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- 저자 : 이현용 ( Sung Hoon Kim (검색결과 17 건)
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수삼추출물 첨가 혼합배지에서 조제된 상황 균사체 심부배양물 다당획분의 면역활성 증진
김훈(Hoon Kim),송기윤(Ki-Yun Song),정재현(Jae-Hyun Jeong),정헌상(Heon-Sang Jeong),이현용(Hyeon-Yong Lee),유광원(Kwang-Won Yu) 한국식품영양과학회 2011 한국식품영양과학회지 Vol.40 No.1
면역활성을 증진시키기 위하여 수삼추출물(GE, 65°Bx)이 첨가된 액체배지(mushroom complete medium, MCM)에서 상황(Phellinus linteus, PL) 균사체를 배양하여 배양액과 균사체가 모두 포함된 심부배양물을 조제하고 조다당획분(CP)으로 분획하였다. MCM 부피에 대하여 GE가 15% 첨가된 혼합 액체배지에서 배양된 수삼추출물-상황 심부배양물로부터 분획된 PL-GE-15-CP는 100 μg/mL의 시료농도에서 GE-5와 10%가 첨가된 PL-GE-5와 10-CP 및 GE가 첨가되지 않은 일반-상황 심부배양물의 PL-CP보다 유의적으로 높은 마크로파지(saline 대조군의 1.45배) 및 Peyer's patch를 경유한 장관면역 활성(1.46배)을 확인할 수 있었다. 활성획분인 PL-GE-15-CP는 DEAE-Sepharose CL-6B를 이용한 분획을 통하여 PL-GE-15-CP의 다른 획분 또는 시료대조군인 PL-CP로부터 분획된 모든 획분보다 유의적으로 높은 마크로파지 활성, IL-12 생산능 및 장관면역 활성(각각 1.54, 3.96과 1.56배)을 갖는 다당획분인 PL-GE-15-CP-Ⅱ를 분리할 수 있었다. 또한, PL-GE-15-CP-Ⅱ는 동일NaCl 농도에서 분획된 시료대조군인 PL-CP-Ⅱ보다 시료농도 200 ㎍/mouse에서 colon 26-M3.1 carcinoma cell에 대하여 유의적으로 높은 암전이 억제활성도 보여주었다(대조군의 57.3% 억제활성). 한편, 활성 다당획분인 PL-GE-15-CP-Ⅱ는 주로 중성당(82.45%)과 산성당(12.99%)으로 구성되어 있었으며 구성당 분석결과에서 산성당과 함께 Ara, Man, Gal과 Glc의 중성당으로 구성되어져 있음을 확인할 수 있었다(molar ratio; 0.52:0.97:0.63:1.00:0.54). 결론적으로 GE가 첨가된 상황 심부배양물은 일반배지에서의 상황 심부배양물보다 면역활성이 높아 GE가 균사체 활성의 증진에 영향을 주고 있는 것으로 생각되며, 특히 활성성분으로 다당류가 중요하게 관여하고 있는 것으로 사료된다. Crude polysaccharide (CP) was fractionated from the submerged culture (containing both mycelia and culture broth, SC) with Phellinus linteus (PL) in mushroom complete medium (MCM) supplemented with ginseng extract (65oBx, GE) to enhance the immune activity. PL-GE-15-CP from SC cultivated in MCM supplemented with GE-15% (v/v, a ratio of MCM volume to GE) showed significantly higher macrophage stimulation (1.45 fold of the saline control at 100 ㎍/mL) than PL-GE-5 and 10-CP with GE-5 and 10%, or PL-CP from SC without GE. The potent intestinal immune system modulating activity through Peyer's patch was also obtained by PL-GE-15-CP (1.46 fold). When PL-GE-15-CP further fractionated on DEAE-Sepharose CL-6B (Cl- form), PL-GE-15-CP-II was the significantly higher than others from PL-GE-15-CP or PL-CP on macrophage stimulation, interleukin (IL)-12 production and intestinal immune system modulation (1.54, 3.96 and 1.56 fold, respectively). PL-GE-15-CP-II also had higher anti-metastatic activity against colon 26-M3.1 carcinoma cell (57.3% inhibition of tumor control, 200 μg/mouse) rather than PL-CP-II. This active fraction (PL-GE-15-CP-Ⅱ) mainly contained neutral sugar (82.45%) and uronic acid (12.99%), and component sugar analysis showed that PL-GE-15-CP-Ⅱ consisted mainly of uronic acid, Ara, Man, Gal and Glc (molar ratio of 0.52:0.97:0.63:1.00:0.54). Furthermore, the activity of GE culture was higher compared with culture without GE, indicating that GE helped to enhance the immune activity of P. linteus; also, it is assumed that the polysaccharide plays an important role in immune enhancement.
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저온 초음파 추출에 의한 Spirulina maxima 면역활성 증진
오성호(Sung Ho Oh),한재건(Jae Gun Han),하지혜(Ji Hye Ha),김영(Young Kim),정명훈(Myoung Hoon Jeong),김승섭(Seong Sub Kim),정향숙(Hyang Suk Jeong),최근표(Geun Pyo Choi),박욱연(Uk Yeon Park),강도형(Do Hyung Kang),이현용(Hyeon Yong Lee) 한국식품과학회 2009 한국식품과학회지 Vol.41 No.3
본 실험은 해수에서 배양된 Spirulina maxima를 100℃와 초음파 병행 60℃ 물 추출물, 80℃ EtOH 추출물을 이용하여 실험을 수행하였다. AOAC법에 의한 일반 조성 및 무기질, 아미노산 조성 분석결과 조 단백질과 무기질 중 나트륨이 각각 56, 60%의 비교적 높은 비율을 차지했으며, 다양한 균주의 필수 아미노산을 포함하고 있었다. 그중 피부와 관련된 leucine의 함량이 9.83%로 상대적으로 풍부하여 S. maxima 피부면역 활성 증진에 효율적인 소재의 가능성을 확인했다. 본 연구에서는 피부 면역과 인체 면역과의 밀접한 상관성이 있으므로 본 연구에서는 T 세포와 B 세포의 생육증진 및 cytokine의 분비량 측정과 NK 세포의 활성 및 항염증 효과인 hyaluronidase 저해 활성 효과를 측정하였다. 먼저 정상세포(HEK293)에 대한 세포독성 결과 인체에 큰 독성을 나타내지 않는 것으로 나타난 S. maxima를 추출조건에 따른 면역증진 효과를 비교한 결과 60℃ 초음파 병행 물 추출물이 면역 B세포와 T세포에서 각각 11.3×10sub{4} cells/mL, 12.8×10sub{4} cells/mL으로 6일째 가장 높은 생육도를 보였다, 이러한 면역 세포들이 분비하는 cytokine(IL-6, TNF-α)의 분비량은 가장 높은 생육도를 보인 60℃ 초음파 병행 물 추출물을 첨가한 B세포, T세포의 경우 IL-6와 TNF-α는 유의적으로 증가된 분비량을 보이며, 면역 및 기능성 소재로서의 활성이 뛰어난 것으로 나타났다. B세포에 각 시료를 첨가하여 배양 후 그 배양액을 NK 세포에 첨가하였을 때, 6일 동안 생육도를 관찰하였는데 시료에 대한 생육도가 증가하며, 6일째 12.40×10sub{4} cells/mL를 나타내어 11.49×10sub{4} cells/mL를 나타낸 대조군에 비해 높은 활성을 나타내었으며, 이로써 활성물질을 포함하고 있음을 알 수 있다. 또한 항염증 효과의 hyaluronidase 저해 활성 효과에서 60℃ 초음파 병행 물 추출물이 1.0mg/mL 농도일 때 62.4%의 저해 활성을 보여 100℃ 이상의 고온 추출에서 야기되는 단백질이나 미립자 활성 물질의 파괴가 최소화되고 저온 초음파 추출 시 유용성분들의 용출량 증가와 새로운 물질들의 생산 혹은 활성변형에 의한 추출을 통해 인체면역과 피부면역 활성 증진에 활용이 가능한 효율적인 소재화가 가능한 것을 확인했다. 이로써, 본 연구 논문은 S. maxima의 물질 분리보다 피부면역관련 활성을 통한 소재로서의 탐색이 주목적이므로 향후 이 추출물의 분리, 동정을 통해 피부 면역 활성도에 따라 물질의 구조 분석에 관한 연구를 보이고자 한다. The marine microalga Spirulina maxima was extracted using water or ethanol at 100 or 80℃ and by ultrasonification in water at 60℃. The ultrasonification technique generated the highest yield (19.8%). To be therapeutically useful, the extraction should yield a product with low cytotoxicity and high immunity against skin infections. The cytotoxicity of all extracts (1.0 mg/mL) was below 25%. Moreover, the cytotoxicity of the extract generated by ultrasonification was 5%. Extracts prepared in the described manners could inhibit hyaluronidase activity by up to 40% compared to the control. Increased growth of human B, T and NK cells and an increase in cytokine secretion were observed, confirming the interrelationship between both human immune and skin immune activity. The extract prepared by ultrasonification increased the growth of human B, T and NK cells up to 10.3×10sub{4} cells/mL, 11.3×10sub{4} cells/mL and 19.1×10sub{4} cells/mL, respectively. The extract prepared by ultrasonification also greatly increased the secretion of both IL-6 and TNF-α. Moreover, it was estimated that protein, Na and leucine occupy a high ratio. Accordingly, this study has confirmed that extracts prepared as described have the potential to effectively increase skin immunity.
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수삼추출물 첨가 배지에서 배양된 노루궁뎅이버섯 균사체 심부발효물 조다당획분의 면역 및 암전이 억제활성
김훈(Hoon Kim),박창규(Chang-Kyu Park),정재현(Jae-Hyun Jeong),정헌상(Heon-Sang Jeong),이현용(Hyeon-Yong Lee),유광원(Kwang-Won Yu) 한국식품영양과학회 2009 한국식품영양과학회지 Vol.38 No.11
수삼과 버섯의 새로운 용도를 개발하기 위하여, 수삼추출물이 첨가된 액체배지에서 배양된 노루궁뎅이 균사체 심부발효물의 열수추출물로부터 조다당획분을 조제하였다. 수삼추출물이 액체배지 전체양의 1%, 3%와 5% 첨가된 노루궁뎅이버섯 균사체 심부발효물의 열수추출물로부터 조다당 획분(HE-GE-CP-1, 3과 5)이 분획되었을 때, 수율은 각각 5.7, 5.1과 4.8%이었다. 이러한 조다당획분 중 HE-GECP-5(saline 대조군의 1.89배)는 HE-GE-CP-1(1.64배)과 HE-GE-CP-3(1.76배)보다 유의적으로 높은 비장세포의 마이토젠 활성을 보여주었다. 또한 HE-GE-CP-5(1.83배)는 소장의 국소 면역조직인 Peyer's patch를 경유한 골수세포 증식활성에서도 HE-CP(1.59배), HE-GE-CP-1(1.44배)과 HE-GE-CP-3(1.69배)보다 높은 활성을 나타내었으며, 항암효과로서의 암전이 억제활성 측정에서는 수삼추출물이 5% 첨가된 조다당획분에서 72.4%의 높은 암전이 억제활성도 보여주었다. 그러나 복강 내 마크로파지의 lysosomal phosphatase의 활성측정에서는 HE-GE-CP-3에서 2.03배의 가장 높은 마크로파지 자극활성을 확인할 수 있었다. 한편, 이러한 면역 및 암전이 억제활성을 갖는 조다당획분인 HE-GE-CP-5는 중성당(63.2%)과 함께 상당량의 산성당(19.3%)을 함유하였으며 단백질은 8.8%가 구성분으로 분석되었다. 이러한 결과로부터 HE-GE-CP-5는 암전이를 억제하기 위한 면역계를 자극할 수 있음이 확인되었으며, 이러한 암전이 억제의 항종양 활성은 마크로파지, 비장세포 및 Peyer's patch cell 등의 활성화 기작과 연계되어 있음을 추정할 수 있었다. To find the new use of Korean ginseng and mushroom, crude polysaccharides were prepared from submerged cultures of Hericium erinaceum in the medium supplemented with Korean ginseng extracts. When we fractionated crude polysaccharides (HE-GE-CP-1, 3, and 5) from hot-water extracts of submerged cultures of H. erinaceum with ginseng extracts (1%, 3%, and 5% addition of total medium), the yields of HE-GE-CP-1, 3, and 5 were identified at 5.7, 5.1, and 4.8%, respectively. Among crude polysaccharide fractions, HE-GE-CP-5 was significantly higher (1.89-fold of the saline control) than those of HE-GE-CP-1 (1.64-fold) or HE-GE-CP-3 (1.76-fold) on mitogenic activity of splenocytes. HE-GE-CP-5 also had the more potent bone marrow cell proliferation (1.83-fold) rather than HE-CP or HE-GE-CP-1 or HE-GE-CP-3 (1.59- or 1.44- or 1.69-fold, respectively), and anti-metastatic activity as anti-cancer effect showed the highest prophylactic value (72.4% inhibition of tumor control) in 5% supplementation of ginseng extract. However, the lysosomal phosphatase of macrophage was significantly stimulated after HE-GE-CP-3 treatment (2.03-fold). In addition, the immunostimulating and anti-metastatic crude polysaccharide, HE-GE-CP-5, contained mainly neutral sugars (63.2%) with considerable amounts of uronic acid (19.3%) and a small amount of proteins (8.8%). HE-GE-CP-5 can stimulate immune system to inhibit tumor metastasis, and its anti-tumor metastasis may be associated with macrophages, splenocytes and Peyer's patch cells activation.
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정명훈(Myoung-Hoon Jeong),김승섭(Seung-Seop Kim),하지혜(Seung-Seop Kim),김영(Ling Jin),이학주(Hak-Ju Lee),강하영(Ha-Young Kang),박성진(Sung-Jin Park),이현용(Hyeon-Yong Lee) 한국식품영양과학회 2009 한국식품영양과학회지 Vol.38 No.9
본 연구에서는 초고압 공정을 통하여 기존의 일반 열수추출공정과 비교함으로써 초고압 공정에 의한 항산화 활성 증진 및 항암활성 증진 효과를 확인하였다. 기존의 추출공정과 비교하여 높은 압력 하에서 추출수율이 증가한 것은 시료의 세포막이 비가역적으로 분해되어 막 투과성이 증가되어 물질 이동이 용이하게 되어 용매가 세포 안으로 들어가 보다 많은 성분이 세포 밖으로 쉽게 용출되어 나오는 결과라고 추정된다. DPPH radical 소거활성을 측정한 결과, 네 가지의 추출물 중 15분간 초고압 처리한 추출물의 활성이 1.0㎎/mL의 농도에서 94.56%로 가장 높은 활성을 보였고, 또한 BHA의 93.24%보다 높은 활성을 보였다. SOD 유사활성 결과를 살펴보면 15분간 초고압 처리를 한 추출물의 활성이 모든 농도에서 대조군으로 비교한 BHA의 활성보다 높았고, 열수추출의 활성보다 높은 결과를 나타내었다. 인간의 정상폐 세포인 HEL299를 이용한 세포 독성은 초음파 공정을 15분간 처리한 추출물 1.0 ㎎/mL의 농도에서 20.12%로, 일반 열수 추출물의 24.53%보다 낮은 세포독성을 나타내어 초고압 공정을 통한 세포독성 저감 효과를 확인할 수 있었다. 또한 인간 정상 신장 세포인 HEK293을 이용한 세포 독성실험에서도 1.0 ㎎/mL의 농도에서 초고압 처리를 15분 동안 한 추출물이 23.54%를 나타내어 일반 열수 추출물보다 약 3% 낮은 독성을 보였다. 암세포 억제활성 측정은 AGS, A549, MCF-7, Hep3B, Caco-2의 세포를 이용하여 실험을 하였다. 위의 4가지 암세포에서 1.0 ㎎/mL의 농도에서 70% 이상의 높은 암세포 억제 활성을 보였고, 암세포의 생육활성에 대한 정상 세포의 세포독성의 비로 나타낸 선택적사멸도는 1.0 ㎎/mL의 농도에서 4 정도로 나타났으며, 초고압 공정에 의한 추출물의 사멸도가 높게 나타났다. 본 실험 결과를 통하여 기존의 일반 열수 추출에 비해 초고압 공정을 통한 추출물의 수율향상 및 세포독성 저감 효과를 확인할 수 있었는데, 이는 초고압에 의한 고로쇠 수피 표면조직의 파괴와 성분 변화로 인한 유용물질 및 신물질의 대량 용출과 함께 독성물질이 파괴되거나 변성되어 나타난 결과라고 생각된다. 또한 항산화 활성 및 항암활성 증진효과를 확인할 수 있었는데 이를 통해 고로쇠나무의 항산화제 및 항암 신소재로의 가능성을 확인할 수 있었다. 더 나아가 초고압 공정에 의해 용출된 성분의 분리 및 성분 분석에 관한 연구가 더 필요할 것으로 사료된다. We investigated a method to improve anticancer activities of Acer mono by ultra high pressure extraction process. The extract yields by ultra high pressure were 9.49% and 9.87% for 5 min and 15 min processing time, respectively, which were relatively higher than 3~4% of conventional extraction processes due to their resid bark structure. The extract for 15 minutes extraction (HPE15) showed higher potent scavenging effect as 94.56% than the control, BHA as 93.24%. On SOD-like test, HPE15 also showed the highest activity as 38.6% at 1.0 ㎎/mL concentration. The cytotoxicity of HPE15 on normal human lung and kidney cell were below 23.54% in adding 1.0 ㎎/mL. Generally, human cancer cell growth stomach adenocarcinoma (AGS), lung adenocarcinoma (A549), breast adenocarcinoma (MCF-7), colon adenocarcinoma (Caco-2) and liver adenocarcinoma (Hep3B) were inhibited up to 75% with higher selectivity of above 4.0. High antioxidant activity of HPE15 resulted in high anticancer activity, and its activity was also due to higher yields of Acer mono by ultra high pressure extraction process. It was also proved by HPLC comparison analysis.
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Mono sodium glutamate (MSG) 발효 GABA의 수면유도 효과
김승섭(Seung-Seop Kim),오성호(Sung-Ho Oh),정명훈(Myoung-Hoon Jeong),조석철(Seok-Cheol Cho),국무창(Moo-Chang Kook),이석호(Seok-Ho Lee),변유량(Yu-Ryang Pyun),이현용(Hyeon-Yong Lee) 한국식품과학회 2010 한국식품과학회지 Vol.42 No.2
미배아 발효로부터 얻은 GABA 시료를 이용하여 양성대조군으로 사용된 우유와 doxylamine succinate, 음성대조군으로 사용된 caffeine, 일반대조군으로 사용된 증류수와 함께 실험군인 GABA 시료를 농도별로 투여하여 실험을 수행하였다. 멜라토닌 함량을 측정한 결과, 대조군의 2.607±0.410 pg/㎖에 비해 GABA 60 ㎎/㎖ 투여군은 3.243±0.154 pg/㎖, GABA 120 ㎎/㎖ 투여군은 3.425±0.182 pg/㎖, 우유에 녹인 GABA 120 ㎎/㎖ 투여군은 3.464±0.205 pg/㎖으로 나타났다. 반면에 GABA 시료의 섭취 기간에 따른 멜라토닌 호르몬의 누적효과는 유의성이 없었다. 세로토닌 함량을 측정한 결과 대조군의 4.73±0.67 ng/mL에 비해 GABA 60 ㎎/㎖ 투여군은 4.71±1.22 ng/㎖, GABA 120 ㎎/㎖ 투여군은 5.37±0.96 ng/㎖, 우유에 녹인 GABA 120 ㎎/㎖ 투여군은 6.34±0.59 pg/㎖으로 대조군의 평균값과 같거나 비교적 높은경향을 보였으며 농도별로 유의성이 있음을 확인하였다. 특히, GABA 120 ㎎/㎖ 투여시 멜라토닌과 세로토닌 모두 시판되는 수면보조제보다 높은 것으로 나타났다. Relatively large amounts of GABA can be produced by the fermentation of rice bran. Therefore, this study was conducted to investigate the effects of GABA on the secretion of melatonin and serotonin for the development of a sleep inductive compound. The secretion levels of melatonin and serotonin from mice were found to be 3.425±0.182 pg/㎖ and 5.37±0.963 ng/㎖, respectively, in response to feeding 120 ㎎/㎖ of GABA while they were 2.607±0.41 pg/㎖ in the control. The secretion of both melatonin and serotonin was increased up to the 13.51% and 34.99%, respectively, when compared to the negative control. However, the feeding of milk alone did not have a great effect on the melatonin and serotonin secretions. Conversely, feeding of milk with GABA enhanced the secretion of serotonin. The amounts of both melatonin and serotonin secreted increased with respect to the increase in GABA concentrations during feeding. Interestingly, the induction level of melatonin was relatively higher than that of serotonin in response to feeding 120 ㎎/㎖ of GABA. This is the first study to report that GABA has an ability to induce sleep related hormones in mice; therefore, it has the potential for use as a natural sleep aid.
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