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        Pseudomonas sp. CB-33이 생산하는 β-Xylosidase의 특성

        유진환,김현구,김치경,임재윤 한국미생물생명공학회 ( 구 한국산업미생물학회 ) 1996 한국미생물·생명공학회지 Vol.24 No.2

        Pseudomonas sp. CB-33 균주의 배양 상등액으로부터 ammonium sulfate 침전법, PEI 침전법, DEAE-Sephadex column chromatography, gel column chromatography 그리고 preparative disc gel electrophoresis를 이용하여 β-xylosidase를 정제하였다. 정제된 효소의 Km 값은 4.6 mM이었다. 효소활성의 최적 pH는 7.0이었으며 pH 6.5~9 범위에서 안정하였다. 최적 활성온도는 45℃였으며, 각 온도에서 30분 동안 정치하였을 때 35℃까지 안정하였다. SDS-PAGE에 의해 효소의 분자량을 측정해 본 결과 약 44,000dalton이었다. HG^2+, Cu^2+ 그리고 Zn^2+는 효소활성을 저해하였고, 여러 화학변형제로 효소에 처리해 본 결과 tyrosine과 tryptophan이 효소활성에 관여하고 있을 것으로 추정된다. 여러가지 기질에 대한 특이성을 조사해 본 결과 pNPX 뿐만 아니라 pNPA도 분해하였다. Xylan에 endoxylanase만을 작용시켰을 때보다 β-xylosidase와 endoxylanase를 혼합작용 시켰을 때 xylan의 가수분해도는 약 2배 정도 증가하였다. 그리고 Pseudomonas sp. CB-33 균주가 생산하는 xylan 분해효소는 oat spelt xylan보다 birchwood xylan에 보다 효과적으로 작용하였다. The β-xylosidase was purified 99-fold from the culture supernatant of Pseudomonas sp. CB-33 by ammonium sulfate precipitation, PEI precipitation, DEAE-Sephadex column chromatography, Sephadex G-75 gel filtration chromatography and preparative disc gel electrophoresis. Molecular weight of the enzyme was estimated to be 44,000 by SDS polyacrylamide gel electrophoresis. The enzyme has a pH optimum for activity at 7.0 and is stable over pH 6.5~9.0. The optimal temperature of the enzyme was 45℃, and it enzymatic activity was completely inactivated at 55℃ for 30 min. Km value of the enzyme for p-nitrophenyl- β-D-xylopyranoside was calculated to be 4.6 mM. The effect of various reagents on the β-xylosidase activity was investigated. The enzyme activity was completely inhibited by Hg^2+, Cu^2+, and Zn^2+. The β-xylosidase was inactivated by tryptophan-specific reagent, N-bromosuccinimide and the enzyme was competitively inhibited by xylose. The β-xylosidase and endoxylanase from Pseudomonas sp. CB-33 hydrolized xylan synergically. The purified enzyme also showed α-L-arabinofuranosidase activity.

      • (+)-Chromen 유도체의 합성 및 이들의 Wnt/β-catenin pathway 억제 활성 평가

        이지현,조수현,윤은주,오유석,송규용 충남대학교 약학대학 의약품개발연구소 2013 藥學論文集 Vol.28 No.-

        (+)-Decursin and GCK062, which is decursin derivative, showed strong inhibitory activity for Wnt/β-catenin signaling and suppressed concentration-dependently PC3 cell growth. These compounds have pyranocoumarin ring as backbone and acryloyl group as side chain. In this study, we introduced (+)-chromen ring as backbond, that is more simplified than pyranocoumarin, and synthesized (+)-chromen derivatives. As a results, in most cases, (+)-chromen derivatives disappeared or lowered the inhibitory activities for Wnt/β -catenin signaling. However (+)-chromen derivative (SLC-G005, 92.0%), introduced 3,4-dihydroxycinnamoyl group, showed potent inhibitory activity, not as much as GCK062 (99.5%).

      • 안면부, 유방 및 상완부에 발생한 홍반성 루푸스 지방층염 1예

        송유근,손두식,명형준,이현정,임중규,김순호,김윤아 朝鮮大學校 附設 醫學硏究所 2004 The Medical Journal of Chosun University Vol.29 No.2

        Lupus erythematous panniculitis is a chronic inflammatory disease of subcutaneous fat that occurs in 2-3% of patients with systemic lupus erythematosus. Lupus erythematous panniculitis typically presents with firm, indurated subcutaneous nodules or plaques commonly developed in proximal extremities, trunks, head and neck. Face, breast and upper extremities involvement with lupus erythematous panniculitis has been infrequently reported. We report a case of lupus erythematous panniculitis developed in a 27-year-old female confirmed by histologic features and laboratory findings.

      • 새로운 백금착체인 tetrachloro [bis(2-chloroethyl)ethylenediamine-N,N']platinum(IV)과 cisplatin이 마우스의 면역반응에 미치는 영향

        표명윤,유경미,최지선,오현정 숙명여자대학교 약학연구소 1993 약학논문집-숙명여자대학교 Vol.9 No.-

        Effects of a new platinum complex, tetrachloro-[bis(2-chloroethyl) ethylenediamine-N,N']platinum(IV)[PtCl₄-2(CEen)] and cisplatin on the immune response were investigated. Male ICR mice were treated at the respective LD50(20% or 60% LD50) of cisplatin and PtCl₄-2(CEen). The results were as following : LD50 of PtCl₄-2(CEen) for male ICR mouse was 122.5mg/kg(i.p.) and higher than cisplatin(16.3mg/kg, i.p.). Body-, spleen-, thymus-, liver-weight, number of WBC and RBC were reduced dependently on the dose and day of administeration of cisplatin and PtCl₄-2(CEen). But these toxicities produced by PtC^-^CEen) appeared to be relatively less and to improve faster than by cisplatin. The titers of hemagglutinin and hemolysin to SRBC in mice received cisplatin and PtCl₄-2(CEen) were decreased significantly and independently on the day of antigen injection. Cisplatin and PtCl₄-2(CEen) stimulated significantly contact hypersensitivity to DNFB when administered prior to sensitization(DNFB), but suppressed slightly when administered after sensitization.

      • KCI등재

        유색미에 관한 연구 : Ⅲ. 유색미 유망계통에 대한 주요 생육 특성

        김광수,최윤표,김선택,최현구,정종태,김보경,유지홍,이희봉 충남대학교 농업과학연구소 2007 농업과학연구 Vol.34 No.2

        국내외 유색미 수집종을 돌연변이원에 의해 유기된 우수 계통과 수집종간 상호교배에 의해 선발된 CNU 20계통을 파종하여 얻어진 주요 작물학적 특성을 살펴보면 다음과 같다. 1. 간장은 유색 메벼인 CNU126 계통이 대조품종인 동진벼와 같이 가장 컸고 메성인 CNU 128계통에서 가장 작았다. 2. 주당 분얼수는 CNU3, CNU50. CNU56, CNU112 계통에서 가장 많았고 대조품종과 CNU 128 계통에서 10개 미만으로 가장 적게 나타났다. 3. 수장은 육성 계통 중 CNU88 계통에서 가장 길었으나 대조구보다 짧고, 육성계통 중에서는 CNU 126 계통이 가장 짧았다. 4. 주당 영화수는 대조구인 동진벼보다 CNU50 계통에서 2배 이상 많았고, CNU158 계통에서 가장 적게 나타났다. 5. 천립중은 CNU113 계통에서 30g이상으로 대조구와 같이 가장 무거웠고, CNU128 계통에서 20g으로 가장 적었다. 6. 주당 수량은 대조구의 26.6g에 비해 CNU50, CNU112 계통에서 두배정도 높았고, CNU128, CNU158, CNU200 계통에서 가장 낮게 타나났다. Aims of this study were carried out to develop the useful lines induced from mutation and pedigree breeding methods among the collected genetic resources from national and domestic areas. In this study, Stem height of CNU126 line and check among them were high, while CNU128 was lower than other lines. Spiklet length of CNU88 was longer, but that of CNU126 was shorter than check. Number of spiklets per plant of CNU50 among lines have twice time than check. 1,000 grains weight of CNU113 was higher than check. In yield per plant, CNU50 and CNU112 were higher than check, Dongjinbyeo.

      • 콘택트렌즈 보존 용기 유래 Acanthamoeba lugdunensis KA/L5주의 내공생세균

        정동일,공현희,김태호,황미열,유학선,윤호철,설성용 경북대학교 의학연구소 1999 경북대학교병원의학연구소논문집 Vol.3 No.1

        콘택트렌즈 보존 용기 유래 가시아메바 KA/L5주의 세포질 내에 존재하는 bacterial endosymbiont(내공생세균)를 투과전자현미경으로 관찰하여 확인하였다. 숙주인 가시아메바 KA/L5주는 형태학적으로 제2군에 속하였고, rDNA PCR-RFLP 결과 A. lugdunensis로 동정되었다. 미토콘드리아 DNA RFLP와 동위효소 분석상 이 충주는 국내 콘택트렌즈 보존용기에서 가장흔히 분리되는 type인 KA/Ll주, 국내 임상 분리주 중 하나인 KA/E2주, 내공생세균을 가지는 것으로 보고된 병원 냉각수 유래 KA/W4주 및 L3a주와 동일하거나 매우 유사한 성적을 보였다. 내공생세균은 약 1.38× 0.507㎛의 크기였고, 아메바 세포질 내에 불규칙하게 분포하고 있었으며. 그 표면에 아메바의 ribosome이 부착되어 있었다. 내공생세균을 둘러싼 lacunae나 막과 같은 구조는 관찰되지 않았다. Legionella 특이 primer를 이용한 효소중합반응(PCR)에서 내공생세균의 염색체 DNA는 증폭되지 않았다. A. lugdunensis의 우리말 이름을 담수가시아메바로 제안한다. Transmission electron microscopy of an Acanthamieba isolate (KA/L5) from a contact lens case revealed bacterial endosymbionts within cytoplasm of the amoebae, The Acanthamoeba isolate belonged to the morphological group II. Based on the polymerase chain reaction (PCR) - restriction fragment length Polymorphism (RFLP) of 18S ribosomal RNA coding DNA (rDNA), the Isolate was identified as A. lugdunensis. Strain typing by isoenzyme analysis using isoelectric focusing (IEF) and mitochondrial (Mt) DNA RFLP revealed that the isolate was closely related with KA/Ll , the most predominant type of isolates from contact lens storage cases, KA/E2, a clinical isolate, KA/W4, preciously reported to host endosymbionts, and L3a strains of A. lugdunensis. The endosymbionts were similar to those of KA/W4 In aspects that they were randomly distributed in both trophozoites and cysts, and were rod-shaped bacteria measuring approximately 1.38x 0.50㎛. But the number of endosymbionts per amoeba was significantly lower than that of KA/W4. They were neither limited by phagosomal membranes nor included In lacunae- like structure.

      • SCOPUSKCI등재

        제2형 당뇨병 동물모델인 OLETF 쥐에서 장기간 라미프릴 투여가 내당능 및 췌도 베타세포에 미치는 효과

        고승현,윤건호,김명미,안유배,송기호,유순집,손현식,차봉연,이광우,손호영,강성구 대한당뇨병학회 2002 Diabetes and Metabolism Journal Vol.25 No.6

        연구배경:최근 소개된 HOPE(Heart Outcomes Prevention Evaluation)study의 결과에 의하면, 심혈관질환이나 이에 대한 위험인자가 1가지 이상인 9,541명을 대상으로 안지오텐신 전환효소 억제제의 일종인 라미프릴을 투여하여 사망율과 뇌졸증, 심부전, 당뇨병 합병증이 개선되었을 뿐 아니라 다른 항고혈압제에 비해 새롭게 당뇨병으로 진단되는 환자가 줄었음을 보고한바 있다. 이에 저자들은 라미프릴(ramipril)을 제2형 당뇨병 동물모델에 장기간 투여함으로써 당뇨병을 예방하거나 고혈당 상태 또는 인슐린 감수성을 개선시킬수 있는지를 알아보고자 하였다. 방법:생후 24주된 체중 400∼450g의 OLETF와 LETO 쥐를 대상으로 6개월간 라미프릴 경구투여 하였고 혈압, 24시간 단백뇨 및 인슐린 내성검사를 시행하였다. 6개월 이후로는 8주간 투여군과 대조군의 체중을 비슷하게 맞추어 내당능 상태를 평가하였고 이후 다시 8주간 고농도 포도당을 투여하였다. 경구당부하검사를 시행한 후 희생시켜 조직표본을 만들어 guinea pig anti­human insulin 항체로 염색후 DAB로 발색하여 point count 법으로 베타세포를 정량하였고, 면역염색으로 췌도의 변화와 섬유화의 정도를 관찰하였다. 결과:라미프릴을 6개월간 투여하였을 때 OLETF 쥐에서 1)체중 증가가 적었으며 2)경구 당부하검사시 포도당하 면적은 의미있게 감소하였고 3)인슐린 내성검사상 Kitt가 증가되는 경향을 보였으며 4)수축기, 이완기 혈압과 24시간 단백뇨양이 의미있게 감소하였고 5)체중을 맞추면 내당능 상태가 비슷해졌다가 고농도 포도당 주입시 다시 포도당하 면적이 대조군에서 더 증가되었다. 라미프릴 투여군에서 췌도변형 및 파괴와 탈과립, 췌도내 섬유화가 감소하였다. 결론:본 실험에서는 인슐린 비의존성 당뇨병 동물 모델인 OLETF 쥐에서 당뇨병 발생 이전 단계부터 장기간 라미프릴을 투여할 경우 체중증가가 적었고, 투여군과 대조군의 체중을 맞추었을 때는 내당능상태의 차이가 없아가 고혈당 투여시 다시 투여군과 대조군에서 의미있는 차이를 보였다. 라미프릴 투여가 베타세포의 기능면에서 이로운 효과를 보일 것으로 생각되었다. 따라서 비만한 환자에서 안지오텐신 전환효소 억제제의 장기투여는 단백뇨 감소, 혈압강하 효과 이외에 체중증가의 억제 및 당뇨병 발생을 억제할 가능성을 시사한다. Background : In a Heart Outcomes Prevention Evaluation HOPE study, ramipril, a long-acting angiotensin-converting enzyme (ACE) inhibitor, significantly reduced the death rates the number of myocardial infarctions, strokes, heart failure as well as the risk of complications related to diabetes and of diabetes itself. However, it is known that ACE inhibitors improve glucose tolerance or insulin sensitivity or reduce the incidence of diabetes. Methods : 24 week-old OLETF (Otsuka Long Evans Tokushima Fatty) rats weighing 400 ~ 450 g were used in this study. 4 groups of rats were examined in parallel for 40 weeks. The OLETF rats were randomized for treatment with an aqueous solution of ramipril (5 mg/Kg) daily [OL (RMP), n=10)] and with saline [OL (CON), n=10)]. The LETO rats were also randomized in the same was as the OLETF rats (LT(RMP), n=10, LT (CON), n=10). The blood glucose level, body weight, systolic and diastolic blood pressure was assessed every month. At 3 and 6 months, the 24hrs urinary protein concentration was measured, and as insulin tolerance test and oral glucose tolerance test were conducted in all experimental groups. After 6 months, the body·weight was matched for 2 months in each corresponding group. Subsequently, a 15% sucrose loading was done for 2 months. After the glucose tolerance test, the pancreas was excised and immuno histochemical staining was conducted for insulin to quantify the beta cell mass by a point-counting method. In addition, the islet morphology was evaluated in the pancreas. Results : Ramipril treatment for a period of 6 months improved the 2hr blood glucose level, the area under the glucose curve in the oral glucose tolerance test, insulin sensitivity in addition to lowering significantly systolic and diastolic blood pressure and 24hrs urinary protein level significantly in OLETF rats. Of note, a lower weight gain was observed in both the ramipril-treated animals at 6 months. After weight matching, the AUC g and 2hr blood glucose level values were similar between the corresponding groups, but a 15% sucrose loading worsened the AUC g value. Histologically, the islets were less disorganized and the extent of fibrosis was lower in the ramipril-treated OLETF rats in the trichrome stain. Conclusion : Long-term treatment of ramipril, a long acting angiotensin-converting enzyme inhibitor may be useful for suppressing weight gain and proteinuria in addition to having a protective effect on the islet to harmful stimuli such as hyperglycemia (J Kor Diabetes Asso 25:469~482, 2001).

      • Gullian Barre Syndrome 患者 1例에 대한 症例報告

        임승민,안정조,최영,조현경,김민상,유병찬,오병렬,김윤식,설인찬 대전대학교 한방병원 2002 惠和醫學 Vol.11 No.1

        Gullian Barre Syndrome is an acute symmetric polyradiculoneuropathy that typically presents as a progressive flaccid paralysis. The pathology is believed to be caused by both cellular and humoral immune processes The possibility of death is 3-5% and About 20% of patients require mechanical ventilaton. Recently We have experienced a patient who had suspected Gullian Barre Syndrome for 60days, his condition weakness and pain was impoved through the herb and acupucture Therefore I reported it for the treatment.

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