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        단계적 온도 하강법을 이용한 췌도세포 냉동보존법

        정인경,오승훈,김병준,양태영,이병완,하창영,노정현,정재훈,민용기,이명식,이문규,김광원 대한당뇨병학회 2002 Diabetes and Metabolism Journal Vol.26 No.1

        연구배경:최근 당뇨병의 새로운 치료법으로 시도되고 있는 췌도이식은 충분한 췌도수의 확보와 췌도생존율을 높이기 위한 면역억제제 사용이 제한점이 되고 있다. 본 연구의 목적은 이식 전 충분한 췌도 수의 확보를 위해 분리한 췌도를 냉동보존하는 방법을 확립하고 냉동보존한 백서 췌도세포의 시험관내 그리고 생체내 기능을 조사하였다. 방법:분리한 백서의 췌장소도를 48시간 배양한 후 한 시험관당 췌도세포 1000개씩 나누었다. 냉동보존은 6개의 시험관에 DMSO를 첨가한 후 초 냉각(supercooling), 핵화(nucleation)단계를 거친 후 99% isopropanol과 액체질소가 들어있는 dewer를 이용하여-0.25℃/분의 냉각속도로 -40℃까지 단계적으로 얼린후-70℃ 액체질소 탱크에 보관했다. 해동은 냉동시킨 vial들을 액체 질소 태으에서 꺼내 37℃ 항온조에 담가 급격히 해동시킨 후, 원심분리하여 상층액을 제거하고 각 vial에 0.75M sucrose 용액을 가한 후, 10% fetal calf serum이 함유된 RPMI 1640 media에서 배양하였다 각각 6개의 시험관에서 해동한 췌도들을 광학현미경 및 형광현미경하에서 췌도의 모양과 생존율에 대해 조사하고 인슐린 정적반응을 알아보았다. 또한 분리한 췌도를 냉동보존하지 않고 이식한 경우를 대조군(6마리)과 생체내 기능을 비교하였다. 결과:① 냉동보존후 획득한 췌도의 수와 생존율 해동후 획득한 췌도의 수는 해동시킨 당일날이 902±21, 24시간 배양 후에는 857±16, 72시간 후에는 817±18개로 점차 감소되었다. AO/PI 염색상 각 췌도의 생존율은 냉동 전을 100으로 하였을 때 해동당일, 24시간 후, 72시간 후가 각각 60±5, 80±5, 90±5%로 해동후 3일간 배양하였을 때 냉동전의 수준으로 회복하였다. ② 냉동보존후 췌도의 포도당에 대한 정적 인슐린 분비능:냉동직후 감소된 경향을 보였으나 해동후 3일간 배양한 췌도의 인슐린 분비는 냉동전과 통계적으로 의미있는 차이가 없이 냉동보존 전의 수준으로 회복되었다. ③ 냉동보존후 췌도의 포도당에 대한 동적 인슐린 분비능:냉동보존한 췌도를 해동후 3일째의 인슐린 동적 분비능은 냉동 전과 마찬가지로 자극 인슐린의 반응의 제1기와 2기가 잘 관찰되었다. ④ 냉동보존한 췌도세포 이식 후 혈당 변화:스트렙토조토신으로 유도된 당뇨병 쥐에 췌도이식 후 혈당은 냉동보존한 췌도이식군에서 대조군에 비해 혈당의 조절효과가 더 오래 지속되었다. 결론:소동물에서 단계적 온도 하강법을 이용한 췌도세포 냉동보존법을 확립하였으며 이는 기능, 구조 및 생존율에 큰 이상을 보이지 않았으므로 장차 사람의 췌도세포 동종이식시 부족한 췌도세포수를 극복하고 면역반응을 줄일 수 있는 매우 유용한 방법이 될 것으로 판단된다. Background : Although islet transplantation has been attempted to reverse the state of diabetes, achieving a critical number of islets and modulating the immune response limit the success of islet transplantation. Cryo-preservation of islets offers many important benefits for islet transplantation by collecting islets with a wide variety of HLA phenotypes and islet MHC expression. The aims of this study was to determine the optimal conditions for cryo-preservation by using a controlled cooling method and to evaluate in vitro and in vivo functional properties of the cryo-preserved islets. Methods : Collagenase-isolated, Ficoll-purified islets were cultured for 48 hours. They were aliquoted into freezing tubes (1000 islets per tube), equilibrated with 2M dimethyl sulfoxide (DMSO) in three steps, supercooled, nucleated, and controll-cooled at rate of 0.25℃/min to - 40℃ prior to storage at - 196℃. Rapid thawing and removal of DMSO with 0.75 M sucrose preceded 48 hour of culture and the morphology, viability, glucose-induced insulin secretion, and in vivo function of rats transplanted with cryopreserved islets was reexamined. Results : ① Recovery was 90.2±0.2%, 85.7±0.1% and 81.7±0.1% immendiately after, 24 hours and 72 hours after thawing respectively. The viability was 60±5%, 80±5%, 90±5% immediately after, 24 hours and 72 hours after thawing respectively. ② The glucose-stimulated-insulin secretion (GSIS) tended to decrease immediately after thawing, but GSIS increase to the level of pre-cryopreservation 72 hours after thawing. ③ The in dynamic GSIS, the first and the second phase of insulin secretion were well preserved in islets cultured for 72 hours after thawing. ④ The cryopreserved islets were cultured for 3 days and transplanted into renal sub-capsular space of streptozotocin (STZ) induced diabetic rats. The duration of normoglycemia in the STZ-induced diabetic rats transplanted with cryopreserved islets was significantly longer than of the fresh islets. Conclusion : The optimal condition of cryopreservation using the controlled cooling method was established in rat pancreatic islets. This cryopreservation method can be a feasible approach for human islet transplantation (J Kor Diabetes Asso 26:64~74, 2002).

      • 내시경적 점막절제술로 치험한 식도 과립상 세포종 1례

        강혁주,김성욱,최석진,이중현,장재식,서영범,윤병구,박건욱,김성자,김용섭,강승완,이구,양창헌,이창우,김욱년,이광헌,서정일 동국대학교 의학연구소 2000 東國醫學 Vol.7 No.-

        과립상 세포종은 Schwann 세포 기원으로 생각되며 인체에 비교적 드물게 발생한다. 과립상 세포종은 전신 어느 곳에서나 발견될 수 있으나 주로 혀, 구강, 피부 혹은 유방 등에서 호발하며 드물게 위장관에서 발견된다. 위장관에서는 식도에서 가장 호발하며 다음으로 위, 대장 순이다. 과립상 세포종은 대부분, 특히 위장관에서는 양성이며 소수의 악성 병변이 보고되었다. 이러한 이유와 함께 수술 전의 진단이 어렵기 때문에 과립상 세포종에 대한 근본적인 치료는 현재까지 외과적 절제술이다. 최근에 시도되는 치료방법들로는 내시경적 레이저 치료, 용종절제술, 내시경적 점막 절제술 등이 있다. 저자들은 상부 소화관 내시경검사를 시행하여 식도 과립상 세포종을 진단하고 내시경적 점막 절제술을 시행하여 합병증 없이 퇴원하여 현재 재발없이 경과 관찰중인 1례를 경험하였기에 보고하는 바이다. Granular cell tumors, which occur infrequently, are probably of Schwann cell origin. They can occur almost anywhere in the body but usually affect the tongue, oral cavity, skin, or breasts and are rarely found in the gastrointestinal tracts. The esophagus is the most frequent gastrointestinal site, followed by the stomach and the colon. Granular cell tumors are generally benign, especially in the gastrointestinal tract, some malignant lesions have been reported. For this reason, and also because preoperative diagnosis is difficult, the standard treatment for granular cell tumor has until now been surgical excision. In recent years, other therapeutic methods is endoscopic laser therapy (ELT), polypectiomy, endoscopic mucosal resection (EMR). We report a case of esophageal granular cell tumor which was diagnosed by an endoscopy and managed using an endoscopic mucosal resection without complication.

      • 전침 자극에 의한 오디 괄약근 운동성 변화에 관한 연구

        이성구,김명완,김홍자,서동환,이상수,김동일,유교상,주연호,민병일,김지훈 경희대학교 동서의학연구소 2001 東西醫學硏究所 論文集 Vol.2000 No.-

        Background/Aims: This study was designed to evaluated the effects of electroacupuncture on the sphincter of Oddi (SO) motility in humans and to correlate the manometric findings with plasma cholecystokinin (CCK) levels. Methods: Eleven patients (M: F= 5: 6) who had various kinds of biliary disorders were enrolled. SO motility was monitored with a conventional low-compliant continuously perfused technique using ERCP (n=9) or percutaneous transhepatic cholangioscope (n=2). After baseline monitoring for phasic wave contractions of SO, electroacupuncture was applied at a specific acupoint, GB 34, in these 11 patients. A nonspecific acupoint 5 cm away from GB 34 was selected as a control. Manometric parameters of SO were also checked in 6 subjects during stimulation of the control acupoint. CCK plasma levels were measured during the time course of electroacupuncture stimulation. Result: All the manometric parameters including the basal pressure of SO, amplitude, frequency and duration of phasic wave contraction of SO were significantly decreased (p< 0.05) during electroacupuncture stimulation. The inhibition of SO contractility was accompanied by increased CCK plasma levels. After removal of electroacupuncture stimulation, restoration of amplitude and duration to basal condition were noted. A tendency towards the return of SO contractility was also observed in basal pressure and frequency. Stimulation of the control acupoint, however, did not affect the SO contractility and plasma CCK levels. Conclusions: Electroacupuncture stimulation of acupoint GB 34 showed reversible inhibition of SO contraction in humans. We speculate that the response of SO to electroacupuncture stimulation may be mediated by some neurohormonal mechanisms including CCK release. (Korean Journal of Gastrointestinal Motility 2000;6:44-41)

      • KCI등재

        하악 전치부에서 발생한 선양치성종양의 증례보고

        이병도,이완,권경환,팽준영,손현진 대한구강악안면방사선학회 2009 Imaging Science in Dentistry Vol.39 No.2

        Adenomatoid odontogenic tumor(AOT) is a tumor of odontogenic epithelium with varying degrees of inductive changes in the connective tissue. The common radiographic appearance of AOT is a unilocular radiolucency associated with an unerupted tooth. Detectable radiopacities have been reported in many cases. We present a case of AOT in a 9-year old-female patient. Cystic lesion with numerous, punctuate radiopaque foci was observed on the anterior region of the mandible. These radiopacities were situated mostly on the buccal side of impacted tooth on the multi-planar images of cone beam computed tomograph. Characteristic duct like structures and amyloid like material were observed on histopathologic finding.

      • 아미노산 투여가 운동중 싸이클선수의 젖산 및 심박수에 미치는 영향

        이승국,유병렬,김문희,김완조,이선장 韓國體育大學校附屬 體育科學硏究所 1992 韓國體育大學校附屬 體育科學硏究所論文集 Vol.11 No.1

        The purpose of the study was to determine whether a 15.6mg.Kg ??' does of glutamate given one hour prior to incremental exercise test would reduce the lactate formation. Five well trained cyclists served as subjects in this experiment which included a placebo and glutamate trial. The subjects initially work on treadmill 200m/min for 3 minutes and here increased the workload by 20m/min every 3minutes until exhaustion. Blood lactate were collected from finger-tip. Subjects in the glutamate trial showed significantly lower lactate formation during exercise then they did in the placebo trial. In both groups no significant difference was found on heart rate. During the recovery lactate and heart, rate were unaltered in either the glutamate or placebo trials. In summary, glutamate ingestion may reduce lactate formation resultly improvement of performance.

      • KCI등재

        컨테이너 터미널 ERP 시스템 구축 방안

        이상완,최형림,박남규,김현수,박병주,유동호 한국로지스틱스학회 2002 로지스틱스연구 Vol.10 No.1

        급속한 세계화로 터미널간의 경쟁이 치열해지면서 기존 시설의 효율적인 운영 및 관리가 터미널의 경쟁력과 생산성을 향상시키는 중요한 요소로 부각되고 있다. 하지만 우리나라 컨테이너 터미널은 양적 확장에 치중한 반면 관리와 운영의 효율성에 대해서는 다소 소홀히 해 왔다. 그리고 대부분의 컨테이너 터미널은 자사 운영시스템을 저문 업체에 의뢰하여 개발함으로써 컨테이너 터미널마다 상이한 시스템이 구축되어 시스템의 유지 보수비용이 많이 발생하고 있다. 최근 터미널 개발과 운영 자체가 사업화 되고 있기에 향후 터미널 운영시스템에 대한 수요는 증가할 것이다. 그래서 터미널마다 다른 운영시스템을 표준화하고 국제화한 ERP 형태의 통합 운영 시스템의 개발이 요구된다 하겠다. 따라서 본 연구에서는 주문형 방식에 의존하던 컨테이너 터미널 운영시스템의 고비용, 비 통합화, 개발기간의 장기화 등의 단점을 극복하기 위해 컨테이너 터미널 ERP 시스템이란 새로운 개념을 제안한다. 이 컨테이너 터미널 ERP 시스템은 통합된 운영시스템 구축, 개발기간의 단출, 개발비용의 절감, 쉬운 업그레이드를 가능하게 해 컨테이너 터미널의 글로벌 사업에 전략적 도구로써 역할을 하게 될 것으로 기대된다. The major characteristics of ERP(Enterprise Resource Planning)are enterprise-wide system that covers all the business functions and information resources, integrated database, built-in best industry practice, packaged software and open architecture. ERP enables reduction of system development time, flexibility, standardization of workflow and effective business planning capability. ERP is mainly for manufacturing industry. However, the principles of ERP can also be applied to container terminal. We have clustered the workflow of container terminal, and analyzed the business process to generate the best workflow. The integrated database is designed to eliminate redundancy and keep integration. The core of ERP for container terminal is the planning facility such as berth planning and yard planning. The planning capability is very tightly coupled with data flow from client entities such as shipping companies. The ERP can handles the existing problems of container terminal operation that are mainly caused by lack of integration of whole of information resource in container terminal, ad-hoc and poor planning capability, disconnected and incorrect data from client companies. ERP approach not only van resolve the problems of container terminals but also promote adoption of information systems for container terminals in the world that have not yet implemented terminal operation systems.

      • SCOPUSKCI등재

        TFSCAN 검색 프로그램 TFSCAN의 개발

        이병욱,박기정,김기봉,박완,박용하 한국미생물생명공학회 ( 구 한국산업미생물학회 ) 1996 한국미생물·생명공학회지 Vol.24 No.3

        TFD는 기능이 알려진 짧은 DNA sequence(signal)들과 그와 연관된 저널 자료로 구성된 데이타베이스이다. 임의의 DNA에서 이 데이타베이스의 sequence들을 검색하여 signal을 찾는 프로그램으로 Dan S. Prestridge가 개발한 SIGNAL SCAN이라는 프로그램이 사용되고 있는데, 이는 간단한 문자열 비교 알고리즘을 사용한다. 본 연구에서는 계산상 보다 효율적인 검색을 위해서, TFD의 sequence를 검색하기 위한 automata를 구성하는 프로그램과, 이 automata에 따라 signal을 검색하도록 하는 TFSCAN이라는 프로그램을 개발하였다. 검색된 signal에 대한 관련 문헌의 검색에서도 인덱싱 방법을 이용하여 계산 속도를 향상시켰다. 프로그램의 사용을 단순화시켰고, 결과 내용을 signal과 관련된 모든 정보를 일목요연하게 보여줄 수 있도록 구성하였다. 이 프로그램을 Web을 통해서도 사용할 수 있도록, GINet Web 서버에 TFSCAN 입력용 form과 CGI 프로그램을 개발·설치하였다. 본 연구의 특정 Motif 패턴으로 구성된 데이타베이스 검색에서, automata를 응용한 알고리즘을 이용하여 계산상 급격히 향상된 결과를 얻을 수 있음을 알 수 있었는데, 이는 생물학의 여러 패턴 검색에 응용될 수 있을 것이다. 더욱 민감한(sensitive) signal 검색을 위해서, 이와 같이 automata를 활용하고, 이 automata를 최적화하는 알고리즘 연구를 계속하고 있다. TFD is a transcription factor database which consists of short functional DNA sequences called as signals and their references. SIGNAL SCAN, developed by Dan S. Prestridge, is used to determine what signals of TFD may exist in a DNA sequence. This program searches TFD database by using a simple algorithm for character string comparison. We developed TFSCAN that aims at searching for signals in an input DNA sequence more efficently than SIGNAL SCAN. Our algorithms consist of two parts, one constructs an automata by scanning sequences of TFD, the other searches for signals through this automata. Searching for signal-related references is radically improved in time by using an indexing method. Usage of TFSCAN is very simple and its output is obvious. We developed and installed a TFSCAN input form and a CGI program in GINet Web server, to use TFSCAN. The algorithm applying automata showed drastical results in improvement of computing time. This approach may apply to recognizing several biological patterns. We have been developing our algorithm to optimize the automata and to search more sensitively for signals.

      • KCI등재

        Zr계 Vitreloy 박막의 특성에 대한 조사

        이경민,이병준,김병훈,이의완,박동수 慶北大學校 師範大學 科學敎育硏究所 1999 科學敎育硏究誌 Vol.23 No.-

        We have grown Zr based vitreloy alloy thin films by thermal deposition methode and ion beam sputtering method and compared them with Zr-Ti-Cu-Ni-Be bulk metallic glass bulk. Thermal analysis caused Zr-Ti-Cu-Ni-Be bulk metallic glass to recrystallize in the two region. The onset point temperature of the first region was 414.12℃ and the peak temperature was 410.02℃. The onset point temperature of the second region was 445.21℃ and the peak point temperature was 454.45℃. The X-ray diffraction measurement and thermal analysis as a function of temperature showed that the bulk metallic glass thin films recrystallize in the same temperature region. As a result, Zr based vitreloy alloy was the same as phase transition of bulk metallic glass bulk and bulk metallic glass thin film.

      • 自動倉庫와 保管品의 最適配置에 관한 硏究

        李相玩,申大赫,兪炳哲 동아대학교 공과대학 부설 한국자원개발연구소 1990 硏究報告 Vol.14 No.1

        This paper deal with the concept of AS/RS and the closest available location is AS/RS. Travel-time model and minimum cost model have developed for automated storage/retrieval machine. In this article, it is shown that arrival loads follow Poisson process and duration times are independent of each other and have i. i. d. distribution. The objective of this study is mainly compare with existing research and propose new approach method to optimal location. We give approximate method for the K closest location.

      • 하폐수중의 아닐린의 생물학적 분해를 위한 Pseudomonas속 균주 MIDR-79의 분리 및 특성

        이재완,이동희,방병호 한국상하수도학회 1989 한국상하수도학회지 Vol.2 No.1

        A bacterium, MIDR-79. was isolated from river bed which utilizes aniline as sole source of carbon and nitrogen. It was identified as Pseudomonas species. Optimal temperature and pH for the biodegradation of aniline was 30℃ and pH6~8, respectively. The microorganism grew well and degraded aniline completely in the range of 10 to 35mM of aniline, but substrate inhibition was observed at the concentration of 40mM aniline. The enzyme system involved in aniline biodegradation was repressed by the readily utilizable carbohydrates and nitrite. Ammonia was released from aniline with resting cells and accumulated in the reaction mixtue. And aromatic compounds besides aniline such as phenol, catechol and resorcinol were assimilated by the microorganism.

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