간조직내 HBV precore 변이를 동반한 HbeAg 양성 만성 B 형간염 환자에서의 인터페론 치료효과

이연재(Youn Jae Lee),옥승철(Sung Cheul Ok),이상혁(Sang Hyuk Lee),설상영(Sang Young Seol),정정명(Jung Myung Chung),박영홍(Yeong Hong Park),주남영(Nam Young Joo) 대한내과학회 1998 대한내과학회지 Vol.55 No.1

N/A type, Group 2: mixed) were received 3-6 MU INF three times a week for 4-6 months, We did follow-ups for at least six months(mean : Group 1-11.3, Group 2- 13.7 months). A complete responder was defined as persis- tent(>6 months) normalization of transaminase and loss of HBeAg and/or seroconversion. Results : The HBV precore mutants were found in 15 cases(31.2%) among 48 patients: 7 cases(21.2%) in 33 HBeAg-positive patients and 8 cases(53.396) in 15 HBeAg-negative patients. The HBV precore mutants were more frequently found in HBeAg-negative patients(p= 0.043). Differences in severity of hepatic pathology were not observed in the wild-type versus mutant-type chronic hepatitis B patients(p =1.00). Initial response rate was not significantly different between two Groups(p= 0.228), but complete response rate had a lower tendency in Group 2 (p=0.073). Conclusion : There is a tendency for HBV precore mutants to be less responsive to INF therapy than wild type. Therefore the patients with chronic hepatitis B should be treated as early as possible in natural history of their liver disease before the emergence of HBV precore mutants.

C형 간염 치료의 현재와 미래

이연재 ( Youn Jae Lee ) 대한간학회 2014 Postgraduate Courses (PG) Vol.2014 No.1

2007년 유럽간학회 토픽 : C형간염의 치료 관련 분야

이연재 ( Youn Jae Lee ) 대한간학회 2007 Clinical and Molecular Hepatology(대한간학회지) Vol.13 No.2

논평 : 만성 C형간염의 치료: 만성 C형간염 환자에서 페그인터페론 알파 2a와 2b의 초치료 효과 비교

이연재 ( Youn Jae Lee ) 대한간학회 2008 Clinical and Molecular Hepatology(대한간학회지) Vol.14 No.4

한국인 역류 식도염 환자의 식도 상피 세포 사이 간격 확장과 Esomeprazole 투여 후의 변화

김재환 ( Jae Hwan Kim ),지삼룡 ( Sam Ryong Jee ),박성재 ( Sung Jae Park ),양성연 ( Sung Yeun Yang ),박은택 ( Eun Taik Park ),이연재 ( Youn Jae Lee ),이상혁 ( Sang Hyuk Lee ),설상영 ( Sang Yong Seol ),정정명 ( Jung Myung Chung ) 대한소화기기능성질환·운동학회 2006 Journal of Neurogastroenterology and Motility (JNM Vol.12 No.1

목적: 서구에서 역류 식도염 환자의 식도 상피는 세포 사이 간격이 확장되어 있으며, 이는 프로톤 펌프 억제제 치료 후 호전된다고 한다. 이번 연구의 목적은 우리나라 역류 식도염 환자에서 식도 상피 세포 사이 간격이 확장되어 있는지 여부와 프로톤 펌프 억제제 치료 후 세포 사이 간격이 호전되는지 알아보았다. 대상 및 방법: 역류 식도염 증상이 있으며 상부위장관내시경 검사에서 점막 손상이 있는 역류 식도염 환자 10명과 위식도역류의 증상이 없고, 상부위장관내시경 검사에서 점막 손상이 없으며 24시간 보행 식도 산도 검사에서 음성인 정상인 10명을 대상으로 하였다. 모든 대상자에서 상부위장관내시경 검사를 시행하였으며, 위식도 경계부 5㎝ 상방에서 4군데 조직을 생검하여 전자 현미경으로 세포 사이 간격을 측정하였다. 모든 식도 조직의 전자 현미경 소견에서 100 번씩 세포 사이 간격을 측정하였다. 역류 식도염 환자는 8주간 esomeprazole로 치료한 후 내시경 검사를 하고 식도 상피 조직을 생검하여 세포 사이 간격을 다시 측정하였다. 결과: 역류 식도염 환자의 세포 사이 간격(평균 1.49±0.39 ㎛)은 대조군의 식도 상피 세포 사이 간격(평균 0.49±0.10 ㎛)보다 통계적으로 유의하게 확장되었다(p<0.01). 역류 식도염 환자에서 esomeprazole로 치료 후 세포 사이 간격(평균 0.56±0.19 ㎛)은 호전되었다(p<0.01). 결론: 우리나라 역류 식도염 환자의 식도 상피 세포 사이 간격은 정상인에 비해 확장된 소견을 보이며, 프로톤 펌프 억제제 치료 후 호전되었다. Background/Aims: It has been demonstrated that dilated intercellular spaces of esophageal epithelium are a marker of tissue injury in Western gastroesophageal reflux disease (GERD); which heals after proton pump inhibitor (PPI) treatment. The aim of this study was to determine whether dilated intercellular spaces are also a feature of acid damage in Korean GERD patients and are also healed after PPI treatment. Methods: Ten GERD patients with heartburn and esophageal mucosal breaks on endoscopy, and 10 controls with no symptoms, normal mucosa on endoscopy and negative 24-hour pH monitoring were enrolled. During upper gastrointestinal endoscopy, four biopsies from normal mucosa were taken within the lower 5 ㎝ of the esophagus for transmission electron microscopy (TEM) analysis. One hundred computer measurements were taken on TEM photomicrographs of the specimens in each patient. After eight weeks of esomeprazole 40 ㎎/day, patients with erosive esophagitis had another endoscopy with biopsies and the intercellular spaces were measured again. Results: The mean intercellular space diameter, in the erosive esophagitis patients, was greater than in controls (1.49±0.10 ㎛ vs 0.49±0.10 ㎛, p<0.01). The mean intercellular space diameter, in erosive esophagitis patients, improved after PPI treatment. Conclusions: Korean erosive esophagitis patients have dilated intercellular spaces of esophageal epithelium and dilated intercellular spaces can be reversed after esomeprazole treatment. (Kor J Neurogastroenterol Motil 2006;12:19-24)

가스유동해석을 통한 방폭구역 설정기준의 검증 연구

이민경(Min-Kyung Lee),김정환(Jeong-Hwan Kim),이제관(Je-Kwan Lee),이진한(Jin-Han Lee),이연재(Youn-Jae Lee) 한국가스학회 2016 한국가스학회 학술대회논문집 Vol.2016 No.6

B형 간염바이러스 중합효소의 역전사효소 활성을 억제하는 인간 단세포군 항체

박성재 ( Sung Jae Park ),설상영 ( Sang Yong Seol ),지삼룡 ( Sam Ryong Jee ),박은택 ( Eun Taik Park ),이연재 ( Youn Jae Lee ),이상혁 ( Sang Hyuk Lee ),정정명 ( Jung Myung Chung ),조현대 ( Hyun Dae Cho ),정영주 ( Young Ju Jeong ) 대한소화기학회 2007 대한소화기학회지 Vol.49 No.2

목적: 간경변과 간암의 주 원인 중 하나인 B형 간염바이러스(hepatitis B virus, HBV)에 대한 새로운 치료법의 개발의 일환으로 phage display 기법을 이용하여 바이러스 복제에 있어 중요한 P 단백의 역전사효소 활성을 억제하는 인간 단세포군 항체를 제작하여 protein based 유전자 치료 가능성을 분석하고자 하였다. 대상 및 방법: HBV P 단백의 역전사효소 기능 부위인 RT/POL 기능 부위를 pMAL-C 벡터에 클로닝하고 maltose binding protein과 융합 단백의 형태로 재조합 단백으로 발현시켰다. 1.1×10(10)의 인체 single chain Fv phage antibody library를 사용하여 RT/POL 재조합 단백에 대한 항체를 BIAcore로 선택하였다. 선택된 항체의 역전사효소, RNA-dependent DNA 중합효소 기능 정도를 분석하였으며 BIAcore로 항원에 대한 친화도를 그리고 염기서열 분석을 통하여 항원 결정 부위를 확인하였다. 결과: 대장균에서 발현 정제된 RT/POL 기능 부위 재조합 단백은 역전사효소 활성을 유지하고 있었으며, 1μg의 재조합 단백은 5 unit의 MMLV 역전사효소와 동일한 효소 활성을 가지고 있었다. BIAcore를 이용한 RT/POL에 대한 항체의 선택으로 POL-A5, POL-B8 그리고 POL-B12의 3개 클론을 확보하였다. 선택된 클론들의 역전사효소 활성 억제능은 각각 82- 52%였으며, 항원에 대한 친화도는 8.15×10(-8) M to 1.75×10(-6) M이었다. 결론: 이번 연구를 통하여 제작된 인간 단세포군 항체는 항원에 대한 친화도가 낮았으나 in vitro에서 효과적으로 역전사효소 활성을 억제하여 protein based gene therapy로서 세포 내 항체로 발현한다면 HBV P 단백의 기능을 억제하여 바이러스의 복제를 억제할 것이다. Background/Aims: To develop a novel treatment method for hepatitis B virus (HBV) infection, we aimed to make a human monoclonal antibody inhibiting reverse transcriptase (RT) activity of P protein which was important in HBV replication by using phage display technique. Therefore, we analysed the usability of human monoclonal antibody as a protein based gene therapy. Methods: Reverse transcriptase/polymerase (RT/POL) functional motif of P protein of HBV was cloned in pMAL-c vector and expressed as maltose binding fusion protein form. The RT/POL recombinant protein (pMRT/POL) was purified by amylose resin column. Using human single chain Fv phage antibody library with 1.1×10(10) size, human antibody against pMRT/POL was selected with BIAcore panning. Selected antibody fragments were analyzed for the activity of RT inhibition. Finally, they were analyzed for the affinity with BIAcore and the complementarity determining regions with nucleotide sequencing. Results: pMRT/POL recombinant protein expressed in E. coli showed RT activity, 1㎍ of recombinant protein had an activity equivalent to 5 unit of MMLV RT. By BIAcore panning, we could select 3 clones; POL-A5, POL-B8 and POL-B12. Each clone`s RT inhibiting activity were 52-82%, affinity against antigen were 8.15×10(-8) M to 1.75×10(-6) M. Conclusions: Human monoclonal antibodies produced in this study showed low affinity, but efficiently inhibited the activity of RT in vitro. If POL-A5, POL-B8, and POL-B12 can be converted to intracellular antibody form, it can be used for protein-based gene therapy by inhibiting the replication through the neutralization of polymerase protein of HBV. (Korean J Gastroenterol 2007;49:85-92)

마우스 Hepa-1c1c7 세포주에서 B형 간염 바이러스에 의한 tumor necrosis factor-a의 발현 유도

예성수,장원희,양영일,이연재,김미성,석대현,박영홍,백계형,Yea Sung Su,Jang Won Hee,Yang Young-Il,Lee Youn Jae,Kim Mi Seong,Seog Dae-Hyun,Park Yeong-Hong,Paik Kye-Hyung 한국생명과학회 2005 생명과학회지 Vol.15 No.1

B형 간염 바이러스(HBV)에 의한 감염은 인류의 보건에 대단히 중요한 문제이며, 따라서 HBV에 대한 많은 연구가 수행되어져 왔다. 그러나 HBV 연구에 있어서의 주된 장애요인은 그 감염이 사람과 일부 영장류에 국한된다는 점이다. 본 연구에서는 마우스 간암 세포주인 Hepa-1c1c7 세포를 이용하여 HBV의 감염성 및 그에 따른 염증성 사이토카인인 TNF-a의 발현의 변화를 측정하였다. HBV의 표면항원(HBsAg)분비는 microparticle enzyme immunoassay를 사용하여 측정하였고, TNF-a mRNA 발현 측정에는 quantitative competitive RT-PCR 방법을 사용하였다. HBV 발현 벡터를 Hepa-1clc7 세포에 도입시켰을 경우뿐만 아니라 HBV 비리온을 갖고 있는 혈청을 사용하여 Hepa-lc1c7 세포를 감염시켰을 때에도 HBV mRNA 발현 및 HBsAg 분비가 측정되었다. 또한 두 상황 모두에서 TNF-a mRNA발현이 증가됨을 알 수 있었다. 이러한 결과는 사람과 영장류에 특이적인 HBV가 마우스 간암 세포주인 Hepa-lclc7 세포도 감염시킬 수 있다는 가능성을 제시한다. 또한 마우스 기원의 Hepa-lclc7 세포에서도 HBV의 유전자 발현에 필요한 여러 인자들이 존재하며, TNF-a와 같은 사이토카인 유전자 발현을 조절하는 세포 내 기전에 HBV가 영향을 미친다고 할 수 있다. 따라서 마우스 간암 세포주인 Hepa-lclc7 세포는 HBV 연구를 위한 시험 관내 모델로서 사용되어질 수 있을 것으로 보인다. Infection with hepatitis B virus (HBV) is a major health problem worldwide. Although a tremendous amount has been known about HBV, there have been obstacles in the study of HBV due to the narrow host range of HBV limited to humans and primates. In the present study, we investigated the susceptibility to HBV infection of mouse hepatoma cell line, Hepa-1c1c7. In addition, based on that human hepatocytes infected by HBV increase the expression of the pro-inflammatory cytokine TNF-a, the inducibility of TNF-a expression by HBV in the cells was determined. HBV surface antigen (HBsAg) secretion was measured by the microparticle enzyme immunoassay and steady state mRNA expression was analyzed by quantitative competitive RT-PCR. Transient transfection of Hepa-1c1c7 cells with HBV expression vector resulted in a dose-dependent induction of TNF-a expression. Infection of Hepa-1c1c7 cells with the serum of HBV carrier also increased TNF-a mRNA expression. Both in the transfected and infected cells, HBV mRNA was expressed and significant HBsAg secretion was detected. There was no significant variation in $\beta-actin$ mRNA expression by HBV. These results demonstrate that HBV is infectious to Hepa-lc1c7 in vitro and the viral infection induces TNF-a expression, which suggests that Hepa-lc1c7, a mouse hepatoma cell line, may be a possible model system for analysis of various molecular aspects of HBV infection.

소화기 ; ALT<80 IU/L인 만성 B형 간염 환자의 중등도 이상 간섬유화 유병률

이우진 ( Woo Jin Lee ),박승하 ( Seung Ha Park ),김동준 ( Dong Joon Kim ),이성화 ( Sung Hoa Lee ),이찬우 ( Chan Woo Lee ),박규태 ( Kyu Tae Park ),정재연 ( Jae Youn Cheong ),조성원 ( Sung Won Cho ),황성규 ( Seong Gyu Hwang ),이연재 대한내과학회 2010 대한내과학회지 Vol.78 No.1

목적: 우리나라의 만성 B형 간염에 대한 항바이러스 치료의 보험기준은 AST/ALT가 80 IU/L 이상이지만, 최근 발표된 연구들에 따르면 정상 상한치의 두 배 미만의 ALT 수치를 가진 환자에서도 상당수의 중등도 이상 섬유화가 관찰 되었다. 이 연구는 국내에서 ALT가 80 IU/L 미만인 환자 중 중등도 이상 섬유화가 얼마나 있는지를 확인하고자 하였으며, 임상에서 흔히 접할 수 있는 자료를 이용하여 중등도 이상 섬유화를 예측할 수 있는 방안을 찾아보고자 하였다. 방법: 여섯 곳의 3차 병원에서 최소 6개월 이상 B형 간염 표면항원를 지니고 있으면서, 혈청 ALT가 80 IU/L 미만이고, 항바이러스 치료를 한 적이 없는 만성 B형 환자 중 간생검을 받은 총 136명의 환자를 대상으로 하였다. 생검 조직의 간섬유화 정도는 METAVIR 기준의 간 섬유화병기에 따라 분류하였으며, F2 이상의 간섬유화를 중등도 이상 간섬 유화로 정의하였다. 임상 자료를 토대로 간섬유화에 대한 비침습 예측모델을 만들었으며, 이의 유용성 및 섬유화 정도 평가에 따른 적절한 경계값을 알아보기 위하여 AUROC 분석을 시행하였다. 결과: 혈청 ALT가 80 IU/L 미만인 만성 B형 환자 전체의 71.3%에서 중등도 이상 섬유화가 관찰되었다. 간생검에서 나타난 섬유화의 정도와 예측모델[위험점수=(3.9×Ln 나이)+(2.7×Ln AST)]의 측정값과는 유의한 연관성을 보였다(r= 0.644, p<0.001). 예측모델에서 진단의 정확성은 높게 측정되었다[AUROC in training set: 0.86 (95% CI, 0.78~0.94), AUROC in validation set: 0.90 (95% CI, 0.78~0.99)]. 이 예측모델의 음성 예측치는 낮았지만, 양성 예측치[90.9% (95% CI, 77.4~97.0), 96.2% (95% CI, 78.4~99.8)]는 높았다. 결론: 우리나라에서도 ALT가 80 IU/L 미만인 만성 B형 간염 환자들 중 중등도 이상 간섬유화를 보이는 경우가 많은 것이 확인되었다. 현재 우리나라의 보험규정에 따라 만성 B형 간염 환자를 치료할 경우 많은 환자들이 적절한 치료를 받지 못하므로 이에 대한 시정이 필요하다. 또한 임상에서 흔히 접할 수 있는 자료로 만들어진 예측모델은 간생검을 시행하지 않고도 간섬유화의 정도를 추정할 수 있는 유용한 비침습 검사방법으로 생각된다. 그러나 이 예측모델을 임상에 적용하기 위해서는 향후 대규모의 독립적인 환자군을 대상으로 하는 검증이 필요하다. Background/Aims: The aims of this study were to investigate the prevalence of significant fibrosis in patients with chronic hepatitis B (CHB) virus infections and alanine aminotransferase (ALT) <80 IU/L, and to develop a noninvasive predictive model for significant fibrosis. Methods: The 136 patients with CHB who underwent liver biopsy were recruited from six tertiary hospitals. The diagnostic value of predictors was judged using multivariate logistic modeling and the area under the receiver operating characteristic (AUROC) curve. Results: Significant fibrosis was diagnosed in 97 patients (71.3%, 95% CI, 63.7~78.9%). In the training set (n = 85), the most important clinical data for predicting significant fibrosis were age and aspartate aminotransferase (AST). The AUROC of this model was 0.86 (95% CI, 0.78~0.94). The validation set (n=51), obtained from another institute, yielded similar results [AUROC: 0.90 (95% CI, 0.78~0.99)]. Conclusions: A high prevalence of significant fibrosis in CHB patients with ALT <80 IU/L was observed. A simple model that includes age and AST provides an easily applicable tool for physicians to guide the decision-making process regarding the need to perform a liver biopsy in individual patients. However, additional studies are needed to explore the model`s performance in larger, independent patient populations. (Korean J Med 78:68-74, 2010)

확장형 심근증에서 도플러 심초음파를 이용한 좌심실 구혈력 및 내인성 심실 부하역동의 평가

채창식(Chang Sig Chae),이연재(Youn Jae Lee),박정현(Jeong Hyun Park),조기정(Gi Jeong Cho),김환태(Hwan Tae Kim),신형규(Hyung Gyu Shin),김동수(Dong Soo Kim),이경순(Kyung Soon Lee) 대한내과학회 1994 대한내과학회지 Vol.46 No.3

N/A Background: Since the concept of peak aortic blood velocity and peak acceleration by Rushmer et al, doppler echocardiography based on the hemodynamic theory has developed as a new noninvasive measure for the evaluation of left ventricular systolic function during the ejection time. Method: The left ventricular ejection force over the acceleration time and the intrinsic component of the left ventricular load at peak acceleration, measured by pulsed wave doppler echocardiography, were compared in 10 patients with idiopathic dilated cardiomyopathy with 9 normal controls. Results: 1) The fractional shortening, peak aortic blood velocity, mean acceleration and ejection force over the acceleration time were significantly lower in the dilated cardiomyopathy group than control group (control vs DCM =33.88±4.75% vs 17.21±5.99%, p<0 001, respectively). 2) By the regressin in the % fractional shortening,, measurement of ejection force over the acceleration time was more beneficial than measurement of peak aortic blood velocity and mean acceleration in assessing the left venticulat systolic function(r=63, 0.49 and 0.55 respectively). 3) The left ventricular intrinsic wall stress showed no significant statistical difference between 2 groups, but intrinsic σm/total σm ratio was significantly lower in the dialated cardiomyopathy group than control group (control vs DCM = 4.36±1.889: vs 1 88% vs 1.84±0.88% p<0.005). Conclusion: The measurement of the ejection force over the acceleration time and the left ventricular intrinsic wall stress/total ventricular load ratio were beneficial in evaluating the ejection hemodynamics during the left ventricular systole.