MMP-9로 자른 피브로넥틴에 의한 뇌종양세포 U87MG Cells와 단핵구 U937 Cells간의 부착증가 효과

김연향 한국산업기술융합학회 2024 산업기술연구논문지 (JITR) Vol.29 No.2

본 논문에서는 MMP-9에 의해 분해된 피브로넥틴이 종양세포에 대한 면역세포 단핵구의 부착을 촉진하는 주요역할을 한다는 것을 규명한 것이다. MMP-9가 종양세포의 세포외 기질 피브로넥틴에 변화를 일으키고 단핵구의 부착을 증가시키는지 여부를 확인하기 위해, MMP-9를 발현하는 인간 뇌종양 세포인 U87MG 세포주를 transfection 방법으로 구축하고 MMP-9 발현을 면역블로팅과 자이모그램방법으로 확인하였다. MMP-9를 발현하는 U87MG 세포에는 인간 단핵구 U937 세포가 유의하게 부착되었지만, MMP-9를 발현하지 않는 U87MG 세포에는 부착되지 않았다. MMP-9에 의해 분해된 피브로넥틴이 단핵구 U937세포의 부착을 증가시키는 역할을 직접 입증하기 위해, MMP-9로 처리된 피브로넥틴에 단핵구 U937 세포가 부착함을 확인하였다. 이러한 결과는 MMP-9에 의해 잘려진 피브로넥틴이 면역세포와 종양세포 사이의 부착을 중재하는 데 중요한 역할을 할 수 있다는 것을 보여준 것이다. This study investigated the pivotal role of fibronectin cleaved by MMP-9 in enhancing the attachment of monocytes to tumor cells. To determine whether MMP-9 induces changes in the extracellular matrix fibronectin of tumor cells and increases monocyte adhesion, human glioblastoma U87MG cells expressing MMP-9 were established by transfection. The human monocyte U937 cells adhered significantly to U87MG cells expressing MMP-9, however, they did not adhere to U87MG cells that did not express MMP-9. To directly demonstrate the role of MMP-9-cleaved fibronectin in increasing monocyte U937 cell adhesion, the attachment of monocyte U937 cells to fibronectin treated with MMP-9 was confirmed. These findings suggest that MMP-9 alters the extracellular matrix, specifically fibronectin, and plays a crucial role in mediating the adhesion between immune and tumor cells.

소아 편두통에서의 혈청 Matrix Metalloproteinase-9 농도

한문희(Moon Hee Han),김덕수(Deok Soo Kim),심재원,(Jae Won Shim),심정연(Jung Yeon Shim),박문수(Moon Soo Park),정혜림(Hye Lim Jung) 대한소아신경학회 2006 대한소아신경학회지 Vol.14 No.1

목 적 : 7세에서 15세 사이의 소아 중 4-10% 정도가 편두통을 경험한다고 한다. 편두통의 발생기 전에 대해서는 아직 명확하지는 않으나 삼차신경이 주요 역할을 하며 신경 펩티드, 세로토닌 등이 관여하는 것으로 알려져 있다. 최근 연구에서 cortical spreading depression이라는 현상에 의해 혈류 역학적 변화가 초래되어 편두통이 발생한다고 하는데, 이 현상에 matrix metaloproteinase-9(MMP-9)가 관여한다는 보고가 있다. 이에 저자들은 혈청 내 MMP-9 농도를 측정하여 소아에서도 MMP-9가 편두통 발생에 관여되고 있는지 여부를 알아보고자 하였다. 방 법 : 2004년 6월부터 8월까지 강북삼성병원 소아과에 두통을 주소로 내원하였던 33명의 환자 중에서 혈액 채취가 가능하였던 17명을 대상으로국제 두통 학회의 개정된 진단기준에 부합하는 편두통 환자군(9명)과 긴장형두통 환자군(8명)으로 나누어 연구하였다. 정상 대조군으로는 특별한 질환이 없는 비슷한 연령의 소아 9명을 포함시켰다. 혈청을 분리하여 영하 20도에 보관하였다가 MMP-9 ELISA kit(QuanikineⓇ, R&D systems)를 이용하여 각 군에서의 MMP-9 농도를 측정하였다. 결 과: 1) 두통을 경험한 평균 기간은 긴장형두통 환자군에서 1.7년이었고, 편두통 환자군에서는 1.3년이었다. 두통의 지속 시간은 평균 0.4시간과 2.1시간이었으며, 편두통 환자군에서의 두통 빈도는 매일 한차례 이상인 경우가 4례, 일주일에 한차례 이상인 경우가 5례였다. 2) 두통의 양상은 편두통 환자군에서 한명을 제외한 8명이 박동성 두통을 호소하였으나 긴장형두통 환자군에서는 8명 모두 비박동성 두통을 나타냈다. 편두통 환자군에서 두통이 있을 때 동반되는 증상으로는 오심이나 복통이 8례(89%), 눈부심이나 고성 공포증은 4례(44%)에서 관찰되었다. 3) 혈청 내 MMP-9의 농도는 정상 대조군 0.333±0.213 μg/mL, 긴장형두통 환자군 0.351±0.505 μg/mL, 편두통 환자군 0.357±0.168 μg/mL 등이었으며, 편두통 환자군과 정상 대조군, 편두통 환자군과 긴장형두통 환자군과의 비교에서 통계적으로 유의성은 없었다. 4) 전체 대상 소아의 MMP-9 농도 중에서 0.8μg/mL 이상으로 높았던 경우가 5례였는데, 이들은 모두 편두통 환자군에 포함되는 소아였으며 편두통이 하루에 한번 꼴로 다른 소아들에서보다 자주 발생하였다. 결 론 : 편두통 환자의 혈청 내 MMP-9의 농도는 정상 대조군이나 긴장형두통 환자군에 비해 높지 않았으나 편두통 발생 빈도가 높은 환자에서는 MMP-9 농도가 월등히 높은 것으로 보아 두통이 발생하지 않는 시기에서는 증가되지 않다가 편두통이 발생하였을 때에서 상승되는 것으로 판단된다. 따라서 MMP-9가 편두통 발생에 관여한다고 생각할 수 있겠으나 이에 대해서는 향후 연구가 수행되어야 하리라고 사료된다. Purpose : Migraine is a common neurological disorder, but the mechanism has not yet been apparently discovered. Recent studies have found that migrainous headache comes from the hemodynamic changes based on the cortical spreading depression and matrix metalloproteinase(MMP)-9 has an important role in this phenomenon. The aim of this study is to investigate the significance of the serum concentration of MMP-9 in children with migraine. Methods : Among 33 children who visited the headache clinic, from June 2004 to August 2004 we identified and analyzed the clinical findings of 17 patients, who were diagnosed as migraine or tension-type headache. Also we selected 9 children as a healthy control group. The serum concentrations of MMP-9 from all of those were obtained via ELISA kits. Results : The mean duration of headache was 1.3 years in the migraine group. Also, the frequency of migraine is as follows : everyday in 4 patients and more than once during weekdays in 5 patients. The character of headache was throbbing in 8 patients out of 9 patients with migraine. There were no significant differences found in the serum concentrations of MMP-9 between the control group and the migraine group. The serum concentrations of MMP-9 were significantly high, of those who had frequent attacks of migrainous headache. Concl usi on : The serum concentrations of MMP-9 in the migraine group were not significantly high compared with those in the control group. However, the levels were high from those who complained of migraine frequently. This study suggests that the serum concentration of MMP-9 is not high during a normal period but increases when migraine occurrs.

대장샘암종에서예후인자로서의Fascin, MMP-9 과발현과 Proliferating Index에 대한 면역조직 화학적 연구

김범규,하경원,유재형,박준석 대한대장항문학회 2009 Annals of Coloproctolgy Vol.25 No.6

Purpose: The malignant conversion of epithelial cells involves alterations in the expression and the function of cell-matrix and cell-cell adhesive systems that enable a switch to a migratory phenotype in tumor invasion and metastasis. Here, the author studies the prevalence and the potential clinical significance of fascin and Matrix metalloproteinase-9 (MMP-9) expression in relation to the progression of colon adenocarcinoma and of tumor cell proliferation as measured by using the topoisomerase II-α(Topo II-α) index. Methods: Relatively well-preserved paraffin-embedded tissues of 120 cases of colon adenocarcinomas were immunohistochemically stained for fascin, MMP-9, and Topo II-αexpression. A reaction was determined as being positive when more than 10% of the cells were positive for fascin, and/or MMP-9. The Topo II-αindex is defined as the positive number of tumor cells divided by the total number of tumor cells counted times 100. At least 1,000 cells were counted for this analysis. A χ2 test, by using Epi info 2000, for Fascin and/or MMP-9 and a two-sided test for the Topo II-αindex were employed with a significance of P<0.05. Results: Positive reactions for fascin and MMP-9 in colon adenocarcinomas were 44.2% and 56.7%, respectively. In clinically annotated tumors, fascin immunoreactivity was more common in tumors located in the right colon (P=0.014) and was associated with older age (>65 yr, P=0.028), tumor grading (P=0.009), and lymph node metastases (P=0.005). However, MMP-9 immunoreactivity was not statistically associated with age, gender, tumor stage, or lymph node metastases. Fascin expression was statistically associated with MMP-9 expression, especially for left colon adenocarcinomas (P=0.0032). Although the topo II-αproliferating index was associated with lymph node metastasis (P<0.01), this result was not statistically associated with Fascin or MMP-9 expression. Conclusion: Fascin expression may be closely linked with tumor grading and lymph node metastasis of more aggressive colon adenocarcinomas and partly associated with MMP-9 expression in tumor invasion. However, further studies of fascin expression as an independent prognostic factor are required for the determination of significant relationships with other clinicopathologic indices. Purpose: The malignant conversion of epithelial cells involves alterations in the expression and the function of cell-matrix and cell-cell adhesive systems that enable a switch to a migratory phenotype in tumor invasion and metastasis. Here, the author studies the prevalence and the potential clinical significance of fascin and Matrix metalloproteinase-9 (MMP-9) expression in relation to the progression of colon adenocarcinoma and of tumor cell proliferation as measured by using the topoisomerase II-α(Topo II-α) index. Methods: Relatively well-preserved paraffin-embedded tissues of 120 cases of colon adenocarcinomas were immunohistochemically stained for fascin, MMP-9, and Topo II-αexpression. A reaction was determined as being positive when more than 10% of the cells were positive for fascin, and/or MMP-9. The Topo II-αindex is defined as the positive number of tumor cells divided by the total number of tumor cells counted times 100. At least 1,000 cells were counted for this analysis. A χ2 test, by using Epi info 2000, for Fascin and/or MMP-9 and a two-sided test for the Topo II-αindex were employed with a significance of P<0.05. Results: Positive reactions for fascin and MMP-9 in colon adenocarcinomas were 44.2% and 56.7%, respectively. In clinically annotated tumors, fascin immunoreactivity was more common in tumors located in the right colon (P=0.014) and was associated with older age (>65 yr, P=0.028), tumor grading (P=0.009), and lymph node metastases (P=0.005). However, MMP-9 immunoreactivity was not statistically associated with age, gender, tumor stage, or lymph node metastases. Fascin expression was statistically associated with MMP-9 expression, especially for left colon adenocarcinomas (P=0.0032). Although the topo II-αproliferating index was associated with lymph node metastasis (P<0.01), this result was not statistically associated with Fascin or MMP-9 expression. Conclusion: Fascin expression may be closely linked with tumor grading and lymph node metastasis of more aggressive colon adenocarcinomas and partly associated with MMP-9 expression in tumor invasion. However, further studies of fascin expression as an independent prognostic factor are required for the determination of significant relationships with other clinicopathologic indices.

성형안과 질환과 눈물막 내 기질금속단백질분해효소 9와의 연관성 분석

최완규,박정우,한지상 대한안과학회 2023 대한안과학회지 Vol.64 No.10

목적: 성형안과 외래로 내원하는 다양한 환자에서 눈물막 matrix metalloproteinases 9 (MMP-9) 성분 분석을 통해 성형안과 질환의진단과의 연관성에 대해 알아보고자 하였다. 대상과 방법: 안구 불편감을 호소하며 성형안과 외래로 내원한 1,703명 환자의 1,703안에 대한 MMP-9 면역분석키트의 결과를 후향적으로 분석하였고 최종 성형안과 진단에 따른 MMP-9 결과의 양성률에 대해 분석하였다. 결과: 총 1,533안 중 1,126안에서 MMP-9 면역분석키트검사 양성을 보였다. 환자의 성별과 나이는 MMP-9 발현과 유의미한 상관관계를 보이지 않았다. 169안의 갑상샘눈병증 환자 중 120안, 161안의 비루관폐쇄 환자 중 145안, 375안의 비루관협착 환자 중 282안, 238안의 안검내반 환자 중 190안, 23안의 안검외반 환자 중 19안에서 MMP-9 양성 결과를 보였다. 결론: MMP-9 면역분석키트검사는 비침습적이고, 쉽고 빠른 검사 방법으로 다양한 성형안과 질환을 가진 환자들의 눈물막에서MMP-9 증가 소견을 보인다. 성형안과 외래로 내원하는 환자에서 MMP-9 검사 결과는 진단 및 치료 방향 결정에 도움을 줄 수 있다. Purpose: We assessed the association between the results of tear film-based matrix metalloproteinases 9 (MMP-9) immunoassay and the diagnosis of patients who visited an oculoplastic outpatient clinic. Methods: We conducted a retrospective analysis of the MMP-9 immunoassay results in 1,703 eyes from 1,703 patients who presented with ocular discomfort at an oculoplastic outpatient clinic. The MMP-9 immunoassay results were analyzed in correlation with the final oculoplastic diagnosis of the patients. Results: In total, 1,126 of 1,533 eyes demonstrated positive expression of MMP-9. No statistically significant differences were observed in MMP-9 expression based on sex (p = 0.107) and age (p = 0.510). Furthermore, 120 of 169 eyes with thyroid eye disease (71.0%, p < 0.001), 145 of 161 eyes with nasolacrimal duct obstruction (90.1%, p < 0.001), 282 of 375 eyes with nasolacrimal duct stenosis (75.2%, p < 0.001), 190 of 238 eyes with entropion (79.8%, p < 0.001), 19 of 23 eyes with ectropion (82.6%, p < 0.001), and 370 of 567 eyes with dry eye syndrome (65.3%, p < 0.001) exhibited positive MMP-9 expression. Conclusions: The MMP-9 immunoassay is a noninvasive, convenient, and rapid test that evaluates ocular surface inflammation. Most patients with oculoplastic diseases exhibit positive MMP-9 expression. These findings provide valuable information for guiding diagnostic and management decisions in patients with oculoplastic conditions.

정상 산모와 중증 전자간증 산모의 태반에서 Matrix Metalloproteinase (MMP) -2, -9의 발현양상

문여정 ( Yeo Jung Moon ),황한성 ( Han Sung Hwang ),김영한 ( Young Han Kim ),권자영 ( Ja Young Kwon ),박용원 ( Yong Won Park ) 대한산부인과학회 2008 Obstetrics & Gynecology Science Vol.51 No.11

Objective: The aim of the study was to investigate the differential expression of Matrix Metalloproteinase (MMP) -2,-9 in the normal and severe preeclamptic placenta. Methods: Placentas were obtained from women undergoing cesarean section with normal (n=10) and severe preeclamptic (n=10) pregnancies. Semi-quantitative RT-PCR was done to detect the placental gene expression of MMP-2,-9. Western blot analysis was performed to identify MMP-2,-9 protein expression in each placenta. Immunohistochemical staining were employed to localize MMP-2,-9 in placental tissues. Results: MMP-2,-9 genes were expressed in both normal and severe preeclamptic placenta. There were lower expressions MMP-2,-9 in severe preeclamptic placentas than in normal. MMP-2,-9 proteins were all present in each placental tissue. The expression for MMP-2,-9 was weaker in severe preeclamptic placenta than in normal. MMP-2,-9 were localized only to the trophoblast, and were also weakly positive in severe preeclamptic placenta compared with normal. Conclusions: MMP-2,-9 expressions were decreased in severe preeclampsia placenta compared to those from normal placenta. This study suggests that decreased expression of MMP-2,-9 may have a role in the development of severe preeclampsia.

만성 간질환에서 혈중 Gelatinase (Matrix Metalloproteinase-2와 9)의 측정 의의

권오상,임도윤,권광안,정문기,박동균,김선숙,김연석,권소영,구양서,김유경,최덕주,김주현,황유진,변관수,이창홍 대한간학회 2003 Clinical and Molecular Hepatology(대한간학회지) Vol.9 No.3

목적: Gelatinase (MMP-2와 9)는 기저막의 주구성요인 type IV collagen을 분해하는 효소로, MMP-2는 간경변과 MMP-0은 간세포암의 진행과 연관이 있는 것으로 알려져 있다. 본 연구에서는 만성 간질환과 MMP-2와 9의 관계를 알아보고자 하였다. 대상과 방법: 간기능이 정상이고 간질환이 없는 건강 대조군 10예, 만성 간염 15예, 간경변 18예, 그리고 간세포암 25예를 대상으로 혈장을 채취하여 MMP-2와 9의 활성을 보기 위해 zymography를 시행하였다. 결과: 혈장 MMP-2의 활성은 간경변군에서 건강 대조군(p=0.009)과 만성 간염군(p=0.011)에 비해 증가되어 있었으나 간세포암군과는 차이가 없었다. 혈장 MMP-9의 활성은 간경변군에서 건강 대조군에 비해 증가되어 있었으나(p=0.035), 만성 간염군과 간세포암군과는 차이가 없었다. 간세포함이 없는 간경변군 15예와 간세포암을 동반한 간경변군 23예를 합친 총 간경변군 38예에서 MMP-2의 활성은 total bilirubin이 높을수록 (r=0.323, p=0.048) 그리고 Child-Pugh 점수가 높을수록(r=0.414, p=0.012) 증가되어 있었다. 총 간경변군에서 MMP-2와 MMP-9의 활성은 알코올 성 간경변군에서 HBV에 의한 간경변군 보다 현저히 증가되어 있었다(각각 p=0.009, p=0.002). 결론: 혈장 MMP-2의 활성은 간경변의 진단과 중증도에 유용한 표지자로 사용될 수 있을 것이다. 혈장 MMP-9의 활성은 간세포암에서의 유용성은 적으리라 생각되나 알코올성 간경변의 진단적 표지자로는 유용하리라 생각된다. MMP-2와 MMP-9의 활성은 간경변의 원인 별로 차이가 나는 것으로 생각되며 그 이유에 대한 연구가 필요하리라 생각된다. Background/Aims: Gelatinase (matrix metalloproteinase (MMP) -2 and 9) has an important role in the pathogenesis of liver cirrhosis (LC) and hepatocellular carcinoma (HCC). In this study, we evaluated the relationship of gelatinase to chronic liver disease. Methods: Four groups of subjects were examined; healthy control (10 cases), chronic hepatitis (18 cases), LC (15 cases), and HCC (28 cases). The plasma of each subject was obtained, and the equal quantification of plasma protein was done. The plasma activities of MMP-2 and 9 were measured by zymography. Results: The activities of plasma MMP-2 in patients with LC were significantly higher than those in controls (p=0.009) and in patients with chronic hepatitis (p=0.011), but not different from those in patients with HCC. The activities of plasma MMP-9 in patients with LC were significantly higher than those in controls, but not different from those in patients with chronic hepatitis or HCC. In patients with LC (regardless of having HCC), the activities of MMP-2 correlated with total bilirubin (r=0.323, p=0.048) and Child-Pugh score (r=0.414, p=0.012). The activities of MMP-2 and 0 were higher in patients with LC (regardless of having HCC) caused by alcohol than caused by HBV (p=0.009 and 0.0002 for each one). Conclusions: The plasma activity of MMP-2 may be a useful marker for the diagnosis and determination of the severity of LC. The plasma activity of MMP-9 was not useful for HCC, but may be a marker for alcoholic LC. Further study is needed to determine why the plasma activity of gelatinase was higher in patients with LC caused by alcohol than by HBV.(Korean J Hepatol 2003;9:222-230)

무균성 뇌수막염 소아에서 뇌척수액내 Matrix Metalloproteinase(MMP)-9과 Tissue Inhibitor of Metalloproteinase(TIMP)-1의 증가

양주희,박민혁,심정연,정혜림,박문수,금동혁,Yang, Ju Hee,Park, Min Hyuk,Shim, Jung-Yeon,Jung, Hye Lim,Park, Moon Soo,Keum, Dong Hyuck 대한소아청소년과학회 2003 Clinical and Experimental Pediatrics (CEP) Vol.46 No.6

목 적 : 뇌수막염에서 MMP-9은 뇌혈관 내피하 기질막을 분해하여 혈관-뇌장벽을 파괴하는데 주된 역할을 담당하며 TIMP-1은 MMP-9의 전효소와 복합체를 형성하여 MMP-9의 작용을 선택적으로 억제하는 인자로 알려져 있으나 이들의 상호작용은 아직 밝혀진 바가 별로 없다. 최근 세균성 뇌수막염 환자의 뇌척수액에서 MMP-9과 TIMP-1 측정에 대한 연구가 있었고, 특히 세균성 뇌수막염에서 신경학적 합병증의 예후인자와 관련하여 MMP-9의 역할에 대한 보고들이 있었으나 아직 무균성 뇌수막염 환자를 대상으로 한 보고는 별로 없었고 특히 국내에서 보고된 바는 없었다. 이에 저자들은 무균성 뇌수막염 환아의 혈액과 뇌척수액에서 MMP-9과 TIMP-1의 농도를 측정하여 대조군과 비교하고, MMP-9과 TIMP-1 및 다른 뇌수막염 관련인자들 사이의 상관관계를 비교 분석하고자 하였다. 방 법: 2002년 6월부터 7월까지 강북삼성병원 소아과 내원환자 중 발열과 뇌막자극증상을 보인 40명의 환아들을 대상으로 뇌척수액 검사를 시행하여, 무균성 뇌수막염 소견을 보인 25명을 뇌수막염군, 정상소견을 보인 14명을 대조군으로 하였다. 입원당일 혈액과 뇌척수액을 채취하여 혈액에서 백혈구수를 측정하고, 뇌척수액에서 백혈구수와, 당, 단백농도 및 뇌압을 측정하였다. 나머지 혈액 및 뇌척수액 검체는 실온에서 10분간 2,000g으로 원심분리하여 영하 70도에서 보관후 sandwich ELISA 방법을 이용하여 각각의 검체에서 일시에 MMP-9과 TIMP-1의 농도를 정량하였다. 결 과 : 뇌척수액 MMP-9과 TIMP-1 농도는 뇌수막염군에서 의미있게 증가되었고(P<0.05), 혈청 MMP-9과 TIMP-1 농도는 두 군간에 차이가 없었다. 뇌척수액 MMP-9과 TIMP-1은 서로 의미있는 양의 상관관계를 보였으며($r_s=0.42$, P<0.05), 뇌척수액 MMP-9/TIMP-1 비율은 대조군에 비해 무균성 뇌수막염군에서 의미있게 증가되었다(P<0.05). 뇌척수액 MMP-9과 TIMP-1은 뇌척수액 총백혈구수와 양의 상관관계를 보였다($r_s=0.43$, P<0.05, $r_s=0.48$, P<0.05). 뇌척수액 TIMP-1은 뇌척수액 단백 농도와 양의 상관관계를 보였다($r_s=0.43$, P<0.05). 결 론 : 무균성 뇌수막염 환아의 급성기 뇌척수액에서 MMP-9과 TIMP-1이 의미있는 증가를 보였고, 뇌척수액 TIMP-1은 정상군에서 상대적으로 높은 농도를 보이고 있어 MMP-9과 TIMP-1은 각각 뇌혈관장벽의 파괴와 유지에 관여한다고 생각된다. Purpose : Matrix metalloproteinase(MMP)-9 is known to breakdown the blood-brain barrier by degrading the extracellular matrix of the subendothelial basement membrane in meningitis. Tissue inhibitor of metalloproteinase(TIMP)-1, a known inhibitor of MMP-9, has been postulated to inhibit the proteolytic activity of MMP-9 by bindng to MMP-9, but their interaction has not been fully understood yet. So far, there have been some reports on the relationship of MMP-9 and TIMP-1 in bacterial meningitis, but few reports in viral meningitis. Furthermore, there has been no report on this in Korea. We investigated the concentrations of MMP-9 and TIMP-1 in cerebrospinal fluid (CSF) and serum of patients with viral meningitis and control subjects, and evaluated their relationship with other clinical parameters of meningitis. Methods : CSF and blood were obtained from 25 subjects with viral meningitis and 14 control subjects. After centrifugation, supernatants were stored at $-20^{\circ}C$ and we assayed concentrations of MMP-9 and TIMP-1 by the sandwich ELISA method. Results : Concentrations of CSF MMP-9 and TIMP-1 were significantly elevated in patients with viral meningitis, when compared with those in control subjects. Their serum levels showed no differences between the two groups. MMP-9 levels were closely correlated with TIMP-1 levels in the CSF($r_s=0.42$, P<0.05). CSF MMP-9/TIMP-1 ratios were significantly higher in patients with viral meningitis than those in the control subjects(P<0.05). Both CSF MMP-9 and TIMP-1 levels positively correlated with CSF total leukocyte counts($r_s=0.43$, P<0.05, $r_s=0.48$, P<0.05). TIMP-1 levels positively correlated with total protein concentrations in the CSF($r_s=0.43$, P<0.05). Conclusion : MMP-9 and TIMP-1 may play an important role in the breakdown and maintenance of BBB in viral meningitis, respectively.

비소세포 폐암에서 COX-2, MMP-9, p53 및 VEGF 발현에 대한 면역조직화학적 연구 : 편평세포암종과 선암종을 대상으로

하경원 외 중앙대학교 의과대학 의학연구소 2007 中央醫大誌 Vol.32 No.3

Purpose: This study was performed to investigate immunohistochemical expression of COX-2, MMP-9 and p53 using surgical specimens of 97 non-small-cell lung cancer cases and to evaluate the relationship between the expression of each molecule and clinicopathologic factors or prognosis. Methods: The following formalin-fixed paraffin embedded surgical specimens were immunohistochemically stained by avidin-biotin complex method for COX-2, MMP-9 and p53; 60 cases of primary squamous cell carcinoma and 37 cases of primary adenocarcinoma of the lung. Results: COX-2 expression of adenocarcinoma is statistically higher than that of squamous cell carcinoma (p<0.01). However, MMP-9, p53 and VEGF expression is not significantly associated with the histologic type of cancer. COX-2 expression was significantly associated with the clinical staging (p<0.05), whereas MMP-9, p53 and VEGF expression were not. Synchronous expression of each molecules (COX-2 + MMP-9 + p53 + VEGF, COX-2 + MMP-9 +p53, COX-2 + MMP-9 + VEGF, COX-2 + p53 + VEGF, COX-2 + MMP-9, COX-2 + p53, MMP-9 + p53, COX-2 + VEGF, MMP-9 + VEGF, p53 + VEGF) was 62.4% in frequency and revealed increased tendency in advanced cancer than early cancer. VEGF expression showed to portend a short survival among patients with non-small cell lung cancer (p=0.05). Conclusion: These results suggested that COX-2 overexpression might be an indicator of an unfavorable clinical outcome and VEGF overexpression appears to portend a short survival. However, further studies of a possibility of prognostic significance, such as MMP-9, p53 and synchronous production of gene products, are required for the determination of significant relationship in other clinicopathologic indices.

Naringenin이 NF-κB, AP-1 억제를 통한 MMP-9 활성 및 발현 억제 효과

채수철 ( Soo Chul Chae ),고은경 ( Eun Gyeong Kho ),서은선 ( Eun Sun Seo ),유근창 ( Geun Chang Ryu ),나명석 ( Myung Suk Na ),김인숙 ( In Suk Kim ),이종빈 ( Jong Bin Lee ) 한국환경생물학회 2009 환경생물 : 환경생물학회지 Vol.27 No.1

Naringenin은 flavonoid 구조의 감귤류 과피에 다량 함유되어 있으며 항암 및 항산화 등의 다양한 생리활성을 가지는 것으로 보고되었다. 이에 본 연구에서는 HT-1080 섬유육종세포의 전이에 대한 영향을 조사하였다. 먼저 Naringenin이 암세포의 이동에 미치는 영향을 알아보기 위해 migration assay를 한 결과, Naringenin이 암세포의 이동을 농도 의존적으로 억제시켰다. 암의 전이에 있어서 매우 중요한 역할을 하는 단백질분해효소인 matrix metalloproteinase-9 (MMP-9)의 활성도를 측정하기 위해 gelatin zymography를 한 결과, Naringenin이 PMA에 의해 증가된 MMP-9의 효소 활성도를 농도 의존적으로 감소시켰다. 또한 MMP-9와 TIMP-1의 유전자발현에 대한 Naringenin의 영향을 RT-PCR 방법으로 조사한 결과, Naringenin이 PMA에 의해 증가된 MMP-9의 mRNA 발현을 농도 의존적으로 감소시켰으나 TIMP-1의 mRNA 발현에는 변화가 없었다. MMP-9 발현 감소에 관여하는 전사조절인자를 확인하기 위해 promoter assay를 한 결과, Naringenin이 PMA에 의해 증가된 MMP-9 및 NF-κB, AP-1의 promoter 활성을 농도 의존적으로 감소시켰다. 또한 MMP-9의 전자조절인자인 NF-κB와 AP-1의 결합 활성도를 electrophoretic mobility shift assay로 확인한 결과 Naringenin이 PMA에 의해 증가된 NF-κB와 AP-1의 결합 활성도를 농도 의존적으로 감소시켰다. 결론적으로 Naringenin이 전사조절인자인 NF-κB와 AP-1의 활성을 억제함으로써 MMP-9의 유전자 발현 및 효소 활성을 억제하고 그 결과 암세포의 이동과 침윤을 억제하는 것을 알 수 있다. The chemopreventive effects of naringenin derived from citrus on tumor migration and the possible mechanisms involved in this protection were investigated in HT-1080 tumor cells. In this study, we found that naringenin reduced phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA)-enhanced matrix metalloproteinases (MMP)-9 activation in a dose-dependant manner and further inhibited HT-1080 cell migration. In addition, naringenin suppressed PMA-enhanced expression of MMP-9 protein, mRNA and transcription activity levels through suppression of nuclear factor κB (NF-κB) activation and activator protein-1 (AP-1) translocation without changing tissue inhibitor of metalloproteinase (TIMP)-1 level. Therefore, our results suggested that the inhibitory effects of naringenin on MMP-9 activation, relation of tumor migration in vitro possibly involve mechanisms related to its ability to suppress PMA-enhanced MMP-9 gene and protein expression through NF-κB activation and AP-1 translocation. Overall, naringenin may be a valuable anti-invasive drug candidate for cancer therapy.

비소세포폐암에서 COX-2, MMP-9와 돌연변이형p53의 발현이 생존에 대한 예후 분석

신종욱 ( Jong Wook Shin ),최재호 ( Jae Ho Choi ),박인원 ( In Won Park ),유재형 ( Jae Hyung Yoo ) 대한결핵 및 호흡기학회 2007 Tuberculosis and Respiratory Diseases Vol.63 No.1

연구배경: 폐암의 병인에 기여하거나 예후를 결정하는 인자에 대해서는 매우 다양한 인자와 다양한 상호 관계로 인하여 특히 유전자의 역할에 대해서는 결정적으로 알려진 것이 없어 앞으로 더 많은 연구가 필요한 실정이다. 이에 따라 본 연구에서는 COX-2, MMP-9, p53가 비소세포폐암에서 어떻게 발현되는지 세포면역학적으로 알아보고 임상 특성과 예후와 상관관계를 알아보고자 하였다. 대상 및 방법: 91명의 비소세포폐암을 대상으로 하여 후향적으로 임상특성을 고찰하고 COX-2, MMP- 9, p53의 유전자 표현을 세포면역학적 방법을 통하여 검사하였다. 임상특성과 유전자 표현 패턴의 상관관계와 생존에 대한 예후인자로서의 역할에 대하여 조사하였다. 결과: 1) 편평상피세포암에서는 흡연자과 남자가 우세한 비율을 차지하였으며 남자에서 흡연의 비율이 유의하게 높았다. 2) 전체 대상 환자에서 생존에 영향을 미치는 결정적인 인자는 근치적 절제술의 시행여부와 병기로 나타났다. 3) COX-2의 발현은 편평상피세포암 보다 선암에서 더 유의하게 높게 발현되었다. 4) COX-2, MMP-9, p53의 발현이 모두 되지 않는 비율은 선암에 비해 편평상피세포암에서 더 흔하게 관찰되었다. 5) p53돌연변이가 있으면서 COX-2와 MMP-9은 발현이 되지 않는 비소세포폐암환자의 생존기간이 다른 발현 양상을 보이는 경우에서의 생존기간보다 더 연장되어 보였다(생존기간의 중앙값; 165.6주). 6) COX-2의 발현과 MMP-9의 발현 사이에는 유의한 상관관계가 있었다. 7) 폐암을 근치적으로 절제한 환자의 경우에 COX-2의 발현은 유의한 예후인자였다. MMP-9는 근치적 절제술을 받지 못한 환자군에서 유의한 예후인자로 작용하였다. 결론: COX-2와 MMP-9의 발현은 비소세포폐암 환자 일부에서 병의 진행에 관여하거나 예후에 영향을 줄 수 있을 것으로 기대된다. Background: In pathogenesis and prognosis of lung cancer, significance of enormous types of genetic expression were very compounding and undetermined. We performed this study to search association between clinical characteristics and expression of COX-2, MMP-9 and p53 in non-small cell lung cancer. Methods: Ninety-one patients with adenocarcinoma or squamous cell carcinoma were enrolled. We had searched clinical data retrospectively and performed immunohistochemical staining for COX-2, MMP-9 and p53. We had analyzed significance of these three genes in clinical features and prognosis for survival. Results: 1) In squamous cell carcinoma, male was predominant and was significantly correlated with smoking. 2) Major prognostic determinants for overall survival were curative resection. 3) Expression of COX-2 was more frequent in adenocarcinoma than in squamous cell carcinoma. 4) Negative staining of COX-2, MMP-9 and p53 was more frequent in squamous cell carcinoma than adenocarcinoma. 5) Survival duration was longer in the group with positive expression of p53 and negative for COX-2 and MMP-9 (median duration of survival = 165.6 weeks) than groups with the other expressional patterns. 6) Significant correlation was found between expression of MMP-9 and COX-2. In squamous cell carcinoma, expression of MMP-9, COX-2 and mutant p53 were mutually correlated. 7) COX-2 expression was significant prognostic factor for survival in resected cancer group. In unresected inoperable non-small cell lung cancer group, MMP-9 was statistically significant prognostic factor for overall survival. Conclusion: COX-2 and MMP-9 might have some roles for progression or prognosis in some selected patients with non-small cell lung cancer. COX-2 and MMP-9 may have some roles for disease progression or prognosis in selected patients with NSCLC. (Tuberc Respir Dis 2007; 63: 31-41)