세포질내 정자주입법(ICSI)에 있어서 정자흡입 및 난자내 주입방법에 관한 연구

이택후,김항진,송건호,김대근,전상식,박윤규,서태광,전병균,류은경,이은숙,문진수,김광철 경북대학교 의학연구소 2000 경북대학교병원의학연구소논문집 Vol.4 No.1

Study on Method of Sperm Aspiration and Injection into an Oocyte in Intracytoplasmic Sperm Injection(ICSI) Immobilization of spermatozoa prior to intracytoplasmic sperm iniection(ICSI) sometimes results in crooked tail and this makes it difficult to aspirate sperm into an injection pipette tail first. Head-first sperm aspiration into an injection pipette avoid this problem due to the bigger size of the sperm head. The effect of head or tail-first sperm injection into an oocyte on fertilization cleavage, percentage of grade I embryos and development to blastocyst stage in ICSI program has been studied. A single living immobilized spermatozoa from oligoasthenozoospermic patient was injected into an oocyte head-first or tail-first according to the treatment. Eighteen hours after microinjection, oocytes ware inspected for survival and fertilization Fertilized oocytes with two pronuclei were cultured in 30μl drop of mHTF supplemented with 10% heat-inactivated follicular fluid(FF) at 37℃. On day 2. embryo transfer was performed with cleaved embryos. The remaining 2-8 cell stage embryos were co-cultured with BRL cells in mHTF + 10% FF for 72 hours and the developmental stage was observed. The data were analyzed by Analysis of Variance. A total of 164 oocytes from 36 cycles were assigned to earth treatment and ICSI was performed(88 head-first, tail-first). The rates of normal fertilization were 81.8% and 76.3% for head-first and tail-first, respectively. Of the fertilized oocytes, the percentage of cleaved embryos and the percentage of grade 1 embryo among cleaved embryos were 88.9% and 68.8%, 93.1% and 74.1% for head-first and tail-first, respectively. Of the 2-8 cell embryos cultured, 44.4%(16/36) and 50.0%(10/20) for head first and tail first, respectively developed to blastocyst stage. There were no differences in fertilization, cleavage, rates of grade 1 embryos, and development to blastocyst stage. In conclusion, head-first or tail-first sperm injection into an oocyte in ICSI program does not affect fertilization and subsequent embryo development to blastocyst stage in vitro.

당뇨병 환자에 있어서 소양증에 대한 임상적 관찰 및 Hydrometer와 Corneometer를 이용한 피부 수분량의 측정

서대헌,은희철,신찬수,윤재일,박석범,김상덕,윤춘식 대한피부과학회 1999 대한피부과학회지 Vol.37 No.3

Background: Diabetes mellitus is a common condition, and the majority of patients have one or more cutaneous complications. Among them, xerosis is well known to be closely related to diabetics. The xerosis is inversely reflected upon skin surface hydration, the state of which can be exactly assessed with various investigating instruments, such as a hydrometer and corneometer. Objective: Our purpose was to compare the hydration state of diabetics with normal persons by the use of a corneometer and hydrometer. Methods: A total of 267 diabetics were asked whether they felt xerosis or pruritus. In a subgroup of 31 patients, the water content was evaluated and compared by the parameters of diabetic severity. Forty-one non-diabetics were selected for the normal control. Results : There was a significant difference in water contents between diabetics and non-diabetics. In diabetics, patients with shin spots and altered renal function showed lower values, revealing decreased water contents. Other parameters, including age of patients duration of diseases, status of microangiopathic complications, insulin dosage, HbAlc and c-peptide, were not related to the water contents. Conclusion ; This data indicates that xerosis is closely associated with diabetics and related to clinical and laboratory fidings revealing the disease severity. The hydrometer and corneometer are recommended for the use of the evaluaton and management of xerosis.

장기적 트립토판 결여식이 생쥐의 유해감각예민도에 미치는 영향

서영대,박제민,김명정,전명호,양구범,장세헌,강철중,김정태,김용식 대한생물치료정신의학회 2000 생물치료정신의학 Vol.6 No.1

The depressive patients can be divided into two subgroups by presence and absence of pain symptoms. Those without pain symptoms have blunted pain sensitivity whereas those with pain have normal range of pain sensitivity, and are clinically characterized by anxiety and irritability. The aim of the study is to test if these clinical profiles of the depressives with pain symptoms are related with reduced level of brain serotonin(5-HT). Forty four mice were randomly divided into two groups : one group to be bred with tryptophan free diet and the other with normal control diet, each for 4 weeks. Before the beginning of the breeding period, measured were locomotor activity by open field test, anxiety by elevated plus maze and nociceptive sensitivity by tail flick test, before and after forced swimming(FS). During each FS, duration of immobilization was also measured. The sable sets of measurements were repeated at the end of the breeding period. The brain 5-HT and 5-hydroxyindoleacetic acid(5-HIAA) were measured by high performance liquid chromatography. The results were as follows 1.Four weeks of tryptophan free diet reduced significantly body weight, brain weight, and levels of 5-HT and 5-HIAA in the whole brain. 2.Tryptophan depletion did not influence basal nociceptive sensitivity as measured by tail flick latency before FS. The normal blunting of the pain sensitivity induced by forced swimming was preserved in the tryptophan depleted group. 3.Tryptophan depletion did not influence general locomotor activity in open field. 4.Tryptophan depletion increased significantly time spent on the open arms at the elevated plus maze test done before FS. This anxiolytic-like effect was reduced by FS. 5.Tryptophan depletion did not influence duration of immobilization during FS. From these results, it is suggested that the genesis of the depression with pain symptoms is not medicated by quantitative reduction of brain serotonin

EPILEPSY AND NEURONAL CELL DEATH IN PHOSPHOLIPASE C β-1 MUTANT MICE

(Dae Soo Kim),(Seong Beom Lee),(Nae Gyu Kang),(Do Sik Min),(Young Hoon Kim),(Sung Ho Ryu),(Pann Ghill Suh),(Hee Sup Shin) 생화학분자생물학회 1997 생화학분자생물학회 춘계학술발표논문집 Vol.- No.-

Production and Rheological Properties of Bioflocculant Produced by Bacillus sp. DP-152

( DAE OOK KANG ),( HEE MOCK OH ),( Hyun Hyo Suh ),( Byung Dae Yoon ),( HEE SIK KIM ),( SEONG HOON MOON ),( Hyoung Kab Kim ),( Gee Ill Jun ),( Hyun Seoun Park ) 한국미생물생명공학회 1998 Journal of microbiology and biotechnology Vol.8 No.6

제대혈 조혈모세포 분리를 위한 적혈구 제거 방법에 관한 연구

서원석,김숙자,정희정,박경배,박성규,원종호,홍대식,박희숙,신상만 대한조혈모세포이식학회 1998 대한조혈모세포이식학회지 Vol.3 No.1

연구배경 :현재까지 제대혈 은행에서 적혈구 제거후에 냉동 보관 방법이 보편화되지 못한 것은 Ficoll, lysis, starch와 중력에 의한 방법 등이 약 50-90%에 이르는 조혈모세포가 손실된다는 이유 때문이다, 따라서 대부분의 제대혈 은행에서 전체 제대혈을 냉동보관 후에 이식에 사용하고 있다. 지금까지의 보고들은 서로 다른 제대혈에서 여러 가지 방법으로 적혈구제거를 실시한 것으로 결과가 서로 큰 차이가 난다. 방법 : 저자는 같은 제대혈에서 Ficoll, gelatin, methylcellulose, RBC lysis 등의 방법으로 적혈구를 제거하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 결과: 1) 채취한 평균 제대혈량은 105±23ml,단핵구수는 18.6±4.09×10^(6)/ml이었다. 2) 각각의 방법으로 적혈구를 제거한 다음의 단핵구수는 Ficoll, 방법 4.43±1.50×10^(6)/ml, gelatin방법 7.71±0.37×10^(6)/ml, methylcellulose 방법 5.90±0.51×10^(6)/ml, RBC lysis방법10.72±2.74×10^(6)/ml개 였으며 이 중 RBC lysis방법에서 단핵구 수가 가장 많았다. 3) 각각의 방법으로 적혈구를 제거한 다음 flow cytometry로 측정한 CD34 양성세포 수는 Ficoll 방법 2.65±0.52×10⁴/ml, gelatin방법 3.50±0.43×10⁴/ml, methylcellulose방법 2.71±0.23×10⁴/ml, RBC lysis방법 9.36±1.62×10⁴/ml개 였으며 이 중 RBC lysis방법에서 CD34양성세포 수가 가장 많았다. 전체 세포에 대한 CD34양성세포의 비율을 보면 Ficoll방법 0.72±0.14, gelatin 방법 0.50±0.08%, methylcellulose 방법 0.44±0.03%, RBC lysis방법 0.79±0.04%였다. 4) CFC수는 Ficoll 방법 21.73±11.77×10³/ml, methylcellulose 방법 15.33±7.14×10³/ml, RBC lysis 방법 26.50±4.26×10³/ml개 였으며 이 중 RBC lysis 방법에서 CFC수가 가장 많았다. 결론 : 이상의결과로 보나 Ficoll, nethylcellulose, gelatin, RBC lysis 등의 방법을 이용하는 경우 모두 적혈구 제가가 잘 되었으며 특히 RBC lysis방법을 이용한 경우 가장 많은 CD34양성세포 수와 CFC수를 얻어 적혈구 제거 방법으로 가장 좋았다. 하지만 다른 보고들에서는 gelatin에 의한 방법이 좋다고 하였는데 이는 실험 방법의 차이에 의한 것으로 보여 이에 대한 연구가 좀 더 많은 례에서 이루어져야 할 것으로 사료된다. Background : Human umbilical cord blood (UCB) has been successfully used as an althemative source of allogeneic hematopoietic stem cells for pediatric transplantation. A bank of cryopreserved UCB has the advantage over existing volunteer marrow donor registries because time consuming donor tracing can be avoided. Efficient clinical banking of UCB requires volume reduction of cord blood collections to decrease storage space and costs. The simplest way to achieve this is no deplete cord blood red cell before cryopreservation. Methods : We compared four different red cell depletion techniques, Ficoll, gelation, methylcelulose and red cell lysis method in terms of mononuclear cell count, CD34-positive cell count and colony forming cell (CFC) count. Results : 1) Mean volume and mononuclear cell count of collected UCB were 105±23mL and 18.63±4.09×10^(6)/mL. 2) Among different red cell depletion techniques, red cell lysis mothod showed the highest yeild of mononuclear cell counts, CD34-positive cell counts and CFC counts. Conclusion : Cord blood collection processed with red cell lysis could provide enough stem cells for engraftment but other studies revealed different result. This may be due to the different study method. We concluded that RBC lysis method is effective for the red cell depletion of cord blood without major losses of CFC or CD34-positive cells.

골수, 제대혈 및 가동화된 말초혈액에서 Megakaryocyte 집락의 형성능력 비교

홍대식,김정아,김숙자,박성규,서원석,박희숙 대한조혈모세포이식학회 1998 대한조혈모세포이식학회지 Vol.3 No.2

연구배경 : MK 집락배양은 적절한 배양조건과 배양후 MK 집락을 확인하기 어려워 다른 집락배양에 비하여 늦게 시작하였다. 하지만 이러한 문제들이 해결되면서 최근에는 체외에서 MK를 증폭하거나 TPO, IL-11등과 같은 사이토카인의 사용으로 이식 후 혈소판의 감소를 극복하려는 시도들이 활발하게 진행되고 있다. 저자들은 MegaCult^(TM)(Stem Cell Technologies Inc, Vancouver, Canada)를 이용하여 제대혈, 가동화된 말초혈액, 골수를 이용하여, 조혈원 간의 MK 집락 형성능력을 비교하였으며, 앞으로 이러한 방법을 생체 외 MK 증폭 실험 뿐만 아니라 혈소판질환의 병태생리를 연구하는 기초적인 자료로 사용하고자 한다. 방법 : 말초 조혈모세포는 정상인에게 G-CSF 300㎍을 5일간 피하 주사 한 후 혈액분반기를 이용하여 채취하였다. 골수는 동종 골수이식 시 공여자로부터 동의를 얻은 후 채취하였으며, 제대혈액은 정상 분만 후 태반과 제대로부터 얻었다. 단핵구와 CD34^(+) 세포를 분리하여 MegaCult^(TM)를 이용하여 MK 집락을 배양하고, 항 GPIIb/IIIa를 이용하여 이를 확인하고 도립현미경하에서 집락수를 관찰하였다. 결과 : 1) 단핵구를 이용한 MK 집락 비교에서 순수 MK, 혼합 MK 집락 모두 제대혈에서 가장 많은 집락 형성능을 보였고, 골수, 말초 조혈모세포 순이었다. 2) CD34^(+) 세포를 이용한 MK 집락은 각 조혈원에서 양호하게 형성됨이 관찰되었고, 단핵구를 이용한 MK 집락 배양에서처럼 제대혈, 골수, 말초혈액 순으로 제대혈액내에서 가장 많은 집락 형성을 보였다. 3) 단핵구 또는 CD34^(+) 세포를 이용한 집락 배양 시에도 MK를 포함한 전체 집락이 제대혈액에서 가장 많이 형성되었다. 결론 : 각 조혈원의 MK배양에 IL-3, IL-6, TPO가 포함된 MegaCult^(TM)를 사용하였으며 배양된 집락중 megakaryocyte를 확인하기 위하여 항GPIIb/IⅡa 항체를 이용한 면역 조직학적 염색을 시행하였다. 저자들이 시행한 MK집락 배양과 GPIIb/IⅡa를 이용한 면역조직학적 염색은 혈소판의 병태 생리를 이해하고, MK 증폭을 포함한 이식 후 혈소판 회복을 증진시키기 위한 여러 가지 실험의 기초적인 자료가 될 것이다. Background: In vitro colony assay procedures for detecting human erythroid and granulocyte-macrophage progenitors have been in widespread use for many years. However, the development of reproducible assay methods for human megakaryocyte (MK) progenitors lagged considerably behind. There are two main reasons for this: First, the growth conditions initially optimized for other blood cell lineages are not optimal for MK progenitor cell growth. Secondly, the specific recognition of MK colonies requires fixation of the cultures and immunocytochemical staining of the cells for MK-specific antigens. The Methocult^(TM) system for detcting human clonogenic MK progenitors uses a medium containing a defined serum substitude to minimize the inhibitory effects of factors like TGF-β that are found in most sera. Three categories of colonies can be identified in cultures set up with Methocult^(TM): pure MK colonies; mixed MK colonies (containing other lineages as well as MK); and non-MK colonies (containing only other lineages of cells). Methods: This assay has been used to determine the range of MK progenitors present in a series of umbilical cord blood, peripheral blood and bone marrow samples. The MK colonies are detected by staining of the cells with a primary antibody to the MK-specific antigen GPIIb/IIIa (CD41). Results: We enumerated pure CFU-MKs in G-CSF mobilized peripheral blood (MPB), BM and umbilical cord blood (UCB). CFU-MK were detected in MPB, BM, and UCB at incidences of 1.00±0.82, 6.75±2.22, 8.00±1.83 of 5×10⁴mononuclear cells and at incidences of 19.00±03.37, 40.33±17.21, 99.00±54.76 of 5×10³ CD34^(+) cells. The highest number of pure CFU-MK was seen in UCB. The other colony counts (mixed CFU-MK, non-MK CFU) were also higher in UCB than in MPB and BM. Conclusion: We speculate that UCB should be better source of CFU-MK than any other stem cell sources.

어도내 유속에 따른 어류체형비 비교

배대열 ( Dae-yeul Bae ),문운기 ( Woon-ki Moon ),김도현 ( Do-hyun Kim ),이의행 ( Eui-haeng Lee ),김원장 ( Won-jang Kim ),서정빈 ( Jung-bin Suh ),안중식 ( Joong-sik Ahn ),김재구 ( Jai-ku Kim ),안광국 ( Kwang-guk An ) 한국환경생태학회 2016 한국환경생태학회 학술대회지 Vol.2016 No.2

어류의 외부 형태적 특징은 어류의 유영력과 군집의 기능을 결정하는 중요한 요인이 되고 있다. 어류의 외형은 크게 6개 타입으로 나누어진다. 유선형(streamline)과 같은 방추형(fusiform), 그 외 체고(body depth)와 체폭(body width)에 따라 측편형(compressiform), 종편형(depressiform), 장어형(anguilliform), 리본형(taeniform), 그리고 구형(globiform)등으로 구분된다(Kim and Park, 2002). 어류의 유영성은 유선형에 가까울수록 부피에 대한 지체계수(drag coefficient)는 최소가 됨으로서 최대가 된다(Jacobs et al., 1933; Hoerner, 1965). 어류의 유선형 정도를 측정하는 방법은 체장(body length)/체고(body depth)의 비로 표현되는 어류 체형비(fineness ratio, FR)가 있다. 어류의 유영 및 이동에서 최적 FR비는 4.5이상에서 지체계수(drag coefficient)가 최소인 것으로 알려져 있다(Scarnecchia, 1988). 일반적으로 유영속도는 체장에 비례하며 순항속도(cruising speed), 유지속도(sustaining speed), 그리고 돌진속도(darting speed)로 구분된다(Nakamura, Shunroku, 1991). 이때 어류의 유영력은 유영속도에 유속을 더한 값으로 정의된다(김진홍). 어종간에 유영속도가 일정하다고 가정하면 어류의 유영력은 유속에 좌우되고, 하천에서 어도구조물 설계시 어종들의 한계유속은 어류가 소상하기 위한 지표가 될 수 있다. 특히 어도의 유량 및 유속은 어도를 이용 할 수 있는 개체크기를 제한하는 요인이 되기도 한다. 하천에서 어류 군집의 특성은 서식지내 유속환경을 이해하는데 중요한 요인이 된다. 여울과 소가 연속적으로 나타나는 하천에서 어류 군집은 서식지복잡성(habitat complexity), 미소서식지(microhabitat)의 발달에 따라 다양한 어류가 출현하게 되고, 출현하는 어류의 외형을 분석하면 하천의 흐름의 특성과 밀접한 관련성을 가진다. 유속이 빠른 여울과 소(pool)나 정수역(rentic water)에 서식하는 어종의 FR값은 서로 차이를 보이게 된다. Langerhans and Reznick(2011)의 연구에 따르면 Poecilliidae에 속하는 50여종의 어류를 대상으로 조사한 결과 유속이 빠른 환경에 서식하는 어류는 유선형에 더 가깝고 FR은 4.5에 근접하는 것으로 보고하고 있다. 이는 유속이 어류의 외부 형태적 진화에 중요한 역할을 하는 것임을 의미 한다. 어도를 이용하는 어류군집의 특성을 고려한 설계가 필요하다. 즉 군집의 어류 체형비를 고려하여 어도의 유속분포를 결정하는 국내어도 설계상 가장 큰 문제점은 하천에 서식하는 어류군집의 생태적 특성을 고려하지 않고 일률적으로 어도를 설계하는데 문제가 있다. 우리나라는 갈수기와 홍수기의 유량에 따라 어도내 유속의 차이가 매우 크게 나타난다. 따라서 본 연구에서는 하천의 인공구조물인 어도에서 유속분포에 따라 이를 이용하는 어류들의 형태학적 체형비를 분석함으로서 향후 어도 설계시 어류상 및 목표어종에 따라 어도내 유속 분포를 결정하는데 유용한 자료로 활용을 목적으로 한다. 국내에 서식하는 어류를 대상으로 어도에서 유속의 범위에 따른 어류 체형비 분석을 통해 하천구조물인 어도에서 유속의 특성에 따른 어류체형비를 비교분석하였다. 향후 어도 설계시 어류상 및 목표어종에 따라 유속 분포를 결정하는데 중요한 자료가 될 것으로 판단한다.

모바일 그리드에서 체크포인트 기반 작업 이주 기법

정대용 ( Dae Yong Jung ),서태원 ( Tae Weon Suh ),정광식 ( Kwang Sik Chung ),유헌창 ( Heon Chang Yu ) 한국컴퓨터교육학회 2009 컴퓨터교육학회 논문지 Vol.12 No.4

A Lipopeptide Biosurfactant Produced by Bacillus subtilis C9 Selected through the Oil Film - collapsing Assay

HEE - SIK KIM,CHANG - HO LEE,HYUN - HYO SUH,KEUG - HYUN AHN,HEE - MOCK OH,GI - SEOK KWON,JI - WON YANG,BYUNG - DAE YOON 한국미생물생명공학회 1997 Journal of microbiology and biotechnology Vol.7 No.3