다양한 수술방법에 의한 진성악관절강직증의 치험례

이영훈,이상철,김여갑,류동목,이백수,윤옥병,Lee, Young-Hoon,Lee, Sang-Chull,Kim, Yeo-Gab,Ryu, Dong-Mok,Lee, Baek-Soo,Yoon, Ok-Byung 대한악안면성형재건외과학회 1999 Maxillofacial Plastic Reconstructive Surgery Vol.21 No.3

TMJ ankylosis is defined as a mobile disorder of jaw such as mouth opening limitation, limitation of anterior or/and lateral movement of TMJ. Kazanjian published first clinical report about classification of TMJ ankylosis dividing with intracapsular ankylosis and extracapsular ankylosis. TMJ ankylosis is resulted from trauma, infection, metastatic tumor, irradiation, burn and etc. When TMJ ankylosis is manifested in growing period, it affects to functional disorder and development and position of mandible, so it can result in maxillofacial deformity such as facial asymmetry, micrognathia, malocclusion. For treatment of TMJ ankylosis, various surgical interventions were devised ; condylectomy, gap arthroplasty, interpositional arthroplasty and TMJ reconstruction. So, we report our results with documental study and cases of true ankylosis in our department.

흑두로 제조한 청국에서 분리된 Bacillus subtillus BB-1으로 부터 혈전용해효소 유전자 크로닝 및 특성규명

이영훈,이성호,전주미,김홍출,조용운,박기훈,최영주,갈상완,Lee Young-Hoon,Lee Sung-Ho,Jeon Ju-Mi,Kim Hong-Chul,Cho Yong-Un,Park Ki-Hoon,Choi Young-Ju,Gal Sang-Wan 한국생명과학회 2005 생명과학회지 Vol.15 No.4

흑두로 제조한 청국으로부터 혈전용해력이 우수한 균을 선발하여 동정하였으며, 그를 Bacillus subtilis BB-1로 명명하였다. 이 균은 혈전용해효소 isozyme을 적어도 5개이상 생성하는 균주로 확인되었다. 이 균으로부터 크로모좀을 분리하여 shot gun법으로 혈전용해효소 유전자를 크로닝하였으며, 이 유전자를 BSF-1이라 명명하였다. 이 유전자는 714개의 아미노산을 암호화하고 있으며 기존에 밝혀진 혈전용해효소 유전자와 상동성은 검출되지 않은 새로운 혈전용해효소 유전자였다. 혈전용해효소활성 최적 pH 및 온도는 5.0과 $35^{\circ}C$였다. 기질특이성은 적혈구 배지 또는 skim milk, gelatin등에 전혀 분해활성이 없었다. 이는 혈전만을 특이적으로 분해하는 기질특이성을 보였으며, 혈전분해효소로서의 이용가능성이 충분한 것으로 판단된다. A bacterium producing five fibrinolytic isozymes was isolated from black bean chung kuk. The bacterium was identified as Bacillus subtilis BB-1 by 16s rDNA sequence homology search. A gene out of five fibrinolytic genes in the Bacillus subtilis BB-1 was cloned by shot-gun method. A Cla I DNA fragment of B. subtilis BB-1 chromosome was cloned in to pBluescript II SK(-) and showed the fibrinolytic activity to bacterial cells. The Cla I DNA fragment was sequenced and the sequences did not show homology with gene for protease or fibrinolytic enzyme genes in other organisms. The Cla I DNA fragment was reduced to 2,142 bp by activity-guided PCR cloning method. The optimum pH and temperature of the enzyme were 5.0 and $35^{\circ}C$, respectively. Substrate specificity of the fibrinolytic enzyme was detected in skim milk, casein, gelatin and blood agar plates. The activity of the enzyme was not detected with these substrates. Taken together, this enzyme is a new fibrinolytic enzyme and may be used to prevent thrombosis and arteriosclerosis.

Bacillus subtilis BB-1으로부터 나토키나아제 유전자 크로닝 및 대량발현

이영훈,이성호,박기훈,최영주,정영기,갈상완,Lee Young-Hoon,Lee Sung-Ho,Park Ki-Hoon,Choi Young-Ju,Jeong Yong-Kee,Gal Sang-Wan 한국생명과학회 2006 생명과학회지 Vol.16 No.2

흑두청국으로부터 분리된 혈전용해력이 우수한 Bacillus subtilis BB-1(KFCC 11344P)으로부터 혈전용해효소 유전자를 PCR법에 의해 크로닝하였고 이를 BCF-1으로 명명하였다. BCF-1의 DNA 염기서열결정 결과 1,145 bp 크기의 혈전용해 효소로, 일본의 natto로부터 분리된 nattokinase 유전자와 99%의 상동성을 보임을 확인하였다. 혈전용해효소 유전자의 발현을 위하여 Bacillus 발현계인 Bacillus-E. coli의 shuttle vector인 pEB vector에 크로닝 하고 host로서 B. subtilis 168에 형질전환시켜 대량 발현시켰다. 생산된 혈전용해효소의 최 적활성 pH와 온도는 7.0과 $35^{\circ}C$로 확인되었다, 기질에 대한 분해양상을 조사한 결과 fibrin에서만 특이적으로 강한 분해가 일어났으며, skim milk에서 아주 약한 분해능을 보였으나 blood agar, gelatin, casein에서는 전혀 분해능을 보이지 않았다. 특히 blood agar plate에서 분해능이 없는 것으로 보아 혈액 내에서의 적혈구 파괴현상과 같은 부작용에 대한 위험을 배제할 수 있을 것으로 사료된다. BCF-1에 의해 생산된 혈전용해효소는 fibrin 특이적으로 활성을 나타냄을 확인할 수 있으며, 이는 임상적이나 산업적으로 적용하였을 때 부작용에 대한 위험적인 문제는 배제될 수 있으리라 생각된다. A fibrinolytic enzyme gene was isolated from Bacillus subtilis BB-1 by PCR method. Primers for PCR cloning were designed according to pre-identified gene for fibrinolytic enzymes from B. subtilis. The primer sequences were 5'-CGG ATC CGT GAG AGG CAA AAA GGT G-3' and 5'-TGA ATT CTT AAT GTG CTG CTG CTT GTC C-3' as concensus sequences of the fibrinolytic genes of Bacillus species. The PCR product was 1,145 bp and the sequence homology was 99% with nattokinase gene isolated from Japanese natto. The cloned fibrinolytic gene was reconstructed in Bacillus-E. coli shuttle vector, pEB for bulk-production. The fibrinolytic enzyme was purified by FPLC from the cloned B. subtilis 168. The optimum pH and temperature of the enzyme were 7.0 and $35^{\circ}C$, respectively. The fibrinolytic enzyme did not show any activity toward to skim milk, gelatin, casein and blood agar plate. The enzyme specific polyclonal antibody was prepared in rabbit for further assays such as detection of the gene expression in plant cells. This means that the enzyme may be used for health-care such as thrombosis without any hamful effects in the blood vessel.

Antitumor Sterol Isolated from the Fruiting Body of Pleurotus eryngii

이영훈,박기훈,이병원,조용운,최영주,갈상완,Lee Young-Hoon,Park Ki-Hun,Lee Byong-Won,Cho Yong-Un,Choi Young-Ju,Gal Sang-Wan Korean Society of Life Science 2006 생명과학회지 Vol.16 No.2

새송이버섯으로부터 활성추적법으로 항암활성이 있는 물질인 에르고스테롤 프록사이드를 분리하였다. 이 스테롤의 구조는 분광법과 NMR법으로 확인하였으며 분자식은 $C_{28}H_{44}O_3$이었다. 폐암과 난소암에 $IC_{50}$값은 각각 $7{\mu}M$과 $14{\mu}M$이었다. DNA단편화 실험에서 이 화합물은 암세포의 chromosimal DNA 를 사닥다리모양으로 분해하였고, 세포 분열주기의 억제실험에서 G1단계를 억제함을 관찰하였다. Activity-guided fractionations led to the isolation of antitumor compound, ergosterol peroxide ($5{\alpha},\;8{\alpha}-epideoxy-24(R)-methylcholesta-6,\;22-dien-3{\beta}-ol$) from the fruiting body of Pleuratus eryngii that was cultivated artificially. This sterol structure was established by using spectroscopic methods ($^1H\;and\;^{13}C$ nuclear magnetic resonance and high resolution mass spectra). The purified compound showed a molecular formular of $C_{28}H_{44}O_3$ displaying characteristic features of epidioxy sterols. The 50% inhibitory concentrations ($IC_{50}$) of ergosterol peroxide against human lung cancer cell line (A549) and human ovarian cell line (SK-OV3) were $7{\mu}M\;and\;14{\mu}M$, respectively. In the DNA fragmentation assay, the compound showed the programmed cell death causing the chromosomal DNA fragmentation. It reveals that ergosterol peroxide arrests G1 phase of the cell division cycle.

포도와 오이즙액을 이용한 동충하초(Paecilomyces japonica) 균사체 배양액의 미백효과

이영훈,박상상,이상원,이성호,박기훈,최영주,갈상완,Lee, Young-Hoon,Park, Sang-Sang,Lee, Sang-Won,Lee, Sung-Ho,Park, Ki-Hoon,Choi, Young-Ju,Gal, Sang-Wan 한국생명과학회 2006 생명과학회지 Vol.16 No.5

포도와 오이즙액에 동충하초 균사체 배양액의 미백화장품 원료로서의 이용가능성을 조사하였다. B16BL6 mouse melanoma cell에 동충하초 균사체 배양액을 배양기간 및 농도별로 처리했을 때, 15일 동안의 배양조건과 $50\;{\mu}l/ml$ (5%)의 농도로 처리하였을 때 멜라닌 생성억제 효과가 가장 높은 것을 확인하였다. In vitro tyrosinase 활성억제효과에서는 포도와 오이즙액에 동충하초 균사체 배양액을 10% 농도로 첨가시 50%의 멜라닌 생성 억제율을 보였으며, 30% 농도에서는 100% 억제를 확인하였다. 결과적으로 포도와 오이즙액에 동충하초 균사체 배양액은 멜라닌 생성의 주 효소인 tyrosinase의 작용을 억제함으로써 미백 효과를 나타내는 것을 확인하였다. 또한 세포독성실험에서 포도, 오이즙액과 그 즙액에 동충하초 균사체 배양액을 각각의 농도로 B16BL6 mouse melanoma cell에 처리 한 결과 포도, 오이즙액의 5% 처리 시에는 50% 사멸, 9% 이상에서는 100% 세포가 사멸하는 것을 확인 할 수 있었다. 그러나 포도, 오이즙액에 동충하초 균사체를 배양한 배양액은 20% 까지 처리 시에도 세포독성이 나타나지 않는 것을 확인 하였다. 따라서 포도와 오이즙액에 동충하초 균사체를 배양한 배양액은 세포 독성이 없으며, 미백 효과가 뛰어난 것으로 미백화장품 원료로서 사용가능함을 확인하였다. This study was carried out to investigate the whitening effect of mycelial culture broth of P. japonica in the mixture of cucumber and grape extracts. In the inhibition test of melanin biosynthesis of melanoma cell, B16BL6, the culture broth of P. japonica more then $50\;{\mu}l/ml$ (5%) concentration inhibited the melanin biosynthesis of the cell entirely without cytotoxicity. More then 10 days incubation of P. japonica in the mixture was required to have the inhibition activity. In vitro inhibition test of melanin biosynthesis of the culture broth of P. japonica was investigated in the concentration dependent manner of 10% to 50%. 30% concentration of the culture broth inhibited completely tyrosinase activity. In the cytotoxicity test, cucumber and grape extract itself has a strong cytotoxicity to the melanoma cell, B16Bl6. The value of $IC_{50}$ of the cucumber and grape extracts against the melanoma cells was 5% concentration. However, the culture broth of P. japonica incubated in the cucumber and grape extracts did not show the cytotoxcity up to 20% against melanoma cell, B16BL6. Therefore, we concluded that the culture broth of P. japonica in the mixture of cucumber and grape extracts can be used as a whitening cosmetic resource.

포도와 오이즙액을 이용한 동충하초(Paecilomyces japonica) 균사체 배양액의 피부 주름개선효과

이영훈,최우식,박기훈,최영주,갈상완,Lee Young-Hoon,Choi U-Sic,Park Ki-Hoon,Choi Young-Ju,Gal Sang-Wan 한국생명과학회 2006 생명과학회지 Vol.16 No.3

포도와 오이즙액에 동충하초 균사체 배양액을 화장품으로서의 이용가능성을 조사하였다. 콜라겐 생성촉진 효과에서는 사람의 섬유아세포에서 시험물질 $0.1{\sim}0.5%$ 농도에서 콜라겐 생합성을 증가시키는 것을 관찰하여 동충하초 균사체 배양액은 적절한 농도에서 세포내 콜라겐 생성을 증가시키는 것으로 판단하였다. 포도와 오이즙액에 동충하초 균사체 배양액의 항산화효과에서는 항산화제인 Vit. C와 함께 SOD 활성능을 측정한 결과 동충하초 균사체 배양액이 0.01% 부터 1.0% 범위에서 농도의존적으로 SOD 활성을 증가시켜 0.1% 에서는 약 50% 정도 1.0% 에서는 90% 정도의 슈퍼옥사이드 라디칼을 소거시키는 것으로 나타났다. 항 혈액응고제로 알려진 퀘르세틴의 함량증가에서는 최초 포도와 오이즙액보다 배양 후의 농도가 약 15배 이상 증가하여 피부의 항 혈액응고에도 효과가 있을 것으로 판단되며, 이를 인체에 대한 자극시험을 실시한 결과 30명의 피검자 모두에게서 피부자극이 전혀 일어나지 않음을 확인하여 인체에 무해한 것으로 판단되었다. 따라서 포도와 오이즙액에 동충하초 균사체 배양액은 피부에 대한 부작용이 전혀 없으며 주름개선효과 및 항산화 활성을 갖는 기능성 화장재료로서의 이용 가치가 매우 높을 것으로 사료된다. The possibility of usage as cosmetic resource of the mycelial culture broth of P. japonica in the mixture of cucumber and grape extracts was investigated. In the effect of collagen synthesis promotion in human fibroblast cells, the culture broth of P. japonica of 0.1, 0.5 and 1.0% concentration increased the amount of collagen synthesis than that of control cells. The culture broth increased the SOD activity in the concentration dependant manner of 0.01% to 1.0% in the antioxydation activity test. About 90% of superoxide radical was eliminated by 0.5% concentration of the culture supernatant in the antioxydation test. Anticoagulant quercetin in the course of mycelial growth in the mixture of cucumber and grape extract was accumulated to 15 folds than that of pre-culture. In the skin safety test of the culture broth, there is no any skin damage signal in the tested 30 people. Taken together, we concluded that the culture broth of P. japonica in the mixture of grape and cucumber extracts can be used as a cosmetic resource.

MI3 벡타 속으로 클로닝된 DNA 에 존재하는 제한효소자리의 인식

이영훈,프랜시스 제이 쉬미트 ( Young Hoon Lee,Francis J . Schmidt ) 생화학분자생물학회 1989 BMB Reports Vol.22 No.3

DNA fragments cloned in opposite orientations into M13 vectors were allowed to associate, generating partially hybridized structures containing both double-stranded insert DNA and single-stranded vector DNA. When these structure ($quot;Figure 8 DNA$quot;) were treated with restriction enzymes, HaeIII, HinfI, or Sau3AI, the insert DNA was cleaved preferentially to yield double-stranded fragments and single-stranded vector DNA. The action of Sau3AI was examined in detail; the results indicate that neither relaxation nor nonspecific cleavage of the $quot;Figure 8$quot; DNA was rate-limiting in the reaction. The BamHI site in the associated polylinker sequence of $quot;Figure 8$quot; DNA was cleaved by Sau3AI but not BamHI, suggesting that DNA structure mediated enzyme action at this site. Double-stranded fragments derived by this procedure from the insert region were used to prime dideoxy sequencing reactions in the clones from which they were derived. A sequencing scheme for long DNAs cloned into single-stranded vectors is proposed.

(Bromomethyl)phenylacetic Acids의 가용매 분해반응에 대한 Extended Grunwald-Winstein 식의 적용

이영훈,성미혜,이권엽,최송희,경진범,Lee, Young-Hoon,Seong, Mi-Hye,Lee, Kwon-Yub,Choi, Song-Hee,Kyong, Jin-Burm 대한화학회 2010 대한화학회지 Vol.54 No.3

조직 내 시스템엔지니어링 환경 구축방안

이영훈,Lee, Young Hoon 한국시스템엔지니어링학회 2009 시스템엔지니어링학술지 Vol.5 No.2

For the effective and efficient system development, it is provided of complex and diverse disciplines, analysis and design, points of views for decisions making, technical information management, assurance of products, and so on to be integrated and ensured. Systems engineering is conducted through a process and is implemented by tools based on relevant methodologies. Systems engineering environment should be provided to support the systems engineering process, method, and tools used on the project. In this paper, the essential environment in performing works in a organization applying systems engineering on the basis of system life cycle was reviewed. The present states on establishment of the systems engineering in Korea Railroad Research Institute were also examined with some reviews of other cases.

구강종양 골절제 환자의 임플란트 수복 시 연조직에 대한 고려사항

이영훈,고경호,허윤혁,박찬진,조리라,Lee, Young-Hoon,Ko, Kyung-Ho,Huh, Yoon-Hyuk,Park, Chan-Jin,Cho, Lee-Ra 대한치과보철학회 2017 대한치과보철학회지 Vol.55 No.4

구강종양을 절제한 경우 악안면 구조의 상실로 인해 발음, 저작, 심미 등 기능장애를 유발하게 되므로 기능회복을 위해 보철 수복이 필요하다. 이때 임플란트를 이용하면 보철물의 효과적인 기능 향상을 기대할 수 있다. 하지만 골절제술을 시행한 후, 이식골의 성공률과는 별개로 연조직이 감염에 취약한 형태를 갖기 쉬우며 이식골은 염증에 이환된 경우 빠른 속도로 파괴가 발생할 수 있다. 성공적인 보철치료를 위해서는 보철치료에 앞서 적절한 연조직 처치와 보철수복 후 잦은 정기검진을 통해 임플란트의 예후와 연관된 각별한 주의가 필요하다. After the resection of oral tumor, defected maxillofacial structure caused functional difficulties including phonetics, mastication and esthetic aspects. In this cases, implant retained prosthesis can contribute to the functional enhancement. Regardless of the success rate in grafted bone, however, the soft tissue usually had a shape which was susceptible to inflammation. Moreover, infected graft bone presented rapid destruction. For success of the prosthetic treatment, adequate soft tissue treatment and frequent recall check are the essential factors to the successful implant prognosis.