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여주홍 ( Joo Hong Yeo ),이광길 ( Kwang Gill Lee ),우순옥 ( Soon Ok Woo ),권해용 ( Hae Yong Kweon ),한상미 ( Sang Mi Han ),박경호 ( Kyung Ho Park ),김성수 ( Sung Su Kim ) 한국잠사학회 2007 한국잠사곤충학회지 Vol.49 No.2
실크단백질 식이공급이 동물대장암에 미치는 효과를 알아본 결과 다음과 같은 결과를 얻을 수 있었다. 1. 동물 대장암에 투여한 식이공급용 선발 실크단백질의 피브로인 및 세리신 단백질은 각각 Mw 65,000 내외의 피브로인 및 Mw 100,000만 내외의 세리신 단백질이며, 동물사료의 경우, 섭식 등 물성 등이 작년대비 개선된 3% 첨가된 전용 사료를 조제하여 섭식하도록 하였다. 2. 1,2-DMH에 의한 동물 대장암 유발(1회/1주, 4회 주사) 후 6주 시료 투여에 있어서 대장암 유발군(CA)의 경우, 체중변화 및 식이 섭취량의 관계인 식이효율은 세리신 섭취군(S)의 경우 정상군(C)의 85% 수준을 나타내었다. 3. 동물대장암 조직의 조직관찰에 있어서는 대장암 조직의 COX-2 발현을 염색한 결과, 대장암 유도군(CA)의 경우 확실한 COX-2에 의한 발현을 나타내었으며, 세리신 섭취군(S)의 경우는 그 정도가 미비함을 나타내어 대장암에 효과가 있음을 나타내었다. 4. 대장암 인자변화를 정량적으로 확인한 결과, 정상군(C)에 비하여 대장암 유발군(CA)은 확실한 7배 정도의 COX-2량이 확인되었으며, 세리신 섭취군(S)의 경우는 유발군(CA) 대비 1/2 이하 수준으로 줄어듬을 확인할 수 있어서 금후 대장 질환 관련 소재 개발 가능성을 나타내었다. This study was done for the dietary effect of silk protein, molecular controlled silk sericin and silk fibroin, on colon cancer of animal. The ICR mice were given weekly injections of 1,2-dimethylhydrazine (DMZ) for the initial 10 mg/kg with four weeks, and fed a diets supplemented with 3% (v/v) molecular controlled sericin and fibroin for 6 weeks, respectively. Then, the body weight, efficiency of dietary, typical histologic appearance of animal colon tissue and COX-2 effect were studied, too. Molecular controlled sericin protein are shown more higher dietary effect on animal colon cancer than fibroin supplemental case. The results suggest a potential usefulness of sericin as a chemopreventive for colon carcinogenesis and the development functional food.
효소처리에 의한 Bombyx mori fibroin 가수분해물의 분자량 및 구조 변화
여주홍(Joo-Hong Yeo),박경호(Kyung-Ho Park),이광길(Kwang-Gill Lee),우순옥(Soon-Ok Woo),권해용(HaeYong Kweon),한상미(Sang-Mi Han),이희삼(Heui-Sam Lee),이진아(Jinah Lee),이인석(In Seok Lee),조윤희(Yunhi Cho) 한국식품과학회 2008 한국식품과학회지 Vol.40 No.4
본 연구는 누에 실 샘으로부터 얻은 Bombyx mori 피브로인의 효소 가수분해 시 그 분자량 및 구조적 특성을 파악하고자 하였다. Gel filtration chromatography(GFC)에 의해 B. mori 피브로인을 순수 분리한 결과 회수율이 약 70% 이상으로 기존의 방법(막과 튜브 분리법)에 비해 약 40% 이상 높았다. 이는 GFC법이 고 순수ㆍ고 수율의 B. mori 피브로인을 얻을 수 있는 방법임이 확인되었다. Gel permeation chromatography에 의한 분자량 측정 결과 누에 체내 피브로인, 염화칼슘 용해 물 및 효소 가수분해물이 각각 평균분자량 108,000 Da 내외, 65,000 Da 내외 및 1,000 Da 내외임을 알 수 있었다. 또한 효소 가수분해에 의한 구조적 변화를 ¹³C-NMR로 알아본 결과, B. mori 피브로인의 메인 골격에 해당되는 glycine, alanine 및 serine 등의 골격 피크가 관찰되어졌으며, 특히 효소가수분해 시 glycine를 의미하는 40-44 ppm 부근의 피크가 높게 나타난 것으로 보아 -G-A-G-A-반복 구조가 분해되었고, 이로 인해 분자량이 현저히 저하되었을 것으로 생각되어진다. This study examined the enzymatic digestion, average molecular weight distribution and structural changes of Bombyx mori silk gland fibroin using gel permeation chromatography and nuclear magnetic resonance methods. The pureseparation of calcium chloride-treated fibroin hydrolysates was carried out by gel filtration chromatography. Also, the effects of fibroin’s enzymatic hydrolysis were investigated using an edible enzyme. The average molecular weight of three hydrolysate samples (silk gland fibroin (SF), SF-calcium chloride (SFC), and SFC-enzyme) were measured to compare their characteristics. The molecular weights of SF, SFC, and SFC-enzyme were approximately 108,000, 65,000, and 1,000 Da, respectively. Finally, we determined the structural characteristic changes of the different enzymatically digested samples by ¹³C nuclear magnetic resonance methods. For the enzymatically digested fibroin, the glycine ¹³C<SUP>α</SUP> resonance indicated that the amino acid was dramatically changed and/or separated out; however, this was not shown for the normal Bombyx mori silk gland fibroin.
실크피브로인을 처리한 MC3T3-E1 조골세포 조건배양액의 파골세포 분화억제효과
여주홍(Joo-Hong Yeo),박경호(Kyung-Ho Park),주원철(Won-Chul Ju),이진아(Jinah Lee),이광길(Kwang-Gill Lee),우순옥(Soon-Ok Woo),한상미(Sang-Mi Han),권해용(HaeYong Kweon),김성수(Sung-Su Kim),조윤희(Yunhi Cho) 한국식품영양과학회 2008 한국식품영양과학회지 Vol.37 No.8
본 연구는 MC3T3-E1 조골전구세포에 실크피브로인 처리 시 파골세포분화 관련 국소인자 중 파골세포로의 분화를 강력히 유도하는 IL-1β의 발현 및 파골세포로의 분화억제에 관여하는 국소인자인 OPG의 발현변화를 조골세포 조건배양액에서 살펴보았으며, 이 조골세포 조건배양액을 RAW264.7 파골전구세포에 처리 시 파골세포로의 분화를 억제하는지를 알아보았다. 조골세포 조건배양액에서 OPG의 발현은 농도별(0.001 ㎎/mL~0.1 ㎎/mL) 실크피브로인 처리 시 86%~100%로 양성대조군(+C)과 유의적 차이가 없었다. 그러나 IL-1β의 발현은 0.1 ㎎/mL 실크피브로인 처리 시 양성대조군(+C)의 1.8% 수준으로 그 발현을 현저히 억제 하였다. 조골세포조건배양액을 처리한 RAW264.7 세포의 파골세포로의 분화정도는 농도 의존적으로 현저히 감소하였다. 특히, 0.1 ㎎/mL의 실크피브로인을 처리한 조골세포 조건배양액 처리 시 파골세포로 분화하지 않은 음성대조군(-RANKL) 수준으로 파골세포 분화를 현저히 억제한 것은 OPG의 발현 증가가 아닌 IL-1β의 발현 억제에 의한 것으로 사료되며, 추후 연구를 통해 관련 기전의 연구가 필요할것으로 생각되어진다. In this study, we investigated the indirect effect of silk-fibroin on osteoclastic differentiation of RAW264.7 cells. The conditioned medium were collected from MC3T3-E1 osbeoblasts treated with 0.001 ㎎/mL~0.1 ㎎/mL silk fibroin for 6 days, mixed in 1:1 ratio with osteoclast medium, and then added into RAW264.7 cells with receptor activator of nuclear factor kappa B ligand (RANKL), a differentiation inducer for 3 days. Of osteoclastic cytokines in the conditioned medium, the protein expression of osteoprotegerin (OPG) with silk-fibroin was not significantly different. However, the protein expression of interleukin (IL)-1β was specifically lower in a dose dependent manner. In RAW264.7 cells, the conditioned medium with silk-fibroin inhibited RANKL induced osteoclastic differentiation as total number of multinucleated tartrate-resistant alkaline phosphatase (TRAP)-positive osteoclasts in a dose dependent manner. Taken together, we demonstrated that the conditioned medium of silk-fibroin treated osteoblasts inhibits RANKL induced differentiation of osteoclasts with inhibiting selective expression of IL-1β.
고지방식이 유도 비만쥐에서 화분이 체중 감소 및 지질대사에 미치는 영향
여주홍(Joo-Hong Yeo),전정우(Jeong-Woo Chon),이광길(Kwang-Gill Lee),우순옥(Soon-Ok Woo),남성희(Sung-Hee Nam),권해용(HaeYong Kweon),한상미(Sang-Mi Han),조유영(You-Young Jo),이희삼(Heui-Sam Lee),이명렬(Myung-Ryul Lee),최용수(Yong-Soo Ch 한국양봉학회 2009 韓國養蜂學會誌 Vol.24 No.3
The intake of high caloric foods and change in lifestyles of industrialized countries has exponentially increased the prevalence of obesity. Pollen contains the richest known source of vitamins, minerals, proteins, and amino acids. Pollen has been traditionally used for the treatment of improve stamina, energy and promote health, and vitality. First, we investigated the anti-adipogenic effect by measuring lipid accumulation with Oil red O staining. The accumulation of triacylglycerol was decreased in 3T3-L1 cells treated with pollen as compared with untreated cells. Second, we investigated the anti-obesity effect of pollen in diet-induce obesity mice. C57BL/6J mice were artificiality induced by dietary manipulation with a high fat diet for 10weeks. After obesity in mice was achieved, pollen groups were administered with pollen at a dose of 100, 300㎎/㎏/day by oral gavages for another 10weeks. At the end of the experiment, the body weight of pollen groups were significantly reduced as compared with that of the high fat diet group by 15.2%, 7.5%, respectively. Serum levels of triglyceride and total cholesterol of pollen groups were significantly decreased compared with that of the high fat diet group while the serum levels of HDLcholesterol were significantly increased. Hepatic levels of triglyceride and total cholesterol in pollen groups were significantly decreased than those of high fat diet group. The results suggest that pollen can be used as potential therapeutic substance as part of prevention or treatment strategy of obesity.
한상미,이광길,여주홍,권해용,우순옥,윤형주,김미애,김원태,백하주,Han, Sang-Mi,Lee, Kwang-Gill,Yeo, Joo-Hong,Kweon, Hae-Yong,Woo, Soon-Ok,Yoon, Hyung-Joo,Kim, Me-Ae,Kim, Won-Tae,Baek, Ha-Ju 한국응용곤충학회 2007 한국응용곤충학회지 Vol.46 No.2
호박벌 일벌독의 성분과 생리활성을 규명하기 위하여 단백질 성분분석과 암세포 생육 저해 효능, 항균력을 검토하였다. 이차원단백질 분석을 통해 호박별의 일벌독은 63개의 단백질이 존재하는 것으로 확인되었으며, 가장 많은 함량을 보이는 3개의 단백질을 염기서열 분석하였다. 그러나 이들 성분은 아직 밝혀지지 않은 성분으로 판단되었다. 호박벌 일벌독의 암세포 (간암; Hep3B, 폐암; A549, 유방암; BT-20, 위암; AGS) 에 대한 생육 저해능은 시료 농도가 증가함에 따라 증가하는 경향을 보이며 100ng/ml에서 간암세포 (Hep3B) 에 대한 생육 저해능이 55%로 가장 높았다. 항균활성에 E. faecium 과 S. sonnei에 대하여 최소발육억제농도와 최소살균농도 모두 각각 0.256ug/ml 로 강한 항균활성을 나타내었으며, 그 외의 피검균에 대해서도 비교적 높은 활성을 보였다. 이상의 결과로부터 호박벌 일벌독의 성분은 다른 벌의 독성분과는 차이를 보이며, 그 생리활성에 있어 약리학적 이용이 가능할 것으로 판단되었다. Pure Bombus ignitus venom samples were submitted to two-dimensional gel electrophoresis. A total of 64 excised spots were analyzed by mass spectrometry. Three main proteins resulted in the identification have not been described in other bee venoms before. Dose-dependence against human carcinoma (Hep3B, BT-20, A549 and AGS) were observed from 1ng/ml to 100ng/ml. Expecially, the treatment of 100ng/ml B. ignitus venoms showed the highest cytotoxicity with 55% against hepatocellular carcinoma (Hep3B). The B. ignitus venoms showed strong antimicrobial activities against Enterococcus faecium and Shigella sonnei, and practically antimicrobial activity against the other microorganisms tested. The minimum inhibitory concentration (MIC) and minimum bactericidal concentration (MBC) of E. faecium and S. sonnei, were 0.256ug/ml, respectively.