크롬(Ⅵ)의 체내 흡수와 소실속도에 관한 연구

김현영,이성배,임철홍,이권섭,정용현,이종성,한정희,전윤석,황호순,이용묵 한국산업위생학회 2003 한국산업보건학회지 Vol.13 No.1

The CrO3 mostly used in plating. metal surface disposal, leather, cosmetic manufacturing, as an experiment material by repeatedly inhaling and exposure the male S.D. rats at a 0.00, 0.2., 0.50, 1.25 mg/㎡ concentration(particle size: 0.5-0.5 aerosol)6hours a day, 5day a week in 13weeks comparing with 2weeks, 8weeks of recovery group about the noxiousness of the experiment animal and the reduce scale of the CrO3 in the internal organ especially in blook and respiratory organ with the period of convalescent and clearance. The experiment results which we received are as follows. 1. In blood the RBC, HGB and HCT experiment, rats with 0.20, 0.50 mg/㎡ concentration showed that there were some decreases but not dependent. The kidneys absolute weight compared with control group was reduced intentionally(p〈0.05) and the lungs absolute weight compared with control group showed intentional increase(p〉0.05). 2. After the exposure of the experiment material, the whole blook, l\blood plasma and red blood cell in blood by (x): the period of convalescent, per (y); the decreasing of Cr concentration, was y=66.51 e -0.057x, y=67.2 e-0.101x, y=70.01 e-0.030 in 0.50 mg/㎡ exposure concentration by calculating the clearance coefficient of correlation, and the half life (day)was estimated 12.0, 6086, 23.0 each. 3, After the exposure of the experiment material, the experiment animals lung, liver and kidneys by(x); the period of convalescent, per (y); the decreasing of Cr conentration, was y=1808 e-0.00493x, y=12.02e-0.0297x, y=67.61 e-0.0292x in 0.50mg/㎡ exposure concentration by calculating the clearance coefficient of correlation, and the half life(day)was estimated 140.6, 23.3, 23.7, each, and including lung, liver with all of the experiment internal organs, the Cr clearance decreased as the exposure concentration increased.

SD Rats를 이용 1-hexene의 흡입독성 연구

김현영,임철홍,정용현,이권섭,이성배,이준연,한정희,전윤석,이용묵 한국환경독성학회 2001 환경독성보건학회지 Vol.16 No.4

The purpose of this study was to investigate the acute (4 hours) and repeated-dose (6 hours a day, 5 days a week, 4 weeks) toxic effects of I -hexene on Sprague- Dawley (SD) rats which were treated by inhalation. The results were as follows; I. The median lethal concentration (LC_(50)) was estimated 52,694 ppm (confidence limit 95%; 49,494~55,447 ppm) in acute inhalation. Abnormal clinical signs related to the l-Hexene were not observed with the acute inhalation dose. Gross findings of necropsy revealed on evidence of specific toxicity related to the 1-hexene, II. By repeated inhalation exposure the body weight of male were more or less reduced by the dose of 2,500 ppm and 5,000 ppm compared with control group. However there were no significant variation hematology and blood biochemistry for the exposed rats compared with the control rats. Abnormal clinical signs and gross findings of necropsy related to the 1-hexene were not shown. In conclusion when we exposed I-hexene to SD rats for 4 weeks, 5 days per week, 6 hours per day, the Lowest observed effect level (LOEL) was over 2,500 ppm and Non observed effect level (NOEL) was below 500 ppm.

Likert式 經營診斷 技法을 통한 協力的 勞史關係 構築方案

李康玉,林夢澤,奉顯哲 조선대학교 경영경제연구소 1997 經營經濟硏究 = Management and economics research Vol.20 No.3

제1형 탈요오드효소 유전자 갑상선호르몬 반응요소에서 T₃자극에 따른 갑상선호르몬 수용체 역동학 모델

이성진,박철영,정인경,홍은경,최철수,김현규,김두만,유재명,임성희,최문기,유형준,박성우,Larsen, P. Reed 대한내분비학회 2003 Endocrinology and metabolism Vol.18 No.3

연구배경: 제1형 탈요오드효소의 발현에 관여하는 hdiol 유전자는 5 flanking region 내 서로 다른 특성을 가진 두 종류의 갑상선호르몬 반응요소, 즉 TREI과 TRE2를 가지고 있음이 알려져 있다. 사람의 간암세포주인 HepG2 세포에서 T₃를 투여하였을 때 hdiol유전자의 전사작용이 급격하게 증가하는데 hdiol mRNA가 충분히 발현하기 위해서는 두 종류의 갑상선호르몬 반응요소가 모두 필요함이 보고 되어 있으나 T₃ 투여시 갑상선호르몬 반응요소와 결합하는 갑상선호르몬 수용체의 역동학에 대해서는 아직까지 연구된바 없다. 한편 현재까지 보고 된 연구 결과들은 갑상선호르몬 자극이 없더라도 갑상선호르몬 수용체와 갑상선호르몬 반응요소가 서로 지속적으로 상호작용 한다는 전제 조건을 바탕으로 하고 있는데 아직까지 이러한 가정은 간접적으로만 증명되어 있는 상태이다. 이에 저자들은 본 연구에서 사람의 간암세포주인 HepG2세포를 대상으로 염색체 면역침전법과 중합효소연쇄반응을 이용하여 갑상선호르몬 자극 전·후 hdiol 유전자의 갑상선호르몬 반응요소에 결합하는 갑상선호르몬 수용체의 결합양상 변화를 분석함과 동시에 갑상선호르몬 자극 전에도 갑상선호르몬 수용체와 갑상선호르몬 반응요소가 서로 결합된 상태로 존재함을 직접적으로 확인하고자 하였다. 방법: 사람의 간암세포주인 HepG2 세포를 대상으로 100 nM T₃를 투여하기 전과 투여한 후 12시간 뒤 TRα1, TR 1, TR 2 항체와 IREI, TRE2에 상보적인 시발체를 이용하여 염색체 면역침전법과 고식적 중합효소연쇄반응 및 정량적 중합효소연쇄반응을 시행하였다. 100nM T₃를 투여하기 전과 투여한 후 12시간 뒤 hdiol mRNA 발현량의 변화를 정량적으로 측정하기 위하여 역전사 중합효소연쇄반응을 시행하였다. 100 nM T₃를 투여하기 전과 투여한 후 12시간 뒤 TR4'1, TR 1, TR 2 단백질의 발현량을 알아보고자Western blot을 시행하였다. 결과: 100 nM T₃를 투여하기 전과 투여한 후 12시간 뒤 염색체 면역침전법과 TREI 시발체를 이용한 고식적 중합효소연쇄반응을 시행하였을 때 T₃ 투여 전후 TREI 부위에는 TRgl이 결합하였으며 T₃를 투여한 후 TRal 결합이 감소하였다. 정량적 중합효소연쇄반응으로 TR4'1 결합량을 측정하였을 때 T₃ 투여 전3.74에서 T₃ 투여 후 1.97로 감소하여 통계적으로 유의한 차이를 나타내었다(Δ=-47.3%, p<0.05). T₃ 투여 전 ·후 TRβl과 TRβ2의 결합은 관찰되지 않았다. 100 nM T₃를 투여하기 전과 투여한 후 12시간 뒤 염색체 면역침전법과 TRE2 시발체를 이용한 고식적 중합효소연쇄반응을 시god하였을 때 T₃ 투여 전ㆍ후 TRE2 부위에는 TRα1, TR 1, TR 2가 모두 결합하였으며 T₃를 투여한 후 TRα1과 TR 1의 결합은 감소하였으나 TR 2의 결합은 증가하였다. 정량적 중합효소연쇄반응으로 갑상선호르몬 수용체의 결합량을 측정하였을 때 TRαl은 T₃ 투여 전 10.41에서 T₃ 투여 후 3.01, TRβl은 T₃ 투여 전 12.56에서 T₃ 투여 후 2.93으로 유의하게 감소하였으며 TRβ2는 T₃ 투여 전 9.17에서 T₃ 투여 후 9.84로 증가하는 경향을 보였다(TRα1, Δ=-71.1%, p<0.05; TR 1, Δ=-76.7%, p<0.05; TR2, Δ=+7.3%). 정량적 중합효소연쇄반응으로 측정한 갑상선호르몬 수용체의 전체 결합량은 T₃ 투여 전 32.14에서 T₃ 투여 후 15.78로 감소하여 통계적으로 유의한 차이를 나타내었다(Δ=-50.9%, p.0.05). 갑상선호르몬 수용체 항체를 1.5μL와 4.5μL 첨가한 후TREI과 TRE2에 대하여 염색체 면역침전법 및 정량적 중합효소연쇄반응을 각각 시깡하였을 때 첨가한 갑상선호르몬 수용체 항체의 양에 따른 갑상선호르몬 수용체 결합량의 차이는 없었다. 100 nM T₃를 투여하기전과 투여란 후 12시간 뒤 역전사 중합효소연쇄반응 및 hdiol cDNA 시발체를 이용한 정량적 중합효소연쇄반응을 시행하였을 때 T₃를 투여한 후 hdiol mRNA발현량은 2.03배 증가하였다(p<0.001). 100 nM T₃를 투여하기 전과 투여한 후 12시간 뒤 Western blot을 시행하였을 때 갑상선호르몬 수용체 발현량은 유의한 차이가 없었다. 결론: 현재까지 갑상선호르몬 수용체의 역동학에 대한 연구가거의 이루어지지 않았던 실정을고려하여볼 때 본 연구는 제한적이나마 일정한 농도의 갑상선호르몬 자극 전 · 후 갑상선호르몬 수용체 결합양상의 변화, 특히 T₃ 자극 전 hdiol 유전자의 TREI 부위에서 TRal이 억제자 (silencer)로서 작용할 가능성 및 T₃자극 전 · 투 TRE2 부위에서 갑상선호르몬 수용체 교대현상을 처음으로 제시하였다는 점에서 의의가 있으며 향후 다른 종류의 세포주 및 체내에서 갑상선호르몬 자극 전 후 갑상선호르몬 수용체 결합양상의 변화 및 유전자 발현에 미치는 영향을 연구할 필요가 있으리라 생각된다. 한편 염색체 면역침전법을 통해 HepG2 세포에서 T₃ 자극이 없더라도 갑상선호르몬 수용체와 갑상선호르몬 반응요소 사이에 지속적인 상호작용이 존재할 뿐 아니라 갑상선호르몬 반응요소에 대한 갑상선호르몬 수용체의 결합이 교대로 이루어지고 있음을 직접적으로 확인할 수 있었으며 향후 T₃ 자극 전 · 후 갑상선호르몬 수용체를 통한 유전자 전사조절기전에 관여하는 전사인자와 역동학적 기전을 규명함에 있어서 염색체 면역침전법과 정량적 중합효소연쇄반응이 매우 유용하게 이용될 수 있을 것이다. Background: Type 1 iodothyronine deiodinase (Dl), the product of the hdiol gene, is involved in thyroid hormone activation by the deiodination of thyroxine (T4) to form 3,5,3'-triiodothyronine (T3). Recent studies have identified two thyroid hormone response elements (TREs) in the 5 ' flanking region of the hdiol gene. TRE1, proximal to TRE in the hdiol gene, consists of a direct repeat of thyroid hormone receptor (TR) binding octamers with 10 bp separating the two TR binding sites. The upstream TRE, TRE2, is a classical direct repeat of retinoid X receptor (RXR)/TR binding half-sites with a 4-bp separation. There are few studies clarifying the TR dynamics in the TRE of a specific gene with or without the exposure of activated thyroid hormone. We evaluated TR binding patterns in the proximal and distal TREs of the hdiol gene before and after T₃ stimulation. Methods: We employed chromatin immunoprecipitation (ChIP) technique to investigate the TR- TRE interaction before and after T₃ stimulation in human hepatocellular carcinoma HepG2 cell line. Following cross-linking and sonication of the cells, immunoprecipitation was performed overnight at 4℃ with TRαl, TRβ1 and TRβ2 antibodies. We analyzed the binding patterns and amounts of TRαl, TRβl and TRβ2 to TREl and TRE2 before and after 12 hours stimulation with 100 nM T3 by using conventional and quantitative real-time polymerase chain reactions (RQ-PCR). Reverse transcriptional PCR (RT-PCR) and Western blot with TR 1, TR 1 and TR 2 antibodies were performed to measure the levels of hdiol mRNA and TR 1, TR 1 and TR 2 proteins before and after 12 hours exposure to l00nM T3. Results: In TRE1, TRαl binding was significantly decreased after 12 hours stimulation with l00nM T3 (3.74→97, Δ=-47.3%, p<0.05), but TRβ1 and TRβ2 bindings were not detected by conventional PCR and RQ-PCR. Although all TR isoforms were bound to TRE2, the binding patterns were quite different. While TRα1 and TRβ1 bindings to TRE2 after 12 hours stimulation with 100 nM T3 were significantly decreased (10.41→3.01, Δ=-71.1%, p<0.05; 12.56 →2.93, Δ =-76.7%, p<0.05, respectively), TRβ2 binding was increased but not significantly (9.17 →9.84, Δ =+7.3%). Total TR bindings in TRE2 were significantly decreased after 12 hours stimulation with 1OOnM T₃ (32.14 →15.78, Δ=-50.9%, p<0.05). The TR bindings to TREl and TRE2 were not significantly different by the amounts of TR antibodies used during ChIP assays. The levels of hdiol mRNA were significantly increased, 2.03 times, after 12 hours exposure to l00nM T3 (p<O.001). Western blot showed no significant change of the level of each TR isoform protein before and after 12 hours exposure to 100nM T3. Conclusion: Our results demonstrate the dynamics of TRal at proximal TRE (TRE1) and the switching phenomenon of TR isoforms at distal TRE (TRE2) of the hdiol gene after T3 stimulation. Further investigation, however, is needed to clarify the mechanisms of these observations (J Kor SOC Endocrinol 18:283-295, 2003).

치아전돌자와 치아밀집자의 측모두부방사선학적 비교

이연수,황현식,강병철 전남대학교 치의학연구소 2003 구강과학 Vol.15 No.4

The purpose of this study was to examine the difference of lateral cephalometric charateristics between dental protrusion and crowding individuals and to find out the possible etiologic factors of each malocclusion. Twenty nine dental protrusion and twenty two crowding individuals were selected from the 4,500 patient records. The tooth size was measured from central incisor to first molar using diagonstic study cast and was compared between two groups. After tracing the lateral cephalometric radiographs, measurements for skeletal factor, hyoid bone position, and incisal position were identified. The means and standard deviations of the measurement of each group were calculated and compared between two groups. Through the comparison of the measurement between two groups, following results were obtained 1. As a result of comparing the tooth size of dental protrusion group with that of crowding group, there was no significant difference between two groups. 2. In the comparison of skeletal measurements, S-N, A'-Ptm', SNA, ANB, and facial convexity of protrusion group showed greater value than crowding group. 3. The measurements of hy-PP and hy-MP showing vertical position of hyoid bone were smaller in protrusion group than those in crowding group. 4. The measurement of hy'-Go showing anteroposterior position of hyoid bone was larger in protrusion group than that in crowding group. The results of the present study showed that dental protrusion inidviduals had the tendency of maxillary protrusion and antero-superior position of the hyoid bone compared to crowding individuals, and these features could be explained as possible etiologic factors of dental protrusion or crowding malocclusion.

Continuous wave of obturation technique에서 플러거의 다양한 적용 깊이에 따른 근단부 폐쇄효율 비교

이상진,박정길,허복,김현철 大韓齒科保存學會 2007 Restorative Dentistry & Endodontics Vol.32 No.6

이 연구와 목적은 continuous wave of obturation technique으로 근관 충전을 할 때, 다양한 heat source plugger의 깊이에 따른 근단부 근관 폐쇄능력을 비교하는 것이었다. 직전 형태 발거 소구치를 #35/.06크기까지 니켈티타늄 파일을 사용하여 성형 및 세정하였다. 성형과 세정이 완료된 치아를 heat source plugger의 적용 깊이에 따라 15개씩 5군으로 분류하였다: 3 mm, 4 mm, 5 mm, 6 mm, 7 mm. 양성 대조군을 제외한 모든 근관은 E&Q plus (Meta Biomed Co., Chungju, Korea)를 사용하여 #35/.06 gutta-percha cone으로 충전하였다. 모든 치아의 근첨공 주변 1 mm를 제외하고 nail varnish를 도포하였고 음성 대조군은 근첨공을 포함하여 전체 면을 도포하였다. 모든 시편을 1% 메틸렌블루 용액에 72시간 동안 보관한 다음 치근첨으로부터 1, 2, 3 mm 높이에서 수평으로 절단하였다. 각 단면을 12.5 x 2.5배 현미경하에서 관찰하고 디지털 카메라로 촬영하였다. 염색제 누출 평가를 위해 five-degree scoring system을 사용하였다. 각 절단면에서의 점수를 모두 합하여 한 시편의 점수로 사용하고 통계학적 분석을 하였다. 이 실험 조건하에서, 3 - 7 mm 까지의 heat source plugger의 적용 깊이는 근단부 폐쇄에서 유의한 차이를 나타내지 않았다. 5 - 7 mm의 Buchanan's protocol을 포함한 3 - 7 mm를 모두 임상 적용에서 받아들여질 만하다고 보인다. The purpose of this study was to compare apical sealing ability of continuous wave canal filling technique according to various heat source plugging depths. Eighty one extracted human premolars with straight root were cleaned and shaped to size 35 using .06 taper rotaiy NiTi file. After cleansing and shaping, the teeth were divided into 5 groups following the heat source probing depths from the apex ; 3, 4, 5, 6 and 7 mm. All specimens were filled using E&Q Plus with #35/.06 tapered gutta-percha cone. The positive control teeth were not filled. All teeth were coated with nail varnish except the apical 1 mm around the apical foramen. Negative control teeth were completely sealed include the apical foramen. All specimens were immersed in 1% methylene blue solution for 72 hours. Then the specimens were sectioned horizontally at 1, 2 and 3 mm from the root apex. Each sectioned surface was photographed using a digital camera attached to the stereomicroscope at 12.5 x 2.5 fold magnification. All points at 1, 2 and 3 mm were summed as final score of one specimen. Statistical analysis of the collected data was performed. Under the condition of this study, there was no significant difference between the heat source plugging depths of 3, 4, 5, 6 and 7 mm in apical sealing ability. All of apical heat source plugging depth from 3 to 7 mm including Buchanan's protocol -from 5 to 7 mm- seems to be acceptable in clinical application.

Strain Distributions of Plane-Strained and Simple-Sheared Al–Mg Alloy

Hyeon‑Woo Son,Jae‑Cheol Lee,Hyun Soon Park,Soong‑Keun Hyun 대한금속·재료학회 2021 METALS AND MATERIALS International Vol.27 No.11

Strain distribution in plane-strained (rolling) and simple-sheared (torsion) Al–Mg alloy has been estimated using both X-rayline profile analysis and electron backscatter technique. The strain analyses under unified texture distribution by orientationrotation showed that torsion has relatively homogeneous strain distribution regardless of texture component in contrast toinhomogeneous strain in rolling. In addition, annealing texture of torsion has more random texture than inhomogeneousrolling texture. Lower texture difference index in annealed torsion specimens suggest homogeneous strain distribution insimple shear has a higher resistance to strain-induced boundary migration, which has been known to be main reason forstrong development of ND||⟨100⟩ component during annealing of rolled Al sheet.

전기도금을 이용한 스테인레스스틸 각형 선재의 굵기 증가 후 물성 변화

이정석,황현식,최광철,문재동 전남대학교 치의학연구소 2002 구강과학 Vol.14 No.1

The purpose of this study was to evaluate clinical applications of electroplating method through investigation of the physical properties of orthodontic rectangular wires according to varying their cross section. For the study, it was accomplished to electroplate the 0.016-inched orthodontic rectangular stainless steel wire. The cross section of stainless steel orthodontic rectangular wire increased from 0.016 X 0.016 inch to 0.017 X 0.017 inch by electroplating. The wire was heat treated to improve an adhesion between the wire and electroplated metal. A three-point bending test and torsion test were conduced in order to compare physical properties among three wire groups; 0.016 X 0.016 wires(group 016P) and 0.017 X 0.017 wires(group 017). Through the investigations of each wire group, following results were obtained. 1. At three-point bending test, the group 016P showed higher tendency in the degree of stiffness, yield strength and ultimate tensile strength than the group 016. Stiffness and ultimate tensile strength showed statistically significant differences between two groups at three-point bending test(p<0.05). 2. Stiffness, yield strength, and ultimate tensile strength of the group 016P showed lower tendency than those of the group 017. Stiffness showed statistically significant differences between two groups at three-point bending test(p<0.05). 3. Torque/twist rate, yield torsional moment, and ultimate torsional moment of the group 016P showed higher tendency than those of the group 016. All measurements showed statistically significant differences between two groups after torsion test(p<0.05). 4. Torque/twist rate, yield torsional moment, and ultimate torsional moment of the group 016P showed lower tendency than those of the group 017. Yield torsional moment, and ultimate torsional moment showed statistically significant differences between two groups after torsion test(p<0.05). Xylitol is a 5-carbons carbohydrate, which can be replaced with sucrose for preventing caries. The replication of Streptococcus mutans and its formation of artificial plaque were studied in the media containing xylitol. The combined effect of xylitol and other carbohydrates on Streptococcus mutans was also studied. The replication of Streptococcus mutans was inhibited according to the increased concentration of xylitol. Streptococcus mutans replicated at the initial stage of incubation in the media contaning glucose, fructose or lactose, while replication from the beginning of incubation in the media containing fructose as combining with xylitol. The formation of artificial plaque by Streptococcus mutans was significantly reduced in the media containing with xylitol and fructose. These results indicated that the replication of Streptococcus mutans was inhibited according to the increased concentration of xylitol, and the formation of artificial plaque by Streptococcus mutans was significantly inhibited in the media containing xylitol and fructose.

백서 뇌하수체 성장호르몬 종양세포의 Chicken Lysozyme 유전자 갑상선호르몬 반응요소에서 갑상선호르몬 수용체 역동학에 미치는 T₃효과 분석

이성진,박철영,정인경,홍은경,최철수,김현규,김두만,유재명,임성희,최문기,유형준,박성우,Larsen, P. Reed 대한내분비학회 2003 Endocrinology and metabolism Vol.18 No.4

연구배경: 유전자 전사과정은 증강부위 (enhancer) 또는 억제부위(silencer)의 복합작용을 통하여 조절되며 chicken Iysozyme 유전자의 억제부위는 두 개의독립적인 전사인자 결합부위 (Fl과 F2)를 가지는데 Fl부위는 75~93 kD 크기의 NePl 단백질이 결합하는 위치인 반면 역위회문구조(inverted palindrome, InvPal)의 F2 부위는 갑상선호르몬 수용체가 결합하는 갑상선호르몬 반응요소인 동시에 갑상선호르몬 수용체에 대해 높은 친화력을 가지고 있다. 실험적으로 Fl부위 또는 F2 부위 (이하 F2-TRE 부위)를 각각 다량체화(multimerization) 하였을 때 전사억제효과가 증가하였다는 연구 결과는 Fl 부위와 F2-TRE 부위가 서로 독립적으로 기능하는 구조임을 시사하고 있으며chicken Iysozyme 유전자의 억제부위가 완전한 전사억제효과를 가지기 위해서는 Fl 부위와 F2-TRE 부위가 모두 필요함이 보고 되어 있다. 현재 갑상선호르몬에 의한 chicken Iysozyme 유전자 조절기전을 규명하기 위해 많은 연구가 이루어지고 있으나 73 자극 전 ·후 갑상선호르몬 수용체의 역동학에 대해서는 아직까지 거의 보고된 바 없으며 이와 관련하여 저자들은 치근 사람의 간암세포주인 HepG2 세포에서 T₃ 자극전 ·후 갑상선호르몬 반응요소인 IRE2 부위에 대한 갑상선호르몬 수용체의 결합이 교대로 이루어지고 있음을 염색체 면역침전법 (chromatin immunoprecipitation, ChIP) 및 정량적 중합효소연쇄반응을 이용하여 확인한 바 있다. 이에 저자들은 본 연구에서 F2-lRE 부위를 포함하는 백서 뇌하수체 종양세포주인 GC8 세포를대상으로 염색체 면역침전법과 중합효소연쇄반응을 이용하여 갑상선호르몬 자극 전 후 시간적 순서에 따라 F2-TRE 부위에 결합하는 갑상선호르몬 수용체의 결합양상 변화를 분석함으로써 갑상선호르몬 수용체의 역동학적 모델을 제시하여 보고자 하였다. 방법: thymidine kinase(TK) promoter의 5' 부위에 chicken Iysozyme silencer의 고친화력 갑상선호르몬 반응요소(F2-TRE 부위)가 삽입된 플라스미드,mouse TRα gene이 삽입된 플라스미드, neomycinresistance gene이 삽입된 플라스미드를 백서 뇌하수체성장호르몬 종양세포인 GC 세포에 각각 주입하여 제작한 GC8 세포주를 사용하였다. 100 αM T₃를 투여하기 전과 투여한 후 12시간 뒤 TRαl, TRβl, TRβ2 항체를 이용하여 염색체 면역침전법과 고식적 중합효소연쇄반응 및 정량적 중합효소연쇄반응을 시행하였다. 각 갑상선호르몬 수용체 항체의 양을 1.5μL에서 4.5μL로 바꾸어 첨가한 후 동일한 방법으로 염색체 면역침전법을 반복하여 시행하였다. 100nM T₃를 투여하기전과 투여한 후 20분, 1시간, 2시간, 4시간, 6시간, 8시간, 12시간 뒤 TRαl, TRβl, TRβ2 항체를 이용하여 염색체 면역침전법을 시행하였다. 100nM T₃를 투여하기 전과 투여한 후 12시간 뒤 TRαl, TRβl, TRβ2 단백질의 발현량을 알아보고자 Western blot을 시행하였다. 결과: 100 nM T₃를 투여하기 전과 투여한 후 12시간 뒤 염색체 면역침전법과 F2-TRE 시발체를 이용한 고식적 중합효소연쇄반응을 시행하였을 때 T₃를 투여한 후 12시간 뒤 TRα1과 TRβ2의 결합은 증가한 반면 TRβl의 결합은 감소하였다. 정량적 중합효소연쇄반응으로 갑상선호르몬 수용체의 결합량을 측정하였을 때TRα1은 T₃ 투여 전 1.01에서 T₃ 투여 후 2.73으로 유의하게 증가하였으며 TBβl은 T₃ 투여 전 4.59에서 T₃투여 후 2.06으로 유의하게 감소하였고 TRβ2는 T₃ 투여 전 2.53에서 T₃ 투여 후 2.98로 증가하는 경향을보였다(TRα1, Δ=+170.3%, p<0.05; TRαl, Δ=-55.1%, p<0.05; TRβ2, Δ=+17.8%). 정량적 중합효소연쇄반응으로 측정한 갑상선호르몬 수용체의 전체 결합량은 T₃ 투여 전 8.13에서 T₃ 투여 후 7.77로 감소하였으나 통계적으로 유의하지 않았다(Δ=-4.4%).100nM T₃ 투여 전 ·후 시간별로 염색체 면역침전법과 정량적 중합효소연쇄반응을 시행하였을 때 TRα1 결합량은 T₃ 투여 후 20분과 6시간 뒤 각각 증가하였으며 TRβ2 결합량은 T₃ 투여 후 20분 뒤 최고치까지 증가하였다가 2시간 뒤부터 감소하였다. 그러나 TRαl 결합량은 T₃ 투여 후 1시간 뒤 최저치까지 감소되었다가 이후 지속적으로 유지되는 경향을 보였다. 100 nM T₃ 투여 전과 투여 후 2시간 뒤 갑상선호르몬 수용체의 결합량을 비교하였을 때 TRα1은 219.8% (1.01→3.23), TRβ2는 9.9% (2.53→2.78) 증가하였으나 TRβ1은 52.9% (4.59-)2.16) 감소하였으며 결합량 변화의 방향은 100 naM T₃ 투여 후 4시간 뒤와 6시간 뒤 갑상선호르몬 수용체 결합량 변화의 방향과 일치하였다(TRα1, 2.89→4.09, Δ =+41.5%; TRβl, 2.33→2.04, Δ=-12.4%; TRβ2, 2.57→2.59, Δ=10.8%). 갑상선호르몬 수용체 항체를 1.5 μL 또는 4.5 μL 투여한 후 F2-TRE부위에 대한 염색체 면역침전법 및 정량적 중합효소연쇄반응을 각각 시행하였을 때 첨가한 갑상선호르몬 수용체 항체의 양에 따른 갑상선호르몬 수용체결합량의 유의한 차이는 없었다. 100 nM T₃를 투여하기 전과 투여한 후 12시간 뒤 Western blot을 시행하였을 때 갑상선호르몬 수용체 발현량의 유의한 차이는 관찰되지 않았다. 결론: 본 연구에서 관찰된 T₃ 자극 전 · 후 chickenIysozyme 유전자의 F2-TBtE 부위에 대한 갑상선호르몬 수용체 이성체의 교대현상 및 시간적 순서에 따른 갑상선호르몬 수용체 결합양상의 변화가 나타내는 의미에 대하여 추시 연구가 필요함은 물론 추가적으로 다른 유전자 또는 다른 종류의 세포주를 대상으로 T₃자극에 따른 갑상선호르몬 수용체 결합양상의 변화와유전자 발현을 검토하여야 할 것이다. 한편 본 연구 결과만으로는 갑상선호르몬 수용체 역동학에 대한 많은 의문점을 풀 수 없음에도 불구하고 아직까지 국내외적으로 갑상선호르몬 수용체의 역동학에 대한 연구 결과가 거의 없는 현실을 고려하여 볼 때 본 연구는 제한적이나마 일정한 농도의 갑상선호르몬 자극 전ㆍ후chicken Iysozyme 유전자의 F2-TRE 부위에서 갑상선호르몬 수용체의 교대현상을 재확인하였다는 점과 갑상선호르몬 자극 전 · 후 시간적 순서에 따른 갑상선호르몬 수용체의 역동학적 모델을 처음으로 제시하였다는 점에서 의의가 있을 것으로 생각된다. Background: The regulation of gene transcription can be controlled by both positive (enhancer) and negative (silencer) regulatory sequences. Several enhancer and silencer elements have been described in the 5' region of the chicken lysozyme gene. The silencer located at -2.4 kb upstream of the chicken lysozyme gene is composed of two separate modules (Fl and F2) that can function as silencers by themselves, but also show synergistic repression after multimerization. The F1 module is bound by a protein termed NePl and F2 module, a F2 thyroid hormone response element (F2-TRE), and can be bound by the thyroid hormone receptor (TR). F2-TRE has an inverted palindromic structure, with high affinity to TR. Although many current reported results have tried to explain the regulatory mechanism of chicken lysozyme gene expression due to the thyroid hormone, there have been few studies that clarify the TR dynamics in the F2-TRE of the chicken lysozyme gene, either with or without exposure of the thyroid hormone. Here, the changes in the TR binding patterns in the F2-TRE of the chicken lysozyme gene are described, both before and after T₃ stimulation over time. Methods: Using the stably transfected rat pituitary somatotroph tumor cell line, GC8 cells, with the F2-TRE inserted 5' to the thymidine kinase (TIC) promoter, together with a mouse TRα - expressing plasmid, a chromatin immunoprecipitation (ChIP) technique was employed to reveal the TR-TRE interaction before and after T₃ stimulation. Following the cross-linking and sonication of the cells, the immunoprecipitation was performed overnight, at 4℃, with TRαl, TRβl and TRβ2 antibodies, respectively. The binding patterns and amounts of TRαl, TRβ1 and TRβ2 to the F2-TRE, before and after 12 hours of 100nM T₃ stimulation, were analyzed using conventional and quantitative real-time polymerase chain reactions (RQ-PCR). The ChIP technique was used to give a basal value for 20 minutes and 1, 2, 4, 6, 8 and 12 hours after the 100nM T₃ stimulation, and RQ-PCR was then performed. Western blot with TRαl, TRβl and TRβ2 antibodies were also performed. Results: After 12 hours of 100 nM T₃ stimulation of the GC8 cells, the TRα1 and TRβ2 binding to the F2-TRE increased, but the TRβ1 binding to the F2-TRE decreased, by conventional PCR. Although all the TR isoforms were bound to the F2-TRE by RQ-PCR, the TRαl binding to the F2-TRE, after 12 hours of l00nM T₃ stimulation, was significantly increased (1.01→2.73, Δ =+170.3%, p<0.05), but the change in the amount of TW2 binding was not significant (2.53→2.98, Δ=+17.8%). The TRβl binding was significantly decreased compared with that of the basal level (4.59→2.06, Δ=-55.1%, p<0.05). The total TR bindings to the F2-TRE had a tendency to decrease after 12 hours of 100 nM T₃ stimulation (8.13→7.77, Δ=-4.4%). The binding patterns and amounts of TRαl, Tβl and Tβ2, both before and after the 100 nM T₃ stimulation, were also identified over time. While the TRβl bindings to the F2-TRE after 1 hour of l00nM T₃ stimulation were acutely reduced, those of the TRαl at 20 minutes and 6 hours were increased. The TRβ2 bindings showed a maximal increase at 20 minutes. The directions of the TR binding patterns, between the before and after 2 hours of 100nM T₃ stimulation, were identical to those for between 4 and 6 hours of T₃ stimulation. There was no significant difference in the TR bindings to the F2-TRE in relation to the amounts (1.5 vs. 4.5μ I) of TR antibodies used during the ChIP assays. The Western blots showed no significant change of the levels of each TR isoform proteins, either before or after 12 hours of exposure to 100nM T₃. Conclusion: These results show the dynamic binding patterns of the TR isoforms to the F2-TRE of the chicken lysozyme gene, both before and after T₃ stimulation, over time. Further investigation, however, will be needed to clarify the mechanisms of our observations. The ChIP technique may then be used to reveal the dynamic models of the cofactors, as well as TR isoforms, in the TR-regulated transcription machinery (J Kor SOC Endocrinol 18:379-391, 2003).

7차 교육과정에 따른 "정보사회와 컴퓨터" 교과의 평가도구 개발

이승현,곽은영,김현철 한국컴퓨터교육학회 2004 컴퓨터교육학회 논문지 Vol.7 No.1

본 논문에서는 제7차 교육과정에 따른 고등학교 ‘정보사회와 컴퓨터’ 교과의 평가도구를 제시한다. 제시된 평가도구는 제7차 교육과정의 목표와 ‘정보사회와 컴퓨터’ 교과의 특성을 모두 반영할 수 있도록 개발하였고 현장 교사들이 구체적으로 활용할 수 있도록 하였으며, 궁극적으로 교육과정의 질을 향상시키도록 하였다. 이를 위하여 먼저 분석된 교과내용을 영역별로 분류하고 성취기준과 평가영역, 평가기준을 개발하였다. 또한 개발된 평가 모델 기반의 예시 평가도구를 제시함으로써 학교현장에서 교육목표가 구현된 평가 활동이 이루어지게 하였다. 현장 전문가의 타당성 검증을 통하여 제시된 평가 도구의 현장 활용도를 높이고자 하였다. In this study, we present an assessment model for the ‘Information Society and Computer’ subject of the 7th National High School Curriculum. The Assessment model is developed to improve the quality of the curriculum by considering both of the objective of the National Curriculum and the property of the subject. To develop the assessment model, we analyzed textbooks used in most schools, developed achievement standards, classified assessment areas and standards. Adequacy and potential practice of the assessment model is also reviewed and evaluated by subject experts.