굴에서 병원성・비병원성 Vibrio parahaemolyticus 예측 모델 개발 및 행동 비교 연구

임주영,조하연,문혜진,이종경,윤기선 한국식품영양과학회 2019 한국식품영양과학회지 Vol.48 No.12

The objective of this study was to develop a predictive model of a cocktail of pathogenic and non-pathogenic Vibrio parahaemolyticus strains in oysters as a function of temperature. The behavior of each pathogenic and non-pathogenic V. parahaemolyticus at 10°C and 25°C was compared. V. parahaemolyticus cocktails grew and died in a temperature range of 11 to 30°C and 4 to 10°C, respectively. At refrigerated temperatures, the best survival ability of the mixture of V. parahaemolyticus was found at 4°C, followed by 7 and 10°C, indicating that the low temperature promotes the ability of V. parahaemolyticus to survive in the oysters. The predicted growth and survival kinetics from the developed models were compared with the experimental kinetics of V. parahaemolyticus in abalone. The acceptable bias and accuracy factors of growth and survival models were obtained. At 25°C, a significantly higher specific growth rate value for pathogenic V. parahaemolyticus was observed compared to that for non-pathogenic V. parahaemolyticus. At 10°C, the delta value of the pathogenic V. parahaemolyticus was considerably higher than that of the non-pathogenic V. parahaemolyticus. The results of this study show that pathogenic V. parahaemolyticus could grow faster and survive longer than non-pathogenic V. parahaemolyticus. These results indicate that pathogenic V. parahaemolyticus has a high risk of surviving in the retail market after being harvested and before consumption and after consumption as well. 본 연구에서는 인공해수에 담겨있는 굴에서 병원성 및 비병원성 V. parahaemolyticus 혼합균주의 행동 예측 모델을 개발하였다. 또한 병원성, 비병원성 각각의 균주 행동을 10°C와 25°C에서 비교 분석하였다. 굴에 오염된 병원성 및 비병원성 V. parahaemolyticus 혼합균주는 11°C 이상에서 성장하였으나 MPD 값이 5.86 log CFU/g에 그쳐 최대로 성장하는 데는 한계가 있는 것으로 확인되었다. 반면 10°C 이하에서는 온도가 낮아질수록 delta 값이 증가하며 4°C에 노출되었을 때 더욱 오래 생존하는 경향을 보여주어 저온에 대한 저항성이 있음을 확인하였다. 이와 같은 결과는 현재 냉장온도인 10°C가 굴에서 병원성 및 비병원성 V. parahaemolyticus 혼합균주의 관리에는 가장 적절한 온도인 것으로 확인되었다. 또한 굴에서 개발된 V. parahaemolyticus 혼합균주의 행동 예측 모델을 전복에서 V. parahaemolyticus의 행동실험값으로 검증한 결과, 증식모델의 변수인 LT, SGR, MPD와 사멸 모델의 변수인 delta의 Bf, Af, RMSE 값이 허용 범위에 속하여 전복에서도 굴에서 개발된 예측 모델을 적용할 수 있을 것으로 사료된다. 또한 인공해수에 담긴 굴에서 병원성, 비병원성 V. parahaemolyticus 각각의 생장 및 사멸 특성을 10°C와 25°C에서 각각 비교하였다. 10°C에서는 병원성 V. parahaemolyticus의 delta 값이 유의적으로 높아 비병원성 V. parahaemolyticus보다도 낮은 온도에서 오래 생존 후 사멸하는 것을 확인하였다. 이러한 결과는 굴에 오염된 병원성 V. parahaemolyticus가 소비(혹은 구매) 이후뿐만 아니라 소비(혹은 구매) 이전 보관 및 유통 단계에서도 더 위험 요인으로 파악되었다. 또한 25°C에서 두 균주 간의 LT와 MPD는 유의적 차이가 없었으나, SGR 값이 병원성 V. parahaemolyticus에서 유의적으로 높게 나타나 비병원성 V. parahaemolyticus보다 더 빠르게 증식하는 것으로 나타났다. 본 연구 결과 병원성 및 비병원성 V. parahaemolyticus 혼합균주를 이용해 개발한 성장・사멸 예측 모델은 굴에서의 V. parahaemolyticus에 대한 정량적 위해평가를 위한 자료로 활용될 수 있다. 또한 굴 양식, 가공공정, 유통 및 가정에서 섭취 전 보관 단계까지 기준규격 설정 및 관리방안에 과학적 기초자료로 활용될 수 있을 것으로 사료된다.

경북지역 설사환자와 환경에서 분리된 장염 비브리오균의 병원성인자에 관한 연구

이상조,정중교,이도영,이복권,이건주,이희무 대한감염학회 2003 감염과 화학요법 Vol.35 No.6

미생물 생장 예측모델과 반응표면분석법을 이용한 Vibrio parahaemolyticus의 신속 증균배지 개발

서연희,이소영,김은지,오세욱,Yeon-Hee Seo,So-Young Lee,Unji Kim,Se-Wook Oh 한국식품위생안전성학회 2023 한국식품위생안전성학회지 Vol.38 No.6

In this study, we developed Rapid Enrichment Broth for Vibrio parahaemolyticus (REB-V), a broth capable enriching V. parahaemolyticus from 10⁰ CFU/mL to 10⁶ CFU/mL within 6 hours, which greatly facilitates the rapid detection of V. parahaemolyticus. Using a modified Gompertz model and response surface methodology, we optimized supplement sources to rapidly enrich V. parahaemolyticus. The addition of 0.003 g/10 mL of D-(+)-mannose, 0.002 g/10 mL of L-valine, and 0.002 g/10 mL of magnesium sulfate to 2% (w/v) NaCl BPW was the most effective combination of V. parahaemolyticus enrichment. Optimal V. parahaemolyticus culture conditions using REB-V were at pH 7.84 and 37℃. To confirm REB-V culture efficiency compared to 2% (w/v) NaCl BPW, we assessed the amount of enrichment achieved in 7 hours in each medium and extracted DNA samples from each culture every hour. Real-time PCR was performed using the extracted DNA to verify the applicability of this REB-V culture method to molecular diagnosis. V. parahaemolyticus was enriched to 5.452±0.151 Log CFU/mL in 2% (w/v) NaCl BPW in 7 hours, while in REB-V, it reached 7.831±0.323 Log CFU/mL. This confirmed that REB-V enriched V. parahaemolyticus to more than 10⁶ CFU/mL within 6 hours. The enrichment rate of REB-V was faster than that of 2% (w/v) NaCl BPW, and the amount of enrichment within the same time was greater than that of 2% (w/v) NaCl BPW, indicating that REB-V exhibits excellent enrichment efficiency. 본 논문은 적은 농도로 존재하는 Vibrio parahaemolyticus를 6시간이내에 10⁶ CFU/mL까지 신속하게 배양가능한 배지인 Rapid Enrichment Broth for V. parahaemolyticus(REB-V)를 개발하여 V. parahaemolyticus를 신속하게 검출할 수 있도록 하였다. Modified Gompertz model과 RSM를 활용하여 V. parahaemolyticus를 신속하게 증균할 수 있도록 첨가 성분을 최적화하였다. 그 결과 2%(w/v) NaCl BPW에 D-(+)-mannose 0.3 g/L, L-valine 0.2 g/L, magnesium sulfate 0.2 g/L를 첨가하였을 때 V. parahaemolyticus의 증균량이 최대였다. REB-V의 배양조건을 pH 7.84와 37℃으로 최적화하였으며, 2%(w/v) NaCl BPW와 비교하여 REB-V의 증균 효율을 확인하기 위해 7시간 증균을 통해 증균량을 평가하였다. 또한 매시간마다 배양액에서 DNA를 추출하였고, 추출한 DNA로 real-time PCR을 수행하여 REB-V의 분자진단법 적용가능성을 확인하였다. 그 결과 7시간 동안 2%(w/v) NaCl BPW에서 V. parahaemolyticus는 5.452±0.151 Log CFU/mL까지 증균되었고, REB-V에서는 7.831±0.323 Log CFU/mL의 V. parahaemolyticus가 증균되었다. 최종적으로 REB-V에서 6시간 이내에 10⁶ CFU/mL 이상으로 증균된 것을 확인하였고, REB-V의 증균속도가 2%(w/v) NaCl BPW보다 빠르고 같은 시간 내의 증균량이 2%(w/v) NaCl BPW보다 많았음을 통해 REB-V의 증균효율이 우수한 것으로 확인되었다.

해산식품과 채소에서 Vibrio parahaemolyticus 검출을 위한 배지배양법과 real-time PCR의 비교검증

천정환(Jung-Whan Chon),현지연(Ji-Yeon Hyeon),황인균(In-Gyun Hwang),곽효선(Hyo-Sun Kwak),한정아(Jeong-A Han),정윤희(Yun-Hee Chung),송광영(Kwang-Young Song),서건호(Kun-Ho Seo) 한국식품과학회 2010 한국식품과학회지 Vol.42 No.3

V. parahaemolyticus는 국내에서 여름과 가을철에 걸쳐 발생되며 생선이나 패류 등의 해산식품을 날것으로 섭취하거나 불완전하게 익혀 먹을 경우 식중독을 일으키는 병원균이다. 본 연구의 목적은 표준 검출기법인 배지배양법을 이용한 V. parahaemolyticus의 검출과 real-time PCR을 이용한 V. parahaemolyticus의 검출에 있어서 그 유효성과 효율성을 검증하는 것이다. V. parahaemolyticus의 발생기록과 발생가능성이 있는 여러 해산식품과 무순에 적절한 균량을 접종하고 APW로 증균배양하였다. 증균배양이 끝난 후 TCBS선택배지에 배양액을 획선도말하고, 동시에 증균배양액에서 1 ㎖을 채취하여 real-time PCR을 실시하였다. TCBS에서 초록색이 나온 집락을 1-3개 선별하여 TSI 배지에 접종하여 screening test를 거친 후 API 20NE strip을 사용하여 확인동정하였다. 또한 정상세균총이 목적균의 성장과 검출에 어느 정도의 영향을 미치는지 평가하기 위하여 25 g의 식품 내 정상세균총의 수준을 함께 측정하였다. 실험결과, 자체 제작한 real-time PCR서열은 V. parahaemolyticus를 특이적으로 검출할 수 있었고 검출한계는 PBS에서 10³ CFU/㎖ 였다. 또한, 식품 내 정상세균총이 높을 경우 증균배양 시 목적균의 성장에 영향을 미칠 수 있다는 것을 확인하였다. Real-time PCR은 180개의 전체 샘플 중 76개의 양성 결과를 보여 66개의 양성 결과를 낸 배지배양법에 비해 더 많은 양성 검출율을 보였으나 통계학적인 유의차는 발견되지 않았다. Real-time PCR은 표준검출법인 배지배양법과 비교해 볼때 동등하거나 우수한 검출력을 지닌 것으로 보이며 이러한 realtime PCR법은 24시간 이내에 확정동정까지 가능하여 시간과 노동력의 소모가 많은 배지배양법에 앞서 선별검사로 사용할 경우 시간, 비용, 노동력 절감에 매우 유효할 것으로 판단된다. Vibrio parahaemolyticus (V. parahaemolyticus), which is commonly found in raw seafood, causes gastroenteritis in humans. Rapid and effective methods have been developed as culture methods require up to 5-7 days. In this study, real-time PCR was compared with the standard culture method for detecting V. parahaemolyticus in seafood and radish sprout samples. Five hundred grams of the samples were artificially contaminated with V. parahaemolyticus then divided into 20 samples. The samples were incubated in alkaline peptone water and then streaked onto thiosulfate-citrate-bile saltssucrose agar. Biochemical tests for suspicious colonies were performed using the API 20NE strip. In parallel, real-time PCR was performed targeting the toxR gene using the enrichment broth. The real-time PCR was sensitive in discriminating V. parahaemolyticus from other foodborne pathogens. The detection limit of the real-time PCR was 10³ CFU/㎖ in phosphate-buffered saline. Although the real-time PCR detected more positive samples (76 out of 180, 42%) than the culture method (66 out of 180, 37%), there was no significant statistical difference (p>0.05) between the two methods. In conclusion, real-time PCR assays could be an alternative to the standard culture method for detecting V. parahaemolyticus in seafood and radish sprouts, which has many advantages in terms of detection time, labor, and sensitivity.

Rapid and Visual Detection of Vibrio parahaemolyticus in Aquatic Foods Using blaC_ARB-17 Gene-Based Loop-Mediated Isothermal Amplification with Lateral Flow Dipstick (LAMP-LFD)

( Yuan-qing Hu ),( Xian-hui Huang ),( Li-qing Guo ),( Zi-chen Shen ),( Lin-xue Lv ),( Feng-xia Li ),( Zan-hu Zhou ),( Dan-feng Zhang ) 한국미생물 · 생명공학회 2021 Journal of microbiology and biotechnology Vol.31 No.12

Vibrio parahaemolyticus is recognized as one of the most important foodborne pathogens responsible for gastroenteritis in humans. The bla_CARB-17 gene is an intrinsic β-lactamase gene and a novel species-specific genetic marker of V. parahaemolyticus. In this study, a loop-mediated isothermal amplification (LAMP) assay combined with a lateral flow dipstick (LFD) was developed targeting this bla_CARB-17 gene. The specificity of LAMP-LFD was ascertained by detecting V. parahaemolyticus ATCC 17802 and seven other non-V. parahaemolyticus strains. Finally, the practicability of LAMP-LFD was confirmed by detection with V. parahaemolyticus-contaminated samples and natural food samples. The results showed that the optimized reaction parameters of LAMP are as follows: 2.4 mmol/l Mg²⁺, 0.96 mmol/l dNTPs, 4.8 U Bst DNA polymerase, and an 8:1 ratio of inner primer to outer primer, at 63℃ for 40 min. The optimized reaction time of the LFD assay is 60 min. Cross-reactivity analysis with the seven non-V. parahaemolyticus strains showed that LAMP-LFD was exclusively specific for V. parahaemolyticus. The detection limit of LAMP-LFD for V. parahaemolyticus genomic DNA was 2.1 × 10^-4 ng/μl, corresponding to 630 fg/reaction and displaying a sensitivity that is 100-fold higher than that of conventional PCR. LAMP-LFD in a spiking study revealed a detection limit of approximately 6 CFU/ml, which was similar with conventional PCR. The developed LAMP-LFD specifically identified the 10 V. parahaemolyticus isolates from 30 seafood samples, suggesting that this LAMP-LFD may be a suitable diagnostic method for detecting V. parahaemolyticus in aquatic foods.

인천연안 Vibrio parahaemolyticus의 분포 및 유산과 과산화수소 처리에 의한 항균효과

장재선,조우균,이혜정,이제만,김혜영,김용희,Jang, Jae-Seon,Cho, Woo-Kyoun,Lee, Hye-Jeong,Lee, Jea-Mann,Kim, Hye-Young,Kim, Yong-Hee 대한환경위생공학회 2006 대한환경위생공학회지 Vol.21 No.4

This study was carried out to investigate the distribution of Vibrio parahaemolyticus in the Incheon adjacent sea, and antimicrobial effect on growth of Vibrio parahaemolyticus in lactic acid and hydrogen peroxide and combination of lactic acid and hydrogen peroxide. The detected strains were compared geographical, months and sample types. The distribution of Vibrio parahaemolyticus was high at Ganghwa county with 66.1%(336 samples), on 7-9 months with 72.4%(386 samples) and from tireland with 75.0%(90 samples), respectively. The minimun inhibitory concentration (MIC) of lactic acid in Vibrio parahaemolyticus were 1250 ppm at pH 6.5 and 7.0, 625 ppm at pH 6.0. respectively. The minimun inhibitory concentration (MIC) of hydrogen peroxide in Vibrio parahaemolyticus were 25 ppm at pH 6.5 and 7.0, 12.5 ppm at pH 6.0, respectively. MICs of combined treatment of lactic acid and hydrogen peroxide in Vibrio parahaemolyticus were 625 ppm of lactic acid with 12.5 ppm of hydrogen peroxide. The correlations between MICs of lactic acid and hydrogen peroxide in Vibrio parahaemolyticus were obtained through the coefficient of determination($R^2$). $R^2$ value were 1.0000. The antimicrobial effect of lactic acid and hydrogen peroxide in Vibrio parahaemolyticus could be confirmed from the result of this experiment.

유통 수산물에서 분리한 Vibrio parahaemolyticus의 항생제 내성 및 전장 유전체 분석을 통한 유전적 특성 분석

송경규,조현우,김연아,장범순,이미루,박건택 한국식품위생안전성학회 2024 한국식품위생안전성학회지 Vol.39 No.3

국내에서 V. parahaemolyticus로 인한 식중독 사고가 지 속적으로 보고되고 있으며, 최근 국내 수산물 판매량 및 수산물 양식에 사용되는 항생제 판매량은 증가하는 추세 이다. 따라서 본 연구는 국내에 유통되는 수산물에서 분 리한 V. parahaemolyticus의 분포, 항생제 감수성, 유전적 특성 및 유전학적 통계를 조사하였다. 79건의 유통 수산 물로부터 47건(59.5%)에서 V. parahaemolyticus가 분리되 었다. 항생제 내성 양상의 경우, 총 47균주의 분리 균주에 서는 ampicillin에 2균주(4.3%)가 내성을 보였으며, 이외 균주는 모든 항생제에 대해 감수성을 보였다. 항생제 내 성 유전자의 경우, 모든 균주(100%)로부터 blaCARB family gene, tet(35), catC가 확인되었으며, 1균주(2.1%)에서는 fos 가 확인되었다. 병원성 유전자 여부의 경우, 모든 분리 균 주에서 tdh, trh 유전자는 확인되지 않았으나, T3SS1은 모든 균주(100%), T3SS2는 1균주(2.1%)에서 확인되었다. MLST의 경우, 17균주로부터 15가지의 ST가 확인되었으며, ST 658가 3균주, 이외 14가지 ST는 1균주씩 확인되었다. 확인된 ST는 대부분 중국, 태국 등의 환경 분리주로확인되었으며, ST 396, ST 3042는 중국 임상 분리주로부터확인되었다. 이로써, 최근 국내에 수산물과 관련한 식중독,유통량, 항생제 판매량 등의 추세에 따른 위험성에 V. parahaemolyticus에 대한 지속적인 연구가 필요할 것으로 사료되며, 본 연구는 그에 대한 도움이 될 것이라 사료된다. Vibrio parahaemolyticus is a major seafood-borne pathogen commonly detected in marine environments. In Korea, V. parahaemolyticus-induced foodborne illnesses account for 7.5% of bacterial pathogen-related food poisonings. Moreover, the amount of antimicrobial agents used in aquatic cultures is continuously increasing. In this study, we isolated V. parahaemolyticus from seafood samples and performed antimicrobial susceptibility tests using the microbroth dilution method. Furthermore, using whole-genome sequencing, we identified antimicrobial resistance genes, virulence genes, and sequence types (STs). We could isolate V. parahaemolyticus from 47 (59.5%) of the 79 seafood samples we purchased from retail markets in Seoul and Chungcheong provinces. Antimicrobial susceptibility tests revealed that 2 and all of the 47 isolates were ampicillin-resistant (4.3%) and susceptible to all tested antimicrobial agents (100%), respectively. The genotype analysis revealed that all isolates carried beta-lactam-, tetracycline-, and chloramphenicol-associated antimicrobial resistance genes. However, we could detect fosfomycin resistance only in one isolate. Concerning the virulence genes, we detected T3SS1 and T3SS2-associated genes in all and one isolate, respectively. However, we could not detect the tdh and trh genes. Of the 47 isolates, 17 belonged to 15 different STs, including ST 658 with 3 isolates. The rest 30 isolates were identified as 25 new STs. The results of this study support the need for operating a continuous monitoring system to prevent foodborne illnesses and the spread of antimicrobial resistance genes in V. parahaemolyticus.

해산물식품 중 식중독원인균의 오염패턴 및 저감화 방안

김순한,신영민,이명자,신필기,김미경,조정숙,이창희,이영자,채갑용,KIM Soon Han,Sin Yeong-Min,Lee Myeong Ja,Shin Pil Ki,Kim Mi Cyeong,Cho Jung Sook,Lee Chang Hee,Lee Young Ja,Chae Kab Ryoung 한국생명과학회 2005 생명과학회지 Vol.15 No.6

The contamination frequency of major foodborne pathogenic bacteria was investigated from 213 seafood samples including sliced raw fish and shellfish in Busan and CyeongNam province area. Tested microorganisms were Salmonella spp. Staphyloroccus aureus, Vibrio parahaemolyticus, Escherichia coli O157:H7, Bncillus cereus, Listeria monocytogenes and Campylobacter jejuni. The frequency of isolated microorganisms was V. parahaemolyticus (30.5%), B. cereus (9.9%), S. aureus (3.8%) and other pathogenic bacteria (1.4%). from July to October, total isolation rates were greater than 50% and V. parahaemolyticus was dominant among the microorganisms isolated. The bacteria isolation rate (49.2%) in raw seafoods including shellfishes was higher than one (28.9%) in sliced raw fish. V. parahaemelyticus isolates were resistant to ampicillin (96.9%), amikacin (29.2%) and tetracycline (27.7%), and B. cereus isolates were resistant to ampicillin (100%), Penicillin G (100%), rifampicin (71.4%) and tetracycline (14.3%). The growth of V. parahaemolyticus and B. rereus was greatly inhibited below $10^{\circ}C$, but increased at ambient temperature. Washing seafood with tap water showed to reduce total count of remaining V. parahaemolyticus. Thus temperature control under $10^{\circ}C$, sufficient washing and prompt eating appeared to reduce the risk of food poisoning by these bacteria in seafoods. 부산 및 경남일대에서 널리 유통되고 있는 생선회, 패류 등의 횟감류 213건을 대상으로 주요 식중독 원인균인 Salmonella spp., Staphylococcus aureus, Vibrio parahaemolyticus, Escherichia coli O157:H7, Bacillus cereus, Listeria monocytogenes 및 Campylobacter jejuni의 오염실태를 조사하였다. V. parahaermolyticus가 65건(30.5%), B. cerus가 21건(9.9%), S. aureus가 8건(3.8%) 및 기타 식중독균이 3건에서 검출되었다. 이를 월별 검출율로 비교해 보면, 7~10월에서 식중독균의 높은 검출율을 나타내었으며, 이러한 높은 검출율은 주로 V. parahaemolyticus에 기인된 것으로 조사되었다. 아울러 생선회에서의 검출율(28.9%) 보다는 패류 등의 기타 횟감류에서 더욱 높은 검출율(49.2%)을 나타내었다. V. parahaemolyticus의 경우 Ampicillin (96.9%), Amikacin (29.2%) 및 Tetracycline (27.7%)에 대해 내성을 나타내었으며, B. rereus의 경우는 Ampicillin (100%), Penicillin G (100%) 및 Rifampicin (71.4%)에 대해 높은 내성을 나타내었다. V. parahaemolyticus와 B. cereus의 생육은 보관온도 및 시간에 크게 영향을 받는 것으로 나타났으며, 수돗물 세척이 해산물에 잔존하는 V. parahaemolyticus의 균수를 크게 감소시키는 것으로 조사되어, 여름철 해산물 섭취로 인한 식중독 발생의 예방을 위해서 $10^{\circ}C$이하의 저온보관과 수돗물로써의 철저한 세척이 필수적인 것으로 판단되었다.

Vibrio parahaemolyticus에 대한 Immunoglobulin yolk (IgY)의 생산과 특이성

심원보,김혜정,박선자,강동훈,강진순,정덕화 한국식품위생안전성학회 2003 한국식품위생안전성학회지 Vol.18 No.2

본 연구는, Vibrio parahaemolyticus에 대한 면역 글로블린 Y(IgY)플 생산하기 위하여 시행되었다. Vibrio parahaemolyticus는 중요한 병원성 균이며. 위장염을 유발시키는 원인 균이다. 따라서, 난황에서 Vibrio parahaemolyticus에 대한 항체를 생산하기 위하여 항원 LPS(lipopolysaccharide)를 암탉에 주사하였다. 면역은 2주 간격으로 4차까지 실시하였으며, 추가면역으로 2주 간격으로 3차 까지 긴시한 후 ELISA로 그 항체 역가를 측정하였다. 난황에서의 항체생성은 1차 면역 후 1주일부터 나타나기 시작하였으며, 7주에 최고 역가에 도달하였고, 이러한 역가는 13주 이후까지 지속되는 것으로 나타났다. 한편 혈청에서의 항체 역가노 난황에서의 경향과 유사하였다. 정제시킨 IgY를 본 연구의 water-dilution 방법과 상업용 IgY분리 kit로 그 정제 정도를 비교해본 결과 큰 차이를 나타내지 않았으며, Vibrio parahaemolyticus외의 다른 Vibrio 속 및 세균들과의 교차반응성 조사에서 특별한 교차반응이 없었다. 본 연구에 나타난 결과로, 아주 적은 양의 LPS 항원으로 역가가 높은 항체의 생산이 가능하였으며, 이러한 결과들을 보아 난황은 유행성 위장염을 유발하는 병원성 균의 특이 항체 개발을 위한 좋은 공급원이 될 것으로 생각된다. This study was conducted to produce the egg yolk immunoglobulin (IgY) on Vibrio parahaemolyticus from immunized hen with lipopolysaccharide (LPS). Ebrio parahaemolyticus is considered as a potentially pathogenic bacteria, the causative agents of the gastroenteritis. According as the LPS antigens were injected into laying hens in order to produce antibodies against Mbrio parahaemolyticus in egg yolk. After chickens were immunized four times in 2 weeks interval and three times booster in 2 weeks interval, the profile of antibody production was examined by ELISA. The production of antibody in egg yolk was started in 1 week after the first immunization, reached peak in 7 weeks and maintained until 13 weeks later. The antibody titre in serum showed similar tendency as IgY. No significant difference in antibody titre when the titre compared to water diluted IgY and commercial IgY kit. Purified IgY reacted with only Vibrio parahaemolyticus, but other Mbrio species and food-bome pathogenic bacteria. In conclusion, we showed that it is possible to obtain a high antibody titre in chicken with quite low amounts of LPS antigen. These results suggested that egg yolk antibodies could be a good source for production of specific antibodies to pathogenic bacteria inducing epidemic gastroenteritis.

Food-borne outbreaks, distributions, virulence, and antibiotic resistance profiles of Vibrio parahaemolyticus in Korea from 2003 to 2016: a review

Park, Kunbawui,Mok, Jong Soo,Kwon, Ji Young,Ryu, A Ra,Kim, Song Hee,Lee, Hee Jung The Korean Society of Fisheries and Aquatic Scienc 2018 Fisheries and Aquatic Sciences Vol.21 No.2

Background: Vibrio parahaemolyticus is one of the most common causes of seafood-borne illnesses in Korea, either directly or indirectly, by consuming infected seafood. Many studies have demonstrated the antibiotic susceptibility profile of V. parahaemolyticus. This strain has developed multiple antibiotic resistance, which has raised serious public health and economic concerns. This article reviews the food-borne outbreaks, distributions, virulence, and antibiotic resistance profiles of V. parahaemolyticus in Korea during 2003-2016. Main body: V. parahaemolyticus infections appeared to be seasonally dependent, because 69.7% of patient infections occurred in both August and September during 2003-2016. In addition, the occurrence of V. parahaemolyticus in marine environments varies seasonally but is particularly high in July, August, and September. V. parahaemolyticus isolated from aquaculture sources on the Korean coast varied in association with virulence genes, some did not possess either the tdh (thermostable direct hemolysin) or trh (tdh-related hemolysin) genes, and a few were positive for only the trh gene or both genes. The high percentage of ampicillin resistance against V. parahaemolyticus in the aquatic environment suggests that ampicillin cannot be used to effectively treat infections caused by this organism. Short conclusion: This study shows that the observed high percentage of multiple antibiotic resistance to V. parahaemolyticus is due to conventionally used antibiotics. Therefore, monitoring the antimicrobial resistance patterns at a national level and other solutions are needed to control aquaculture infections, ensure seafood safety, and avoid threats to public health caused by massive misuse of antibiotics.