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      • 흰쥐 샘뇌하수체의 면역전자현미경적 연구 : 젖샘자극호르몬 분비세포와 성장자극호르몬 분비세포

        하상선,박경호,양남길,안의태,고정식 순천향의학연구소 1995 Journal of Soonchunhyang Medical Science Vol.1 No.2

        본 실험은 흰쥐 샘뇌하수체의 세포형태를 밝히기 위하여 이중면역금입자표지법을 이용하였다. 체중 200-250g의 Sprague Dewley계 숫흰쥐를 실험동물로 사용하였다. ether로 마취된 후 뇌하수체전엽을 적출하여 1% glutaraldehyde- 1% paraformaldehyde액으로 일차고정하였으며, 2% osmium tetroxide액에 이차고정하였다. 고정이 끝난 조직은 alcohol과 propylene oxide로 탈수한 후 araldite혼합액에 포매하였다. 포매된 조직은 LKB-V ultratome으로 60-70cm두께의 얇은 절편을 작성하여 300 mesh nickel grid에 붙인 다음 면역염색 및 이중면역금입자표지법을 시행하였다. 젖샘자극호르몬에 대한 면역염색은 sodium m-periodate로 45분간 처리한 다음, 비특이적 면역반응을 제거하기 위해서 bovine serum albumin(BSA, Sigma) 1% 용액을 사용하였으며, 완충용액으로는 Tris buffered saline, pH 8.2(TBS; 20mM Tris buffered + 20mM NaCl + 0.01% sodium azide)을 사용하였다. 일차항체는 rabbit anti ovine prolactin(ICN Chemicals)을 1 : 3,000으로 희석하여 사용하였으며, 이차항체는 biotin이 표시된 goat anti rabbit Ig G(희석비율 1 : 500, Amersham)을 사용하였고, 금입자표지는 streptavidin gold(희석비율 1 : 100, 10nm, Amersham)을 사용하였다. 성장자극호르몬에 대한 면역염색은 sodium m-periodate로 45분간 처리한 다음, 완충용액으로는 phosphate buffered saline, pH 7.4(0.01M)을 사용하였다. 비특이적 반응을 줄이기 위하여 100mM ammonium chloride로 처리한 후 rabbit anti human growth hormone(BioGenex)을 1 : 40으로 희석하여 면역 반응을 시킨후, protein A-gold(희석비율 1 : 50, 5 nm, BioCell)로 금입자표지를 하였다. 이중면역염색은 Bendayan(1982)의 방법을 변형하여 시행하였는데, grid의 한쪽 면은 젖샘분비자극호르몬의 항체, 다른 쪽 면은 성장자극호르몬의 항체로 반응시켰다. 면역염색이 끝난 절편은 uranyl acetate와 lead citrate로 염색한 후 JEM 100 CX-Ⅱ 전자현미경으로 관찰하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 흰쥐 샘뇌하수체를 이중면역금입자표지법을 이용하여 젖샘자극호르몬분비세포는 3종류, 성장자극호르몬세포는 2종류로 구분할 수 있었다. 1. 젖샘자극호르몬분비세포는 불규칙한 모양을 한 큰 분비과립(300-700 nm)을 가진 성숙세포, 크기가 다양한 둥근 분비과립(150-200 nm)을 가진 중간 세포와 크기가 작은 둥근 분비과립(100-150 nm)을 가진 미성숙세포로 나눌 수 있었다. 2. 성장자극호르몬분비세포는 크고 둥근 분비과립(200-500 nm)을 가진 제 1 형 세포와 상대적으로 작고 둥근 분비과립 (150-200 nm)을 가진 제 Ⅱ형 세포로 나눌 수 있었다. 3. 젖샘자극호르몬과 성장자극호르몬이 한 세포내에 함께 존재하는 경우는 관찰 할 수 없었다. This experiment was aimed at clarifying immunocytochemical characteristics of growth hormone cells and prolactin cells in male rat adenohypophysis, using double immunogold method. Under ether anestehesia, male rats weighing 200-250 gm were decapitated. Adenohypophysis were fixed in the 1% glutaraldehyde - 1% paraformaldehyde solution. followed by refixation in the 2%osmium tetroxide solution. Dehydrated blocks were embedded in araldite mixture. The sections were cut on a LKB V ultrotome, and ultrathin sections were placed on nickel rid(300 mesh). The section-bearing grids were floated upside down on th esolutions in a moisture chamber at room temperature. Sections were etched with a saturated solution of sodium m-periodate for 45 min. Aftr etching. sections were pretreated with 0.02M Tris buffered saline(TBS), pH 8.4, with 1% bovine serum albumin(BSA, Sigma) for 60 min, then treated with rabbit anti-sheep prolactin(ICN incubated 60 min in biotinylated goat anti-rabbit IgG(Amersham) diluted 1:100 in TBS with 0.1% BSA. Then sections were incubated on streptavidin gold rinsed with TBS with 0.1% BSA. After each step, the grids were briefly rinsed with TBS with 0.1% BSA. After the streptavidin gold step, the sections were jet washed with distilled water. According to Bendayan(1982) method, the opposite side of the grid was etched with saturated solutin of sodium m-periodate for 45 min. Aftr etching, sections were treated with 0.01M phosphate buffered saline(PBS), pH 7.4, with 0.1% BSA and 0.1M ammonium chloride for 60 min, then treated with rabbit anti-human growth hormone(BioGenex) diluted 1:40 in PBS with 0.1% BSA for overnight. Grids were incubated 60 min in protein A-gold(5 nm, BioCell) diluted 1:50 in PBS with 0.1% BSA. The sections were jet washed with distilled water. The ultrathin sections stained with uranyl acetate and lead citrate were observed with JEM 100CX II electron microscope. The results were as follow: Three types of prolactin cells and two types of growth hormone cells of the rat adenohypophysis were recognized by double immunogold electron microscopy. 1. Matrue prolactin cells are characterized by irregulary shaped large secretory granules (300-700 nm): intermediate type cells contain round granules of varying sizes(150-200 nm): and immature type cells have small round secretory granules(100-150 nm). 2. Type I growth hormone cells are characterized by large round secretory granules(200-500 nm): type II growth hormone cells are characterized by large round secretory granules(150-200 nm). 3. In the male rat adenohypophysis double immunogold labeled with 10 nm gold particles for prolactin and with 5 nm gold particles for growth hormone proved that growth hormone and prolactin were not contained in the same cell at the same time.

      • 한국형 환경영향 평가 지수 방법을 위한 국내 정규화 기준값의 산정

        허영채,서상원,하상선,이건모 한국전과정평가학회 2000 한국전과정평가학회지 Vol.2 No.1

        이 연구는 한국형 환경 영향평가 지수 방법에 적용하기 위한 국내 정규화 기준값 산정을 목적으로 하고 있다. 영향 범주는 무생물 자원고갈, 지구온난화, 오존층 고가, 산성화, 부영양화, 광화학 산화물 생성, 생태 및 인간 독성영향 범주와 국내환경 여건을 고려하여 폐기물을 포함하였다. 산정방법은 영향범주의 지리적 경계를 기준으로 산정하여 인구당량으로 나누어 표시 하는 EDIP 방법을 적용하여 영향범주 별 정규화 기준값을 산정하였다. 산정과정에서 암모니아 배출량, VOC의 오염원별 배출량, 생태독성 상웅인자, 폐기물 영향범주 등 국내의 선행연구를 보완하였고 자료원의 선택, 자료 가공, 사용된 가정 등을 명확히 제시하였다. 산정된 정규화 값을 선행된 연구들과 비교 고찰한 결과 기준연도와 지리적 경계의 차이가 결과 값에 큰 영향을 미치는 것으로 파악되었다. 기준년도와 지리적 경계가 일치하는 연구들에서는 50% 미만의 차이가 있었고 이것은 사용된 자료원과 산출 방법론에 기인하는 것으로 파악되었다. This study aimed at calculating normalization reference values for Korean Eco-indicator. For this objective, abiotic resources depletion, global worming, ozone depletion, acidification, eutrophication, photo chemical oxidant creation, eco-toxicity, human-toxicity and solid waste were selected as adequate impact categories for normalization references relating to Korean situation. EDIP method which use per-capita base expression was chosen for this study. Bridging data gab, ammonia emission, equivalency factors for various pesticides used in Korea were calculated. Selection of data sources, data processing procedures, assumptions used in this study were explicitly disclosed in order to guarantee the transparency and the consistency in the calculation of the normalization reference values. Comparison of calculated normalization references with other prior researches showed that main deviation was come from the difference in reference year and geographical boundaries between each study, and the differences were not exceed 50% if these two conditions were identical.

      • KCI등재

        전방십자인대 재건술시 골 - 슬개건 - 골에 대한 고정력의 생역학적 연구 : 간섭나사못과 사다리꼴 모양 골편의 고정력 비교연구

        이병일,나수균,하상선,신병준,최창욱 대한슬관절학회 1994 대한슬관절학회지 Vol.6 No.2

        Reconstruction of the ACL remains one of the most challenging problem on orthopaedic knee surgery. Interference fit pull-out strength is dependent on bone quality, compression of the bone plug in osseous tunnel, length of the screwthread-bone contact, direction of the ligamentous force. Rigid fixation is probalby the most important in the success of procedures during the initial stages of healing. The purpose of this study was to compare the maximum tensile strength, stiffness and linear load between 7mm x 20mm, 9mm x 20mm interference serew and trapezoid bone plug fixation methods with outside-in technique in femoral tunnel. The results were as follows. 1) 7mm interference screw(N=15) pull-out tensile strength tests showed 805.35±54.61(N) maximum tensile strength, 83.33±10.98(N/mm)stiffness and linear load 685.99±86.32(N), respectively. The failure sites were all femoral tunnel area. 2) 9mm interference screw(n=10) pull-out tensile strength tests showed 886.91±46.16(N) maximum tensile strength, 69.20±6.61(N/mm)stiffness and linear load 740.93±103.10(N), respectively. The failure sites were all femoral tunnel area(N=9), except one case of midsubstance. 3) Trapezoid bone plug(N=10)pull-out tensile strength tests showed a maximum tensile strength 1046.30±32.90(N), stiffness 72.06±4.14(N/mm), and linear load 774.57±107.26(N), respectively, The failure sites were all femoral tunnel area(N=9) which were fracture and separation on the epiphyseal scar line, except one case of substance. There was no significant difference between 7mm interference screw and 9mm interference screw but the trapezoid plug fixation shows significantly higher values than interference screw fixation in terms of maximum tensile strength, stiffness and linear load(P$lt;0.0001).

      • KCI등재

        Laminar Bone Block을 이용한 후방 요추체간 유합술

        신병준,김경제,하상선,정상훈,권권희,김연일 대한척추외과학회 1999 대한척추외과학회지 Vol.6 No.1

        연구계획 : Laminar bone block을 이용한 후방 요추체간 유합술의 결과를 후향적으로 분석하였다. 목적 : 임상적 및 방사선학적인 결과를 분석하여 이런 방법이 임상적으로 유용하게 사용되어질수 있는가에 대해 평가하여 보고자 하였다. 대상 및 방법 : 1997년 3월부터 1998년 2월까지 23명의 환자를 극돌기, 관절돌기 및 추궁판에서 얻은 블록 골을 이 용하여 후방 요추체간 유합술을 시행하였는데 모든 환자에서 1 2개월 이상 추시하여 임상적인 평가가 이루어 졌으 며 평균 연령은 49세, 평균 추시기간은 13.6개월이었으며 임상적인 평가는 김 등의 분류를 사용하였고 단순 방사선 검사에서 골 유합, 추간판 침하, 후만각의 변화 등을 평가하였다. 결과 : 임상적인 만족도는 82.6%, 방사선학적인 골 유합율은 92.3%, 평균 추간판 침하는 2.0㎜, 평균 후만각 변화는 2.2도였으며 경미한 경막 파열 2례, 척추경 나사못 파손이 1례 및 천부감염 1례 등 총 4례의 합병증이 발생하였다. 결론 : Laminar bone block을 이용한 후방 요추체간 유합술은 임상적 및 방사선학적으로 유용한 결과를 얻었으며 척추병변에서 자가장골의 골을 채취하여 골이식을 않으면서도 골유합을 얻을수 있는 훌륭한 방법으로 사료된다. Study Design : This is a retrospective study analyzing the results of posterior lumbar interbody fusion(PLIF) using laminar bone block and pedicle screw instrumentation. Objectives : To analyse the clinical and radiological results of PLIF using laminar bone block to evaluate whether this method is clinically valuable. Materials and Methods : From March 1997 to February 1998, twenty three patients were treated by PLIF using bone block obtained from spinous process, facets and lamina. All of the patient were followed up over 12 months clinically. The mean age was 49 years and mean follow-up was 13.6 months. The clinical results were evaluated by Kim’s criteria and radiological union, subsidence of disc space and change of lordotic curve were assessed by simple X-ray. Results : The satisfactory clinical result rate was 82.6% and radiological union rate was 92.3%. The mean subsidence of disc space and change of lordotic curve were 2.0㎜and 2.2 degrees. There were four complications : two minimal dural tear, one pedicle screw breakage and one superficial infection. Conclusion : PLIF using laminar bone block showed acceptable radiological union rate and clinical results. It could be a good alternative to obtain bony union without taking bone graft from the posterior ilium in various spinal lesions.

      • KCI등재후보
      • KCI등재

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