김치에서 분리한 Lactobacillus sp. JC-7과 Lactobacillus acidophilus 88간의 Electrofusion 최적조건 설정

조영배,최현정,백형석,전홍기 부산대학교 유전공학연구소 1997 분자생물학 연구보 Vol.13 No.-

김치 발효 숙성기간을 연장하고 신선도를 오랫동안 유지 할 수 있는 김치발효 starter의 개발을 목적으로 최적숙성기에 있는 김치로부터 bacteriocin생성능이 없는 유산균을 분리하여 동정하였으며, bacteriocin생성능이 우수한 L.acidophilus 88을 융합시키기 위해 electrofusion에 대한 최적 조건을 검토하였다. 분리균주는 Lactobacillus속으로 동정되어 Lactobacillus sp. JC-7이라 명명하였다. Electrofusion에 의해 생성된 융합주를 식별하기 위해 streptomycin(2.5㎎/ml)에 내성을 나타내는 Lactobacillus sp. JC-7변이주와 kanamycin(600㎍/ml)에 내성을 나타내는 L.acidophilus 88변이주를 분리하였다. Electrofusion을 100V/㎝, 120msec(72ohms,1670 capacitance) 에서 수행했을 때 융합효율이 가장 양호하였으며 전기장의 세기와 시간이 중가할수록 융합 효율이 현저히 감소하였다. 2가 양이온은 농도가 중가할수록 대체적으로 융합효율을 감소시키는 경향을 나타내었으나 1mM MGCl_2에서는 대조군에 비해 융합효율이 약간 증가하였다. PEG매개에 의한 융합법의 융합효율을 비교한 결과, 융합효율은 chemical fusion<electrofusion<electrofusion+20% PEG순을 나타내었다. Evaluation of Optimum Conditions for the Electrofusion between Lactobacillus sp. JC-7 Isolated from Kimchi and Lactobacillus acidophilus 88. Young-Bae Jo, Hyun-Jung Choi, Hyung-Suk Baik and Hong-Ki Jun*. Department of Microbiology, Pusan National University, Pusan 609-735,Korea-A lactic acid bacterium was isolated from kimchi. The isolated strain was identified as the genus Lactobacillus thrugh its morphological characteristics and named as Lactobacillus sp. JC-7. The optimum conditions for the electrofusion between streptomycin(2.5㎎/ml)resistant mutant of Lactobacillus acidophilus 88 and kanamycin(600㎍/ml) resistant mutant Lactobacillus sp. JC-7 were evaluated. The highest number of fusants were obtained at a capacitance value of 120msec(1670㎌), a field strength of 100V/㎝,and a pulse controller setting of 72Ω. The potimum pH of elecroporation buffer was 7.5 and the concentration of divalent cation was 1mM MG^2+. Electrofusants were efficiently obtained by addition 20% polyethylene glycol to electroporation buffer. The yield of fusion was better than that of using polyethylene glycol mediated chemical induction.

저장용액의 온도에 따른 치주인대세포의 생존율

조재현,김성오,최형준,이제호,손흥규,최병재 대한소아치과학회 2007 大韓小兒齒科學會誌 Vol.34 No.1

외상성 손상 후 치아 탈구 시 치아를 저장하는 저장용액의 종류와 온도가 치주인대세포의 생존율에 어떠한 영향을 미치는지 연구하기 위하여 치주인대세포를 10% fetus bovine serum(FBD) 함유 α-minimal essential medium(α-MEM)에서 37℃ 5% CO_(2) 공기 혼합 배양기에서 배양하고 4.25, 37℃의 Hank's balanced sa1t solution(HBSS)과 α-MEM, 우유(S회사, P회사), tap water에 저장하고 60분이 지난 후 각 군에 대해 치주인대세포의 생존율을 측정하기 위하여 MTT assay를 시행하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 4℃ 저장용액의 치주인대세포의 생존율은 α-MEM과 P회사우유에서 가장 높았고 HBSS, S회사우유, tap water 순으로 낮았다. 2. 25℃ 저장용액의 치주인대세포의 생존율은 α-MEM에서 가장 높았고 P회사우유, HBSS, S회사우유, tap water 순으로 낮았다. 3. 37℃ 저장용액의 치주인대세포의 생존율은 α-MEM과 P회사우유, HDSS, S회사우유에서 높았고 tap water에서 가장 낮았다. 4. α-MEM의 치주인대세포의 생존율은 4℃에서 가장 높았고 25℃와 37℃ 순으로 낮았으며 HBSS에서는 4℃에서 높았고 25℃와 37℃에서 낮았다. 5. S회사와 P회사우유에서 치주인대세포의 생존율은 4℃와 25℃에서 높았고 37℃에서 낮았다. 이상의 결과를 종합해볼 때 외상으로 인해 치아가 탈구되었을 때 탈구된 치아의 저장용액으로 HBSS 용액이 추천되고 있으나 이 연구에서 4℃와 25℃ 우유에서 치주인대세포의 생존율이 높았으므로 사고 현장에서 쉽게 구할 수 있고 치주인대세포의 생활력 보존에도 유리한 낮은 온도의 우유에 탈구된 치아를 보존하는 방법도 좋을 것으로 생각된다. To compare the survival rate of periodontal ligament cells preserved in storage media with good availability at the time of an avulsion injury, periodontal ligament cells were incubated in α-MEM culture medium containing 10% FBS in condition of 37℃, 5% CO_(2). These cells were then cultured in HBSS, α-MEM, milk(S. co., P. co.) and tap water at the temperature of 4, 25, 37℃ each in 60 min. The groups were measured by MTT assay. The results were as follows : 1. Among the storage media at 4℃, α-MEM and P-milk had the highest preserving ability of periodontal ligament cells, while that of HBSS, S-milk and tap was low in order. 2. Among the storage media at 25℃, α-MEM had the highest preserving ability of periodontal ligament cells, while that of P-milk, HBSS, S-milk, tap water was low in order. 3. Among the storage media at 37℃, the preserving ability of periodontal ligament cells was very high in α-MEM, P-milk, HBSS and S-milk. it' s lowest in tap water. 4. The preserving ability of periodontal ligament cells in α-MEM was high at 4℃ and it’s low in order of 25℃, 37℃, but in HBSS was high at 4℃ and it's low at 25℃, 37℃. 5. The preserving ability of periodontal ligament cells in S-milk and P-milk was high at 4℃, 25℃ and it’s low at 37℃. In conclusion, HBSS is the storage medium of choice in an avulsion, but in this study it is preferable to choose milk at 4℃ for tooth since it is easy to get and affect cell viability.

Lactobacillus acidophilus 88과 Lactobacillus bulgaricus IFO 13953간의 세포융합주의 특성에 관한 연구

조영배,김혜정,김성구,백형석,전홍기 부산대학교 유전공학연구소 1996 분자생물학 연구보 Vol.12 No.-

유산균의 균주개량방법의 일환으로 protoplast fusion 기법과 electrofusion법을 이용하여 protease 활성, lipase 활성, 내열성, 내산성 등이 우수한 L. bulgaricus 와 bacteriocin을 생산하는 L. acidophilus를 융합시켜 얻은 융합주들의 생리학적 성질을 검토하였다. 산 생성능, 내열성, 내산성, protease, lipase 활성 등은 L. bulgaricus가 L. acidophilus 보다 우수하였다. L. bulgaricus는 lactose와 sorbose를 이용하였으나 maltose와 sorbitol을 이용하지 못하는 반면, L. acidophilus는 maltose를 이용하고 lactose와 sorbose를 이용하지 못하였다. 융합주 가운데서는 3, 6, 7, 8, 10번이 모균주의 발효능 특성을 함께 지님으로서 재조합체임을 확인 할 수 있었으며, sorbitol의 경우 모균주에서는 발효능이 전혀 나타나지 않았음에도 불구하고 융합주 4, 7번이 발효능을 나타내어 융합과정에서 새로운 형질을 획득하기도 한다는 사실을 알 수 있었다. Lactase 활성은 모균주 모두 높은 β-galactosidase 활성을 보였으나, phospho-β-galactosidase 활성은 거의 없었으며 융합주들도 다소 차이는 있었지만 모균주와 유사한 효소 활성을 나타내었다. 발효에 있어서 key enzyme으로 작용하는 protease, lipase 등의 효소 활성도 모균주의 활성 보다 우수한 융합주도 존재하였다. Aninterspecific fusant was made from the protoplasts of two strains of lactobacillus genus (streptomycin and lincomycin resistant L. bulgaricus and kanamycin resistant L. acidophilus 88). The functional properties of the fusant were examined by determining bacteriocin productivity, acid producing activity, ability of carbohydrates fermentation and three important enzyme activities. The recombinant strain revealed bacteriocin productivity. Acid production and β galactosidase, phospho-β-galactosidase, lipase and protease activity of L. bulgaricus were better than those of L. acidophilus 88. Among fusants, β-galactosidase activity of two strains were better than that of the parent strains but phospho-β-galactosidase activity remarkably lower. One fusant revealed the improved proteolysis compared to that of the parent strains- Lipase activity of L. bulgaricus was better than that of L. acidophilus but another fusant exhibited the highest lipase activity.

HBx형질전환 생쥐에서 발생한 간세포암종에서 H-ras 및 c-myc의 발현에 관한 연구

문형배,소병준,김학철,윤기중,한원철,조향정,유대열,정영진 圓光大學校 醫科學硏究所 2002 圓光醫科學 Vol.17 No.2

<연구목적> HBx형질전환 생쥐에서 발생한 간세포암종의 발암과정에 종양유전자(H-rgs, c-myc)의 발현 정도를 조사하고자 하였다. <연구방법> 정상생쥐 12마리(4-18개월) 및 HBx 형질전환 생쥐 44마리(4-18개월)를 대상으로 포르말린에 고정하고 파라핀에 포매한 간 조직을 이용하여 면역조직화학적염색을 실시하였다. 실험군은 정상 부위, 이형성 부위 및 종양 부위로 구분하였으며, 종양 부위는 소결절성병변 부위와 간세 포암종 부위로 구분하였고, 이형성병변 부위는 이형성병변만 발견되는 부위, 소결절성병변과 동반된 이형성병변 부위 및 간세포암종과 동반된 이형성병변 부위로 구분하였다. <연구결과> H-rgs의 발현은 정상 간조직에 비하여 이형성병변 부위(P<0.05) 및 종양 부위(P<0.01)에서 증가하였으며, 소결절성병변 부위과 간세포암종 부위 사이에서는 간세포암종 부위에서 증가된 경향이었으나 통계학적으로 유의한 차이가 없었으며, 각 이형성병변 부위 사이에서도 유의한 차이는 없었다. c-myc의 발현은 정상 간조직 및 이형성병변 부위에 비해 종양 부위에서 증가하였으며(P<0.001), 소결절성병변 부위와 간세포암종 부위에서는 비슷하였고, 각 이형성병변부위 사이에서도 비슷하였다. <결론> HBx형질전환 생쥐에서 발생하는 간세포암종의 발생에 H-rgs는 이형성 변화를 일으키는 시기에 관여하며, c-myc은 이형성병변에서 암으로 이행하는 시기에 관여할 것으로 생각한다. Background: This experiment was designed for the expression of H-ras and c-myc in hepatocarcinogenesis of the HBx transgenic mice. Methods: Immunohistochemical stains in the paraffin embedded tissue of the liver were used for the detection of H-ras and c-myc in the 12 normal mice and 44 HBx transgenic mice of the 4-18 month old. Results: Expression of the H-ras was significantly increased in the dysplastic area (P<0.05) and tumor area (P<0.01) than in the normal liver. But there were no differences of H-ras expression between areas of microscopically identified hepatocellular carcinoma (MI-HCC) and grossly identified hepatocellular carcinoma (GI-HCC) and dysplastic areas among the only dysplastic areas, dysplastic areas with MI-HCC and GI-HCC. Expression of the c-myc was significantly increased in the tumor area (P<0.001) than in the normal liver and dysplastic area. But there were no differences of c-myc expression between areas of MI-HCC and GI-HCC, and dysplastic areas among only dysplastic areas, dysplastic areas with MI-HCC and GI-HCC. Conclusions: Our study suggests that H-ras is related to the dysplastic change and c-myc is related to the neoplastic change in the hepatocarcinogenesis of the HBx transgenic mice.

제주연안 갯녹음(백화) 지역의 해수에 분포하는 세균군의 분자생물학적 분석

강봉조,김미란,윤병준,이동헌,오덕철,강형일 濟州大學校 基礎科學硏究所 2002 基礎科學硏究 Vol.15 No.2

본 연구에서는 갯녹음(백화)현상이 세균생태계와 어떤 관련이 있는지에 대한 기초자료 및 정보를 얻기 위하여 갯녹음 현상이 일어난 제주도 성산과 강정지역 연안의 해수에 존재하는 세균군을 16S rRNA 증폭기법을 이용하여 조사하였다. 강정지역에서는 Alcanivorax, Paracoccus, Damselae, Pseudomonas, Rhodovulum, Silicibacter, Sulfitobacter, Roseobacter 등 다양한 종류의 세균이 분포되어 있었으며, Alcanivorax가 20%의 빈도로 가장 많이 나타났다. 반면, 성산 지역에서는 Pseudomonas속 균주가 우점종으로서 존재하였으며, Pseudomonas tolaasii(혹은 Pseudomonas corrugata)와 유연관계가 가까운 세균은 44%, Pseudomonas mandeli와 가까운 세균이 24%, Verrucomicrobiales와 가까운 세균은 4%, 기타 동정되지 않은 세균은 세 group으로 구분되었으며, 각각 8%, 8%, 12%를 차지하여, 두 곳에 분포되어 있는 세균군상이 상당한 차이점이 있음을 확인하였다. 갯녹음 지역인 강정과 성산 해수의 8월(표품 채집시기)의 수온은 27℃-27.5℃, 염분의 농도는 30.24-30.60%, pH는 8.23-8.36, 용존산소량(DO)은 각각 7.20-7.28로, 두 지역에서 매우 비슷한 것으로 조사된 바 있는데, 이는 수온이나 염분의 농도, 또는 pH보다는 다른 원인에 의하여 두 갯녹음 지역에 분포하는 세균군의 차이를 가져왔음을 제시해 주었다. In this study, the bacterial communities distributed in sea water of the whitening areas of Gangjeong and Seongsan, Jeju-do have been analyzed using the PCR amplification of 16S rRNA to obtain fundamental data and information on relationship of the whitening phenomenon and microbial ecosystem. In Gangjeong, diverse bacteria such as Alcanivorax, Paracoccus, Damselae, Pseudomonas, Rhodovulum, Silicibacier, Sulfitobacter, and Roseobacier have been found, and Alcanivorax was the most abundant clone. The most abundant clone from Seongsan was Pseudoinonas, of which Pseudomonastolaasii and Pseudonionas mandeli were most abundantly occurred in the frequency of approx 44% and 24%, respectively. Approx 4% of the bacterial clones closest to firruconiicrobiales and other unidentified clones were also found in Seongsan, suggesting there is a great discrepancy between bacterial communities from the whitening areas of Seongsan and Gangjeong. The mean tem- perature, chlorine concentration, pH, and dissolved oxygen (DO) of the sea water of Gangjeong and Seongsan in August of 2001 (sampling period) was 27℃-27.5℃, 30.24-30.60%, pH 8.23-8.36,7.20-7.28 ㎎/ℓ, suggesting other environmental factors except for the factors mentioned above might result in difference of bacterial communities distributed in both areas.

소나무로부터 배출되는 모노테르펜 구성비의 수령별 특성 연구

김조천,홍지형,주명칠,전진,김기준 동신대학교 환경연구소 2002 환경연구 Vol.7 No.1

소나무로부터 직접 배출되는 주요한 모노테르펜 물질로 α-pinene, camphene, myrcene, β -pinene, α-phellandrene, α-terpinene, d-limonene, p-cymene, β-phellandrene 등이 확인되었다. 7년생 소나무에서 직접 배출되는 모노테르펜 물질의 구성비를 분석한 결과 β-pinene이 67.0%로 가장 높았고, 22년생 소나무 경우에 β-phellanone이 37.4%로 가장 높았으며, 32년생 소나무는 α-pinene 구성비가 약 42.9%로 가장 높았다. 소나무는 수령에 따라서 구성비에 큰 차이를 보였으며, 소나무 수령이 높을수록 α-pinene이 구성비가 높았다. 소나무의 수령별 α-pinene과 β-pinene의 비율(α-pinene/β-pinene)을 비교한 결과, 7년생 소나무의 경우 0.16~l.15 범위로 나타났고, 22년생 소나무의 경우 0.64~2.47로 나타났으며, 32년생 소나무의 경우 0.50~18.47 범위로 나타났다. α-pinene과 β-pinene의 비는 수령이 높아질수록 좀 더 높은 값을 보였고, 동일한 수령일지라도 나무에 따라서 차이를 보였다. The major monoterpenes emitted from the Pinus densiflora were α-pinene, camphene, myrcene, β-pinene, α-phellandrene, α-terpinene, d-limonene, p-cymene and β-phellandrene. As a result of comparison of monoterpene composition by tree age for P. densiflora, it was found that β-pinene was a dominant monoterpene for 7-year-old pine(67%). β-Phellandrene(37.4%) and α-pinene(46.1%) were most abound for 22-year-old pine and 32-year-old pine respectively. The ratio of monoterpene composition varied considerably with tree age for the pine, and the percentage of α-pinene composition increased with tree age. The ratio of α-pinene and β-pinene(α-pinene/β-pinene) increased with tree age, and varied tree to tree.

침엽수로부터 발생되는 방향성 테르펜의 배출속도 비교 연구

김조천,홍지형,강창희,선우영,김기준,임준호 한국대기환경학회 2004 한국대기환경학회지 Vol.20 No.2

In order to investigate the composition ratio and the emission rate of monoterpenes emitted from coniferous trees during summer, the enclosure chamber experiments were carried out for two tree species (Pinus densiflora and Pinus rigida). The major monoterpenes from the pine trees were α-pinene, β-pinene, myrcene and β-phellan-drene. There was no difference of the composition ratio between two sites for P. densiflora, but the difference was observed for P.rigida, Clearly, the ratio of β-pinene (26.1%) for P.rigida was higher than that of β-phellandrene (12%) at the Gumsung mountain site, but the ratio of β-phellandrene (22.2%) was higher than that of β-pinene (9.9%) at the Chiri mountain site. Particularly, the composition ratio of β-phellandrene was higher than that of β-pinene for P.densiflora, and the opposite trend was found for P.rigida at the Gumsung mountain site. The characteristics of the composition ratio between two species were similar at the Chiri mountain site. As a result of the emission rate measurements, it was observed that both sites did not show any significant β value (slope between emission rate and temperature) and ERs (Standard Emission rate at 30℃) difference. However, the β value and ERs at the Chiri mountain site were slightly greater than those of Gumsung mountain site for both pine species. P.densiflora(1.703 and 1.971㎍C/gdw/hr) showed the higher monoterpene ERs than those of P.rigida (0.572 and 0.698 ㎍C/gdw/hr) at both sites.

유산균(L.lactis CBT-8)및 발효 추출물의 Helicobacter pylori 억제 능력

진춘조,박형석,이혜운,김성렬,강동구,이준상,이재동,왕준호 건국대학교 의과학연구소 2002 건국의과학학술지 Vol.12 No.-

Helicobacter pylori infection was the cause of chronic gastritis, duodenal ulcer and gastric MALT lymphoma. The eradication rates of H. pylori using antibiotics are around 80%. Lactobacilli have been demonstrated to have in vivo and in vitro inhibitory effects on H. pylori infection. We aimed to evaluate the inhibitory effect of L. lactis CBT-8 and its extract on H. pylori in human stomach. Thirty-five H. pylori-infected volunteers(30-49 yr)were randomized into two groups which were treated with L. lactis CBT-8 and its extract(Group A n=17) or milk containing L. lactis CBT-8(Group B, n=18). They underwent 13C-urea breath tests before and after treatment. The DOB30 of group A(n=14) was decreased 41.0% after treatment(26.0±4.9 before, 15.3±2.1 after treatment)(p<0.05). the DOB30 of group B(n=13) was decreased 22.3% after treatment(22.0±2.2 before, 17.1±1.7 after treatment)(p<0.05). In conclusion, L. lactis CBT-8 was effective in suppressing H. pylori infection in human stomach.

GPR41 효능제의 3T3-L1 지방세포 지질축적 억제효과

이미지, 이도형, 조준환, 한주희, 명창선 충남대학교 약학대학 의약품개발연구소 2021 藥學論文集 Vol.36 No.-

G protein-coupled receptor 41 (GPR41) is activated by short chain fatty acids (SCFAs) such as acetate (C2), propionate (C3), butyrate (C4). It is known to stimulate the secretion of glucagon-like peptide-1(GLP-1) in the intestinal enteroendocrine L-cell and leptin in adipocytes. The aim of this study was to investigate the inhibitory effect of GPR41 agonists including AR420626, 1-methyl cyclo- propane-1-carboxylic acid (1-MCPC) and propionate on lipid accumulation in 3T3-L1 adipocytes. GPR41 agonists did not show cytotoxic effect at all concentration tested. Each GPR41 agonist reduced lipid ac- cumulation in 3T3-L1 adipocytes. They decreased the expression of peroxisome proliferator-activated re- ceptor-g (PPAR-g) that contributes to the regulation of lipid accumulation. Among three agonists, AR420626 showed the greater effect on the regulation of lipid accumulation than 1-MCPC and propionate. Therefore, this observation indicates the beneficial effect of GPR41 activation for the man- agement of obesity.

이면성 및 도플러 심초음파도를 이용하여 진단한 선천성 거대 좌회선지-좌심실 관동맥루

진승원,박준철,이영중,유병현,박현옥,김용주,윤호중,김재형,홍순조,최규보,권종범,원용순,박건 대한순환기학회 2000 Korean Circulation Journal Vol.30 No.4