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저혈청 배지에서 인간 전골수세포(HL-60)를 이용한 tPA 생산과 세포사멸기작에 관한 연구
김현구,성기돈,김태호,안주희,함문선,박진서,이현용 한국미생물생명공학회 ( 구 한국산업미생물학회 ) 1996 한국미생물·생명공학회지 Vol.24 No.1
tPA 생산과 세포 사멸의 연구를 하기 위해서 인간 전골수세포가 배양되었다. 연속 관류 배양하에서 최대 tPA 생산량은 324 ng/ml이며 최대 세포 농도는 5.27×10 exp (6) cells/ml였다. Phorbol ester를 넣었을 때 tPA 생산량은 420 ng/ml까지 향상되었다. 형광 현미경으로 관찰했을 때, apoptosis는 세포 배양 초기부터 중반까지 우세했고 빠른 교반 속도에서도 우세했다. 그러나 necrosis는 세포배양 말기와 동결된 세포가 해동 되었을 때 우세했다. HL-60 was cultivated to produce tPA (tissue-type plasminogen activator) and study the mechanism of cell death. Maximum cell density and tPA production were obtained as 5.27×10 exp (6) cells/ml and 324 ng/ml, respectively under perfusion cultivation. tPA production was enhanced to 420 ng/ml in adding 160 nM of phorbol ester. The cells were gradually differentiated to granulocytes rather than proliferation. By Fluorescent microscope, apoptosis was prevailed except the death phase and in high agitation speed, but necrosis was prevailed in thawed cells and during the latter periods of the cultivation. It was also proved that tPA was most produced in apoptosis. To obtain higher tPA productivity, the cells must be maintained in apoptosis, not necrosis phase when the cells were dying.