The biological effects of fibronectin typeIII 7-10 to MC3T3-E1 osteoblast

홍정욱,최상묵,한수부,정종평,류인철,이용무,구영,Hong, Jeong-Ug,Choi, Sang-Mook,Han, Soo-Boo,Chung, Chong-Pyoung,Rhyu, In-Chul,Lee, Yong-Moo,Ku, Young The Korean Academy of Periodontoloy 2002 Journal of Periodontal & Implant Science Vol.32 No.1

타이태늄은 뛰어난 생체적합성과 적절한 물리적 성질을 바탕으로 치과 및 정형외과 영역의 매식재로 널리사용되어져 왔으며, 골과 매식재 사이의 골 융합 정도를 증가시킬 목적으로 물리, 화학적인 방법을 이용한 타이태늄의 표면처리에 관한 많은 연구들이 진행되어 왔다. 최근에는 부착단백질 또는 성장인자를 이용한 생체재료의 표면개질을 통하여 조직적합성 및 치유 능의 개선을 위한 시도들이 있어왔다. Fibronectin(FN)은 주요 세포외기질중의 하나로 생체 내 널리 분포하여 세포의 부착, 이동 및 증식에 관여하는 거대 당단백으로, RGD및 PHSRN 펩타이드 서열이 세포의 인테그린과 결합하여 세포의 활성을 조절하는 것으로 알려져 있다. 이 연구에서는 FN으로 처리된 타이태늄이 조골세포의 부착, 증식 및 분화에 미치는 영향과 이에 따른 석회화 정도에 미치는 영향을 관찰하여 부착분자를 이용한 타이태늄 표면개질의 효과를 규명하고자 하였다. 상업용 순수 타이태늄을 gold thiol법을 이용하여 표면처리 후, 혈장 FN(plasma FN, pFN)과 유전자재조합법을 이용하여 얻은 FN조각(FN type III 7-10, FNIII 7-10)을 피복한 시편을 실험군으로, 아무런 처리를 하지 않은것(smooth surface, SS)과 산 부식(Sandblasted and acid etched, SLA)처리된것을 대조군으로 이용하였다. 배양된 조골세포주(MC3T3-E1)를 사용하여 타이태늄 표면 처리에 따른 세포의 증식, 형태변화, 알칼리성 인산분해효소(ALPase) 생산 및 세포면역형광법을 이용한 분화정도를 시간 경과에 따라 관찰하였다. 조골세포증식의 경우 FNIII 7-10 처리군에서 pFN 처리군 및 대조군에 비해 시간경과에 따라 유의성있는 세포수의 증식이 관찰되었으며(p<0.05), ALPase 생성의 경우에도 FNIII 7-10 처리 군에서 아무 처리도 하지 않은 군에 비해 유의성 있게 높은 효소의 생성이 관찰되었다(p<0.05). 주사전자현미경을 이용한 세포의 형태관찰결과 아무 처리도 하지 않은 군에서는 마름모형태를 나타내었으며, 산 부식 처리된 군에서는 세포가 가시모양의 형태를 보인 반면 FN으로 처리된 두 군에서는 세포의 부착 및 펴짐이 매우 발달되어 있는 모습이 관찰되었다. 세포의 분화정도를 관찰하기 위하여 국소부착키나제(focal adhesion kinase, FAK), 및 actin stress fiber의 분포양상을 세포면역형광법을 이용하여 관찰한 결과 FN으로 표면처리된 두 군에서 아무런 처리도 하지않은 군 및 산 부식처리 한 군에 비해 프라크의 발현이 높게 나타났으며 잘 발달된 actin stress fiber의 소견을 나타내었다. 이 실험의 결과들은 gold thiol 법을 이용한 표면처리 후 FN부착을 통한 타이태늄의 표면개질이 조골세포의 부착, 증식 및 분화에 중요한 역할을 담당하여 석회화 정도를 촉진시키는 것을 보여주었으며, 이런 결과들은 더 짧은 FN조각을 이용한 다른 생체재료의 표면개질에 폭 넓게 응용할 수 있으리라 생각된다.

자발성 뇌실질내 출혈 환자에서 혈종 증가의 위험 인자에 대한 분석

이용묵,고현송,염진영,김성호,송시헌,김윤,Lee, Yong-Mook,Koh, Hyeon-Song,Youm, Jin-Young,Kim, Seong-Ho,Song, Shi-Hun,Kim, Youn 대한신경외과학회 2001 Journal of Korean neurosurgical society Vol.30 No.4

Objective : The purpose of this study was to evaluate the risk factors of hematoma enlargement in patients with spontaneous intracerebral hemorrhage(ICH). Methods : A series of 214 ICH patients diagnosed by brain CT scan in our neurosurgery department from June 1995 to July 1998 were reviewed with clinical status, past medical histories, laboratory findings, CT findings and prognosis. Results : In 27 patients(12.6%), the second CT scan showed an enlarged hematoma. Age, sex, and site of hematoma were not related to hematoma enlargement. A long interval(>6 hours) between the onset and the 1st CT scan strongly reduced the incidence of hematoma enlargement. The incidence of hematoma enlargement significantly increased in patients with previous history of hypertension, cerebral infarction and ICH. This analysis also demonstrated the following independent factors predisposed to hematoma enlargement : initial high systolic blood pressure, high serum total protein, low serum albumin, low serum sodium, prolonged prothrombin time(>14 sec) and activated partial thromboplastin time(>29.5 sec), irregular hematoma shape, and combined intraventricular hemorrhage. Prognosis in the group of hematoma enlargement showed high mortality(48.1%) and poor outcome. Conclusion : Patients with previous history of hypertension, cerebral infarction and ICH, and with high systolic blood pressure, prolonged coagulation time, irregular hematoma shape and intraventricular hemorrhage in CT scan should be observed carefully. And, early surgical therapy of large hematoma and meticulous control of blood pressure may decrease the mortality and morbidity in patients with spontaneous ICH.

수산화철에 의한 Na2WO4 수용액중의 토륨 흡착에 관한 연구

이용묵,이원해 대한금속재료학회 1990 대한금속재료학회 학술대회 개요집 Vol.1990 No.1

신선도 유지를 위한 포도저장에 관하여

이용묵 慶北大學校 農業開發大學院 1998 最高農業經營者課程 論文集 Vol.4 No.-

인터넷 이용자의 검색 행동 성향에 관한 연구

오경묵,황상규,이용현,Oh Kyung-Mook,Hwang Sang-Kyu,Rhi Yong-Hyun 한국문헌정보학회 1999 한국문헌정보학회지 Vol.33 No.3

새로운 정보검색 환경인 인터넷에서의 정보검색은 과거의 정보검색행위와는 여러 면에서 다르다. 인터넷 이용자들은 과거의 정보 이용자와는 다른 행동 양식을 보이고 있기 때문에 보다 나은 서비스를 제공하기 위해서 인터넷 검색 시스템은 새로운 이용자들의 특성을 제대로 반영하여야 한다. 정보 수요자인 인터넷 이용자들의 검색 행동 성향을 조사, 분석하는 과정을 통해 이용자들의 요구사항을 파악하고, 이를 통하여 인터넷 기반 정보검색시스템 설계를 위한 가이드라인을 제시하고자 한다. Information retrieval on World Wide Web is very different from the one in traditional environment. Since Internet user's searching behavior shows it's own special search characteristics, a study of user's specific characteristics is necessary to offer better services. Through analysis and examination of Internet user behaviors, we suggest guidelines of design for developing Internet -based information retrieval systems.

반복적인 소뇌 출혈로 발현한 후두와 모세혈관 확장증 - 증례보고 -

이용묵,고현송,조준희,염진영,송시헌,김윤,Lee, Yong-Mook,Koh, Hyeon-Song,Cho, Jun-Hee,Youm, Jin-Young,Song, Shi-Hun,Kim, Youn 대한신경외과학회 2001 Journal of Korean neurosurgical society Vol.30 No.2

Hemorrhage due to capillary telangiectasia is rare. We report a case of capillary telangiectasia presenting with repeated cerebellar hemorrhage in a 38-year-old male. To our knowledge this is the first case of repeated cerebellar hemorrhage from the capillary telangiectasia. At the first operation, we removed hematoma only, but rebleeding occurred repeatedly in the same area. Finally, we evacuated the recurrent hematoma and vascular mass of capillary telangiectasia at the second operation under surgical microscope. Based on the findings of this case and a review of the literature, we conclude that capillary telangiectasia can be the cause of the massive repeated hemorrhage.

Development of RGD peptides grafted onto chitosan surfaces; Osteoblast interactions

이창균,황정효,이용무,구영,류인철,이승진,한수부,최상묵,정종평,Lee, Chang-Kyun,Hwang, Jeong-Hyo,Lee, Yong-Moo,Ku, Young,Rhyu, In-Chul,Lee, Seung-Jin,Han, Soo-Boo,Choi, Sang-Mook,Chung, Chong-Pyoung The Korean Academy of Periodontoloy 2003 Journal of Periodontal & Implant Science Vol.33 No.1

1. 목적 생체재료의 생체친화성을 증진시키고 치유를 촉진하기 위한 목적으로 생체재료의 생화학적 표면개질에 관한 연구가 널리 진행되고 있다. 이와 같은 목적으로 이용되어 온 부착분자에는 아미노산, 펩타이드, 단백질, 효소 및 성장인자들을 들 수 있으며, 이들 분자들을 금속, 골대체물질 및 폴리머와 같은 생체재료의 표면개질에 이용하여 왔다. 이 연구의 목적은 생체적합성이 우수하고 생분해성을 지닌 키토산으로 얇은 막을 제작한 후, 세포외 기질의 구성성분 중 세포부착에 관여하는 RGD 펩타이드를 부착시킨, 표면개질 키토산막의 생물학적 영향을 MG-63 조골양세포를 이용하여 관찰하는 것이다. 2. 방법 2% acetic acid에 키토산 가루를 녹여 만든 2% 키토산 용액으로 24-well 배양접시의 표면을 도포 후 24시간 동안 건조시켜 키토산막을 제작하였다. GRGDS 펩타이드를 cross-linker(EDC, NHS) (Sigma, MO, USA) 용액과 반응시켜서 펩타이드의 카르복실기를 활성화시켰다. 이들을 PBS 완충용액으로 수화시킨 키토산막과 결합시켜 펩타이드의 활성화된 카르복실기와 키토산의 아민기 간에 안정적인 아미드 결합(amide bond)이 형성되도록 하였다. 하루 동안 반응을 일으킨 후 PBS 완충용액과 증류수로 씻어내고 냉동 건조시킴으로써 GRGDS가 결합된 키토산막을 제작하였다. 재료 표면의 화학 성분을 알아보는데 사용되는 방법의 일종인 X-ray photoelectron spectroscopy(XPS) 분석을 통하여 부착분자가 키토산막에 결합된 여부를 확인하였다. GRGDS 펩타이드에 요오드를 결합시킨 후, 이것을 키토산막에 공유 결합시키고 XPS를 통해 요오드가 재료 표면에서 검출되는지를 검사하였다. 요오드가 검출된다면 이것은 키토산막 표면에 실제로 GRGDS 펩타이드가 존재하는 것을 의미하게 된다. 표면개질된 키토산막에 사람조골양세포인 MG-63을 접종하여 이를 실험군으로 하였고, 표면이 개질 되지 않은 키토산막을 대조군으로 하였다. 세포부착의 최적화 농도를 확인하기 위하여 GRGDS를 0.01, 0.05, 0.1, 0.25, 0.5, 1.0mg/ml의 농도로 준비하였다. 배양 후 1일, 7일째에 각 well에서 trypsin EDTA를 이용하여 세포를 분리한 후, 이를 원심 분리하여 세포수측정기를 이용하여 부착 세포의 수를 측정하여 세포의 부착 정도를 비교하였다. 배양 2시간, 24시간 후 주사전자현미경을 이용하여 키토산막에 부착된 세포의 양상을 관찰하였다. 3. 결과 XPS를 통한 표면의 화학 성분 분석 결과 GRGDS 펩타이드를 결합시킨 키토산막에서 요오드가 검출되었으며 펩타이드를 부착하지 않은 대조군에서는 검출되지 않았다. 따라서 cross-linker를 이용한 펩타이드와 키토산막의 공유결합을 확인할 수 있었다. 세포 배양 후 1일째 부착된 세포 수를 측정한 결과 0.1mg/ml 이상의 GRGDS 펩타이드 농도로 공유 결합시킨 키토산막에서 부착 세포 수가 다른 농도에 비해 유의성 있게 많이 관찰되었다. 이 농도 이하에서는 대조군과 실험군간에 세포부착의 유의한 차이가 없었다. 따라서 주사전자현미경을 이용한 부착 세포의 양상에 관한 관찰은 0.1mg/ml 농도의 펩타이드를 이용하였다. 세포 배양 7일째, 부착된 세포 수 측정 결과 GRGDS의 농도에 따른 유의성 있는 차이가 없었으며, 실험군과 대조군간에도 유의성 있는 차이가 없었다. 주사전자현미경 관찰결과 2시간 및 24시간 배양된 실험군 모두에서 별모양의 세포들이 키토산막 표면에 편평하게 잘 부착되어 있으며 많은 위족이 발달된 소견을 보인 반면,

GPSㆍ지오이드 고를 보정한 측지계간 좌표변환

姜準默(강준묵),李鎔昌(이용창),朴弼鎬(박필호),宋承鎬(송승호) 대한토목학회 1993 대한토목학회 학술발표회 논문집 Vol.1993 No.2

서울시 대기 중 총 가스상 수온의 농도와 수용원 모델을 이용한 오염원의 파악

이용미,이승묵 한국대기환경학회 2004 한국대기환경학회 학술대회논문집 Vol.- No.-

Tissue Engineered Bone Formation Using Porous Chitosan and Chitosan/Tricalcium Phosphate Matrices

이용무,최상묵,박윤정,이승진,구영,정종평,Lee, Yong-Moo,Choi, Sang-Mook,Park, Yoon-Jeong,Lee, Seung-Jin,Ku, Young,Chung, Chong-Pyoung The Korean Academy of Periodontoloy 1998 Journal of Periodontal & Implant Science Vol.28 No.4

chitosan은 골치유증진 및 골세포의 분화를 촉진하는 것으로 알려진 천연의 생분해성 고분자이다. 이연구에서는 chitosan 및 chitosan/tricalcium phosphate(TCP) 다공성 기질을 제조하여 골이식재 및 조직공학적 골형성을 위한 3차원적 세포배양 지지체로서의 가능성을 평가하고자 하였다. chitosan 용액 및 TCP가 포함된 chitosan 용액을 동결건조함으로써 소공의 크기가 $100-200{\mu}m$인 스폰지형태의 chitosan 및 chitosan/TCP 다공성 기질을 제작하였다. 골이식재로서의 효과를 평가하기 위하여 백서의 두개골 결손부에 제작된 chiosan 및 chitosan/TCP 다공성 기질을 각각 이식하고 2주 및 4주 후에 동물을 희생하여 조직학적으로 치유양상을 관찰하였다. 조직공학적 골형성을 위한 세포배양 지지체로서의 가능성을 평가하기 위하여 백서 태자의 두개골에서 분리된 골아세포를 chitosan 및 chitosan/TCP 다공성 기질에 각각 접종하고 56일간 배양하면서 각 기간 별로 세포수, 염기성 인산효소 활성, 축적된 calcium의 양을 측정하였고 배양된 세포-기질 혼합체를 광학현미경 및 주사전자현 미경하에서 조직학적 관찰을 시행하였다. 백서 두개골결손부에 이식된 chitosan 및 chiosan/TCP 다공성 기질은 별다른 이물반응 없이 자연 분해되면서 신생골조직 내에 매립되었으며 이식하지 않은 대조군에 비해 유의하게 높은 신생골형성 효과를 나타내어 우수한 골전도성이 있음이 확인되었다. 신생골형성 양상이나 형성된 양에 있어서 두 가지 기질간의 유의한 차이는 없었다. 골아세포-기질 혼합체의 배양결과, 접종후 배양 28일 경과 시까지 골아세포수는 지속적으로 증가하다가 이후에는 5 8일까지 성장정도가 둔화되었다. 염기성 인산효소의 활성 및 calcium 축적량은 접종후 배양시간경과에 따라 56일까지 지속적으로 증가하였다. 세포수 및 염기성 인산효소의 활성에서 두 기질간의 유의한 차이는 없었고, calcium 축적량에 있어서는 chitosan/TCP 기질에서 유의하게 높았고 증가속도도 컸다. 배양된 골아세포가 접종된 다공성 기질의 조직학적 관찰결과, 골아세포는 다공성 기질에 잘 부착하여 중층의 형태로 성장하면서 광화된 골기질을 형성함이 관찰되었다. 배양 14일부터 작은 골편형태의 골형성이 기질 표면에 부착되어 관찰되었고, 배양기간이 길어짐에 따라 성장하여 배양 56일째에는 상당한 양의 광화된 골질이 형성됨이 관찰되었다. 배양 56일 경과후의 광화된 골질의 양은 chitosan/TCP 기질에서 더 많았다. 이 연구의 결과, chitosan 및 chitosan/TCP 다공성 기질이 골이식재로서 뿐만 아니라, 조직공학적 골형성에 적용되는 골아세포의 배양을 위한 3차원구조의 세포지지체로 이용되어 골재생술식에 유용한 생체재료로 활용될 수 있음이 확인되었다.