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      • 성장호르몬 분비성 뇌하수체 선종에서 소마토스타틴 수용체 (제2아형, 제5아형), G_i2α 및 Pit-1 유전자 발현

        류미숙,양인명,박철영,우정택,김성운,김진우,김영설,최영길,김은희,박승준,김국기 대한내분비학회 2002 Endocrinology and metabolism Vol.17 No.2

        Background: Mutation of Gs protein subunit (gsp oncogene), detected in about 30∼40% of growth hormone (GH)-secreting pituitary tumors, is associated with an increased long-acting somatostatin analog octreotide sensitivity. However, the mRNA expression of somatostatin receptor (sst) was not changed in the GH-secreting pituitary tumor, regardless of whether they were gsp oncogene positive or negative. This suggests that the expression of genes coding for G_i2α, Pit-1 and the other factors involved in the regulation of secretory activity in somatotrophs is likely to be altered in gsp oncogene positive tumors. We observed the impact of the gsp oncogene on the expression of the genes coding for Gi2, Pit-1 and sst (2&5) in GH-secreting pituitary tumors. Methods: The GH response to octreotide was examined in 13 acromegalic patients before transsphenoidal adenomectomy. Genomic DNA and RNA were extracted from fresh frozen tumor tissues. PCR was performed to amplify and sequence the region between codon 184 and 251 that includes exons 8 and 9 of the Gs gene. Sst2, sst5, G_i2α and Pit-1 mRNA levels were measured by semi-quantitative RT-PCR. Results: Sst2 and sst5 mRNA transcripts were detected in all tumors (7 gsp +, 6 gsp-). The amount of sst transcripts varied considerably varied between the tumors. There were no significant differences in sex, age, tumor size, grade or basal GH levels. Pit-1 and sst2 mRNA levels were not different. In contrast, G_i2 mRNA levels were significantly higher in gsp (+) while sst5 mRNA levels were higher in gsp (-). Conclusion: These data suggests that gsp oncogene may increase Gi2α levels but decrease sst5 mRNA levels. However, Pit-1 and sst2 mRNA expression may not be affected by gsp oncogene. The increased expression of the G_i2α gene might be an inhibitory compensatory response to the action of gsp oncogene

      • KCI등재

        Is renal replacement therapy necessary in deceased donor liver transplantation candidates with hepatorenal syndrome?: a 2-year experience at a high-volume center

        Gil-Chun Park,Shin Hwang,Dong-Hwan Jung,Gi-Won Song,Chul-Soo Ahn,Ki-Hun Kim,Deok-Bog Moon,Tae-Yong Ha,Young-In Yoon,Hui-Dong Cho,Jae-Hyun Kwon,Yong-Kyu Chung,Sang-Hyun Kang,I-Ji Jung,Jin Uk Choi,Sung- 대한외과학회 2020 Annals of Surgical Treatment and Research(ASRT) Vol.98 No.2

        Purpose: Hepatorenal syndrome (HRS) is a fatal complication in patients with end-stage liver disease awaiting liver transplantation (LT). HRS often develops in patients with high model for end-stage liver disease (MELD) score. This study investigated the outcomes of peritransplant management of HRS in a high-volume LT center in Korea for 2 years. Methods: A total of 157 recipients that deceased donor liver transplantation (DDLT) from January 2017 to December 2018 were included. In-hospital mortality (IHM) was analyzed in relation to pre- and posttransplant application of renal replacement therapy (RRT). Results: Primary diagnoses for DDLT were alcoholic liver disease (n = 61), HBV-associated liver cirrhosis (n = 48), retransplantation for chronic graft failure (n = 24), and others (n = 24). Mean MELD score was 34.6 ± 6.2 with 72 patients at Korean Network for Organ Sharing MELD status 2 (45.9%), 43 at status 3 (27.4%), 36 at status 4 (22.9%), and 6 at status 5 (3.8%). Pretransplant RRT was performed in 16 patients (10.2%) that did not show IHM. Posttransplant RRT was performed in 69 patients (44.0%), for whom IHM incidence was 15.9%. In 53 patients that had undergone de novo posttransplant RRT, IHM incidence increased to 20.8%. IHM in the 88 patients not requiring RRT was 2.3%. Conclusion: The majority of adult DDLT recipients in Korean MELD score-based allocation system have very high MELD scores, which is often associated with HRS. Pretransplant RRT appears to improve posttransplant survival outcomes. We thereby recommend that, if indicated, pretransplant RRT be performed while awaiting DDLT.

      • KCI등재
      • 비만 여성을 대상으로 한 해조류 추출물의 국부처치와 운동 병행을 통한 지방분해 효과의 임상적 검정

        서태수,이인숙,변재철,김규호,박승한,김유영,김상국,김현정,김상기,신동철,성미영,박종석,김종기,박언휘 한국스포츠리서치 2003 한국 스포츠 리서치 Vol.14 No.3

        This study was carried out to test the body fat breakdown during topical seaweed extract treatment and in combination with the aerobic exercise. Of 20 female obesity subjects, ten treated a cream types of seaweed extract(control group) and ten treated a placebo cream(placebo group). Topical treatment of each sample was designed for 4 weeks, and treated with 2 times a day about 10ml on the abdomen and the thigh, respectively. All subjects were participated aerobic dance half hour a day and four times a week. After 4 weeks of topical treatment and exercise, they were measured body fat, skinfold thickness, body circumference. Then venous blood samples were taken and analyzed blood cells, serum enzymes, and serum lipids. There were reduction of body weight, % of body fat, antebrachium, brachium, chest, waist, thigh circumference and abdomen thickness between pre and post treatment in both group. Especially, body weight and % of body fat significantly reduced in the subjects treating the seaweed extract than those treating the placebo. There were significant decrement in total cholesterol and LDL whereas increment in HDL and TBIL in the control group, but no significant difference in the placebo group. In conclusion, there were 7.6% of body fat reduction during 4 weeks of aerobic exercise and 21% of body fat reducement in combination of topical seaweed treatment and exercise, respectively. These results suggest that the topical treatment of seaweed extract should be very effective for fat breakdown. Especially, the body fat breakdown maximized in the combination with the topical seaweed extracts treatment and the aerobic exercise.

      • SCOPUSKCI등재

        백서 뇌하수체 성장호르몬 종양세포의 Chicken Lysozyme 유전자 갑상선호르몬 반응요소에서 갑상선호르몬 수용체 역동학에 미치는 T₃효과 분석

        이성진,박철영,정인경,홍은경,최철수,김현규,김두만,유재명,임성희,최문기,유형준,박성우,Larsen, P. Reed 대한내분비학회 2003 Endocrinology and metabolism Vol.18 No.4

        연구배경: 유전자 전사과정은 증강부위 (enhancer) 또는 억제부위(silencer)의 복합작용을 통하여 조절되며 chicken Iysozyme 유전자의 억제부위는 두 개의독립적인 전사인자 결합부위 (Fl과 F2)를 가지는데 Fl부위는 75~93 kD 크기의 NePl 단백질이 결합하는 위치인 반면 역위회문구조(inverted palindrome, InvPal)의 F2 부위는 갑상선호르몬 수용체가 결합하는 갑상선호르몬 반응요소인 동시에 갑상선호르몬 수용체에 대해 높은 친화력을 가지고 있다. 실험적으로 Fl부위 또는 F2 부위 (이하 F2-TRE 부위)를 각각 다량체화(multimerization) 하였을 때 전사억제효과가 증가하였다는 연구 결과는 Fl 부위와 F2-TRE 부위가 서로 독립적으로 기능하는 구조임을 시사하고 있으며chicken Iysozyme 유전자의 억제부위가 완전한 전사억제효과를 가지기 위해서는 Fl 부위와 F2-TRE 부위가 모두 필요함이 보고 되어 있다. 현재 갑상선호르몬에 의한 chicken Iysozyme 유전자 조절기전을 규명하기 위해 많은 연구가 이루어지고 있으나 73 자극 전 ·후 갑상선호르몬 수용체의 역동학에 대해서는 아직까지 거의 보고된 바 없으며 이와 관련하여 저자들은 치근 사람의 간암세포주인 HepG2 세포에서 T₃ 자극전 ·후 갑상선호르몬 반응요소인 IRE2 부위에 대한 갑상선호르몬 수용체의 결합이 교대로 이루어지고 있음을 염색체 면역침전법 (chromatin immunoprecipitation, ChIP) 및 정량적 중합효소연쇄반응을 이용하여 확인한 바 있다. 이에 저자들은 본 연구에서 F2-lRE 부위를 포함하는 백서 뇌하수체 종양세포주인 GC8 세포를대상으로 염색체 면역침전법과 중합효소연쇄반응을 이용하여 갑상선호르몬 자극 전 후 시간적 순서에 따라 F2-TRE 부위에 결합하는 갑상선호르몬 수용체의 결합양상 변화를 분석함으로써 갑상선호르몬 수용체의 역동학적 모델을 제시하여 보고자 하였다. 방법: thymidine kinase(TK) promoter의 5' 부위에 chicken Iysozyme silencer의 고친화력 갑상선호르몬 반응요소(F2-TRE 부위)가 삽입된 플라스미드,mouse TRα gene이 삽입된 플라스미드, neomycinresistance gene이 삽입된 플라스미드를 백서 뇌하수체성장호르몬 종양세포인 GC 세포에 각각 주입하여 제작한 GC8 세포주를 사용하였다. 100 αM T₃를 투여하기 전과 투여한 후 12시간 뒤 TRαl, TRβl, TRβ2 항체를 이용하여 염색체 면역침전법과 고식적 중합효소연쇄반응 및 정량적 중합효소연쇄반응을 시행하였다. 각 갑상선호르몬 수용체 항체의 양을 1.5μL에서 4.5μL로 바꾸어 첨가한 후 동일한 방법으로 염색체 면역침전법을 반복하여 시행하였다. 100nM T₃를 투여하기전과 투여한 후 20분, 1시간, 2시간, 4시간, 6시간, 8시간, 12시간 뒤 TRαl, TRβl, TRβ2 항체를 이용하여 염색체 면역침전법을 시행하였다. 100nM T₃를 투여하기 전과 투여한 후 12시간 뒤 TRαl, TRβl, TRβ2 단백질의 발현량을 알아보고자 Western blot을 시행하였다. 결과: 100 nM T₃를 투여하기 전과 투여한 후 12시간 뒤 염색체 면역침전법과 F2-TRE 시발체를 이용한 고식적 중합효소연쇄반응을 시행하였을 때 T₃를 투여한 후 12시간 뒤 TRα1과 TRβ2의 결합은 증가한 반면 TRβl의 결합은 감소하였다. 정량적 중합효소연쇄반응으로 갑상선호르몬 수용체의 결합량을 측정하였을 때TRα1은 T₃ 투여 전 1.01에서 T₃ 투여 후 2.73으로 유의하게 증가하였으며 TBβl은 T₃ 투여 전 4.59에서 T₃투여 후 2.06으로 유의하게 감소하였고 TRβ2는 T₃ 투여 전 2.53에서 T₃ 투여 후 2.98로 증가하는 경향을보였다(TRα1, Δ=+170.3%, p<0.05; TRαl, Δ=-55.1%, p<0.05; TRβ2, Δ=+17.8%). 정량적 중합효소연쇄반응으로 측정한 갑상선호르몬 수용체의 전체 결합량은 T₃ 투여 전 8.13에서 T₃ 투여 후 7.77로 감소하였으나 통계적으로 유의하지 않았다(Δ=-4.4%).100nM T₃ 투여 전 ·후 시간별로 염색체 면역침전법과 정량적 중합효소연쇄반응을 시행하였을 때 TRα1 결합량은 T₃ 투여 후 20분과 6시간 뒤 각각 증가하였으며 TRβ2 결합량은 T₃ 투여 후 20분 뒤 최고치까지 증가하였다가 2시간 뒤부터 감소하였다. 그러나 TRαl 결합량은 T₃ 투여 후 1시간 뒤 최저치까지 감소되었다가 이후 지속적으로 유지되는 경향을 보였다. 100 nM T₃ 투여 전과 투여 후 2시간 뒤 갑상선호르몬 수용체의 결합량을 비교하였을 때 TRα1은 219.8% (1.01→3.23), TRβ2는 9.9% (2.53→2.78) 증가하였으나 TRβ1은 52.9% (4.59-)2.16) 감소하였으며 결합량 변화의 방향은 100 naM T₃ 투여 후 4시간 뒤와 6시간 뒤 갑상선호르몬 수용체 결합량 변화의 방향과 일치하였다(TRα1, 2.89→4.09, Δ =+41.5%; TRβl, 2.33→2.04, Δ=-12.4%; TRβ2, 2.57→2.59, Δ=10.8%). 갑상선호르몬 수용체 항체를 1.5 μL 또는 4.5 μL 투여한 후 F2-TRE부위에 대한 염색체 면역침전법 및 정량적 중합효소연쇄반응을 각각 시행하였을 때 첨가한 갑상선호르몬 수용체 항체의 양에 따른 갑상선호르몬 수용체결합량의 유의한 차이는 없었다. 100 nM T₃를 투여하기 전과 투여한 후 12시간 뒤 Western blot을 시행하였을 때 갑상선호르몬 수용체 발현량의 유의한 차이는 관찰되지 않았다. 결론: 본 연구에서 관찰된 T₃ 자극 전 · 후 chickenIysozyme 유전자의 F2-TBtE 부위에 대한 갑상선호르몬 수용체 이성체의 교대현상 및 시간적 순서에 따른 갑상선호르몬 수용체 결합양상의 변화가 나타내는 의미에 대하여 추시 연구가 필요함은 물론 추가적으로 다른 유전자 또는 다른 종류의 세포주를 대상으로 T₃자극에 따른 갑상선호르몬 수용체 결합양상의 변화와유전자 발현을 검토하여야 할 것이다. 한편 본 연구 결과만으로는 갑상선호르몬 수용체 역동학에 대한 많은 의문점을 풀 수 없음에도 불구하고 아직까지 국내외적으로 갑상선호르몬 수용체의 역동학에 대한 연구 결과가 거의 없는 현실을 고려하여 볼 때 본 연구는 제한적이나마 일정한 농도의 갑상선호르몬 자극 전ㆍ후chicken Iysozyme 유전자의 F2-TRE 부위에서 갑상선호르몬 수용체의 교대현상을 재확인하였다는 점과 갑상선호르몬 자극 전 · 후 시간적 순서에 따른 갑상선호르몬 수용체의 역동학적 모델을 처음으로 제시하였다는 점에서 의의가 있을 것으로 생각된다. Background: The regulation of gene transcription can be controlled by both positive (enhancer) and negative (silencer) regulatory sequences. Several enhancer and silencer elements have been described in the 5' region of the chicken lysozyme gene. The silencer located at -2.4 kb upstream of the chicken lysozyme gene is composed of two separate modules (Fl and F2) that can function as silencers by themselves, but also show synergistic repression after multimerization. The F1 module is bound by a protein termed NePl and F2 module, a F2 thyroid hormone response element (F2-TRE), and can be bound by the thyroid hormone receptor (TR). F2-TRE has an inverted palindromic structure, with high affinity to TR. Although many current reported results have tried to explain the regulatory mechanism of chicken lysozyme gene expression due to the thyroid hormone, there have been few studies that clarify the TR dynamics in the F2-TRE of the chicken lysozyme gene, either with or without exposure of the thyroid hormone. Here, the changes in the TR binding patterns in the F2-TRE of the chicken lysozyme gene are described, both before and after T₃ stimulation over time. Methods: Using the stably transfected rat pituitary somatotroph tumor cell line, GC8 cells, with the F2-TRE inserted 5' to the thymidine kinase (TIC) promoter, together with a mouse TRα - expressing plasmid, a chromatin immunoprecipitation (ChIP) technique was employed to reveal the TR-TRE interaction before and after T₃ stimulation. Following the cross-linking and sonication of the cells, the immunoprecipitation was performed overnight, at 4℃, with TRαl, TRβl and TRβ2 antibodies, respectively. The binding patterns and amounts of TRαl, TRβ1 and TRβ2 to the F2-TRE, before and after 12 hours of 100nM T₃ stimulation, were analyzed using conventional and quantitative real-time polymerase chain reactions (RQ-PCR). The ChIP technique was used to give a basal value for 20 minutes and 1, 2, 4, 6, 8 and 12 hours after the 100nM T₃ stimulation, and RQ-PCR was then performed. Western blot with TRαl, TRβl and TRβ2 antibodies were also performed. Results: After 12 hours of 100 nM T₃ stimulation of the GC8 cells, the TRα1 and TRβ2 binding to the F2-TRE increased, but the TRβ1 binding to the F2-TRE decreased, by conventional PCR. Although all the TR isoforms were bound to the F2-TRE by RQ-PCR, the TRαl binding to the F2-TRE, after 12 hours of l00nM T₃ stimulation, was significantly increased (1.01→2.73, Δ =+170.3%, p<0.05), but the change in the amount of TW2 binding was not significant (2.53→2.98, Δ=+17.8%). The TRβl binding was significantly decreased compared with that of the basal level (4.59→2.06, Δ=-55.1%, p<0.05). The total TR bindings to the F2-TRE had a tendency to decrease after 12 hours of 100 nM T₃ stimulation (8.13→7.77, Δ=-4.4%). The binding patterns and amounts of TRαl, Tβl and Tβ2, both before and after the 100 nM T₃ stimulation, were also identified over time. While the TRβl bindings to the F2-TRE after 1 hour of l00nM T₃ stimulation were acutely reduced, those of the TRαl at 20 minutes and 6 hours were increased. The TRβ2 bindings showed a maximal increase at 20 minutes. The directions of the TR binding patterns, between the before and after 2 hours of 100nM T₃ stimulation, were identical to those for between 4 and 6 hours of T₃ stimulation. There was no significant difference in the TR bindings to the F2-TRE in relation to the amounts (1.5 vs. 4.5μ I) of TR antibodies used during the ChIP assays. The Western blots showed no significant change of the levels of each TR isoform proteins, either before or after 12 hours of exposure to 100nM T₃. Conclusion: These results show the dynamic binding patterns of the TR isoforms to the F2-TRE of the chicken lysozyme gene, both before and after T₃ stimulation, over time. Further investigation, however, will be needed to clarify the mechanisms of our observations. The ChIP technique may then be used to reveal the dynamic models of the cofactors, as well as TR isoforms, in the TR-regulated transcription machinery (J Kor SOC Endocrinol 18:379-391, 2003).

      • SCOPUSKCI등재

        제1형 탈요오드효소 유전자 갑상선호르몬 반응요소에서 T₃자극에 따른 갑상선호르몬 수용체 역동학 모델

        이성진,박철영,정인경,홍은경,최철수,김현규,김두만,유재명,임성희,최문기,유형준,박성우,Larsen, P. Reed 대한내분비학회 2003 Endocrinology and metabolism Vol.18 No.3

        연구배경: 제1형 탈요오드효소의 발현에 관여하는 hdiol 유전자는 5 flanking region 내 서로 다른 특성을 가진 두 종류의 갑상선호르몬 반응요소, 즉 TREI과 TRE2를 가지고 있음이 알려져 있다. 사람의 간암세포주인 HepG2 세포에서 T₃를 투여하였을 때 hdiol유전자의 전사작용이 급격하게 증가하는데 hdiol mRNA가 충분히 발현하기 위해서는 두 종류의 갑상선호르몬 반응요소가 모두 필요함이 보고 되어 있으나 T₃ 투여시 갑상선호르몬 반응요소와 결합하는 갑상선호르몬 수용체의 역동학에 대해서는 아직까지 연구된바 없다. 한편 현재까지 보고 된 연구 결과들은 갑상선호르몬 자극이 없더라도 갑상선호르몬 수용체와 갑상선호르몬 반응요소가 서로 지속적으로 상호작용 한다는 전제 조건을 바탕으로 하고 있는데 아직까지 이러한 가정은 간접적으로만 증명되어 있는 상태이다. 이에 저자들은 본 연구에서 사람의 간암세포주인 HepG2세포를 대상으로 염색체 면역침전법과 중합효소연쇄반응을 이용하여 갑상선호르몬 자극 전·후 hdiol 유전자의 갑상선호르몬 반응요소에 결합하는 갑상선호르몬 수용체의 결합양상 변화를 분석함과 동시에 갑상선호르몬 자극 전에도 갑상선호르몬 수용체와 갑상선호르몬 반응요소가 서로 결합된 상태로 존재함을 직접적으로 확인하고자 하였다. 방법: 사람의 간암세포주인 HepG2 세포를 대상으로 100 nM T₃를 투여하기 전과 투여한 후 12시간 뒤 TRα1, TR 1, TR 2 항체와 IREI, TRE2에 상보적인 시발체를 이용하여 염색체 면역침전법과 고식적 중합효소연쇄반응 및 정량적 중합효소연쇄반응을 시행하였다. 100nM T₃를 투여하기 전과 투여한 후 12시간 뒤 hdiol mRNA 발현량의 변화를 정량적으로 측정하기 위하여 역전사 중합효소연쇄반응을 시행하였다. 100 nM T₃를 투여하기 전과 투여한 후 12시간 뒤 TR4'1, TR 1, TR 2 단백질의 발현량을 알아보고자Western blot을 시행하였다. 결과: 100 nM T₃를 투여하기 전과 투여한 후 12시간 뒤 염색체 면역침전법과 TREI 시발체를 이용한 고식적 중합효소연쇄반응을 시행하였을 때 T₃ 투여 전후 TREI 부위에는 TRgl이 결합하였으며 T₃를 투여한 후 TRal 결합이 감소하였다. 정량적 중합효소연쇄반응으로 TR4'1 결합량을 측정하였을 때 T₃ 투여 전3.74에서 T₃ 투여 후 1.97로 감소하여 통계적으로 유의한 차이를 나타내었다(Δ=-47.3%, p<0.05). T₃ 투여 전 ·후 TRβl과 TRβ2의 결합은 관찰되지 않았다. 100 nM T₃를 투여하기 전과 투여한 후 12시간 뒤 염색체 면역침전법과 TRE2 시발체를 이용한 고식적 중합효소연쇄반응을 시god하였을 때 T₃ 투여 전ㆍ후 TRE2 부위에는 TRα1, TR 1, TR 2가 모두 결합하였으며 T₃를 투여한 후 TRα1과 TR 1의 결합은 감소하였으나 TR 2의 결합은 증가하였다. 정량적 중합효소연쇄반응으로 갑상선호르몬 수용체의 결합량을 측정하였을 때 TRαl은 T₃ 투여 전 10.41에서 T₃ 투여 후 3.01, TRβl은 T₃ 투여 전 12.56에서 T₃ 투여 후 2.93으로 유의하게 감소하였으며 TRβ2는 T₃ 투여 전 9.17에서 T₃ 투여 후 9.84로 증가하는 경향을 보였다(TRα1, Δ=-71.1%, p<0.05; TR 1, Δ=-76.7%, p<0.05; TR2, Δ=+7.3%). 정량적 중합효소연쇄반응으로 측정한 갑상선호르몬 수용체의 전체 결합량은 T₃ 투여 전 32.14에서 T₃ 투여 후 15.78로 감소하여 통계적으로 유의한 차이를 나타내었다(Δ=-50.9%, p.0.05). 갑상선호르몬 수용체 항체를 1.5μL와 4.5μL 첨가한 후TREI과 TRE2에 대하여 염색체 면역침전법 및 정량적 중합효소연쇄반응을 각각 시깡하였을 때 첨가한 갑상선호르몬 수용체 항체의 양에 따른 갑상선호르몬 수용체 결합량의 차이는 없었다. 100 nM T₃를 투여하기전과 투여란 후 12시간 뒤 역전사 중합효소연쇄반응 및 hdiol cDNA 시발체를 이용한 정량적 중합효소연쇄반응을 시행하였을 때 T₃를 투여한 후 hdiol mRNA발현량은 2.03배 증가하였다(p<0.001). 100 nM T₃를 투여하기 전과 투여한 후 12시간 뒤 Western blot을 시행하였을 때 갑상선호르몬 수용체 발현량은 유의한 차이가 없었다. 결론: 현재까지 갑상선호르몬 수용체의 역동학에 대한 연구가거의 이루어지지 않았던 실정을고려하여볼 때 본 연구는 제한적이나마 일정한 농도의 갑상선호르몬 자극 전 · 후 갑상선호르몬 수용체 결합양상의 변화, 특히 T₃ 자극 전 hdiol 유전자의 TREI 부위에서 TRal이 억제자 (silencer)로서 작용할 가능성 및 T₃자극 전 · 투 TRE2 부위에서 갑상선호르몬 수용체 교대현상을 처음으로 제시하였다는 점에서 의의가 있으며 향후 다른 종류의 세포주 및 체내에서 갑상선호르몬 자극 전 후 갑상선호르몬 수용체 결합양상의 변화 및 유전자 발현에 미치는 영향을 연구할 필요가 있으리라 생각된다. 한편 염색체 면역침전법을 통해 HepG2 세포에서 T₃ 자극이 없더라도 갑상선호르몬 수용체와 갑상선호르몬 반응요소 사이에 지속적인 상호작용이 존재할 뿐 아니라 갑상선호르몬 반응요소에 대한 갑상선호르몬 수용체의 결합이 교대로 이루어지고 있음을 직접적으로 확인할 수 있었으며 향후 T₃ 자극 전 · 후 갑상선호르몬 수용체를 통한 유전자 전사조절기전에 관여하는 전사인자와 역동학적 기전을 규명함에 있어서 염색체 면역침전법과 정량적 중합효소연쇄반응이 매우 유용하게 이용될 수 있을 것이다. Background: Type 1 iodothyronine deiodinase (Dl), the product of the hdiol gene, is involved in thyroid hormone activation by the deiodination of thyroxine (T4) to form 3,5,3'-triiodothyronine (T3). Recent studies have identified two thyroid hormone response elements (TREs) in the 5 ' flanking region of the hdiol gene. TRE1, proximal to TRE in the hdiol gene, consists of a direct repeat of thyroid hormone receptor (TR) binding octamers with 10 bp separating the two TR binding sites. The upstream TRE, TRE2, is a classical direct repeat of retinoid X receptor (RXR)/TR binding half-sites with a 4-bp separation. There are few studies clarifying the TR dynamics in the TRE of a specific gene with or without the exposure of activated thyroid hormone. We evaluated TR binding patterns in the proximal and distal TREs of the hdiol gene before and after T₃ stimulation. Methods: We employed chromatin immunoprecipitation (ChIP) technique to investigate the TR- TRE interaction before and after T₃ stimulation in human hepatocellular carcinoma HepG2 cell line. Following cross-linking and sonication of the cells, immunoprecipitation was performed overnight at 4℃ with TRαl, TRβ1 and TRβ2 antibodies. We analyzed the binding patterns and amounts of TRαl, TRβl and TRβ2 to TREl and TRE2 before and after 12 hours stimulation with 100 nM T3 by using conventional and quantitative real-time polymerase chain reactions (RQ-PCR). Reverse transcriptional PCR (RT-PCR) and Western blot with TR 1, TR 1 and TR 2 antibodies were performed to measure the levels of hdiol mRNA and TR 1, TR 1 and TR 2 proteins before and after 12 hours exposure to l00nM T3. Results: In TRE1, TRαl binding was significantly decreased after 12 hours stimulation with l00nM T3 (3.74→97, Δ=-47.3%, p<0.05), but TRβ1 and TRβ2 bindings were not detected by conventional PCR and RQ-PCR. Although all TR isoforms were bound to TRE2, the binding patterns were quite different. While TRα1 and TRβ1 bindings to TRE2 after 12 hours stimulation with 100 nM T3 were significantly decreased (10.41→3.01, Δ=-71.1%, p<0.05; 12.56 →2.93, Δ =-76.7%, p<0.05, respectively), TRβ2 binding was increased but not significantly (9.17 →9.84, Δ =+7.3%). Total TR bindings in TRE2 were significantly decreased after 12 hours stimulation with 1OOnM T₃ (32.14 →15.78, Δ=-50.9%, p<0.05). The TR bindings to TREl and TRE2 were not significantly different by the amounts of TR antibodies used during ChIP assays. The levels of hdiol mRNA were significantly increased, 2.03 times, after 12 hours exposure to l00nM T3 (p<O.001). Western blot showed no significant change of the level of each TR isoform protein before and after 12 hours exposure to 100nM T3. Conclusion: Our results demonstrate the dynamics of TRal at proximal TRE (TRE1) and the switching phenomenon of TR isoforms at distal TRE (TRE2) of the hdiol gene after T3 stimulation. Further investigation, however, is needed to clarify the mechanisms of these observations (J Kor SOC Endocrinol 18:283-295, 2003).

      • 한의진단명과 진단요건의 표준화 연구 III : 3차년도 연구결과 보고

        최선미,양기상,최승훈,박경모,박종현,심범상,김성우,노석선,이인선,정진홍,이진용,김달래,임형호,김윤범,박성식,송태원,김종우,이승기,최윤정,신순식 한국한의학연구원 1997 한국한의학연구원논문집 Vol.3 No.1

        The diagnostic requirements were suggested and explained regarding the systems of differentiation of symptoms and signs in the third year study of standardization and unification of the terms and conditions used for diagnosis in oriental medicine. The systems were as follows : - analyzing and differentiating of epidemic febrile disease - analyzing and differentiating in accordance with the Sasang constitution medicine based on four-type recognition - differentiation of disease according to pathological changes of Chong and Ren channels - standards for diagnosis of women's disease - standards for diagnosis of children's disease - standards for diagnosis of motor and sensor disturbance (-muscle. born, joint, etc.) - standards for diagnosis of neuropsychiatric disease - standards for diagnosis of five sense organ disease - standards for diagnosis of external disease The indivisual diagnosis pattern was arranged by the diagnostic requirements in the following order : another name, notion of diagnosis pattern, index of differentiation of symptoms and signs, the main point of diagnosis, analysis of diagnosis pattern, discrimination of diagnosis pattern, prognosis, a way of curing a disease, prescription, herbs in common use, disease appearing the diagnosis pattern, documents. The standards for diagnosis of each disease was arranged by the diagnostic requirements in the following order : another name, notion of disease, the main point of diagnosis, analyzing and differentiating of disease, analysis of disease, discrimination of disease, prognosis, a way of curing and prescription of disease, disease in western medicine appearing the disease in oriental medicine, documents.

      • KCI등재후보

        학술연구 : 소기업 정보시스템의 성공적 도입에 영향을 미치는 요인들에 관한 실증 연구

        이정우 ( Jung Woo Lee ),윤정인 ( Jung In Yoon ),박준기 ( Jun Gi Park ) 한국중소기업학회 2011 기업가정신과 벤처연구 Vol.14 No.2

        정보통산 기술 발달로 다양한 서비스와 솔루션들이 저렴한 가격에 공급되면서 소기업들도 경쟁우위의 한 방법으로 IT솔루션 도입을 적극적으로 검토하고 있다. 이에 본 연구에서는 중소기업 중에서 60% 이상을 차지하고 있는 소기업의 효율적인 정보 시스템 도입과 성공적인 활용을 위한 주요 영향요인을 실증하였다. 태생적으로 내부 적인 자원 한계를 가진 소기업들이 정보시스템을 도입하는 데 있어서는 시간적, 재무적, 전문성의 제약이 영향요인으로 작용한다. 아울러 내적 자원의 부족을 극복하기 위해 외부 자원의 활용을 통해 제약 상황을 극복할 수 있다. 본 연구에서는 중소기업을 대상으로 한 정보시스템 사용에 관한 대표적인 연구인 Thong(2001)의 연구모형을 기반으로 한국의 소기업들을 대상으로 정보시스템 도입 및 성공을 위한 요소들을 실증하였다. 자원제약 이론을 기반으로 한Thong(2001)의 연구 모형은 한국의 소기업 정보시스템 도입 및 활용에도 유용한 모형으로 밝혀졌다. 다만 기업규모와 업종 차이로 인해 요인들의 개별 영향도는 상이하게 나타났다. 주요 요인 들로 기업 내부의 기술 전문성 제약을 극복하기 위해서 "외부 전문지식의 활용"과 시간적 제약을 극복하기 위한 "정보시스템의 도입과 활용에 관한 계획"이 유의한 것으로 파악되었다. 그러나 시간적 제약요인인 "대표자의 적극적인 참여와 지원"과 "사용자참여" 그리고 재무적 제약인 "투자수준"과 사용자의 "IS 지식수준"은 관계가 없는 것으로 나타났다. Small businesses are under increasing pressure to use information systems(IS) to maintain their competitive positions or simply to survive. But small businesses suf-fer from relative scarcity of resources compared to large corporations. Due to in-herent differences between small and large businesses, research findings from large businesses cannot be generalized towards small businesses. This paper adopts Thong (2001)`s resource-based model of IS implementation for small businesses. Thong has conceptualized three types of resource constraints: time constraints, financial constraints, and expertise constraints in setting up IS implementation success model in small businesses. This model was replicated and tested on a sample of 118 small size retail and service firms in Korea. Research results revealed that Thong`s model is also applicable to small businesses in Korea. However, the relative im-portance of each factor for IS implementation success in Korea came out differently, Key factors of IS implementation success in Korean small businesses are external technological expertise, and IS planning. while adequate CEO support, user in-volvement, IS investment and users` IS knowledge are found to be not so significant.

      • 국내육성 오차드그라스 품종들의 캘러스 형성율 및 식물체 재분화 효율

        김기용,강경민,배은경,이인애,임용우,최기준,박근제,손대영,조진기 Plant molecular biology and biotechnology research 2003 Plant molecular biology and biotechnology research Vol.2003 No.-

        Comparisons of callus formation ratios from seed explants, callus sizes, regeneration ratios from callus and regeneration efficiency for 4 orchardgrass (Dactylis glomerata L.) varieties (Three were developed in Korea and one was imported from foreign nation) are as follows; Jangbeol 102 (67.0%) has the highest callus formation ratio in 4 weeks incubated callus after bedding the seed explants, but Potomac (68.4%) has the highest ratio in 6-seek callus. Potomac (3.93cm) has the highest callus size in 4-week callus, but Jangbeol 101 (4.32cm) has the highest size in 6-week callus. Jangbeol 101 (17.7%) has the highest plant regeneration ratio in 4-week callus, but Potomac (37.4%) has the highest raion in 6-week callus. Jangbeol 102 (11.5%) has the highest plant regeneration efficiency in 4-week callus, but Potomac (25.6%) has the highest efficiency in 6-week callus.

      • 다공성 매체에서의 다성분확산에 대한 주파수응답

        박인수,곽철,황영기 경남대학교 공업기술연구소 2000 硏究論文集 Vol.18 No.-

        다성분 확산 속도론 파라미터를 측정하기 위하여, 유입 몰유량의 주기적인 변조에 의한 연속흐름 용기의 주파수응답을 해석하였다. 이성분계에 대한 수치모사에 의하면, 빠르게 확산하는 성분의 주파수응답은 느리게 확산하는 성분에 의하여 크게 영향을 받았다. 빠르게 확산하는 성분의 주파수응답의 out-of phase 특성함수는 최대값과 최소값을 나타내었고, 느리게 확산하는 성분에 대한 out-of phase 특성함수는 극점을 나타내지 않았다. 성분들 사이의 상호 간섭 때문에, 빠르게 확산하는 성분의 주파수 응답의 out-of phase 특성함수는 각각 보다 큰 값의 주파수에서 최대값과 최소값을 나타내었다. The frequency response of a continuous-flow reservoir with the perdiodic modulation of the inlet flow-rate to measure multicomponent diffusion kinetics in porous media is analyzed in this paper. Simulation results for binary system show that the frequency response of the faster diffusing component is strongly influenced by the slower diffusing component. The out-of- phase characteristic function of the frequency response of the faster diffusing component shows maximum and minimum points, while the out-of- phase function for the slower component shows no extrema at all. Due to an interaction between components, the out-of- phase characteristic function of faster component can give maximum and minimum points at much higher frequencies.

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