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사람의 섬유아세포에서 Glucose 농도가 Insulin-like Growth Factor Binding Protein-5의 발현에 미치는 영향
류혜영,황혜정,김인혜,류홍수,남택정,Ryu, Hye-Young,Hwang, Hye-Jung,Kim, In-Hye,Ryu, Hong-Soo,Nam, Taek-Jeong 한국생명과학회 2007 생명과학회지 Vol.17 No.9
사람의 섬유아세포인 GM10에서 glucose 농도에 따른 IGFBP-5의 존재와 발현에 미치는 영향을 살펴보고 당뇨병과 관련된 in vitro model system으로서의 활용 가능성을 검토하고자 하였다. 섬유아세포인 GM10 세포를 시용하여 glu-cose 배양 조건에 따른 IGFBP-5의 존재와 발현에 미치는 영향을 살펴보았다. 그 결과, IGFBP-5의 단백질 수준은 고농도 glucose 배양 조건에서 증가하였으나, IGFBP-5 mRNA 발현에는 아무런 영향을 나타내지 않았다. IGFBP-5 protease 활성은 고농도 glucose 배양 조건에서 높았다. IGF- I 과 인슐 린은 IGFBP-5 protease 활성에 관여하는 것으로 보여지며, GM10 세포에 있어서 IGFBP-5의 분해에는 serine protease 뿐만 아니라 metalloprotease가 관여하는 것으로 나타났다. 또한, gelatin zymography를 통한 protease 활성은 고농도 glucose 배양 조건에서 크게 나타났으며, 시간 의존적으로 증가하였다. 본 연구 결과를 바탕으로 IGFs와 같은 세포 성장인자에 대한 연구는 세포수준의 당뇨병과 관련된 in vitro model system이 가능하리라고 여겨지며 더 많은 연구가 진행되어야 할 것으로 보인다. Insulin-like growth factor-I (IGF-I) and IGF-II have structure like insulin. In contrast to insulin, however, the bioavaility of IGFs is modulated by the IGF-binding protein (IGFBPs). Each of IGFBPs was different with molecular masses, biological characteristics, and immunological properties.. Human fibroblasts secrete IGFBPs that can modify IGF-I action. In diabetes mellitus, the most study of IGF systems have been investigated in insulin-dependent diabetes mellitus, non-insulin-dependent diabetes mellitus, and streptozotocin-in-duced animals in vivo. Recently, a little research regarding the IGFs system has been proposed in por-tion of cell in vitro. In this study, effects of low or high glucose condition on IGFBP-5 in GM10 was investigated. By western blotting analysis, IGFBP-5 level decreased in cells cultured at high glucose, but IGFBP-5 level of mRNA didn't change. IGFBP-5 protease that cleaves IGFBP-5 in conditioned me-dium had was inhibited by EDTA and heparin, like serine protease and metalloprotease. Furthermore, the protease activity was increased in high glucose cultivated condition. In results of gelatin zymog-raphy, molecular weight of proteolytic metalloenzymes was indentified 69-kDa and protease activity was increased in time-dependent manner. Although the mechanism has yet to be determined, IGFBP-5 proteolysis in GM10 cells cultured with high glucose may increase effects of IGFs to decrease the glu-cose level through dissociation of IGFs from IGFBPs. Therefore, we suggest that IGF- I and IGFBPs could be potential models in study of pathophysiology such as diabetes mellitus.
류혜영 인하대학교 법학연구소 2008 法學硏究 Vol.11 No.1
물류는 “제3이윤원천”이라고도 한다. 이미 국민경제의 새로운 성장요소와 기간산업 으로 성장하고 있다. 전 지구적인 범위에서 쾌속하고 우량한 고객서비스체계를 구축하 고 적당한 공급자와 판매자를 선정하여 국제구매와 영업을 하여 자원의 합리적인 활용 을 도모함으로 국제물류체계를 형성하는 것은 필연한 선택이 아닐 수 없다. 국제물류는 국가간, 지역간 화물운송, 보관, 하역, 포장, 유통가공, 배송 및 이와 관련한 정보수송을 말한다. 국제물류경영인이라면 국제물류서비스를 제공하는 자로써 제일 중요한 활동의 하나가 국제운송서비스를 제공하는 것이다. 현재로서는 국제물류와 관련한 법률법규가 미비한 상태로, 국내법 혹은 국제법 측면 에서 통일된 규정이 없는 상태이다. 이와 관련하여서는 국내법, 국제운송협약 및 기타 국제협약의 규정을 준용하여 국제물류경영인을 규범하고 있다. 따라서 각국의 법률과 국제협약의 규정도 일치하지 않은 부분이 있고 국제협약간에도 통일되지 않은 부분이 있다. 중국물류법체계에 존재하는 문제점으로는 첫째, 법제정이 다양하고 서로간의 협 조가 부족하다. 둘째, 입법의 상대적인 낙후로 물류산업에 대해 실질적인 규제를 하기 어렵다. 셋째, 물류산업에 대해 직접적인 효력을 발생하는 법규가 대부분 중앙정부 부 서, 지방에서 제정한 조례, 규정과 통지 등 형식으로 법적효력으로 보면 법률, 행정법규 와 비교가 되지 않아 법원의 재판에서는 참고근거로만 적용하고 있다. 물류산업에 대해 효율적인 규제를 하지 못한다.
사람의 섬유아세포에서 glucose 농도가 물질대사 및 Insulin-like growth factor binding protein-3의 발현에 미치는 영향
류혜영,황혜정,김인혜,류홍수,남택정,Ryu, Hye-Young,Hwang, Hye-Jung,Kim, In-Hye,Ryu, Hong-Soo,Nam, Taek-Jeong 한국생명과학회 2007 생명과학회지 Vol.17 No.5
사람의 섬유아세포인 GM10을 사용하여 glucose의 배양조건에 다른 물질대사 및 IGFBP-3 발현을 살펴본 결과, glucose 농도에 따른 glucose 소비와 triglyceride 축적 수준은 고농도 glucose 배양 조건에서 증가한 반면, 총 단백질 함량은 고농도 glucose배양 조건에서 시간의 경과에 따라 감소하였다. 또한 고농도 glucose 배양 조건에서 5일 동안 배양한 세포 배양액내의 유리아미노산 함량은 저농도보다 고농도 glucose 배양 조건에서 높게 나타났다. IGFBP-3 단백질 수준과 mRNA수준은 저농도 glucose배양 조건에서 증가하였으나, IGFBP-3 단백질 분해효소에 따른 영향은 없었다. 이상의 결과에서 glucose 배양조건에 따른 물질대사는 부분적으로 세포를 이용한 당뇨병 모델 실험에서 in vivo와 같은 결과를 얻지 못하였지만, IGFs와 같은 세포 성장인자에 대한 연구를 통해 세포수준의 당뇨병 모델화가 가능하다고 여겨진다. Insulin-like growth factor-I(IGF-I) has significant insulin-like anabolic effects which include the stimulation of glucose and amino acid uptake, as well as protein and glycogen synthesis. IGFs exist in serum and other biological fluids as complexes bound to a family of structurally related insulin-like growth factor binding proteins(IGFBPs). Six human IGFBPs can modulate the effects of IGFs on target tissues by several mechanisms, including altering the serum's half-life and the transcapillary transport of IGFs, as well as changing the availability of IGFs to specific cell surface receptors. Human fibroblasts secrete IGFBPs that can modify IGF-I action. Previous to our study using either Northern blotting, and Western blotting have shown that fibroblasts express mRNA IGFBP-3, -4, and -5, and synthesize these proteins. In addition, fibroblast cell lysates revealed that the IGFBP-3 was most abundant. For these reasons, we undertook to gain further insight into the effects of high and low glucose incubation condition on metabolism and IGFBP-3 expression. In results of metabolites and IGFBP-3 expression in GM10 cells cultivated with various glucose concentration, the consumption of glucose and accumulation of triglyceride were increased in condition of high glucose, and total protein level was decreased. in the course of time. After 5 days incubation, levels of free amino acid in medium containing glucose of high concentration glucose were higher than in conditions of low glucose. Although the levels of IGFBP-3 protein and mRNA levels were increased in low glucose, and IGFBP-3 was not affected by any pretense. Taken together, we suggest that the study of growth factors, like IGFs, might be a possible model of diabetes militus in cell, although the results in cell models were not in accord with in vivo.