRSA에서는 mecA-mecR1형, mecA-mecR1의 5′말단형이, MRCNS에서는 mecA-Pr-mecA형과 mecA형이 추가로 분리되었다. 유전형의 분포를 연도별로 분석한 결과 연도별로 우세한 유전형이 서로 다른 것을 알 수 있었다. 유전형과 내성 정도의 상관성을 분석한 결과, mecA-Pr-mecA-mecR1을 보유한 MRSA의 경우 mecA 억제유전자로 생각되는 mecI 유전자 유무에 관계없이 모두 고도 내성을 나타내어 mecI의 유무는 내성 정도와는 일정한 관련이 없었으나, MRSA와 MRCNS 모두에서 mecI와 동시에 mecR1의 3′말단이 결혼된 유전형이 저도 및 중등도 내성을 보이는 균주에서 유의하게 많이 관찰되어 mecI가 결손된 균주에서는 mecR1의 3′말단부위의 유무가 내성 정도의 결정에 중요한 역할을 할 것으로 생각하였다. 결론 : 국내에서 분리되는 메티실린 내성 포도구균의 유전형의 분포가 국외 분리주와 차이를 보이는 것으로 관찰되었다. 또한 기존의 보고와는 달리 메티실린 내성 정도와 유전형 사이에 유의한 연관성이 있는 것으로 관찰되어 mec조절유전자가 내성 발현 뿐만 아니라 내성 정도의 결정에 중요한 역할을 하는 것으로 관찰되었다. MRSA가 중요한 감염균임에도 불구하고 아직까지 MRSA의 내성기전에 대해 확실하게 규명되지 않아 치료가 더욱 어려워지고 있는 실정이므로 이에 대한 더욱 종합적인 연구와 동시에 발생과 확산을 막기 위한 노력이 필요할 것으로 생각된다. Background : High prevalence of methicillin resistance has been noticed in staphylococci which also have been recognized as important nosocomial and multi-drug resistant pathogens. In this study, we investigated the distribution of mec regulator genes and the presence of the mutation in mecIgene to reveal the resistance mechanism at molecular level. Methods : The isolates included 90 clinical isolates of MRSA, 36 MRCNS of which methicillin resistance were determined by disk diffusion test and isolated in a single hospital during 1996-1999. We performed microdilution MIC test for oxacillin resistance and Kirby-Bauer test for other antibiotics. Genotypes of mecA positive (determined by PCR) isolates (78 MRSA, 36 MRCNS) were investigated by PCR amplification of mec regulator genes such as 3' end and 5' end of mecR1. mecI, and Pr-mecA. Results : In MIC assay, all MRSA strains except 3 strains and all MRCNS strains showed oxacillin resistance. The level of resistance correlated to the multi-drug resistance. Seven genotypes were observed in mecA positive MRSA and MRCNS. Differences of predominant genotypes among years isolated and among species were observed. Deletions of the 3' end of mecR1 and the mecI were more frequently observed in the low- and borderline-level resistant MRSA and MRCNS (P(0.05). So the important role of 3' end of mecRI in determining resistance level was suggested. Conclusion : This study demonstrated that genomic distribution of methicillin-resistant staphylococci isolated in Korea was different from that of strains isolated in other countries. And important role of mec regulator genes for expression of methicillin resistance was suggested.

Helium-Oxygen Plasma 조사에 의한 방사능 저항 미생물 Deinococcus radiodurans 살균

박연희,김성미,김종일 서울여자대학교 자연과학연구소 2006 자연과학연구논문집 Vol.18 No.-

다양한 살균법이 있지만 열에 약한 물질을 살균 처리하는 방법으로는 여러 문제점을 지닌 ethylene oxide(EtO) gas를 이용한 것이 주로 쓰이고 있는 실정이다. 플라즈마를 이용한 살균법은 EtO 살균법의 단점을 보완해 주는 대체 기술로 제시되고 있는데 플라즈마 조사에 대한 미생물의 생존을 UV 조사와 비교 분석하였다. 플라즈마에 직접 노출된 Deinococcus radiodurans는 조사 시간의 증가에 따라 colony 형성능력이 크게 감소하였으며, UV 조사에 의한 사멸보다 더 효과적으로 작용하였다. 또한 세균에 플라즈마를 쪼여 준 후 생체 내 효소와 세포 사멸에 관계가 많은 산소 활성종의 양이 증가하여 세포 사멸에 큰 영향을 준다고 사료된다. There are various methods for sterilization but the heat-sensitive materials are sterilized usually by ethylene oxide gas, which has several problems. Plasma sterilization method could replace the sterilization with ethylene oxide gas. The use of plasma for sterilization has been analyzed in this study. The extents of surving colonies imparted by plasma exposure for the increasing time were assessed. The killing effect by plasma was exhibited to be much higher than those by exposure to UV. Irradiation of plasma to the cells was the cause of the breakdown of biopolymer via action of reactive oxygen species, which could result in the cell death.

경주 남리사지에 사용된 석재의 암석학적 특성과 원산지 해석

이찬희,정연삼,정민호,이명성,김영택 공주대학교 문화재보존과학연구소 2004 문화재과학기술 Vol.3 No.1

이 연구는 경주 남리사지에 이용된 석재를 대상으로 암석의 성인적 분류, 광물 및 지구화학적 특성을 검토하여 석재의 기원지 추정과 고고지질학적 의미를 해석한 것이다. 남리사지에서 출토된 암석은 5종의 화강암질암 (알카리 화강암, 흑운모 화강암, 미문상 화강암, 등립질 화강암, 홍장석 화강암), 세립질 퇴적암 (셰일, 미사암), 호온펠스, 옹회암질암, 염기성 맥암 등이 있다. 이 중에서 서탑에 이용된 암석은 유백색의 중립질 알카리 화강암과 담홍색의 흑운모 화강암이 주류를 이룬다. 각 석재들의 대자율 값은 흑운모 화강암이 4.94~7.59 (평균 6.47)로서 제일 높았으며 미문상 화강암이 0.86~1.54 (평균 1.13)로 제일 낮았다. 알카리 화강암은 3.51, 홍장석 화강암이 5.88, 등립질 화강암이 4.89로서 분화경로와 산출상태에 따라 조금씩 다른 값을 보였다. 이 화강암류는 화학조성으로 볼 때, 거의 동일한 마그마 기원의 칼크-알카리 계열 화강암 영역에 해당된다. 이 석재의 화학적 풍화지수와 풍화 잠재지수는 각각 49.87~61.64와 4.12~8.46 범위로서, 현재 암석이 화학적 풍화작용이 왕성하게 발생하는 정도는 아니나 풍화잠재력은 매우 높은 것으로 나타났다. 이 화강암질암의 암석학적 및 지구화학적 특징으로 볼 때, 이들의 성인적 유형은 남산 일대에 분포하는 화강암과 동일하다. 따라서 남리사지의 석조문화재 건축에 사용된 석재는 현지에서 재료를 구하고 현장에서 제작한 자급자족형 석재와 수계의 상류지역에서 도입된 외래형 석재가 공준하고 있는 것으로 해석된다. 자급형 석재가 현지의 원료를 이용한 것은 확실하나 어느 지역에서 채석하여 어디서 가공을 하였는지는 불분명하다. Rock properties around the Namri temple site was studied source area and archaeogeological interpretations based on petrology, mineralogy and geochemistry. Excavated rocks from the area composed of granitic rocks (alkali granite, biotite granite, micrographic granite, eqigranular granite, pink feldspar granite), fine grained sedimentary rocks (shale and siltstone), hornfels, tuffaceous and basic dyke rocks. Almost rock materials of the west pagoda made of white medium grained alkali granite and biotite granite. As the magnetic susceptibility (MS), biotite granite ranges from 4.94 to 7.59 (mean 6.47), and micrographic granite is lowest value of 0.86 to 1.54 (mean 1.13). The mean MS values revealed that alkali granite = 3.51, pink feldspar granite = 5.88, eqigranular granite = 4.89, which are little variatins because of differentiation process and field occurrences. In the geochemical data, the granitic rocks represent a comagmatic calc-alkali series granite. The values of WPI and CIA for rock properties from the Namri temple site range from 49.87 to 61.64 and 4.12 to 8.46, respectively, which values don't going active weathering right now, but weathering potential represents very high. On the basis of petrology and geochemistry of the rock properties from the Namri temple site, the genetic types are the similar as those of the Namsan granite. Therefore, the using rocks of the Namri temple site suggested that domestic type rock properties getting material in the actual place and making in situ, and foreign type rock properties getting from the upstream area are coexisted. Domestic types are sure of making the actual place material, but unclear where is a quarry and working.