인체 무릎관절 윤활세포에 관한 면역전자현미경적 연구

황덕호,장가용,이왕재,박경한,이종범,Hwang, Douk-Ho,Chang, Ka-Young,Lee, Wang-Jae,Park, Kyung-Han,Lee, Jong-Bum 한국현미경학회 1996 Applied microscopy Vol.26 No.1

This study was designed to observe the ultrastructure of synoviocytes which are concerned with phagocytic function in the knee joint of the human. The synovia were dissected and were fixed for two hours in 0.2% glutaraldehyde and 4% paraformaldehyde solution and processed and finally infused in 2.3 M sucrose and 20% PVP solution. The tissues were cut with the cryoultramicrotome and labelled with primary antibodies (anti-tubulin, anti-vimentin) and secondary antibody-6 nm colloidal gold particles. The tissues were observed under transmission electronmicroscope. The results were followings. 1. In phagocytic synovial cells, the distributions of tubulin were cytoplasm, especially around vacuoles. 2. In phagocytic synovial cells, the distributions of vimentin were cytoplasm. 3. Both tubulin and vimentin were not located inside of vacuoles. On the basis of above findings, it is obvious that the phagocytic functions are concerned with tubulin, and the phagocytic synovial cells contain vimentin.

발생중인 생쥐 뇌의 열충격단백질70 mRNA 발현에 대한 조직화학적 연구

장철호(Cheol Ho Chang),임형수(Hyoung Soo Lim),권오현(Ohyun Kwon),김남희(Nam Hee Kim),박홍석(Hong Suk Park),이영일(Young Il Lee),박웅양(Woong-Yang Park),황덕호(Douk Ho Hwang),백상호(Sang Ho Baik),박경한(Kyeong Han Park) 대한해부학회 2001 Anatomy & Cell Biology Vol.34 No.3

출생 전후의 생쥐 뇌의 발생과정에서 열충격단백질70 mRNA 발현 세포의 분포 양상에 대하여 riboprobe를 이용한 하이 브리드조직화학기법 (in situ hybridization technique)을 적용하여 형태학적 연구를 시행하였다. 열충격단백질70 mRNA 양성세포가 특이적으로 관찰된 표본을 분석하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 발생 16일군에서는 열충격단백질70 mRNA 양성 반응이 척수에서 강하게, 넷째뇌실 주위의 뇌실막세포와 소뇌 등에서 는 중등도로, 대뇌겉질, 후각망울과 사이뇌와 같은 상위 중추의 세포에서는 약하게 관찰되었다. 2. 발생 18일군에서는 열충격단백질70 mRNA 양성 반응이 16일군에서보다 상위에 위치한 사이뇌 등의 중추신경계통에서도 중등도로 발현되었지만 대뇌겉질에서는 여전히 약하게 발현되었다. 3. 출생 0일군에서는 열충격단백질70 mRNA 양성 반응이 중추신경계통의 전반에 걸쳐 중등도로 또는 강하게 발현되었으며 특히 대뇌겉질에서 겉질판의 과립모양세포위층과 밑판, 해마 등에서 뚜렷한 중등도의 양성 반응이 관찰되었다. 4. 출생 2일군에서는 출생 0일군에서와 유사하였으며 대뇌겉질과 소뇌의 분화가 더욱 진행된 양상을 나타내었다. 5. 열충격단백질70 mRNA는 세포분열이 활발한 부위나 분화과정이 진행중인 부위의 세포에서 강하게 발현되었으며 발생과정이 진행됨에 따라 하위의 중추신경계통으로부터 상위의 중추신경계통으로 발현 범위가 확대되는 양상을 보였다. 이상의 결과로 미루어볼 때 열충격단백질70은 중추신경계통의 발생 및 분화에 있어서 중요한 역할을 수행할 것으로 생각된다. Using in situ hybridization technique with digoxigenin-labelled riboprobe, study on the expression of hsp 70 mRNA in the developing mouse brain was performed. The results obtained are as follows; 1. In embryonic day 16 group, cells with strong reactivity to hsp70 mRNA were found in spinal cord. In neuroepithelial layer lining fourth ventricle and external granular layer of cerebellum, moderate reactivity was observed. But the reactivity was weak in the forebrain including cerebral cortex, diencephalon and olfactory bulb. 2. In embryonic day 18 group, the regional pattern of hsp70 mRNA expression was similar to that of embryonic day 16 group. In medulla oblongata, however, stronger reactivity was found in the embryonic day 18 group. 3. In postnatal day 0 mice group, cells with moderate or strong reactivity to hsp70 mRNA were found in the overall area of central nervous system, Especially, cells with moderate reactivity were found in the dentate gyrus of hippocampus, and the supragranular cortical plate and subplate neocortex. 4. In postnatal day 2 mice group, cells with moderate or strong reactivity to hsp70 mRNA were found in the same pattern as in postnatal day 0 group. Further differentiation of cerebral cortex and cerebellum was found. 5. Strong expression of hsp70 mRNA was found in the areas with high rate of cell division. In general, the area of expression moved to more rostral area in central nervous system as development proceeds. Above results suggest that hsp70 play an important role in the development and differentiation of central nervous system.

생쥐 무릎관절 공간 발생에 있어 아포프토시스 세포에 관한 면역전자현미경적 연구

채희선,김경용,이원복,임형수,황덕호,장가용,Chae, Hee-Sun,Kim, Kyung-Yong,Lee, Won-Bok,Lim, Hyoung-Soo,Hwang, Douk-Ho,Chang, Ka-Yong 한국현미경학회 1998 Applied microscopy Vol.28 No.1

This study was designed to investigate the appearence and the characteristics of the apoptotic cells and the process of the joint cavity formation in mouse knee joint. Fetal mouse knee joints from 15 to 19 days of gestation were used. Paraffin-embedded serial sections, stained with H & E for light microscopic observation, Epon 812 embedded thin sections for electron microscopic observation and Lowicryl HM 20 embedded thin sections for immune-electron microscopic observation were prepared. Monoclonal antibodies to $\beta-tubulin$ and polyclonal antibodies to tissue transglutaminase were used for immune-electron microscopic study. The results obtained were as follows. 1. At 15 days of gestation, blood vessels, which have invaded in the mesenchymal cells, were present in the synovium, to form the joint cavity in the future. 2. At 16 days of gestation, the joint cleft was first appeared and several RBCs were present in the joint cleft. The invasion of blood vessels into the joint cleft was continuing, and apoptotic cells were present in the inner cell layer, adjacent to the joint cleft. Necrotic cells were also present in the outer cell layer; they were present 18 days of gestation, but apoptotic cells did not appear after 17 days of gestation. 3. In the apoptotic cells, transglutaminase were localized around vacuoles and the marginal site of the cytoplasm. 4. In the apoptotic cells, tubulin was around the endoplasmic reticulum and the marginal site of the cytoplasm. In the late stage of apoptotic cells, tubulin was localized diffusely in the cytoplasm. Tubulin was also strongly labeled around in the cytoplasm of the neighboring cell at which the apoptotic body was phagocytosed. Tubulin labeled particles were apparently increased in the seperated apoptotic bodies. On the basis of the above findings, it is proposed that during the development of the mouse knee joint, blood vessel invasion first occurs and then apoptosis and cell necrosis follow it. In the apoptotic cell, present in the synovium of the developing knee joint of the mouse. it is suggested that the redistribution of tubulin is associated with apoptotic process. And transglutaminase overexpressed in the apoptotic cell.

퇴행성관절염의 사람 무릎관절 윤활막에서 Tenascin 발현에 대한 면역전자현미경적 연구

임형수,최희준,이세정,황덕호,Lim, Hyoung-Soo,Choi, Hee-Joon,Lee, Se-Jeong,Hwang, Douk-Ho 한국현미경학회 2005 Applied microscopy Vol.35 No.2

사람 무릎관절의 윤활막을 대상으로 정상과 퇴행성관절염 시의 윤활막의 변화와 tenascin의 발현을 면역전자현미경적 방법으로 비교, 관찰한 결과 다음과 같은 결과를 얻을 수 있었다. 1. 정상의 윤활막과 비교하여 퇴행성관절염 시에 윤활막이 두터워지는 것은 주로 윤활분비세포의 수적인 증가에 의한 것임을 알 수 있었다. 2. Tenascin에 대한 면역금의 관찰 결과 정상의 윤활막을 구성하는 세포에서는 면역금의 표지가 관찰되지 않았다. 3. 퇴행성관절염 시 윤활막의 윤활분비세포 과립세포질 세망에서 면역금의 표지가 관찰되어 tenascin의 분비세포가 윤활분비세포임을 확인할 수 있으며, 윤활세포 사이의 바탕질의 아교섬유에서도 tenascin의 표지가 관찰되었다. 이상의 결과를 종합해 보면, 퇴행성관절염 시에 윤활막이 두터워지는 것과 병변의 진행과정에, 윤활분비세포의 수가 증가와 tenascin의 발현 증가가 관련성이 있는 것으로 생각된다. To observe the morphological changes and the expression of tenascin in synovium of human knee joint, between normal condition and degenerative arthritis, were processed by immunoelectron microscopic method. The results were summarized as follows. 1. In degenerative arthritis, the hyperplasia of synovial membrane was characterized by the increase of cell number in secretory synovial cells. 2. In normal condition, there was no marking of the immuno-gold for tenascin in synovial membrane. 3. In degenerative arthritis, the immuno-gold for tenascin were observed in endoplasmic reticulum of secretory synovial cells and extracellular matrix of synovial layer. On the basis of above findings, the hyperplasia of synovial membrane and the pathologic processes may be concerned with the increase of number of secretory synovial cells and of expression of tenascin, in degenerative arthritis.

종자중심 T세포는 기억세포인가?

이왕재(Wang Jae Lee),황덕호(Douk Ho Hwang),김중곤(Joong Gon Kim) 대한해부학회 2002 Anatomy & Cell Biology Vol.35 No.6

종자중심은 체액성 면역반응이 일어나는 중요한 장소다. 아울러 면역반응의 기억현상을 가능하게 하는 기억세포의 생 성장소로 알려져 있다. 본 연구에서는 종자중심에서 관찰되는 T세포의 양상을 관찰함으로 그 세포들이 기억 T 세포로서 의 특성을 갖추고 있는지 관찰하기 위해 특이 T세포를 추적할 수 있는 항원 myelin basic protein (MBP)을 balb/c 생쥐의 발바닥에 주사하고 이에 특이하게 반응하는 T세포들을 추적 관찰하였고 아울러 이때 분비되는 기억 T세포 표지물질들의 발현양상을 관찰하였다. 이 실험의 결과 MBP 항원 투여 후 관찰되는 Vα2양성세포는 대부분이 L3T4양성세포 (조력T세포)들이었으며 특이하게 반응하는 이 조력T세포들이 초기에는 종자중심이 아닌 T세포구역 (B세포림프소절 근처의 속겉질)에서 관찰되었으나 나중에는 종자중심 내에서 관찰되었다. 이 세포들이 발현하는 것으로 보이는 물질들 중에 1차 면역반응시에는 기억 T세포의 표지자로 IL-4가 가장 먼저(투여 후 1주일) 관찰되었고 CD69, CD2R 등이 그 이후에 관찰되었다. 2차 면역반응 시에는 항원투여 후 1일부터 모든 표지자 (IL-4, CD25, CD69, CD2R, CTLA-4)가 관찰되었으나 2차 투여 후 2주부터는 IL-4, CD25, CD69의 발현은 관찰되지 않았다. 이상의 결과들로부터 종자중심에서 관찰된 T세포들은 면역반응의 중요한 특징 중의 하나인 기억현상을 주도하는 조력 T세포들임을 강하게 암시하고 있다. Germinal center (GC) is a critical site where the humoral immune responses take place. Especially memory cells are known to be generated from the GC. In this experiment, T cells observed in the GC were studied in the aspect of memory T cells. T cells responding to myelin basic protein (MBP) antigen usually have their own specific T cell receptor complex (TCR) consisting of Vα2 and Vβ8. Therefore, MBP antigen enables to trace specific T cells reacting to MBP antigen. This experiment, in which balb/c mice were injected with MBP into footpad and the popliteal lymph nodes were removed, showed that most of Vα2± cells were L3T4± cells, and that initially they were located in the deep cortex near the B cell follicles and later they were observed in the GC. In case of the primary injection of MBP, IL-4± cells were observed for the first time, followed by appearance of CD69 and CD2R. In case of the secondary injection, all of IL-4, CD25, CD69, CD2R and CTLA-4 were observed from the 1st day after injection. However IL-4, CD25 and CD69 among them were not observed any more since 2 wks after the secondary injection. These results strongly suggest that T cells observed in the GC during the immune responses for MBP might be memory T helper cells.

신연 골형성술에서의 혈관신생

안재훈(Jae Hoon Ahn),최인호(In Ho Choi),황덕호(Douk Ho Hwang),정진엽(Chin Youb Chung),조태준(Tae-Joon Cho) 대한정형외과학회 1999 대한정형외과학회지 Vol.34 No.4

인체 무릎관절 윤활포식세포 cluster designation 표지에 관한 면역전자현미경적 연구

임형수,조국형,김용욱,박경한,황영일,장가용,황덕호,Lim, Hyoung-Soo,Cho, Kook-Hyeung,Kim, Yong-Wook,Park, Kyeong-Han,Hwang, Young-Il,Chang, Ka-Young,Hwang, Douk-Ho 한국현미경학회 2000 Applied microscopy Vol.30 No.2

사람 무릎관절 윤활막을 구성하는 윤활세포 중 윤활포식세포(phagocytic synovial cell, type A cell)의 기원에 대한 논의는 형태적으로 큰포식세포의 모습을 하고 있는 단핵포식체 계 (mononuclear phagocyte system)의 한 일부로서 아마도 골수(bone marrow)에서 기원되어졌을 것이라고 알려져 있다. 기능적으로도 LCA, HLA-DR과 Ia 항원에 양성반응을 보여 큰포식세포의 일부로 알려졌으나 아직 연구가 부족한 실정이다. 본 연구는 CD14와 활성화된 큰포식세포의 표지물로 알려진 CD105(endoglin)를 이용하여 윤활포식세포의 세포 내 발현부위를 규명하고, 기능적으로 활성화된 큰포식세포와 포식작용의 역할을 수행하는지 여부를 확인하기 위해 사람의 무릎관절에서 윤활세포들을 냉동초미세박절법을 이용한 면역조직화학 기법으로 CD14와 CB105에 대한 금표지를 하여 투과전자현미경으로 관찰한 결과 다음과 같은 결론을 얻었다. 1. CD14는 윤활포식세포의 과립세포질세망과 세포질및 가장자리, 공포 주변 부위에서 표지 되었으며 공포내에서는 표지 되지 많았다. 2. CD105(endoglin)는 윤활포식세포의 세포막 가장자리와 세포질 돌기를 따라 표지 되었으며 공포 주변 부위에서도 표지 되었으나, 공포 내에서는 표지 되지 많았다. 이상의 결과로 보아 사람 무릎관절 윤활세포층에 위치하는 윤활포식세포는 CD14와 CD105의 항원에 대한 표지를 보이므로 활성화된 큰포식세포나 포식작용의 역할을 수행하는 것으로 생각된다. This study was designed to observe the ultrastructural localization of synoviocytes, which are concerned with the function of phagocytic synovial cells (type A synoviocytes, macrophage-like synoviocytes), in the knee joint of the human for CD14 and CD105 by cryo-immune-electron microscopic technique. The synovium were dissected and fixed for two hours (in 4% paraformaldehyde and 0.1% glutaraldehyde mixture), and were immerged in 2.3 M sucrose and 20% PVP solution. Finally, they were cut with the cryoultramicrotome and labelled with primary antibodies (monoclonal mouse anti-human CD14, monoclonal mouse anti-human CD105 (endoglin) and secondary (donkey anti-mouse IgG) tagged with 6 nm colloidal gold particles. The tissues were observed under transmission electron microscope. This study was resulted as follows. 1. In the synovium of the human knee joint, CD14+ cells were identified. These cells showed phagocytic synovial cell's features. In the phagocytic synoviocyte, the distributions of CD14 were marked in the cytoplasm, around vacuoles, and in cytoplasmic process, but not detected inside of vacuoles. 2. In the synovium of the human knee joint, CD105+ cells were identified. These cells were recognized endothelial cells and phagocytic synovial cells. In the phagocytic synovial cells, the distributions of CD105 (endoglin) were marked in cytoplasic process, around vacuoles, and in cell membrane, but not detected inside of vacuoles. On the basis of above findings, it is obvious that phagocytic synovial cells were marked at CD 14 and CD 105, and might be play the role of activated macrophages or phagocytes in the synovial membrane.

한국인 정상 심장 승모판의 해부학적 구조

배태영(BAE Tae Yeong),박경한(PARK Kyeong Han),황덕호(HWANG Douk Ho),조사선(CHO Sa Sun),장가용(CHANG Ka Young),백상호(BAIK Sang Ho),이광호(LEE Kwang Ho) 대한체질인류학회 1989 대한체질인류학회지 Vol.2 No.1

한국인 정상 심장 승모 판의 해부학적 구조의 관찰 및 계측을 통해서 승모 판의 정상 구조를 기술하고 개 집술 및 심혈관 조형술에 이용될 기본 자료를 작성하기 위해성인 시체 40구(남성 26, 여성 14)의 심장을 대상으로 조상하였다. 한국인의 승모판에 대한 본 논문의 성적은 전반적으로 Ranganathan 등(1970)의 연구 성적과 일치하였으며, 후첨의 소엽이 3개인 경우가 85%로 Ranganathan 등 (1970)의 결과(92%)와 유사한 결과를 나타내었으며, 소엽들을 독립된 첨으로 취급한 Harken(1952)의 논문에서 75%에서 4개의 첩으로 구성된다는 주장과도 일치하였다. 계측대상은 승모판 윤의 둘레, 전첨 및 후첨 소엽의 폭과 넓이, 후첨의 소엽 수 등이며 이들은 남녀 및 외국인에서 연구 보고된 계측 치와 비교하여 성별, 종족별 차이점을 검토하였다.

한국인 막창자꼬리에 관한 형태계측학적 연구

박경한(Kyeong Han Park),엄미령(Uhm Mee Ryung),황영일(Young Il Hwang),황덕호(Douk Ho Hwang),장가용(Ka Young Chang) 대한체질인류학회 1996 대한체질인류학회지 Vol.9 No.1

간추림 한국인 막창자꼬리 (충수)의 형태계측학적 구조를 연구하기 위하여 1985년부터 1995년까지 서울대학교, 인하대 대학교, 중앙대학교, 경상대핵교, 충북대학교 등의 의과대학에서 해부학 실습용으로 사용된 124 구의 성인 시체를 대상으로 막창자 꼬리에 대한 계측을 실시하고 국내외의 관련 문헌 고찰을 시행한 결과 막창자꼬리의 위치는 Wakeley (1933)의 분류법을 기준무로 돌창자앞형 (prelleal type)이 2.5%, 돌창자뒤형 (postlleal type)이 37.7%, 골반영 (pelvic type)이 23.8%, 막창자아래형 (subcecal type) 이 10.7%, 막창자뒤형 (retrocecal type) 이 19.7%, 영치뼈꽂형 (promontonc type)이 5.7% 로서 돌창자뒤형이 가장 많았으며 이것은 한국인을 대상으로 한 다른 연구결과들과 잘 일치하였으며 외국의 백인 및 흑인의 연구결과와 차이점을 보였으나 일본인과는 유사한 분포를 보였다. 남녀 또는 연령에 따른 막창자꼬리의 위치 분포는 유의한 차이를 보이지 않았다. 막창자꼬리의 뿌리부분을 중심 A호 한 막창자꼬리의 장축의 시계바늘 방향을 2시 방향이 24.8% 호 가장 많았고 3시 방향도 19.8% 로서 1~3시 방향, 즉 위왼쪽 방향이 가장 많았다 고정형 (fixed form) 의 막창자꼬리는 22.1%, 자유형 (free form)의 막창자꼬리는 77.9% 로 자유형의 빈도가 더 높았다. 막창자꼬리의 고정 정도에 따른 막창자꼬리 위치의 유형은 자유형의 경우 돌창자뒤형이 37.9% 로 가장 많았으나 고정형의 경우 막창자 뒤형이 40.8% 로 가장 많았으며 고정 정도의 따라 막창자꼬리의 위치 분포는 유의한 차이를 보였다 막창자꼬리의 걸이는 평균 5.95±1.64cm 였으며 여성에서는 6.14±1.67cm, 여성에서는 5.59±1.51 cm 록서 성의 차이나 막창자꼬리 위치에 따른 경이의 유의한 차이는 없었다. 이상에서 인종간의 막창자꼬리 위치의 분포상 차이는 후천적인 요인에 의해 결정되기보다는 태아때 이미 그 위치가 결정되는 것으로 보이며 그 요인에 대해서는 막창자꼬리의 고정도 등의 체질인류학적인 구조적 요인이 관여히는 것으로 생각된다.

노화된 흰쥐 대뇌겉질에서 NOS 신경세포의 분포에 관한 면역세포화학적 연구

정윤희(Yoon Hee Chung),신정민(Chung Min Shin),이왕재(Wang Jae Lee),황덕호(Douk Ho Hwang),이병란(Byung Lan Lee),조사선(Sa Sun Cho),백상호(Sang Ho Baik),차중익(Choong Ik Cha) 대한해부학회 1999 Anatomy & Cell Biology Vol.32 No.4

Nitric oxide (NO)는 생체 내에서 수많은 생리과정에 관여하며 특히 중추신경계통에서는 신경전달물질로서 synaptic plasticity와 밀접한 관련이 있다고 알려졌다. 노화 흰쥐에서는 NO의 생성이 감소했음을 시사하는 연구들이 있지만 NO를 생성하는 세포의 노화에 따르는 형태학적 연구는 미흡한 상태이다. 본 연구에서는 노화군 흰쥐와 대조군 흰쥐의 대뇌겉질 및 해마의 각 영역에서 nitric oxide synthase (NOS) 신경세포의 분포와 형태 양상을 면역세포화학 방법과 in situ hybridization 방법을 이용하여 조사하였는데 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 대조군 흰쥐와 노화군 흰쥐에서 NOS 신경세포들은 대뇌겉질 및 해마의 전 영역에 고르게 분포되어 있었다. 2. 노화군 흰쥐에서 NOS 신경세포의 가지돌기는 가지치기 양상이 많이 감소했으며 길이도 짧아졌다. 3. 노화군 흰쥐에서 NOS 신경세포의 수가 유의하게 감소되어 있었는데 부위별로 달랐다. 그 중 50% 이상 감소된 부위는 띠겉질 (cingulate cortex), 마루엽겉질 1영역 (parietal cortex area 1), 관자엽겉질 2, 3영역 (temporal cortex area 2, 3), 뒤통수엽겉질 2영역의 내측 부분 (medial part of occipital cortex area 2), 뒤통수엽겉질 1영역의 monocular와 binocular 부분 (monocular and binocular of occipital cortex area 1), 속후각겉질 (entorhinal cortex), 해마 (hippocampus proper), 치아이랑 (dentate gyrus), subiculum 등이다. 4. 노화군 흰쥐에서 NOS 신경세포는 대조군보다 염색성이 감소되었다. 5. In situ hybridization 방법에 의하면 노화군 흰쥐에서 NOS mRNA 양성세포의 수가 대조군 흰쥐보다 감소하였다. 이상의 소견으로 미루어 볼 때 노화에 따라 NOS 신경세포 수는 감소한다는 형태학적 증거를 파악하였고 이에 따라 NO 의 생성도 감소함으로써 학습과 기억 능력의 감퇴가 수반되는 노화의 한 현상을 설명할 수 있는 일부 원인이 될 수 있으리라고 추정된다. Nitric oxide (NO) involvement has been demonstrated in mechanisms of synaptic plasticity, particularly in hippocampal long-term potentiation, a mechanism that underlies certain forms of learning and memory. Further, NO has been shown to regulate various neurotransmitters which play an important role in learning and memory. Several findings suggest that NO production may be decreased in the aged rat. Changes in the nNOS-containing neurons with aging were demonstrated by immunocytochemistry and in situ hybridization. NOS-immunoreactive cells in aged rats were present in all cortical areas and the hippocampus, and the pattern of distribution was similar to that of the control group. The number of NOS-immunoreactive cells in the cerebral cortex was significantly decreased in the aged rats, but the extent of changes was variable in each area, and ranged from mild decrease (<30%) to severe decrease (>50%). Severely decreased areas were the cingulate cortex, parietal cortex area 1, temporal cortex area 1, 2, 3, medial part of occipital cortex area 2, monocular and binocular part of occipital cortex area 1, entorhinal cortex, hippocampus proper, dentate gyrus and subiculum. Moderately decreased areas (30~50%) were frontal cortex area 1, 2, 3, parietal cortex area 2, forelimb, hindlimb, lateral part of occipital cortex area 2. Slightly decreased area was insular cortex. Morphologically, the number of dendritic branches seemed to be decreased in aged group and the length of dendrites of NOS-IR neurons showed a tendency to shorten. These results indicate the involvement of neuronal system containing NOS in the aging brain, and provide the first morphological evidence for the loss of NOS neurons in the cerebral cortex of the aged rats by immunocytochemistry. Further multidisciplinary investigations involving normal aging and neurodegenerative disease such as Alzheimer’s disease are needed to clarify the importance of nitric oxide changes in the cerebral cortex with aging.