G292 세포에서 세포막 신장으로 활성화되는 K^+통로의 특성

이상국,정동근,서덕준,박수병 대한치과교정학회 2000 대한치과교정학회지 Vol.30 No.2

본 연구에서는 인체 골종양에서 유래한 G292세포를 이용하여 압력으로 세포막을 신장(stretch)시켰을 때 K+ 통로의 전기적 활성 변화를 연구하였다. 배양된 세포에서 유리전극을 이용하여 세포막 내측이 유리전극의 외부로 향하도록 inside-out patch를 얻어 단일이온통로전류를 막전압고정법 (patch clamp recording)으로 기록하였다. G292세포의 세포막 내외에 140 mM KCl용액이 있는 상태에서 유리전극내 전압을 -80 mV로 고정했을 때 전도성이 270±27 pS, 113±12 pS, 48±8 pS인 3가지 종류의 K+통로를 관찰하였다. 전도성이 낮은 48 pS의 K+ 통로는 모든 세포막에서 관찰하였으며 270 pS 및 113 pS의 K+ 통로는 일부 세포에서만 관찰하였다. 48 pS의 K+ 통로는 세포막 외측에 음의 전압을 가하면 활성화되고 양의 전압을 가하면 활성화되지 않는 외향성 정류특성을 보였다. 세포막 외측에 음압을 가하면 48pS의 K+통로는 활성화되었으며 이온 통로가 열리는 확률(Popen)이 가하는 압력에 비례하여 증가하였다. 이러한 결과는 G292세포주에 3가지 종류의 K+통로가 존재하며 전도성이 낮은 48pS의 K+통로만이 세포막 신장에 의하여 직접적으로 활성화되는 특성을 보였다. 이러한 K+ 통로의 활성화는 세포가 기계적 자극을 받아 세포막이 신장되면 세포막전압을 과분극시키며 조골세포에서 기계적 강수기로서의 기능을 수행하여 조골세포의 골개조에 관여할 것으로 추측된다. K+-selective ion channels were studied in excised inside-out membrane patches from human osteoblast-like cells (G292). Three classes of K- channels were present and could be distinguished on the basis of conductance. Conductances were 270±27 pS, 113± 12 pS, 48±8 pS according to their approximate conductances in symmetrical 140 mM KCI saline at holding potential of -80 mV. It was found that the small conductance (48 pS) K+ channel activation was dependent on membrane voltage. In current-voltage relationship, small conductance K+ channel showed outward rectification, and it was activated by the positive potential inside the membrane. In recordings, single channel currents were activayed by a negative pressure outside the membrane. The membrane pressure increased Popen of the K+ channel in a pressure-dependent manner. In the excised-patch clamp recordings, G292 osteoblast-like cells have been shown to contain three types of K+ channels. Only the small conductance (48 pS) K+ channel is sensitive to the membrane stretch. These findings suggest that a hyperpolarizing current, mediated in part by this channel, may be associated with early events during the mechanical loading of the osteoblast. In G292 osteoblast-like cells, K+ channel is sensitive to membrane tension, and may represent a unique adaptation of the bone cell membrane to mechanical stress.

골격근의 신장성 및 단축성 근수축 후에 면역적격세포수의 변화

이호성 ( Ho Seong Lee ) 한국스포츠정책과학원(구 한국스포츠개발원) 2009 체육과학연구 Vol.20 No.2

본 연구는 골격근의 신장성 및 단축성 근수축 후에 면역적격세포수의 동태를 검증하는데 그 목적을 두었다. 실험동물은 체중 30-40g(8주령)의 ICR계 수컷 생쥐 총 84마리를 신장성 근수축 집단(ECC, n=42)과 단축성 근수축 집단(CON, n=42)으로 분류하였다. 신장성 및 단축성 근수축(30회 5세트, 각 세트간의 휴식 1분)은 전경골근의 비골신경을 통해 전기 자극을 주었다. 전경골근의 적출은 신장성 및 단축성 근수축 전(pre, n=6), 직후(IA, n=6), 1일 후(1D, n=6), 3일 후(3D, n=6), 7일 후(7D, n=6), 14일 후(14D, n=6), 그리고 28일 후(28D, n=6)에 각각 실시하였다. 양성 근섬유수 및 면역적격세포수(T, Th, Tc, 호중구, 포식세포)는 조직학적 분석을 통해 산출하였다. 양성 섬유수는 근수축 3일 및 7일 후에 CON 집단에 비해 ECC 집단에 있어서 유의하게 높게 나타났다(p<.05). Tc 세포수는 근수축 1일, 3일 및 7일 후에, 호중 구수는 근수축 직후, 1일, 3일 및 7일 후에, 포식 세포수는 근 수축 직후, 1일, 3일, 7일, 14일 및 28일 후에 각각 CON 집단에 비해 ECC 집단에 있어서 유의하게 높게 나타났다(p<.05). 반면, T 및 Th 세포수는 시기 및 집단 간에서 유의한 차이를 보이지 않았다. 이상의 결과에 의하면 신장성 근수축은 골격근 손상 및 면역적격세포수를 크게 증가시켰다는 것이 시사되었다. The purpose of this study was to examine immunocompetent cell numbers following eccentric and concentric muscle contraction in skeletal muscle. Eight-week-old Institute of Cancer Research (ICR) mice (n=84) were divided to eccentric muscle contraction group (ECC, n=42) and concentric muscle contraction group (CON, n=42). The tibialis anterior muscle was stimulated via the peroneal nerve to contract either eccentrically or concentrically (30 times × 5sets, Rest for 1 minute between each set). The tibialis anterior muscle was isolated before (pre, n=6) and 1 (n=6), 3 (n=6), 7 (n=6), 14 (n=6), and 28 d (n=6) after muscle contraction. Changes in the number of positive muscle fiber and immunocompetent cells (T, Th, Tc, neutrophils, and macrophages) were calculated by the histological analysis with HE stain and Immunohistochemistry. The number of positive muscle fiber was significantly higher (p<.05) in the ECC than in the CON at 3 and 7 d after muscle contraction. The number of Tc cells was significantly higher (p<.05) in the ECC than in the CON at 1, 3, and 7 d after the contractions. The number of neutrophils was significantly higher (p<.05) in the ECC than in the CON at immediately after, 1, 3, and 7 d after the contractions. The number of macrophages was significantly higher (p<.05) in the ECC than in the CON at all time course after muscle contraction. However, Changes in the number of T and Th cells were not significantly different between time course or groups. These results suggest that eccentric muscle contraction induces greater skeletal muscle damage and immunocompetent cells.

신장세포암에서 WT1과 IGF2 유전자의 발현

이정호,김응석,김용섭,장성익,윤환중 동국대학교 의학연구소 2000 東國醫學 Vol.7 No.-

IGF2 유전자는 제 11번 염색체 단완 (11p15.5)에 위치해 있으며 아버지로부터 유전된 대립형질만 기능을 하는 genomic imprinting되는 유전자이다. 이 유전자는 정상세포에서는 세포증식을 촉진시키는 작용을 하고 몇가지 암에서는 LOI에 기인한 과발현이 있는 것으로 알려져 있다. 한편 WT1 유전자는 제 11번 염색체 단완 (11p13)에 위치해 있으며 어머니로부터 유전된 대립형질만 기능을 하는 즉 IGF2 유전자와는 정반대의 genomic imprinting 되는 유전자이다. 이 유전자는 비뇨생식기관의 발생에 매우 중요한 유전자이며 암화과정에서는 암억제 유전자로서 기능한다. 소아신장에서 발생되는 Wilms 종양에서는 IGF2 유전자와 WT1 유전자의 고장이 주원인으로 생각하고 있다. 이에 근거하여 성인에서 발생되는 신장세포암에서도 Wilms 종양에서의 결과와 같을 것인지의 여부를 알기 위하여 12명의 신장세포암 환자 ( 남자 6명, 여자 6명)로부터 얻은 조직을 이용하여 이들 유전자의 발현정도를 조사하였다. 환자의 연령은 남자에서는 43세에서 56세까지였고 여자에서는 23세에서 61세까지였다. 신장세포암에서 IGF2 유전자와 WT1 유전자의 발현정도는 다같이 성별이나 연령과는 무관하였다. IGF2 유전자는 50%에서 발현되었으며, 그 발현정도는 저발현에서부터 중등도 그리고 과발현까지 다양했으며 주로 신세뇨관 부위에 있는 암세포에서 발현되었다. WT1은 56%에서 발현되었으며 과발현과 중등도 발현이 대부분이었다. IGF2 유전저의 발현과 WT1 유전자의 발현은 각 예에서 상이하게 나타나서 두 유전자간의 작용은 일치하지 않았다. IGF2 gene which was located on chromosome 11p15.5 is expressed by the paternal allele. It stimulates the cell proliferation in normal cells, however, it is over expressed in some cancers due to LOI (loss of genomic imprinting). In contrast, WT1 gene which was located on chromosome 11p13 shows maternal specific monoallelic expression. It is a very much important gene in developing urogenital system, besides, it acts as tumor suppressor gene in some cancers. IGF2 and WT1 genes are the main causative genes in Wilms tumor which is developed in pediatric kidney. To understand the status of IGF2 and WT1 expressions in renal cell carcinoma which is developed in adult life, tissues from 12 cases patients (male 6 cases ; female 6 cases) were detected by immunohistochemistry with antibodies from IGF2 and WT1 genes. To distinguish the different ages between Wilms tumor and renal cell carcinoma, the patients age in renal cell carcinoma was ranged in 43-56 years old in man and 23-61 years old in female. No direct correlation was, in general, between gene expression of IGF2 and WT1 and age or sex of patients in renal cell carcinoma. Expression of IGF2 gene revealed six of twelve (560%) and expression of WT1 gene showed seven of twelve (56%) in renal cell carcinoma, respectively. The status of IGF2 gene expression was varied from low to high expression. In contrast, the status of WT1 gene expression was higher than in IGF2 gene expression. However, there was no apparent correlation between expressions in each cases. In conclusion, IGF2 and WT1 genes are very important in carcinogenesis of renal cell carcinoma, however interaction between two genes was obscure.

Streptozotocin으로 유발된 당뇨병성 신장병증 생쥐에서 토리 내피세포의 Apoptosis와 미세구조 변화

김정상(Jeong Sang Kim) 대한해부학회 2003 Anatomy & Cell Biology Vol.36 No.3

당뇨병성 신장병증 (diabetic nephropathy, DN)은 당뇨병의 주요 합병증으로 사망 원인 중 하나이다. 본 연구는 streptozotocin (STZ)으로 유발된 실험적 당뇨병 생쥐 (ICR strain) 신장 토리의 세포자멸 (apoptosis)를 구명하기 위하여 수행하였다. 생쥐를 12시간 절식시킨 다음 STZ 50 mg/kg을 복강주사하여 1차 유발을 한 24시간 후에 동일량의 STZ을 투여하여 2차 유발을 하였으며, 72시간 후에 100 mg/kg을 복강 투여하여 3차 유발을 하였다. 혈당량과 creatinine 농도는 STZ를 투여한 후 점자로 증가하여 DN이 시작되었음을 암시하였다. DN 생쥐의 신장 토리에 대한 조직병리적 검사 결과 혈관사이세포가 국소적으로 증가하거나 PAS-양성물질이 정상군에 비하여 증가하였는데 실험 군 6주에서 보다 현저하였다. Apoptag에 염색되는 세포들의 수는 실험군 4주와 6주에서 정상군에 비하여 현저히 증가하 였다. 전자현미경 관찰 결과 실험군 4주에서는 핵의 전자밀도가 다소 높게 나타났으나, 실험군 6주에서는 생쥐 신장 토리 의 혈관사이세포와 내피세포의 핵이 괴사되어 전자밀도가 매우 높고 일부 바닥판들이 비후되어 있었다. 본 연구 결과 STZ로 유발된 실험적 당뇨병 생쥐의 신장 토리에서 조직병리학적 변화와 세포자멸이 나타났다. Diabetic nephropathy (DN) in mice induced by intraperitoneal injections of streptozotocin (STZ) three times at divided dosages; the first dosage of 50 mg/kg STZ was given to mice after 12-h fasting, followed by the second 50 mg/kg STZ at 24-h after the first injection, and the third dosage of 100 mg/kg was given at 72-h after the first injection. The plasma glucose and creatinine levels gradually increased after the STZ treatment, indicating the onset of DB. Histopathological examination of the kidneys of mice treated with STZ revealed focal areas of mesangial proliferation with increased periodic acid-Schiff-positive materials. At 4 and 6 weeks diabetic groups after STZ treatment showed severely degenerated nuclei of the mesangial and endothelial cells. These results indicate that apoptic histopathological changes occurs in the kidney of the STZ-induced diabetic mellitus.

신생리 : 요산에 의한 신장 세뇨관 세포의 상피-중간엽 세포변이: 요산에 의한 신장 질환 악화의 새로운 기전으로서의 의의

유민아 ( Min A Yu ),송경희 ( Kyung Hee Song ),이정민 ( Jung Min Lee ),류동열 ( Dong Ryul Ryu ),김승정 ( Seung Jung Kim ),최규복 ( Kyu Bok Choi ),윤견일 ( Kyeon Il Yoon ),강덕희 ( Duk Hee Kang ) 대한신장학회 2008 춘계학술대회 초록집 Vol.28 No.1

갑상선으로 전이된 신장세포암종

김동주,장이찬,최재운,박진우,Dong-Ju Kim,M.D.,Lee-Chan Jang,M.D.,Jae-Woon Choi,M.D. and Jin-Woo Park,M.D. 대한갑상선-내분비외과학회 2012 The Koreran journal of Endocrine Surgery Vol.12 No.3

Clear cell renal cell carcinoma (RCC) is the most common histological subtype of malignant renal tumors. Although RCC frequently metastasizes to many organs, it rarely metastasizes to the thyroid gland without evidence of other organ involvement. We report a case of a metastatic renal cell carcinoma to the thyroid gland, which was misdiagnosed preoperatively as a follicular neoplasm from the fine needle aspiration cytology.

돼지 신장세포(PK15)의 이종이식 거부반응에 대한 재조합 IL-18의 영향

최연실,김은미,김영관,박상연,심정현,윤도영,강형식,명평근 충남대학교 형질전환복제돼지연구센터 2004 논문집 Vol. No.8

Various cytokines including IL-1β, IL-2, IL-4, IL-10, IL-12p40, IFN-r, and TNF-α have been recently reported to play important roles in both host and donor cell activations during xenotransplantation. Interleukin (IL)-18, a proinflammatory cytokine, can induce IL-4 and IL-13 production in T cells, NK cells, B cells, mast cells, and basophils. IL-18 has the capacity to stimulate innate immunity and both Th1-and Th2- mediated responses, but little is known to involve in the xenograft rejection. In order to investigate the role of IL-18 in xenograft rejection, we transplanted the pig kidney (PK15) cells to C57BL/6 mouse with or without intraperitoneal injection of mouse recombinatant IL-18, It was analyzed the population of T cell, B cell and NK cell in the mice transplanted with PK 15 cells and recombinant IL-18 by flow cytometry. We found that splenic CD3+ T cells were increased in mice injected PKl5 cells with recombinant IL-18. These results suggest that recombinant IL-18 is critical in the xenograft rejection by increasing T cell population of the recipients.

신농양으로 오인된 전이성 유두상 신장세포암종

김영욱 ( Young Wook Kim ),김영선 ( Young Sun Kim ),지은영 ( Eun Young Ji ),김정훈 ( Jung Hoon Kim ),전선영 ( Sun Young Jun ),신석준 ( Seok Joon Shin ),윤혜은 ( Hye Eun Yoon ) 대한내과학회 2015 대한내과학회지 Vol.88 No.5

Papillary renal cell carcinoma (PRCC), a histological subtype of renal cell carcinoma (RCC), accounts for approximately 10% of all RCC. Here, we report a case of metastatic RCC diagnosed unexpectedly in a 31-year-old female patient. Computed tomography revealed a renal abscess in the left kidney and the urine culture confirmed Escherichia coli producing extended-spectrum beta-lactamase. Despite appropriate antibiotic treatment for 2 months, the patient’s symptoms and radiological findings worsened and she underwent nephrectomy. Pathological examination confirmed type 2 PRCC and a further staging study found stage 4 (T3N1M1). Our findings indicate that malignancy should be considered in young patients with a bacteriologically confirmed urinary tract infection. (Korean J Med 2015;88:587-592)

신장이식 초기에 발생한 거대세포 바이러스성 회장염

장철영(Chul-young Chang),김혜영(Hye-young Kim),송형근(Hyung-Geun Song),장이찬(Lee-chan Jang) 대한외과학회 2006 Annals of Surgical Treatment and Research(ASRT) Vol.70 No.2

신장성 근수축 운동에 따른 손상 조직 내 면역적격세포의 변화

이호성 ( Ho Seong Lee ) 한국운동생리학회(구-한국운동과학회) 2009 운동과학 Vol.18 No.2