인체 폐암조직에서 Phospholipase C-$\gamma1$의 활성화 단백, AHNAK의 발현양상

오윤정,박준성,최소연,정성철,이선민,황성철,이이형,한명호,이기범,류한영,하만준,배윤수,이서구,Oh, Yoon-Jung,Park, Chun-Seong,Choi, So-Yeon,Cheong, Seong-Cheoll,Lee, Sun-Min,Hwang, Sung-Chul,Lee, Yi-Hyeong,Hahn, Myung-Ho,Lee, Kyi-Beom,Ryu, Han 대한결핵및호흡기학회 1999 Tuberculosis and Respiratory Diseases Vol.47 No.3

배경: Phospholipase C(PLC)는 세포의 성장, 분화, 변형(transformation)과 관련된 세포내 신호 전달과정에 중추적인 역할을 하는 효소이다. 이들 중 PLC-$\gamma$는 tyrosine kinase의 인산화에 의해 주로 활성화되는 데, 최근에 phosphatidic acid(PA), phosphatidy-linositol 3, 4, 5-trisphosphate($PIP_3$), tau 단백에 의한 활성화 기전이 밝혀진 바 있다. 특히 tau 단백은 bovine brain에서 arachidonic acid와 함께 PLC-$\gamma$를 활성화시키는 것으로 알려져 PLC-$\gamma$와 $PLA_2$ 사이의 cross-talk이 이루어질 가능성이 제시되고 있다. 최근 보고에 의하면 tau 단백과 같은 기전으로 PLC-${\gamma}1$ 활성화시키는 단백이 bovine lung에서 발견되었고, 이 활성화 단백을 정제 및 클론하여 AHNAK 단백임이 확인된 바 있다. 또한 PLC-${\gamma}1$이 유방암, 대장암, 위암 등에서 증가되어 있어 발암 과정과 연관되어 있음이 보고되어 왔으나 PLC-${\gamma}1$의 활성화 단백인 AHNAK 단백에 대해서는 질병과 관련되어 연구된 것이 아직 없는 실정이며 저자 등은 폐암 조직과 정상 폐조직에서 AHNAK 단백의 발현 양상을 연구하여 폐암의 발암과정에 AHNAK 단백이 관여함을 밝히고자 하였다. 대상 및 방법: 아주대학교 병원에 내원하여 폐암으로 수술을 받은 환자의 폐암 조직과 동일 환자의 정상 폐조직에서 AHNAK 단백의 발현양상을 western blot 분석과 면역조직화학적 염색방법을 통하여 조사하였다. 결과: 14예의 편평상피암 세포조직 중 8예 (57.1 %)와 14예의 선암 세포조직 모두에서 정상 대조군에 비해 AHNAK 단백의 발현이 증가하였고, 70 kDa~200kDa의 여러가지 분자량을 가지는 띠모양으로 나타났다. 면역조직화학적 염색에서도 정상 폐조직보다 폐암 조직내에서 강한 발색반응을 보였다. 결론: PLC-${\gamma}1$의 활성화 단백인 AHNAK 단백이 폐암 조직에서 정상 조직보다 과발현된 것은, AHNAK 단백이 PLC-${\gamma}1$을 활성화시켜 폐암의 발생 기전에 관여할 수 있음을 뒷받침한다고 하겠다. Background: Phospholipase C(PLC) plays a central role in cellular signal transduction and is important in cellular growth, differentiation and transformation. There are currently ten known mammalian isozymes of PLC reported to this date. Hydrolysis of phosphatidylinositol 4,5-bisphosphate($PIP_2$) by PLC produces two important second messengers, inositol 1,4,5-trisphosphate($IP_3$) and diacylglycerol. PLC-${\gamma}1$, previously, was known to be activated mainly through growth factor receptor tyrosine kinase. Other mechanisms of activating PLC-yl have been reported such as activation through tau protein in the presence of arachidonic acid in bovine brain and activation by $IP_3$, phosphatidic acid, etc. Very recently, another PLC-${\gamma}1$ activator protein such as tau has been found in bovine lung tissue, which now is considered to be AHNAK protein. But there has been no report concerning AHNAK and its associated disease to this date. In this study, we examined the expression of the PLC-${\gamma}1$ activator, AHNAK, in lung cancer specimens and their paired normal. Methods: From surgically resected human lung cancer tissues taken from twenty-eight patients and their paired normal counterparts, we evaluated expression level of AHNAK protein using immunoblot analysis of total tissue extract Immunohistochemical stain was performed with primary antibody against AHNAK protein. Results: Twenty-two among twenty-eight lung cancer tissues showed overexpression of AHNAK protein (eight of fourteen squamous cell lung cancers, all of fourteen adenocarcinomas). The resulting bands were multiple ranging from 70 to 200 kDa in molecular weight and each band was indistinct and formed a smear, reflecting mobility shift mainly due to proteolysis during extraction process. On immunohistochemistry, lung cancer tissues showed a very heavy, dense staining with anti-AHNAK protein antibody as compared to the surrounding normal lung tissue, coresponding well with the results of the western blot Conclusion: The overexpression of PLC-${\gamma}1$ activator protein, AHNAK in lung cancer may provide evidence that the AHNAK protein and PLC-${\gamma}1$ act in concerted manner in carcinogenesis.

초등 교사들의 사회과 관련 PLC 참여경험의 의미

정민희,남상준,권정화 한국교원대학교 교육연구원 2014 敎員敎育 Vol.30 No.1

This study is aimed at identifying the meaning of PLC participation experience of elementary school teachers involved in social studies-related PLC(Professional Learning Community). Towards this end, this study attempted to establish concepts and properties of the PLC from the viewpoint of curriculum and instruction, and discuss the significance of PLC participation experience on the individual teachers' enhancement of professional expertise through experience of teachers participating in social studies-related PLC. In addition, the implication of teachers' collaborative activities represented by PLC on teacher education for teachers' professional growth and enhancement of expertise in social studies was explored. 본 연구는 사회과 관련 PLC(Professional Learning Community)에 참여 중인 초등 교사들을 대상으로 하여 PLC 참여경험의 의미를 밝혀보고자 하는 데 그 목적이 있다. 이를 위해 교과교육적 관점에서 PLC의 개념과 속성을 정립하고, 사회과 관련 PLC에 참여 중인 교사들의 경험을 통해 PLC 참여경험이 교사 개인의 사회과 전문성 신장에 어떠한 의의를 가지는지 논의해 보았으며, PLC라는 교사들의 협력적 활동이 교사들의 성장과 사회과 전문성 신장을 위한 교사교육에 시사하는 바를 탐색해 보았다.

Phospholipase C-β3 Mediates the Thrombin-induced Ca2+ Response in Glial Cells

Pann-Ghill Suh,Jong-Ik Hwang,Kum-Joo Shin,Yong-Seok Oh,Jung-Woong Choi,이지원,Daesoo Kim,Kwon-Soo Ha,신희섭,Sung Ho Ryu 한국분자세포생물학회 2005 Molecules and cells Vol.19 No.3

Phospholipase C-β (PLC-β) hydrolyses phosphatidylinositol 4,5-bisphosphate and generates inositol 1,4,5-trisphosphate in response to activation of various G protein-coupled receptors (GPCRs). Using glial cells from knock-out mice lacking either PLC-β1 [PLC-β1 (-/-)] or PLC-β3 [PLC-β3 (-/-)], we examined which isotype of PLC-β participated in the cellular signaling events triggered by thrombin. Generation of inositol phosphates (IPs) was enhanced by thrombin in PLC- β1 (-/-) cells, but was negligible in PLC-β3 (-/-) cells. Expression of PLC-β3 in PLC-β3 (-/-) cells resulted in an increase in pertussis toxin (PTx)-sensitive IPs in response to thrombin as well as to PAR1-specific peptide, while expression of PLC-β1 in PLC-β1 (-/-) cells did not have any effect on IP generation. The thrombin-induced [Ca2+]i increase was delayed and attenuated in PLC-β3 (-/-) cells, but normal in PLC-β1 (-/-) cells. Pertussis toxin evoked a delayed [Ca2+]i increase in PLC-β3 (-/-) cells as well as in PLC-β1 (-/-) cells. These results suggest that activation of PLC-β3 by pertussis toxin-sensitive G proteins is responsible for the transient [Ca2+]i increase in response to thrombin, whereas the delayed [Ca2+]i increase may be due to activation of some other PLC, such as PLC-β4, acting via PTx-insensitive G proteins.

흰쥐 뇌에서의 Inositol Phospholipid 특이성 Phospholipase C-β 동종효소들의 분포에관한 면역조직화학적 연구

황승준,김현,김용식,서영석 대한해부학회 1994 Anatomy & Cell Biology Vol.27 No.1

중이진주종에서의 Phospholipase C-β1과 Phospholipase C-γ1의 발현

송영호,홍남표,이동엽,김영도,안회영,차창일 대한이비인후과학회 1998 대한이비인후과학회지 두경부외과학 Vol.41 No.7

Regulation properties of phospholipase C$\delta$ cloned from Misgurnus mizolepis

Kim, Na-Young,Ahn, Sang-Jung,Jeon, Soo-Jin,Seo, Jung-Soo,Kim, Moo-Sang,Lee, Sang-Hwan,Je, Ju-Eun,Sung, Ji-Hea,Lee, Hyung-Ho,Lee, June-Woo,Chung, Joon-Ki The Korean Society of Fish Pathology 2007 한국어병학회지 Vol.20 No.2

Phosphoinositide-specific phospholipase Cδ (PLCδ) plays an important role in many cellular responses and is involved in the production of second messenger. The present study was conducted to characterize the catalytic and regulatory properties of the PLCδ of Misgurnus mizolepis (ML-PLCδ). The ML-PLCδ gene was cloned and expressed under according to the method of the previous report (Kim et al., 2004), and its recombinant protein was purified by successive chromatography using Ni2+-NTA affinity column. The recombinant ML-PLCδ showed a concentration-dependent PLC activity to phosphatidylinositol 4,5-bisphosphate (PIP2) or phosphatidylinositol (PI). Its activity was absolutely Ca2+-dependence, which was similar to mammalian PLCδ isozymes. The Ca2+ concentration yielding maximal activation of ML-PLCδ was 100 μM. However, the activity was decreased interestingly by a polyamine, such as spermine and spermidine. In vitro assay using cholate-micelle cell, ML-PLCδ activity was inhibited in dose-dependent manner by sphinogosine but increased by phosphocholine . In the lipid-binding assay, ML-PLCδ was strongly bound to LPA, PI(3)P, PI(4)P, PI(5)P, PI(3,5)P2, PI(4,5)P2, PI(3,4,5)P3 and PA, but it showed the low affinity to S1P, PI(3,4)P2 and PS. Taken together our results, it is suggested that the general catalytic and regulatory properties of ML-PLCδ are similar with those of mammalian PLCδ1 isozymes, but the N-terminal extended piscine phospholipase Cδ1 (ML-PLCδ) might reflect some distinctions in regulatory properties and inositol-lipid binding specificity between piscine ML-PLCδ and mammalian PLCδ isozymes.

Cortex M7 기반 PLC, HMI 간 프로토콜 모니터 시스템

김기수,이종찬,하헌성 한국컴퓨터정보학회 2020 韓國컴퓨터情報學會論文誌 Vol.25 No.6

In this paper, collecting real-time data frames that occur during RS232 communication between an HMI and PLC of automation equipment by sniffing real-time information data frames through MCU without modification of the HMI or PLC, a method is proposed that allows users to collect data without being dependent on the modification of PLC and HMI systems. The user collects necessary information from the sniffing data through the parsing operation, and the original communication interface is maintained by transmitting the corresponding sniffing frame to the destination. The MCU's UART communication interface circuit is physically designed according to the RS232 communication standard, and this additionally improves efficiency more so than an interrupt-based system by using the DMA device inside the MCU. In addition, the data frame IO operation is performed by logically separating the work of the DMA interrupt service routine from the work of the main thread using the circular queue. Through this method, the user receives the sniffing data frame between the HMI and PLC in RS232 format, and the frame transfer between PLC and HMI arrives normally at the original destination. By sniffing the data frame without further modification of the PLC and HMI, it can be confirmed that it arrives at the user system normally. 본 논문에서는 자동화 설비 장비의 HMI와 PLC간 RS232 통신 시에 발생하는 실시간 데이터 프레임의수집을 위하여, 별도의 HMI 혹은 PLC의 수정 없이 MCU를 통하여 실시간 정보 데이터 프레임을 스니핑함으로서, 사용자가 PLC, HMI 시스템의 수정 작업에 종속되지 않고 데이터를 수집할 수 있는 방법을제안한다. 사용자는 스니핑 데이터로부터 파싱작업을 통하여 필요한 정보를 수집하고 해당 스니핑프레임을 목적지로 송신함으로서 본래의 통신 인터페이스를 유지한다. RS232 통신규격으로 MCU의UART통신 인터페이스 회로를 물리적으로 설계하고, 더불어 MCU내부 DMA장치를 사용함으로서 인터럽트기반 시스템 보다 효율을 개선한다. 또한 환형큐를 사용하여 DMA인터럽트 서비스 루틴의 작업과메인 스레드의 작업을 논리적으로 분리함으로서 데이터 프레임 IO 작업 처리를 수행한다. 이 방법을통하여, 사용자는 RS232 규격으로 HMI, PLC간 스니핑 데이터 프레임을 수신하고 PLC와 HMI 간의프레임 전송이 원래의 목적지에 정상적으로 도착하며 PLC와 HMI의 추가적인 수정 없이 데이터 프레임을 스니핑 함으로서 사용자 시스템에 정상적으로 도착함을 확인할 수 있다.

소의 뇌조직 Phospholipase C의 활성화에 미치는 G-단백질의 역할

김정희,이동진,변영주 영남대학교 의과대학 1992 Yeungnam University Journal of Medicine Vol.9 No.2

소의 중추신경계의 신경전달인자에 의한 세포막에서의 정보전달 과정에 관여하는 PLC활성화에 G-단백질의 관여 여부를 관찰하기 위하여 소의 뇌조직의 PLC β, γ 및 δ를 얻어 각 isozyme의 특성을 관찰하였다. 기질용액에 phosphatidyl choline(PC)을 첨가시 PLC 각 isozyme마다 정도의 차이는 있으나 증가 양상을 보였으며 PLC δ는 100μM Ca²+농도에서 높은 활성도 증가를 보였다. 세포막 소포체를 형성하기 위하여 PIP₂기질과 PC에 detergent로 cholate와 deoxycholate농도에 따른 PLC효과 관찰에서 cholate 농도 0.2%에서 1%까지 증가할 때 효소 활성도의 지속적인 상승이 관찰되었고, deoxycholate는 농도가 0.2%에서 높았다가 0.4%에서 낮아졌고 1%까지 증가함에 따라 PLC 효소 활성도는 약간 증가하였다. 기질액에 뇌추출액을 첨가하여 cholic acid 농도에 따른 PLC의 효과를 관찰한 결과 cholic acid 농도 0.2%에서 보다 1%에서 각 isozyme 모두에서 PLC활성도가 증가하였다. 소의 여러 장기에서 PLC isozyme의 분포정도를 방사면역측정방법으로 관찰하였을 때 뇌조직에 가장 많이 분포하고 있으며 특히 PLC β, γ가 많았고, PLC δ는 부신에서 가장 많이 분포하였다. 다음으로 PLC β는 부신과 위, PLC γ는 부신과 폐순이었다. PLC효소가 활성화될 때 G-단백질의 관여여부에 관하여 cholate 0.2%와 0.1%에서 G-단백질과 GTPrS 및 PLC의 결합정도의 관찰은 조직분쇄시료를 소의 뇌 및 부신조직을 이용하여 S-GTPrS 첨가시와 단세포군 항체를 이용한 경우 모두에서 1.49% 이하의 낮은 결합 정도를 관찰하였다. 그래서 정제된 PLC isozyme과 G-단백질 Goα, Gβγ, Gmix, Giα 및 Gtα각각에 대한 효과 관찰에서 Goα와 Gβγ는 PLCβ와 δ의 활성도를 증가시켰고, PLCγ는 별 영향이 없었으며 Gmix에서는 세효소 모두 증가시켰다. Giα는 PLCβ와 γ에서만 증가하였다. Gtα는 PLCβ 및 γ에서 억제하였고 PLCδ에서는 증가 양상을 보였다. 그러므로 PLC활성화에 G-단백질의 관여가 인지되며 PLC isozyme과 G-단백질의 종류에 따라 대개의 경우 증가하는 경향이나 일부는 억제 내지는 별 영향이 없는 것으로 나타났다. The objective of the present study was to identify the characteristics of phospholipase C (PLC) isozymes purified from bovine brain and to investigate their interrelationship with G protein. The purified PLC isozymes β, γand δwere obtained and the characteristics of PLC activity on various concentrations of free Ca²+ were observed. The activity of PLC was increased with increasing Ca²+ concentration and the activity PLC δwas increased higher in the presence of phosphatidyl choline(PC) than in the abscence of PC. For vesicle formation as the structure of cell membrane, cholic acid and deoxycholic acid as detergent on phosphatidylinositol bisphosphate(PIP₂) substrate containing PC were used, and then the activity of PLC is isozymes were increased with increasing concentration of cholate, from 0.2% to 1% and were increased slightly in deoxycholate. In the PIP₂containing phospholipid and glycolipid as brain extract, the activity of PLC isozymes were checked in 0.2% - 1% cholic acid. The activities of PLC isoyzmes were continuously increased up to 1% cholic acid. The quantitation of PLC isozymes from several bovine organs by radioimmunoassay was made. Brain was the most sufficient organ in terms of amount of PLC βand δ. A large amount of PLC δwas existed in adrenal gland. The binding capacity of GTPrS and G protein was observed and other observations of the binding effect of GTPrS-G protein and PLC monoclonal Ab-Protein A from tissue homogenate with PLC were made. From the observation the binding capacity was revealed the range of O.11%- 1.49 %. The effects of each type of G protein on the percent activity of purified PLC isozymes were observed. From the observation, activities of isozymes were increased in Goα& Gmix, and the activities of PLC β and δ were increased in Gβγ and Giα. Activities of PLC βand γwere decreased in Gtα but PLC δincreased.

Genistein과 Calphostin C를 이용한 T98G 세포와 Hs 683 세포에서의 PLC활성과 세포증식의 관계에 대한 연구

최창명,김윤,김보연,양지호,이일우,정철구,강준기 대한신경외과학회 1998 Journal of Korean neurosurgical society Vol.27 No.8

과학 교사 학습공동체 특성에 대한 질적 탐구 -학교안과 학교밖 공동체 사례-

곽영순 ( Youngsun Kwak ),이기영 ( Ki-young Lee ),정은영 ( Eunyoung Jeong ) 한국과학교육학회 2021 한국과학교육학회지 Vol.41 No.4

이 연구에서는 교과교육전문성 함양을 목적으로 모인 과학교사 PLC를 학교안 PLC와 학교밖 PLC로 구분하여 그 특징을 탐색하였다. 이를 위하여 과학중점학교 7개교에 속한 과학교사 PLC와 학교밖 과학교사 PLC 3개 단체에 속한 과학교사들을 대상으로 학습공동체로서의 정체성과 동인, 활동 내용, 운영 성과, 부족하거나 지원이 필요한 부분 등에 대하여 초점집단 심층면담을 실시하였다. 주요 연구결과를 살펴보면, 학교안 과학과 PLC와 학교밖 과학과 PLC 모두 교수·학습과 관련된 전문성 개발을 위해 학습공동체를 구성한 것으로 나타났다. 연구에 참여한 학교안과 학교밖의 과학교사 학습공동체들은 모두 구성원들이 공통으로 경험하는 쟁점 문제들을 중심으로, 호혜적 참여를 통해 협력관계를 형성하는 ‘실천공동체’의 특징을 나타내었다. 한편, 쟁점 문제에서 학교안의 경우는 과학 교과 교육과정 재구성과 같은 미시적인 문제에, 학교밖의 경우는 교사로서의 전문성 향상과 같은 거시적인 문제에 천착하는 차이점을 나타내었다. 학습공동체로서의 활동과 역할의 경우 학교안과 밖의 과학교사 학습공동체들은 협업적 전문성 개발, 초임교사 멘토링과 같은 상호교학 등의 공통점을 나타내었다. 학습공동체의 영향력과 운영 성과의 경우, 학습공동체는 교사 자신뿐만 아니라, 학생과 학교문화에까지 긍정적인 영향을 미치는 것으로 나타났다. 학습공동체 지원과 관련하여 공동체 운영을 위한 물리적 여건 개선과 함께 PLC 운영을 위한 프로토콜 제공, 대학과의 연계를 통한 공동 연구나 재교육 등과 같은 소프트웨어 지원이 필요한 것으로 나타났다. 특히 대학과 PLC의 공동연구는 ‘탐구 공동체’로서 교사 학습공동체가 추구해야 할 미래지향적인 방향을 보여준다. 연구 결과를 토대로 과학과 PLC의 원활한 운영을 위한 적극적인 지원의 필요성, 과학과 PLC와 대학과의 협력 체제 구상의 필요성, 과학중점학교의 과학과 PLC의 운영 성과를 중·고등학교 과학교사 PLC에 확산하는 방안 등을 제안하였다. This study explores the characteristics of within-school and across-school science teacher professional learning communities (hereafter, PLC) qualitatively. In-depth focus group interviews were conducted with science teachers belonging to seven PLCs within the science core school and three PLCs across schools. Interview questions include identity and motivation, major activities, and outcomes of PLC, as well as shortcomings and support plans for PLC. The results include both within-school and across-school science teacher PLCs formed for professional development related to science teaching and learning. Both science PLCs participated in the study showed the characteristics of a ‘practice community’ that developed a cooperative relationship through reciprocal participation, focusing on shared issues among members. Regarding issues, within-school PLCs focused on microscopic problems such as curriculum reconstruction of subject-matter, while across-school PLCs focused on macro problems such as teacher professional development. Regarding activities and roles as PLC, within-school and across-school science PLCs shared such features as collaborative professional development, and interpersonal education such as mentoring for novice teachers. In terms of PLC’s influence and outcomes, science teacher PLCs has a positive effect not only on the teachers themselves, but also on the students and the teacher culture in the school. In addition, science teacher PLCs need improvement of the physical conditions for community operation, and software support such as protocol provision for PLC operation and joint research or re-education with universities. In particular, joint research between universities and science teacher PLCs shows the future orientation of the PLC as an ‘inquiry community’. Based on the results, the necessity of active support for science PLC, the necessity of developing a cooperative system between science teacher PLC and universities, and ways to spread the PLC of science core schools to that of general schools were proposed.