곰피추출물의 지표성분 Dieckol의 분석법 개선 및 검증

한웅호,최선일,문효,이세정,오건,진희구,오현지,김은진,김종욱,이부용,이옥환,Han, Xionggao,Choi, Sun-Il,Men, Xiao,Lee, Se-jeong,Oh, Geon,Jin, Heegu,Oh, Hyun-Ji,Kim, Eunjin,Kim, Jongwook,Lee, Boo-Yong,Lee, Ok-Hwan 한국식품위생안전성학회 2022 한국식품위생안전성학회지 Vol.37 No.3

This study was to investigate an analytical method for determining dieckol content in Ecklonia stolonifera extract. According to the guidelines of International Conference on Harmonization. Method validation was performed by measuring the specificity, linearity, precision, accuracy, limit of detection (LOD), and limit of quantification (LOQ) of dieckol using high-performance liquid chromatography-photodiode array. The results showed that the correlation coefficient of calibration curve (R²) for dieckol was 0.9997. The LOD and LOQ for dieckol were 0.18 and 0.56 ㎍/mL, respectively. The intra- and inter-day precision values of dieckol were approximately 1.58-4.39% and 1.37-4.64%, respectively. Moreover, intra- and inter-day accuracies of dieckol were approximately 96.91-102.33% and 98.41-105.71%, respectively. Thus, we successfully validated the analytical method for estimating dieckol content in E. stolonifera extract.

강원도 10종 산채류의 항산화 및 인지능력개선 효능 평가

한웅호,최선일,김민종,이옥환,Han, Xionggao,Choi, Sun-Il,Kim, Min-Jong,Lee, Ok-Hwan 한국식품영양학회 2019 韓國食品營養學會誌 Vol.32 No.6

The purpose of this study was to investigate effect of methanolic extracts of 10 kinds of wild vegetables cultivated in Gangwon province on antioxidant activity, acetylcholinesterase, and β-secretase inhibitory activities. Results showed that among the wild vegetables, Aralia elata(Miq.) Seem shoot extract exhibited the highest total phenol content (84.65±1.08 mg GAE/g) and total flavonoids content (70.77±0.55 mg RE/g), respectively. The antioxidant activity of wild vegetables extracts was measured by using 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) and 2,2'-azino-bis-(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) (ABTS) assay. Aralia elata(Miq.) Seem shoot extracts had the highest DPPH and ABTS scavenging activity (90.16%, 40.18% at 2 mg/mL). As a result, Aralia elata(Miq.) Seem shoot extract was the most effective in terms of acetylcholinesterase inhibitory activity (35.94% at 1 mg/mL). In the β-secretase activity assay, all 10 kinds wild vegetables extracts showed low inhibitory activity, and Aralia elata(Miq.) Seem shoot extract had highest inhibitory activity among the 10 wild vegetables extracts was 14.99%. Taken together, these results showed that Aralia elata(Miq.) Seem shoot extract has potential cognition improvement impact, suggesting that it may provide an effective strategy for improving cognition.

오크라 분말의 Quercetin-3-o-Gentiobioside 및 Isoquercitrin의 분석법 개선 및 검증

한웅호,최선일,문효,이세정,진희구,오현지,조세행,이부용,이옥환 한국식품위생안전성학회 2022 한국식품위생안전성학회지 Vol.37 No.2

This study aimed to investigate the validation and modify the analytical method to determine quercetin- 3-o-gentiobioside and isoquercitrin in Abelmoschus esculentus L. Moench for the standardization of ingredients in development of functional health products. The analytical method was validated based on the ICH (International Conference for Harmonization) guidelines to verify the reliability and validity there of on the specificity, linearity, accuracy, precision, detection limit and quantification limit. For the HPLC analysis method, the peak retention time of the index component of the standard solution and the peak retention time of the index component of A. esculentus L. Moench powder sample were consistent with the spectra thereof, confirming the specificity. The calibration curves of quercetin-3-o-gentiobioside and isoquercitrin showed a linearity with a near-one correlation coefficient (0.9999 and 0.9999), indicating the high suitability thereof for the analysis. A. esculentus L. Moench powder sample of a known concentration were prepared with low, medium, and high concentrations of standard substances and were calculated for the precision and accuracy. The precision of quercetin-3-o-gentiobioside and isoquercitrin was confirmed for intraday and daily. As a result, the intra-day precision was found to be 0.50-1.48% and 0.77-2.87%, and the daily precision to be 0.07-3.37% and 0.58-1.37%, implying an excellent precision at level below 5%. As a result of accuracy measurement, the intra-day accuracy of quercetin-3-o-gentiobioside and isoquercitrin was found to be 104.87-109.64% and the daily accuracy thereof was found to be 106.85-109.06%, reflecting high level of accuracy. The detection limits of quercetin-3-o-gentiobioside and isoquercitrin were 0.24 μg/mL and 0.16 μg/mL, respectively, whereas the quantitation limits were 0.71 μg/mL and 0.49 μg/mL, confirming that detection was valid at the low concentrations as well. From the analysis, the established analytical method was proven to be excellent with high level of results from the verification on the specificity, linearity, precision, accuracy, detection limit and quantitation limit thereof. In addition, as a result of analyzing the content of A. esculentus L. Moench powder samples using a validated analytical method, quercetin-3-o-gentiobioside was analyzed to contain 1.49±0.01 mg/dry weight g, while isoquercitrin contained 1.39±0.01 mg/dry weight g. The study was conducted to verify that the simultaneous analysis on quercetin-3-o-gentiobioside and isoquercitrin, the indicators of A. esculentus L. Moench, is a scientifically reliable and suitable analytical method.

표준화된 곰피추출물의 항산화 활성 및 콜레스테롤 개선 효과

한웅호,김우혁,최선일,문효,이세정,진희구,오현지,강다혜,김형빈,이부용,이옥환,Han, Xionggao,Kim, Woo-Hyeok,Choi, Sun-Il,Men, Xiao,Lee, Se-jeong,Jin, Heegu,Oh, Hyun-Ji,Kang, Dahye,Kim, HyungBin,Lee, Boo-Yong,Lee, Ok-Hwan 한국식품위생안전성학회 2021 한국식품위생안전성학회지 Vol.36 No.4

본 연구에서는 표준화된 곰피추출물의 항산화 및 콜레스테롤 개선에 대한 효능평가를 통해 건강기능식품 소재로서의 가치를 검토하기 위해 총 폴리페놀, 총 플라보노이드 및 dieckol 함량을 측정하였으며 DPPH, ABTS radical 소거능, reducing power 및 FRAP 활성을 통하여 곰피추출물의 in vitro 항산화 활성을 조사하였고 표준화된 곰피추출물의 HMG-CoA reductase 저해 활성 및 세포 내 콜레스테롤 생성 억제 효능을 평가하였다. 표준화된 곰피추출물의 총 폴리페놀, 총 플라보노이드 및 dieckol 함량은 각각 9.64±0.04 mg GAE/g, 2.72±0.08 mg RE/g, 27.42±0.66 mg/g으로 나타났다. 표준화된 곰피추출물의 in vitro 항산화활성, HMG-CoA reductase 저해활성 및 세포 내 콜레스테롤 생성 억제 효능은 농도의존적으로 증가하는 경향을 보였으며 이는 표준화된 곰피추출물에 함유되어 있는 페놀성 화합물에 기인된 효능으로 사료되며 항산화성분, 항산화 효과, 콜레스테를 개선 효능간의 상관관계가 있음을 확인하였다. 향후, 표준화된 곰피추출물에 대한 in vivo 모델에서의 전임상 연구 및 작용기전 입증되면 인체적용시험을 통해 이중기능성을 갖는 건강기능식품의 개발이 가능할 것으로 사료된다. Ecklonia stolonifera, which belongs to the family Laminariaceae, is an edible perennial brown marine alga that is widely distributed, and is rich in polyphenols, including dieckol. Here, we investigated the radical scavenging activities of E. stolonifera extract (ESE) using various in vitro models. We further evaluated the effect of ESE on the cholesterol secretion inhibition activity in HepG2 cells, as well as the hydroxymethylglutaryl-coenzyme A (HMG-CoA) reductase activity. Our results showed that the total phenol, total flavonoid, and dieckol contents of ESE were 9.64±0.04 mg GAE/g, 2.72±0.08 mg RE/g and 27.42±0.66 mg/g, respectively. The antioxidant activity of ESE increased in a dose-dependent manner. In addition, the ESE inhibited cholesterol secretion from HepG2 cells with anti-HMG-CoA reductase activity. These results suggested that ESE possesses antioxidant and anti-cholesterol activities, and can therefore be used as a preclinical bioresource for development of health functional foods.

노니 지표성분 6종과 발효노니의 면역활성 증진 효과

최선일,한웅호,문효,이세정,김용덕,나임정,성금수,이옥환 한국식품위생안전성학회 2022 한국식품위생안전성학회지 Vol.37 No.1

This study will evaluate the effect of fermented Morinda citrifolia L. extracts and its marker compoundsto provide baseline data for utilizing Morinda citrifolia L. as functional health products. Morinda citrifolia L. and six marker compounds were processed on RAW 246.7 macrophage to test for XTT Cytotoxicity, measure NitricOxide and Cyokine formation, and analyze the expression of immune marker genes. Furthermore, LPS and fermentedred ginseng extract, a common functional ingredient, are used as positive controls. Our results showed that fermentedMorinda citrifolia L and six bioactive compounds did not have any cytotoxic effect in all treatment concentrations andgroups. Among six bioactive compounds, SCP and ASE confirmed the formation of NO. In addition, the ASE treatmentgroup showed increased formation of IL-6 and IL-1β and the expression of iNOS and TNF-α. Also, fermentedMorinda citrifolia L extract activated the macrophage by enhancing the production of nitric oxide (NO), interleukin(IL)-6, and IL-1β, and the expression of COX2 compared to Morinda citrifolia L. extracts. The result of the studyshowed that Fermented Morinda citrifolia L. (Noni) and marker compound enhance the innate immunity activity andsuggested that the bioactive compound could be applied as a marker compound. Thus, Fermented Morinda citrifoliaL. (Noni) could be used as functional food material to develop immunity-enhancing products, and highly functionalmarker compounds can be utilized as the effective components. 본 연구에서는 발효노니를 건강기능식품 소재로 활용 시기초자료로 제공하고자 발효노니 추출물 및 지표성분의 면역활성 증진 효과를 평가하였다. RAW 264.7 대식세포에서 발효노니 추출물 및 지표성분 6종을 처리하여 XTT세포독성평가, Nitric Oxide 생성 측정, Cyokine 생성 측정, immune marker genes 발현분석 수행하였다. 뿐만 아니라 양성대조군으로 LPS와 기능성 원료로 사용되고 있는 발효홍삼 추출물을 사용하였다. 그 결과 모든 처리 농도 및 처리군에서 세포독성이 관찰되지 않았으며, 지표성분 6종 중 SCP 및 ASE에서 NO 생성이 증가됨을 확인하였다. 뿐만 아니라 ASE 처리군에서는 IL-6 및 IL-1β의 생성이 증가되었으며, iNOS 및 TNF-α의 immune markergenes 발현이 증가됨을 확인하였다. 발효노니 추출물 효능평가에서는 발효시 NO 생성 및 IL-6, IL-1β의 생성, COX2의 발현이 증가되는 것으로 나타났다. 이러한 연구 결과는 발효노니 추출물 및 지표성분의 선천면역 활성증가를타나내며 노니 및 발효노니 표준화 연구에서 지표성분으로 사용 가능성을 제시한다. 따라서 발효노니는 면역증진활성을 갖는 제품 개발에 있어서 유용한 기능성 식품소재로써 사용될 수 있으며, 우수한 효능을 나타내는 지표성분은 유용성분으로 이용이 가능할 것으로 사료된다.

황백의 지표성분 berberine과 palmatine의 분석법 개발과 검증 및 항산화 효능 평가

장길웅,최선일,한웅호,문효,권희연,최예은,박병우,김정진,이옥환 한국식품위생안전성학회 2020 한국식품위생안전성학회지 Vol.35 No.6

본 연구의 목적은 예로부터 약재로 사용되어 온 황백의 대표적인 지표물질 berberine 및 palmatine의 동시 분석법을 개발 및 검증하고 지표물질들의 항산화 효능을 평가하여 해당 물질들에 대한 기초자료를 제공하고자 하였다. 표 준물질들의 동시 분석법은 특이성, 직선성, 정확성, 정밀성, 검출한계 및 정량한계를 측정하여 신뢰성을 검증하였으며, 지표물질들의 항산화 활성은 FRAP 활성, reducing power 및 아질산염 소거능 실험으로 측정하였다. HPLCPDA를 이용하여 berberine과 palmatine의 혼합용액을 분 석하였을 때, 두 물질이 간섭 없이 선택적으로 분리되었 음을 확인하였다. Berberine 및 palmatine의 검량선의 상관 계수 값은 모두 0.9999로 우수한 직선성을 보여 분석에 적합함을 알 수 있었고 정확성과 정밀성은 농도를 알고 있는 황백 시료에 인위적으로 저농도, 중농도, 고농도의 표준물질 혼합용액을 첨가하여 계산하였다. 정밀성과 정확성은 일간실험 및 일내실험으로 확인하였다. Berberine 의 일간 및 일내 정밀성은 1.27-1.93%, 0.12-0.56%의 수준으로 나타났고, palmatine의 일간 및 일내 정밀성은 0.19- 2.89%, 0.36-1.52%로 % 이하의 우수한 정밀성을 나타냈으며, berberine의 일간 및 일내 정확성은 98.43-100.73%, 99.56-101.45%로 나타났고 palmatine의 일간 및 일내 정확성은 93.20-100.60%, 92.39-97.10%로 나타났다. Berberine 과 palmatine의 검출한계는 각각 0.32 μg/mL, 0.35 μg/mL 로 확인되었고 정량한계는 0.97 μg/mL, 1.06 μg/mL로 확인되었다. 분석법 검증결과, 확립된 분석법은 특이성, 직 선성, 정밀성, 정확성, 검출한계 및 정량한계가 모두 우수한 분석법임을 검증할 수 있었다. 항산화 활성은 FRAP 활성, reducing power 및 berberine과 palmatine 모두 농도 의존적으로 활성이 증가하는 것을 확인할 수 있었다. 이상의 결과를 종합하여 볼 때 황백은 추후 항산화에 도움을 주는 소재로의 적용 및 항염증 효과로 인한 피부 기능 개선 제품의 소재로서 활용도가 넓을 것으로 사료되며, 황백 내에 존재하는 항산화물질인 berberine 및 palmatine의 동시분석법을 통하여 성분의 함량을 분석하여 효능을 확인할 수 있을 것으로 사료된다. The aim of this study was to develop and validate a simultaneous analytical method for berberine and palmatine, which are representative substances of Phellodendron amurense, and to evaluate the antioxidant activity. We evaluated the specificity, linearity, precision, accuracy, limit of detection (LOD), and limit of quantification (LOQ) of analytical methods for berberine and palmatine using high-performance liquid chromatography. Our result showed that the correlation coefficients of the calibration curve for berberine and palmatine exhibited 0.9999. The LODs for berberine and palmatine were 0.32 to 0.35 μg/mL and the LOQs were 0.97 to 1.06 μg/mL, respectively. The inter-day and intra-day precision values for berberine and palmatine were from 0.12 to 1.93 and 0.19 to 2.89%, respectively. The inter-day and intra-day accuracies were 98.43-101.45% and 92.39-100.60%, respectively. In addition, the simultaneous analytical method was validated for the detection of berberine and palmatine. Moreover, we conducted FRAP and NaNO2 scavenging activity assays to measure the antioxidant activities of berberine and palmatine, and both showed antioxidant activity. These results suggest that P.amurense could be a potential natural resource for antioxidant activity and that the efficacy can be confirmed by investigating the content of the berberine and palmatine.

생물전환에 의한 감태 및 곰피 추출물의 유효성분 함량 및 아토피 피부염 개선 효과

임준석,조근희,한웅호,문효,이세정,오건,최선일,이화영,이옥환 한국식품영양과학회 2023 한국식품영양과학회지 Vol.52 No.5

Atopic dermatitis is a chronic dermatitis caused by the immune imbalance of Th1 and Th2. This study evaluates and compares alleviation of the hyperimmune response due to immune imbalance of Th1 and Th2 after exposure to Ecklonia cava (EC), Ecklonia stolonifera (ES), fermented Ecklonia cava (FEC), and fermented Ecklonia stolonifera (FES). The contents of dieckol in EC, FEC, ES and FES were determined to be 8.53±0.33 mg/g, 7.51±0.21 mg/g, 1.42±0.32 mg/g, and 0.84±0.10 mg/g, respectively. The β-glucan content in EC, FEC, ES, and FES was 24.31± 0.71 mg/g, 38.22±0.92 mg/g, 34.70±0.83 mg/g, and 58.35±0.46 mg/g, respectively. We also investigated the anti-atopic effect of EC, FEC, ES, and FES on TNF-α/IFN-γ-induced HaCaT cells by evaluating the production of MDC, TARC, and IL-6. Compared to EC and ES, exposure of TNF-α/IFN-γ-induced HaCaT cells to FEC and FES significantly reduced the production of IL-6, MDC, and TARC. The pre-treatment of HaCaT cells with FEC, and FES was observed to inhibit the TNF-α/IFN-γ-induced nuclear transcription factor, NF-κB, Jak1, and STAT1. These results indicate the potential of FEC and FES to be used as functional ingredients for improving atopic dermatitis. 본 연구에서는 표고버섯 균사체에 의해 발효된 FEC, FES의 아토피 피부염 개선효과를 EC, ES와 비교하였다. Dieckol 함량의 경우 EC 8.53±0.33 mg/g, FEC 7.51±0.21 mg/g, ES 1.42±0.32 mg/g, FES 0.84±0.10 mg/g으로 생물전환 과정을 거친 후에 dieckol 함량이 줄어드는 것을 확인하였다. 유효성분인 β-glucan의 함량은 EC 24.31±0.71 mg/g, FEC 38.22±0.92 mg/g, ES 34.70±0.83 mg/g, FES 58.35±0.46 mg/g으로 측정되었다. 이를 통해 생물전환 후의 FEC와 FES에서 유의미하게 β-glucan의 함량이 증가하였음을 확인하였다. HaCaT cell을 이용한 세포독성 실험에서는 EC, FEC, ES 그리고 FES가 25~100 μg/mL 농도에서 세포독성을 보이지 않았다. TNF-α/IFN-γ로 증가한 p- NF-κB, p-Jak1, p-STAT1의 단백질 발현량은 EC, FEC, ES, FES의 처리에 의해 감소하였으며, 특히 FEC는 p-Jak1의 단백질 발현량을 EC보다 유의적으로 감소시켰으며, FES는 p-NF-κB, p-Jak1, p-STAT1의 단백질 발현량을 ES보다 유의적으로 감소시켰다. 또한 EC, FEC, ES, FES에 의한 IL-6, MDC, TARC의 생성량은 농도 의존적으로 감소하였으며, FEC와 FES는 EC와 ES보다 유의적으로 IL-6, TARC, MDC의 생성량을 감소시켰다. 이상의 결과들을 종합해볼 때, FEC와 FES는 EC와 ES에 비해 지표성분인 dieckol 함량이 감소하였지만, β-glucan 함량이 유의적으로 증가하였고 FEC는 p-Jak1의 단백질 발현량을 EC보다 유의하게 억제하고, FES는 p-NF-κB, p-Jak1, p-STAT1의 단백질 발현량을 ES보다 유의하게 억제하여 피부면역과민반응에 주요한 cytokine과 chemokine의 생성량을 감소시켰다. 이는 FEC와 FES가 ES와 EC에 비해 아토피 피부염 개선 효과가 높음을 시사한다. 따라서 생물전환을 거친 해조류, 특히 감태와 곰피는 기능성이 향상된 소재로서 이용 가치가 있을 것으로 사료된다.

발효된 도라지 추출물의 지표성분(Platycoside E 및 Platycodin D) 분석법 검증

최예은,최선일,한웅호,문효,장길웅,권희연,박병우,김정진,이옥환 강원대학교 농업생명과학연구원 2020 강원 농업생명환경연구 Vol.32 No.2

The aim of this study was to validate an analytical method for the determination of platycoside E and platycodin D in Platycodon grandiflorum root extract. Specificity, linearity, precision, accuracy, limit of detection (LOD), and limit of quantification (LOQ) of platycoside E and platycodin D were measured by high performance liquid chromatography. Correlation coefficients of the calibration curve for platycoside E and platycodin D were 0.9999 and 0.9997, respectively. The inter-day and intra-day precision values of platycoside E and platycodin D ranged from 0.58 to 3.59% and from 0.4 to 4.77%, respectively. The inter-day nd intra-day accuracies were 94.02 to 115.73% and 94.11 to 122.82%, respectively. The LOD for platycoside E and platycodin D was 0.22 μg/mL and 0.31 μg/mL, respectively. The results validated the analytical determination of platycoside E and platycodin D in Platycodon grandiflorum root extract.

Lactobacillus plantarum CM에 의해 발효한 황백 추출물의 항산화 및 항염증 활성

장길웅,최선일,한웅호,문효,권희연,최예은,강나윤,박병우,김정진,강석남,이옥환 한국식품위생안전성학회 2021 한국식품위생안전성학회지 Vol.36 No.2

본 연구는 발효 전후 황백 시료의 항산화 활성, 피부기능 개선 효과 및 항균 활성을 연구하고 그 효능을 평가하여 발효 황백의 피부기능 개선 효능에 대한 자료를 제공하고자 하였다. 항산화 활성을 평가하기 위해 총 플라보노이드, 총 페놀 함량, FRAP, DPPH 라디칼 소거능, reducing power, 아질산염소거능 등을 측정하였고, 피부 기능 개선 효과를 확인하기 위해 LPS를 처리한 RAW 264.7 대식세포와 TRF-α/IFN-γ를 처리한 HaCaT 피부표피 세포를 바탕으로 XTT 세포독성평가, NO 생성 억제능 평가, ELISA kit를 이용한 염증성 cytokine의 생성량을 평가 하여 항염증 활성을 평가하였다. 항산화 활성의 측정 결과 발효 전 황백 시료에서는 현저히 낮은 결과를 보였으 나, 발효과정을 거치며 항산화 활성이 증가하는 결과를 확인할 수 있었다. XTT 세포독성 평가 결과, RAW 264.7 세포와 HaCaT 세포 모두 3.13, 6.25, 12.5 μg/mL의 농도에서 독성이 없음을 확인하였다. NO 생성 억제능 평가와 ELISA kit를 이용한 실험 결과 황백 시료가 발효됨에 따 라 염증반응 매개물질인 NO의 생성량이 감소하고 IL-6와 IL-1β의 발현이 현저하게 감소함을 확인할 수 있었다. 발효 전후 황백 추출물의 berberine 및 palmatine의 함량을 분석한 결과 palmatine은 검출되지 않았으며 berberine의 함량은 발효에 따라 증가함을 확인할 수 있었다. In this study we investigated the total phenolic (TP) and total flavonoid (TF) contents, in addition to the antioxidant and anti-inflammatory activities, of Phellodendron amurense extract fermented with Lactobacillus plantarum CM. The fermentation of P. amurense extract (FP) was performed using Lactobacillus plantarum CM in non-fermented P. amurense extract (NFP) during various fermentation times (5 h, 10 h, and 20 h), respectively. Our results showed that FP was higher in TP and TF contents, DPPH radical scavenging activity, ferric ion reducing antioxidant power (FRAP), and nitrite scavenging activity than those of NPF. Neither RAW 264.7 nor HaCaT cells treated with FP and NF showed any cytotoxicity up to 12.5 μg/mL. Treatment of FP (12.5 μg/mL) significantly inhibited NO production in RAW 264.7 cells and cytokine production, including IL-6 and IL-1β, in HaCaT cells. These results indicate that the enhancement of antioxidant and anti-inflammatory activities of FP is due to fermentation by Lactobacillus plantarum CM, which can be used in functional foods and cosmetics materials.

갓과 흑미강 혼합물의 항산화 활성 및 지방세포 억제 효과

임지현,임준석,한웅호,문효,오건,조근희,최선일,황운상,이옥환 한국식품영양학회 2023 韓國食品營養學會誌 Vol.36 No.4

This study was conducted to provide basic data on the antioxidant activity, inhibition of adipocyte differentiation and reactive oxygen species (ROS) production of a mixture of Brassica juncea extract (BJE) and fermented black rice fraction (BRF). We investigated the total phenol content, total flavonoid content, antioxidant effects (DPPH radical scavenging, ABTS radical scavenging, reducing power, FRAP and ORAC assay) and anti-obesity activity of the mixture in 3T3-L1 cells. Our results showed that the total phenol and flavonoid content increased with increasing BRF mixture ratio. The antioxidant activity increased as the BRF mixture ratio increased. In addition, BJE and BRF mixtures did not show any cytotoxicity during the 3T3-L1 differentiation period. During adipocyte differentiation, BJE and BRF mixtures significantly inhibited lipid accumulation and ROS production compared to the control group. These results warrant further experiments to develop an anti-obesity functional food using a mixture of BJE and BRF.