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Candida magnoliae에 의한 에리스리를 생산을 위한 최적 배양환경과 질소원 선별
고은성,문관훈,한기철,유연우,서진호 한국산업미생물학회 2000 한국미생물·생명공학회지 Vol.28 No.6
C. magnoliae M26을 이용하여 천연 감미료인 에리스리톨의 발효생산 환경의 최적화와 대량생산을 위한 산업용 배지의 적용가능성을 검토하였다. 에리스리톨의 발효생산의 최적 조건은 28℃의 발효온도와 초기 pH 7 이었으며, 1 vvm, 500 rpm의 2.5 l jar-fermentor에서의 통기 조건이었다. C. magnoliae M26에 적합한 탄소원을 알아보기 위해 포도당, 과당, sucrose에 대하여 탄소원의 소비 경향과 에리스리톨의 생산성을 알아 본 결과, 포도당이 가장 적합했다. 에리스리톨의 효율적인 대량생산을 위해 전분가공공정의 부산물인 LSW와 CSL가 yeast extract대체 질소원으로의 가능성을 검토하였다. 대체 질소원인 LSW와 CSL은 서로의 발효 양상과 결과는 거의 비슷했고, 대조 실험인 yeast extract 결과 (68.2 g/l)에 비하여 세포성장이 약 1.5배 정도로 세포성장은 촉진되었고 에리스리톨 생산성은 yeast extract결과 (0.966 g/l·h)의 약 90% 정도로 거의 비슷한 에리스리톨 생산성을 보였다. 따라서 LSW와 CSL은 yeast extract 대체 질소원으로 산업화 공정에 사용이 가능한 것으로 판단되었다. Culture conditions and nitrogen sources were optimized for production of erythritol, a natural sweetener, by Candida magnoliae M26. The optimal culture conditions were found to be culture temperature of 28℃, initial pH of 7, aeration of 1 vvm and agitation speed of 500 rpm in a 2.5 l jar-fermentor. Glucose was chosen as the best carbon source based on cell growth and erythritol productivity. Light steep water (LSW) and corn steep liquor (CSL) which are by-products in starch processing from corn were tested as a nitrogen source substitute for yeast extract. The use of either LSW or CSL did not change the fermentation performance. The experimental results using LSW and CSL showed 1.5 times higher in cell growth and almost the same value inerythritol productivity compared with the control fermentation using yeast extract as a nitrogen source. These results suggested that either LSW or CSL could be used as a nitrogen source in a large-scale fermentation for erythritol production.
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김현수,신재욱 한국산업미생물학회 1997 한국미생물·생명공학회지 Vol.25 No.2
한국산 도꼬마리(Xanthium strumarium L.) 추출물의 항균효과를 검토하기 위해 열매, 줄기, 잎을 대상으로 하여 열수, methanol 및 ethylacetate로 추출하였다. 각 추출물의 항균효과는 agar diffusion법에 의한 MIC를 검토한 결과, ethylacetate 추출물의 항균효과가 가장 우수하였으며 Gram(-) 세균의 일부를 제외한 Gram(+)세균, 효모, 곰팡이에 항균효과를 나타내었다. 항균성물질의 특성은 열수추출물을 열처리(120℃, 20분, 1기압), 산(pH 3.0) 및 알칼리(pH 10.0)처리한 결과, 열에는 안정한 반면 산처리의 경우 50%이상이 실활되었으며, 알칼리처리시 완전히 실활되었다. 항균성물질의 정제는 열수추출, ethylacetate추출, 활성탄 및 silica gel column에 흡착, 용출하여 sep-pak(C_18) 및 HPLC(ODS column)로써 최종 정제하였다. 항균성 물질 A, B는 HPLC로써 최종 분리하였으며 순도는 98%이상이었다. 정제 표품 A 및 B를 agar diffusion법을 이용하여 항균활성을 검토한 결과, 20 ㎍ 첨가시 A가 B보다 다소 높은 항균력을 보였으며, B. subtilis PCI 219보다 E. coli K-12에 다소 강한 활성을 나타내었다. 또한, fluorescein diacetate(FDA)법을 이용한 항균활성을 검토한 결과, 20 ㎍ 사용의 경우에는 항균성물질 A는 Gram(+), Gran(-)균에 강한 생육저해 효과를 보였으나, 효모류에는 항균효과가 거의 없었으며, B는 세균 및 효모류에도 항균활성을 나타내었다. Antimicrobial activity of various extracts of Xanthium strumarium L. was tested against 25 strains of bacteria, yeast and fungus. The crude ethylacetate extract exhibited strong growth inhibition to the tesed strains with the exception of partial Gram-negative bacteria. The property of antimicrobial compound was very stable under heat treatment at 120℃, but it was unstable in acid (pH 3.0) and alkali (pH 10.0) treatment. The antimicrobial compounds were purified by boiling water extraction, ethylacetate extraction, charcoal column chromatography, silica gel column chromatography and reverse phase HPLC. The purified compound A and B were detected in a single peak (each above 98% purity) through the HPLC analysis. The componud A and B showed a strong growth inhibition against Gram-negative and positive bacteria in the agar diffusion method. When tested by the FDA method using the esterase, compound A mainly inhibited the growth of bacteria and compound B showed the growth inhibition of both bacteria and yeasts.
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동물의 장에서 분리한 Enterococcus sp.의 특성 및 분말화
박종진,변정수,조윤경,홍승서,이현수 한국미생물생명공학회 ( 구 한국산업미생물학회 ) 1996 한국미생물·생명공학회지 Vol.24 No.4
의약품 및 동물약품으로 사용되고 있는 분말유산균을 개발하고자 동물의 장에서 산성 pH 및 담즙산에 대한 내성이 강하고 대장균 생육억제력이 좋은 Enterococcus faecium L20을 분리 동정하고 이를 이용하여 고농도의 생균이 함유된 분말 유산균을 제조하였다. 분리된 균주는 pH 3.0에서 90% 이상의 내성과 0.3% 담즙산이 함유된 배지에서 100%의 내성을 나타냈으며 MRS 배지에서 대장균과 혼합배양시 24시간 이내에 대장균을 사멸시켰다. 분리된 균주를 산업용배지에서 배양한 후 동결건조시켜 분말을 만들었을 때 생균수는 5.0×0^11/g 이상이었다. 이것은 18℃에 보관하였을 경우 11개월 동안 80%의 생존율을 나타내었다. In order to develop a lactic acid bacterial powder which can be used as a probiotic for human and animal, a lactic acid bacteria which has high resistance against low pH and ox-gall, and shows a good growth inhibition against low pH and ox-gall, and shows a good growth inhibition against E. coli, was isolated from an animal intestine and characterized. The isolated strain was identified as Enterococcus faecium. It had more than 90% of survival at low pH for 2 hours and almost 100% of survival in the presence of 0.3% ox-gall. When co-cultured with E. coli in MRS broth, all of the E. coli cells were killed within 24 hours. The final powdered product of the isolated strain was manufactured after a freeze drying process suing an industrial media, and then checked its stability. Its storage stability was 80% for 11 months at 18℃.
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항생제 다제내성균 Staphylococcus aureus SA2로부터 분리한 테트라사이클린 내성 플라스미드 pKH6의 염기서열
이대운,윤성준,김우구,신철교,임성환,이백락,문경호 한국미생물생명공학회 ( 구 한국산업미생물학회 ) 1996 한국미생물·생명공학회지 Vol.24 No.4
한국에서 임산균주로부터 분리한 테트라사이클린(Tc) 내성 플라스미드 pKH6의 전체 염기서열을 결정하여 가장 대표적인 Tc 내성 플라스미드인 pT181과 비교하였다. pKH6의 전체 길이는 4439bp로 pT181과 동일하게 나타났으며 염기서열은 7개의 염기에서 차이를 보였다. 전부 다 염기쌍이 치환된 형태로 나타났으며 그 중 3개는 coding 부위에서 일어났다. coding 부위에서 일어난 경우에도 1개는 동일한 아미노산을 coding 하였기 때문에 pT181과 차이가 없었으며 RepC와 Pre 단백질에 있어 각각 1개의 아미노산에서 차이를 나타내었다. The complete nucleotide sequence of pKH6, a tetracycline-resistance (Tc^r) plasmid isolated from multi-drug resistant Staphlococcus aureus SA2, has been determined and compared with that of the staphylococcal Tc^r plasmid pT181. The nucleotide sequences of the two plasmids are in agreement except for 7 nucleotides. All differences are caused by base pair substitutions. Among 6 substitutions, 3 occurred in coding regions. However, only tow base substitutions in coding regions resulted in changes of amino acid sequences in two different ORFs of repC and Pre proteins.
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