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Streptomces sp. MET 0515의 균체외 Alginate lyase의 정제 및 특성
김현경,이재창,강남현,김송희,김종국,정기철,Kim, Hyun-Kyoung,Lee, Jae-Chang,Kang, Nam-Hyun,Kim, Song-Hee,Kim, Jong-Guk,Chung, Ki-Chul Korean Society of Life Science 2007 생명과학회지 Vol.17 No.5
알긴산분해효소(EC 4. 2. 2. 3)를 균체외로 생산하는 새로운 방선균을 전라남도 완도의 연안토양으로부터 분리하고 이 균주를 Streptomyces sp. MET 0515라 명명하였다. 이 균주가 생산하는 균체외 알긴산분해효소를 아세톤 침전, 음이온 교환 크로마토그래피(Q-Sepharose and DEAE-Sepharose), 젤 크로마토그래피(Sephacryl S-200 HR gel filtration chromatography)를 이용하여 정제하였다. 이 효소의 최적 활성 온도과 pH는 각각 $70^{\circ}C$와 pH 7.5이고, 온도 안정성은 $0-50^{\circ}C$, pH 안정성은 pH 6.0-9.0였다. 이 효소는 $Mn^{2+}$ 이온 첨가시에는 활성이 증가하였으며 1mM $Fe^{3+}$, 1mM EDTA, 1mM $Zn^{2+}$ 이온 첨가시에는 활성이 억제되었다. 또한 이 효소는 poly-alpha 1,4-L-guluronate와 poly-beta 1,4-D-mannuronate두 종류의 기질에 대하여 활성을 나타냈다. 따라서 본 효소는 다른 미생물 기원의 효소와 비교해 볼 때 Streptomyces sp.가 생산하는 첫번째 효소로 인정되었다. We isolated a new extracellular alginate lyase-producing microorganism, which displayed alginate-depolymerizing activity in plate assays, from coastal soils in Wando, Jeollanam-do, Korea. This alginate-depolymerizing bacterium belonged to the genus Streptomyces and it was named Streptomyces sp. MET 0515. An extracellular alginate lyase(ALY1) secreted by Streptomyces sp. MET 0515, was purified to homogeneity by a combination of acetone precipitation, anion-exchange chromatography (Q-Sepharose and DEAE-Sepharose) and Sephacryl S-200 HR gel filtration chromatography. Its molecular mass was 26 kDa as determined by SDS-PACE analysis. The enzyme had an optimal temperature of $70^{\circ}C$ for its activity, and was most active at pH 7.5. The thermal and pH stability were $0-50^{\circ}C$, and pH 6.0-9.0, respectively. The enzyme activity was stimulated by 1mM $Mn^{2+}$, and inhibited by 1mM $Fe^{3+}$, 1mM EDTA and 1mM $Zn^{2+}$. Preliminary analysis of substrate specificity showed that this alginate lyase had activity on both poly-alpha 1,4-L-guluronate and poly-beta 1,4-D-mannuronate in the alginate molecule.
기능성 소화불량증 환자의 피로도와 기혈수 변증의 상관성 분석
김현경,이준석,엄국현,이선령,김소연,허원영,김진성,류봉하,윤상협,Kim, Hyun-Kyung,Lee, Joon-Suk,Eom, Guk-Hyeon,Lee, Seon-Young,Kim, So-Yeon,Hur, Won-Young,Kim, Jin-Sung,Ryu, Bong-Ha,Yoon, Sang-Hyub 대한한방내과학회 2006 大韓韓方內科學會誌 Vol.27 No.2
Objectives: The aim of this study was to investigate the correlation between fatigue degree and Comprehensive diagnosis of Qui Xui Shui in patients with functional dyspepsia. There again, we investigated an association between scores obtained from Comprehensive diagnosis of Qui Xui Shui and state of skin sympathetic tone or cardiovascular reactivity. Methods: Subjects were 56 patients with Functional dyspepsia and 8 healthy People. Fatigue degree was assessed by questionnaires consisting of subjective complaints of fatigue. Comprehensive diagnoais of Qui Xue Shui was investigated by questionnaire and physical examination, total score and composition score were calculated from the symptom score. Skin sympathetic tone was measured by Ryodoraku Score(RS) and Cardiovascular Reactivity(CV Reactivity) was checked by Pulse diagnostic apparatus. All patients were divided into two groups by RS $40{\mu}A$(below and above) or by CV Reactivity(decreased and increased or not decreased). Results: There was highly significant correlation between Fatigue Degree and total score and each composition score of Comprehensive diagnosis of Qui Xui Shui. And total score of patients was significantly higher than that of health controls : in the patients, females than males. Significance related with the level of RS $40{\mu}Aor$ the state of CV Reactivity were not remarkable in both patients and health control group. Conclusions: Fatigue degree seems to have a special feature reflecting the state of Comprehensive Diagnosis of Qui Xui Shui in patients with functional dyspepsia.
비지터블 추출물 및 유산균 발효물의 진생사포닌 대사산물과 장건강 활성성분 효과
김현경,Kim, Hyun Kyoung 국제문화기술진흥원 2022 The Journal of the Convergence on Culture Technolo Vol.8 No.6
본 연구에서는 사과, 배, 무 등 8종 과채류를 절단하고 열수추출물과 과채류 증숙열수추출물을 제조하고 실험기질로 사용하였다. 실험기질에 홍삼추출물 1%(W/V)와 유산균발효 추출물에 유산균 8종 혼합스타터를 첨가하여 발효한 결과, ginsenosides의 패턴과 함량은 과채류 추출물군과 증숙 처리군에서는 거의 변화가 없었다. 그러나 유산균 발효군에서는 발효과정과 처리에 따라 TLC 패턴이 변하여 Rg<sub>3</sub>(S) 및 Rg<sub>5</sub>으로 전환되는 진세노사이드 함량이 증가하였다. 4종의 과채류추출물 모두에서 유산균 수(cfu)의 변화는 관찰되지 않았다. 유산균 CFU의 수는 과채류 추출물의 4가지 발효군에서 약간 감소하였으나 유익균의 생장 억제 효과는 유의하게 나타나지 않았다. 3가지 유해균의 증식억제 효과는 4가지 과채추출물에서 대장균과 슈도모나스의 증식에 영향을 받지 않았다. 그러나 살모넬라균의 증식은 억제되었으며, 이는 과채류 증숙 열수추출물 및 홍삼추출물 첨가 여부에 관계없이 과채류 추출물의 생장억제효과로 확인되었다.
홍삼함유 과채류 복합 추출물의 증숙열처리 및 유산균 발효에 의한 장관면역 활성
김현경,Kim, Hyun Kyoung 국제문화기술진흥원 2022 The Journal of the Convergence on Culture Technolo Vol.8 No.6
본 연구의 목적은 과채류 복합추출물에 소량의 홍삼을 첨가하여 증숙가열 및 유산균 발효에 의한 진세노사이드 대사산물의 활성 증가와 장내면역 활성이 현저히 개선되는지를 알아보고자 하였다. 홍삼 단독 추출물 또는 과채류복합추출물에 비해 홍삼을 함유한 과채류 복합추출물에서 시너지 효과에 의한 장내면역 활성의 증가가 관찰됨을 확인하였다. 다음으로 홍삼을 함량별로 첨가하여 유산균 발효에 따른 시너지 효과를 얻을 수 있는 홍삼의 농도를 결정하였다. 그 결과, 홍삼을 과채류 혼합물 질량에 대하여 3~10%의 질량비로 혼합하여 증숙 및 유산균 발효 추출하였을 때 시너지 효과가 나타나는 것을 확인하였다. 또한 홍삼을 함유한 과채류 복합추출물은 200㎍/ml의 농도로 처리하였을 때 홍삼이 함유되지 않은 과채류 복합추출물에 비해 NO 생성을 약 60% 억제하였으며, IL-1β의 발현은 63%, IL-6의 발현 69%, TNF-α의 발현 76% 수준으로 억제하여 장내면역 활성이 크게 향상되었음을 확인하였다.