Bacteria에 있어서 Adenine deaminase와 Adenosine deaminase의 分布 : Bacteria에 있어서 Adenine deaminase와 Adenosine deaminase의 분포

전홍기 부산대학교 1980 論文集: 自然科學篇 Vol.30 No.-

합성 배지에서 Aspergillus parasiticus의 Aflatoxin 생성에 미치는 인삼 saponin과 그 관련물질의 영향

전홍기,조영배,박건영 한국미생물학회 1986 미생물학회지 Vol.24 No.4

합성배치인 Glucose-Salts 배지에서 인삼 saponin과 그 관련 물질이 A~$\psi$ergillusρarasiticus의 Aflatoxin 생성에 미치 는 영힘뼈 대해 검토하였다. 배양시간에 따른 균체 증식은 배양 5 일째 이후가 최대였고 Aflatoxin 생성은 배영 9 일째가 최대였다. 인상 saponin O. 05% 첨가시 율처l 증식과 Aflatoxin 생성이 대조군보다 상당량 감소되었고, 5.0% 첨가시 균체 증식은 대 조눈보다 증가하였으나 Aflatoxin 생성은 매우 감소되었다. S Saponin diol 및 triol의 농도별 첨가시 diol 0.01, 1. 0%와 triol O. 5, 1. 0%가 Aflatoxin 생성 저해에 효과적이였다. S Saponin fraction 첨 가시 fraction 1이 Aflatoxin 생성 저해에 가장 효과적 이 었고 fraction 2, 4, 6도 상당한 효과가 있었다. 핵산 관련 물질 첨 가시 Adenine, denosine, Guanosine, Caffeine, Cytosine 및 Xanthosine 첨 가꾼 오우 대조군에 비 해 Aflatoxin 생성 저해에 효과적이었으며, affeine의 경우 균체내에서만 Aflatoxin을 검출할 수 있었다. Saponin 5. 0% 챙까시 Aflatoxin 생성이 매우 저해된 반면 total lipid의 %뇨은 대조군의 10애, 균체 증식은 약 2 배 이상 증가되였다. A study was carried out to determine the effect of ginseng saponin an its related materials on aflatoxin production by Aspergillus parasiticus NRRL2999 in glucose-salts(GS) medium. Maximal growth of the mold and AF froduction in the medium occurred after 5 and 9 days at $28^{\circ}C$, respectively. When various concentrations of saponin added to the medium aflatoxin synthesis were significantly reduced (p<0.05) compared to the control after 9 days at $28^{\circ}C$. 0.05% of saponin inhibited aflatoxin production most effectively in the low concerntrations of saponin (0.01-0.2%) and the toxin synthesis reduced with an increasing concentrations of saponin in the high concentrations (0.03-5.0%). Various concentrations (0.01-1.0%) of saponin diol and triol in the media also caused to reduce aflatoxin synthesis by the mold (p<0.05). All saponin fractions were found to decrease aflatoxin production significantly. Saponin fraction numbers of 1,2,4 and 6 were shown to reduce aflatoxin production effectively, and the number 1 was the most effective. Addition of 0.05% of nucleic acid related materials to the medium reduced aflatoxin production (p<0.05). Aflatoxins could not be found in broth at all, but in mycelia when 0.05% of caffeine was added to the medium. Aflatoxin synthesis was well correlated with total lipid synthesis, growth and glucose uptake. When aflatoxin synthesis inhibited (5.0% of saponin) both total lipid synthesis and growth were stimulated and the efficiency of glucose utilization was reduced.

Pseudomonas synxantha A3에 의한 Xanthine Dehydrogenase의 생산에 관한 연구(II)

전홍기,Jun, Hong-Ki 생화학분자생물학회 1983 한국생화학회지 Vol.16 No.3

The induction and repression of xanthine dehydrogenase (XDH) in the strain of Pseudomonas synxantha A3 were studied in the presence and absence of various carbon and nitrogen sources. Adenine and various purine compounds such as adenosine, inosine, hypoxanthine, and guanine were inducers of this enzyme. The induction of XDH in the presence of adenine was also stimulated by glucose, glycerol, and sorbitol. In contrast, the enzyme formation was inhibited by glyoxylate and ammonia, which were end-products of the degradation of adenine in this strain. The enzyme formation in the presence of adenine, even in the presence of glucose was also stimulated by some amino acids, such as glutamate and aspartate. Alanine and phenylalaine, however, inhibited the enzyme formation in the presence of glucose. In contrast to xanthine dehydrogenase, adenine deaminase in the strain A3 was suggested to be constitutively produced. Therefore, adenine degradation in the strain A3 seems to be controlled by the level of xanthine dehydrogenase involved in degradation of hypoxanthine. 여러 가지 탄소원과 질소원을 사용하여 Pseudomonas synxantha A3가 생산하는 xanthine dehydrogenase(XDH)의 효소 생성에 관한 유도와 억제현상을 검토하였다. XDH는 adenine 외에 hypoxathine, guanine, adenosine, inosine과 같은 purine 화합물에 의해서도 유도가 되는 것으로 나타났다. XDH의 adenine에 의한 유도 현상은 glucose, glycerol, sorbitol, 등의 탄소원에 의해서 유도가 더욱 촉진되었으며, 반면에 pyruvate와 glyoxylate에 의해서는 저해되었다. Adenine에 의한 XDH의 유도 생산은 alanine과 phenylalanine을 첨가하였을 때에는 유도현상이 저해를 받지 않는 것으로 나타났으며 glutamate와 aspartate의 경우는 유도가 촉진되었다. 그러나 glucose가 첨가된 배지에서는 XDH의 유도는 alanine과 phenylalanine에 의해서 오히려 저해되었다. A3균의 purine 염기 대사의 최종 생성물인 glyoxylate와 ammonia가 공존하는 경우에는 XDH의 유도가 더욱더 저해되는 것으로 나타났으며, 역시 본균의 adenine 분해는 유도효소인 XDH 수준에 의해서 조절되고 있는 것으로 생각할 수 있었다.

E. coli DNA 회복에 미치는 플라스미드 pKM101과 pSL4의 mutator 기능

전홍기,이상률,백형석 한국미생물학회 1990 미생물학회지 Vol.28 No.2

Mutator 기능을 가지는 플라스미드 pKM101과 이의 돌연변이체 pSL4를 DNA 수복능력이 다른 Esherichia coli B/r(phr, recA, uvrA, uvrB)균주들에 도입하여 돌연변이원인 UV와 MNNG에 대한 보호효과와 mutagenecity를 조사형ㅅ다. pKM101과 pLS4의 mutator 기능과 보호효과는 repair 기능에 따라 다르나 전반적으로 두 플라스미드의 UV와 MNNG에 대한 저향성과 돌연변이율을 증가시켰고 pLS4는 pKM101보다 그효과가 높았다. 이러한 pLS4와 pKM101의 기능적 차이는 이들 플라스미드의 mutator 유전자상에 일어난 변이에 의한 것이라고 생각되었다. The mutagenesis-enhancing plasmid pKM101 and its mutant pSL4 were introduced into Escherichia coli B/r strains possessing different DNA repair capacities ($phr^{-}, recA^{-}, uvrA^{-}, uvrB^{-}$) and determined the protection effect and mutagenecity for UV and MNNG. The mutability and protection effect of plasmid pKM101 and pSL4 were affected by different DNA repair capacity. The mutagenecity and resistance of two plasmids were increased against UV and MNNG, and plasmid pSL4 had a higher effect than pKM101. We suggest that the functional differences between pKM101 and pSL4 is due to the variety of mutator gene.

Glyoxylate와 항생물질이 Pseudomonas synxantha A3의 Xanthine Dehydrogenase 합성의 조절에 미치는 영향(III)

전홍기,Jun, Hong-Ki 생화학분자생물학회 1984 한국생화학회지 Vol.17 No.1

Pseudomonas synxantha A3에 의한 xanthine dehydrogenase 생성의 조절에 미치는 glyoxylate의 영향을 항생 물질 등을 사용하여 검토하였다. glyoxylate에 의한 효소의 생합성 저해 양식은 chloramphenicol의 단백질 합성 저해기구와 거의 동일한 translation 단계를 저해하는 것으로 추측할 수 있었다. 또한 glyoxylate에 의한 xanthine dehydrogenase 합성의 translation단계의 저해는 만약 효소의 유도배지 등에서 조절 물질인 glyoxylate가 소실되면 효소의 유도는 원래의 수준으로 곧 회복되어 지는 것으로 생각할 수 있었다. The regulation of xanthine dehydrogenase formation in a strain of Pseudomonas synxantha A3 was studied in the presence of glyoxylate and some antibiotics. The pattern of the enzyme formation by glyoxylate showed almost the same as that by chloramphenicol, and appeared to be influenced at the level of translation. When glyoxylate was removed from induction medium, the formation of xanthine dehydrogenase was relieved from the repression and induced by adenine.

제 14 회 부산대학교 김치연구소 심포지움 김치유산균 발효와 신제품 개발 : 김치발효와 안정형 비타민 C ( AA - 2G ) 의 생성

전홍기 부산대학교 김치연구소 2001 김치의 과학과 기술 Vol.7 No.-

Bacillus subtilis JK-56이 생산하는 chitinase isozyme의 정제와 특성 규명

전홍기,김낙원,정영기 한국생명과학회 2002 생명과학회지 Vol.12 No.1

토양으로부터 chitinase를 생성하는 균주를 분리하여 동정한 결과 Bacillus subtilis로 판명되었으며, 분리한 균주를 Bacillus subtilis JK-56이라 명명하였다. B. subtilis JK-56의 chitinase 생산 최적 조건을 검토한 결과 1% chitin, 0.5% polypeptone, 0.1% KCI, 0.05% MnS $O_4$.4$H_2O$이며 초발 pH 7.0, 배양온도 37$^{\circ}C$에서 가장 많은 효소를 생산하였다. 본 균주가 생산하는 chitinase를 정제하기 위해서 native-PAGE를 이용해 효소활성 band를 확인한 결과, 1개의 강한 활성 band와 2개의 약한 활성 band를 가지는 isozyme으로 확인되었다. 확인된 isozyme을 정제한 결과, isozyme 중 1개의 강한 활성 band를 정제하였고 정제된 효소를 Chi-56A라고 명명하였다 Chi-56A의 효소 특성에 관해서 실험한 결과 분자량은 약 53kDa, pI는 4.3으로 확인되었다. 본 효소는 $65^{\circ}C$까지 상당히 안정하였으며 효소의 최대활성 온도도 $65^{\circ}C$로 확인되는 등 열에 대해 상당히 안정한 효소로 확인되었다. Collidal chitin에 대한 정제효소 Chi-56A의 $K_{m}$ 값은 17.33g/L였다. 그리고 pH 6.0에서 최대의 활성을 나타내었고, 산성범위보다 알칼리범위에서 안정한 것으로 나타났다. 또한 $Mn^{2+}$ 존재 하에서 높은 활성을 나타내었고 C $O^{2+}$와 $Mg^{2+}$ 존재 하에서도 활성이 약간 증가한 반면에 H $g^{2+}$ 존재 하에서는 상당한 저해를 받았다. Chito 올리고당에 대한 분해 산물을 HPLC로 확인해 본 결과 짝수개의 올리고당의 분해산물은 (GlcNAc)$_2$만을 생산하였고 홀수개의 올리고당에 대해서는 GlcNAc와 (GlcNAc)$_2$를 생산하는 것으로 비환원성 말단으로부터 이당체인 diacetyl chitobiose ((GlcNAc)$_2$)를 생산하는 exo형 chitinase로 추정 된다. Chitin, a $\beta$-1,4 polymer of N-acetyl-D-glucosamine, is one of the most abundant organic compounds in nature. Chitinase (EC 3.2.1.14) is an enzyme that degrades chitin to chito-oligosaccharides, diacetyl rhitobiose and N-acetyl-D-glucosamine. An extracellular chitinase-producing bacterial strain was isolated from soil and named to as Bacillus subtilis JK-56. Optimum culture condition of B. subtilis JK-56 for the production of chitinase was 1% chitin, 0.5% polypepton, 0.1% KCl, 0.05% MnS $O_4$.4$H_2O$, 37$^{\circ}C$, initial pH 7.0 and 40 hour culture time. When B. subtilis JK-56 was grown in the optimum medium, one major active band and two minor active bands were detected by native-PAGE and active staining of the gel. Among them, the major band was purified from the culture supernatant by 70% ammonium sulfate precipitation and native-PAGE with BIO-RAD Model 491 Prep-Cell and named as Chi-56A. Its molecular weight was estimated to be 53kDa monomer and the isoelectric point (pI) was pH 4.3. The pH and temperature for the optimum activity of Chi-56A were pH 6.0 and $65^{\circ}C$, respectively. Chi-56A was stable up to $65^{\circ}C$ and in alkaline region. Its $K_{m}$ value for colloidal chitin was 17.33g/L. HPLC analysis of the reaction products confirmed that Chi-56A was an exo type chitinase.e.

집중안전포커스 - 한전기공(주) 제주사업소

전홍기,Jeon, Hong-Gi 대한산업안전협회 2001 안전기술 Vol.39 No.-

Xanthomonas campestris가 생산하는 5-Fluorocytosine Deaminase의 성질

전홍기,김동완 부산대학교 1986 자연과학논문집 Vol.41 No.-

Xanthomonas campestris IAM 1671의 세포내 5-fluorocytosine deaminase의 일반적인 성질을 검토하였다. 본 효소의 안정 pH는 6.0-7.0이었으며, 열안정성은 각 온도에서 10분간 처리했을 때 40℃부터 서서히 실활되기 시작하였다. 효소의 활성에 미치는 pH의 영향을 검토한 결과 cytosine을 기질로 했을 때는 potassium phosphate 완충액의 pH 8.0에서, 5-fluorocytosine을 기질로 사용했을 때는 tris-HCI완충액의 pH8.0-9.0에서 활성이 가장 높게 나타났으며, 활성최적 온도는 50℃로 나타났다. 본 효소는 1mM의 Mg^(2+), K^(+)에 의해서도 다소 저해되었다. 본 효소의 활성은 1mM의 N-ethylmaleimide에 의해 완전히 저해되었고 1mM의 ethylenediaminetetraacetic acid에 의해서도 강하게 저해되었다. NAF는 cytosine을 기질로 사용했을 때는 저해작용이 나타나지 않았으나, 5-flu-orocytosine을 사용했을 때는 다소 저해작용을 나타내었다. ethylenediaminetetraacetic acid에 의해 저해된 본 효소액에 각종 금속이온을 첨가하여 검토한 결과 Mn2+이 저해된 효소의 활성을 완전히 회복시켜 주었으며 Co^(2+)도 활성회복에 유효한 것으로 나타나 본 효소의 활성기에는 Mn^(2+)과 Co^(2+)이 관여하는 것으로 사료되었다. Some properties of 5-fluorocytosine deaminase produced by Xanthomonas campestris IAM 1671 were studied. The enzyme was most stable at pH 6.0-7.0 and gradually inactivated above 40℃. The optimum pH of the enzyme activity was 8.0 for cytosine and 8.5 for 5-fruorocytosine, and optimum temperature for the enzyme activity was 50℃. The enzyme activity was completely inhibited by 1mM of Mn^(2+), Zn^(2+), Mg^(2+), and K^(+). The enzyme was completely inhibited by 1mM of N-ethylmaleimide and also strongly inhibited by 1mM of ethylenediaminetetraacetic acid. NAF inhibited the enzyme with 5-fluorocytosine, but did not inhibited the enzyme with cytosine. The enzyme activity inhibited by ethylenediaminetetraacetic acid was regained by addition of Mn^(2+) or Co^(2+).

Bacillus sp. JK-43의 Cyclodextrin Glucanotransferase에 의한 2-O-$\alpha$-D-Glucopyranosyl L-Ascorbic Acid 생산에 관한 연구

전홍기,배경미,김영희,김성구 한국식품영양과학회 2000 한국식품영양과학회지 Vol.29 No.1

The 2-O-$\alpha$-D-glucopyranosyl L-ascorbic acid (AA-2G) which was enzymatically glucosylated with the cyclodextrin glucanotransferase (CGTase) [EC 2.4.1.19] from Bacillus sp. JK-43 has been reported previously. The presnet experiments examined the optimal conditons for the productio of AA-2G from AA and soluble starch, and characterized the properties of the CGTase from Bacillus sp. JK-43. The reaction mixture for the maximal production of AA-2G was followings; 12% total substrate concentration, 1,400 usits/mL of CGTase and a mixing ratio of 2 : 3(g or AA : g of soluble starch). Under this condition, 1.76mM of AA-2G, which corresponded to 2.53% yield based on AA, was produced after incubation for 24hrs at 45$^{\circ}C$ (pH 5.5). The optimum pH and temperature for the CGTase activity were 6.0 and 45$^{\circ}C$, respectively. The enzyme was stable at pH 5.5 to 9.5, and at temperature up to 5$0^{\circ}C$. The thermostability of the enzyme could be enhanced up to 6$0^{\circ}C$ by the addition of 30mM CaCl2.