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      • 냉동 제대혈 세포의 체외 증폭

        김삼용,김철희,배광봉,김현수,박상준,김종숙,윤환중,조덕연 충남대학교 암연구소 1998 癌共同硏究所 硏究誌 Vol.2 No.1

        Background : Cord blood(CB), which has no HLA restriction, is an alternative to bone marrow for hematopoietic stem cell transplantation. The use of cord blood, however, is limited by the number of progenitor/stem cells necessary to reconstitute the older child or adult. Therefore, ex vivo expansion of CB could have tremendous impact on diverse clinical settings. We studied the ex vivo expansion of isolated population of CD34_(+) cells from cryopreserved CB cells. Methods : CD34 cells were isolated from cryopreserved CB mononuclear cells. Purified cells were cultured with various combinations of hematopoietic growth factors including erythropoietin(EPO), stem cell factor(SCF), granulocyte-colony-stimulating factor(G-CSF), gra-nulocyte, macrophage-colony-stimulating factor(GM-CSF), interleukin-1β(IL-1β), 1L-3, and IL-6. After 7, 10 or 14 days of culture, the fold increases of colony-forming unit- granu-locyte, macrophage(CFU-GM), burst-forming unit-erythroid(BFU-E), colony-forming unit-mix (CFU-Mix), and high proliferative potential colony-forming cell(HPP-CFC) were evaluated. Results : Ten-day culture with the combination of EPO, SCF, G-CSF, IL-1β, and IL-3 resulted in a median of 60-fold increase of CFU-GM, which was greater than those with the combinations of less than 5 growth factors. The addition of IL-6 or GM-CSF to this combination did not enhance CFU-GM expansion. Ten-day culture was significantly superior to 7-day culture for CFU-GM expansion. Prolongation of culture to 14 days, however, revealed decreased expansion of CFU-GM compared to 10 days. BFU-E and CFU-Mix were expanded to 2~5 folds in 7-day culture with the combination of EPO, SCF, and G-CSF. Further expansion was not achieved in 10-day culture and colonies disappeared in 14-day culture. HPP-CFC was expanded to a median of 7.5 folds in 7-day culture with the combination of EPO, SCF, G-CSF, IL-1β, IL-3, and IL-6. Neither 10-day or 14 day-culture enhanced expansion of HPP-CFU. Conclusion : Cryopreserved cord blood cells maintain ex vivo expansion potential. In our system, 10-day culture with the combination consisting of EPO, SCF, G-CSF, IL-1β, and IL-3 seems to be adequate for hematopoietic progenitor/stem cell expansion from cryopreserved cord blood cells.

      • SCOPUSSCIEKCI등재
      • 항암제 처리한 백혈병 세포주에서의 Apoptosis 발현

        김삼용,윤소현,김현수,김종숙,윤환중,김진경,조덕연 충남대학교 암연구소 1998 癌共同硏究所 硏究誌 Vol.2 No.1

        The bcl-2 proto-oncogene encodes a 26 kD protein that promotes cell survival by blocking apoptosis. The bax protein is a member of the bcl-2 familly, now known to form heterodimers with the bcl-2 protein. The ratio of bax to bcl-2 is be critical in determining the fate of the cell in response to stimuli that can induce apoptosis. Extract of Pulsatilla Koreana (SB-31) showed promising antitumor activity in vitro with Topo I inhibitory action. In the present study, the relationship between apoptosis and the apoptosis related proteins, bcl-2 and bax were investigated in human leukemic cell lines HL-60, U-937 and CEM-CM3. All anticancer drugs(adriamycin, etoposide, camptothecin, SB-31) induced extensive apoptosis in HL-60, U-937 cells and CEM-CM3 cells. The expression of bcl-2 and bax protein were determined in cell lines by western blotting before and after incubation with anticancer drugs at different time points. 1) In HL-60 or U-937 cell lines, down regulation of bcl-2 and up-regulation of bax were found after incubation with ADR, VP-16 or camptothecin. 2) In HL-60 or U-937 cell lines, no significant change in bcl-2 or bax protein expression resulted after incubation with SB-31. 3) In CEM-CM3 cells, virtually no change was noted in bcl-2/bax expression after incubation with ADR, VP-16, camptothecin or SB-31. It is suggested that different leukemic cell lines use different pathways of apoptosis activation and a given cell may utilize different pathways of apoptosis activation in response to different cytotoxic agents.

      • 일부 자동차 공장 근로자들의 職業的 特性과 社會 心理的 Stress의 相關性 硏究

        김성삼,홍지우,한현정,최희석,권소희,정해경,김삼태,송용선,이기남 한국전통의학연구소 2004 한국전통의학지 Vol.14 No.1

        〈Objective〉 This study were carried out to study to assess the relationship between job characteristics, general characteristics, health behaviors, and psychosocial distress and suggested the preventive oriental medicine approaches in occupational health area. 〈Methods〉 We measured job characteristics(job demand, job control, jop insecurity) by The Karasek's Job Content Questionnaire, health behaviors(smoking, drinking, exercise, coffee), general characteristics at work by a self-administered questionnaire. Psycho social distress was measured by PWI(Psychosocial Well-being Index), a 18-item self- administered instrument. 370 data for research were collected through the process of oriental health examination with questionnaire in workplace. Statistical analysis was done by t test, oneway ANOVA, and hierarchical multiple regression analysis with SPSSWIN (version 10.0) 〈Results〉 Among the 152 respondents, the prevalence of high job strain was 27%(41 persons). The Odds ratio of high job strain was 3.11(95 2.12~4.11), and those of passive group and active group were 2.01(95 0.83~2.76) and 1.80(95 0.83~2.76), respectively. Our results supported the association between psychosocial distress and job strain. 〈Conclusion〉 The odds ratio of high strain isolated group(high strain group+low social support) was 3.59(95 2.05 5.13), but the odds ratio of high strain collective group was 1.32(95 0.23 2.41). Social support at work was modifing factor of the association between psycho social distress and job strain. Therefore we reviewed the evidence that economic depression was associated with psycho social distress in this study, and that the strength of the social support was important in maintain health.

      • Streptozotocin-당뇨병 백서에서 당뇨병 이환기간에 따른 대동맥의 이완능 저하 및 Oxygen-Free Radical에 의한 이완능의 손상정도

        김정국,김신우,김수동,서예경,하승우,김보완,백운이,권삼,강승완 경북대학교 병원 1997 경북대학교병원의학연구소논문집 Vol.1 No.1

        목적: 당뇨병의 이환기간이 혈관의 내피세포 의존성 및 비의존성 이완능의 저하에 미치는 영향과 이환기간에 따라 oxygen-free radical(OFR)에 의한 동맥이완능의 손상정도에 차이가 있는지를 알아보고자 하였다. 방법: Streptozotocin(STZ)으로 당뇨병이 유도된 3 주 및 10주째의 백서군과 연령이 비슷한 정상 대조백서군의 적출 대동맥환을 norepinephrine으로 수축시킨 상태에서 내피세포 의존성 이완제인 acetylcholine(ACh) 및 비의존성 이완제인 nitroglycerine(NTG)에 대한 이완능을 즉정하여 비교 관찬하였다. 또한 xanthine과 xanthine oxidase의 혼합으로 생성된 H₂O₂에 대동맥환을 노출시킨뒤 역시 ACh과 NTG에 대한 이완능의 손상정도를 비교하였다. 결과: 3주및 10주째 당뇨병 백서의 대동맥환은 모두 대조군 백서의 대동맥환에 비해 ACh에 대한 이완능이 유의하게 감소하였으며 10주째 당뇨병 백서군에서의 ACh에대한 이완능의 저하는 3 주째 당뇨병 백서군에 비해 유의하게 심하였다.H₂O₂에 노출시킨 뒤 ACh에대한 이완능은 3주 및 10주 째 당뇨병 백서군에서 모두 대조군에 비해 유의하게 심한 손상을 보였으나 3주와 10주째 당뇨병 백서군 사이의 손상정도의 차이가 통계학적으로 유의하지는 않았다. 한편 3주 및 10주째 당뇨병 백서군 모두 NTH에 대한 대동맥환의 이완능은 대조 백서군과 별다른 차이가 없었으며 또 H₂O₂에 노출시킨 뒤에도 NTG에 대한 이완능의 손상은 관찰되지 않았다. 결론: STZ-당뇨병백서에서 대동맥의 이완능은 당뇨병에 이환된지 3 주째에 이미 ACh에 대한 내피세포 의존성 이완능이 선택적으로 저하되며 당뇨병의 이환기간이 길수록 이완능의 저하가 심하였고, OFR에 의한 동맥 이완능의 손상도 내피세포 의존성 이완능에만 선택적으로 나타나나 이환기간에 따라 OFR에 의한 이완능 손상정도에는 뚜렷한 차이가 없음을 시사하고 있다. Objectives: Diabetes mellitus produces histological evidence of endothelial as well as changes in vascular function in experimental animal. Oxygen free radicals interfere with of destroy endothelium-dependent relaxation in normal and diabetic blood vessels. The present study was investigated whether the duration of diabetic state can affect the severity of impairment in endothelium-dependent and/or independent relaxation and the sensitivity to oxygen free fadical (OFR)-induced damage in diabetic rat vasculature. Methods: The relaxative responses of aortic ring precontracted with norepinephrine in vitro to cumulative concentrations of acetylcholine (ACh) and nitroglycerine (NTG) were conducted in 3- and 10- week streptozotocin (STZ)-diabetic rats and agematched controls. After exposure to H₂O₂generated by mixing xanthine and xanthine oxidase, the degree of impairment in relaxative responses to ACh and NTG were also compared between 3- and 10-week diabetic rats. Results: The relaxative responses of aortic rings produced by cumulative concentrations of ACh were significantly lower in both 3- and 10-week diabetic rats than in the age-matched controls. The impairments of relaxative responses to ACh in 10-week diabetic rats were significantly greater than those in 3-week ones. After H₂O₂ exposure, the impairments of relaxative responses to ACh in 3- and 10-week diabetic aortas was also significantly greater than those in the control in the control ones. However, the severity of H₂O₂-induced damage in 10-week diabetic aortas was not significantly different than that in 3-week ones. In contrast, aortic rings of 3- and 10-week diabetic rats could still be fully relaxed by NTG, even after exposure to H₂O₂. Conclusion: These findings suggest that in SRZ-diabetic rat aortas selective impairment of endothelium-dependent relaxation to Ach can be found early even over a 3-week period after the induction of diabetes and the impairment may be greater in those with the longer duration of the diabetic state and that the impairment of the vascular relaxation by OFR is also selective to endothelium-dependent response but the sensitivity of OFR-induced damage may not be related to the duration of the diabetic state.

      • 의무고용제도 재설계 방안

        김종진,장창엽,유완식,김언아,이정주,류정진,강필수,최종철,남용현,김윤삼 한국장애인고용촉진공단 고용개발원 2008 연구개발 Vol.- No.2

        현행 우리나라 의무고용제도는 장애인구의 급격한 증가, 장애인차별금지 및 권리구제 등에 관한 법률의 도입 등 외부환경변화에 신축적으로 대처하지 못하고, 경증장애인 중심으로 의무고용제도가 운영됨으로써 중증장애인의 고용배제가 우려되고 있다. 본 보고서는 이러한 문제점을 해결하기 위해 의무고용제도의 일자리 확대와 고용증가를 통해 중증장애인의 고용기회를 확대할 수 있는 정책방안을 제시하기 위한 것이다. 본 보고서는 (1)의무고용 사업체의 의무고용 산정인원에서 자립장애인 제외 (2)현행 2% 의무고용률을 3%로 상향 조정 (3)사업체가 고용하는 중증장애인에 대한 더블카운트(2배) 가산제도 도입 (4)의무고용률 미달 사업주에 대한 부담금 차등징수의 4가지 정책방안, 제도 합리화 차원에서 장려금 지급방식의 개선과 사업주의 장애인에 대한 인식개선 방안을 제시하였다. 정책방안에 대한 영향분석 결과 의무고용 적용대상자에서 비장애인과 고용상 차별되지 않는 자립장애인(6등급)을 의무고용 산정인원에서 제외하는 경우 의무고용 사업체의 고용인원은 23,296명이 감소해 고용률은 1.35%에서 0.88%로 감소하였고, 의무고용 사업체의 장애인 일자리 수는 미고용인원의 증가로 15,152개가 증가하였다. 그리고 기금은 부담금이 631억원 증가하고, 장려금이 352억원 감소해 983억원의 수지개선 효과가 발생하는 것으로 나타났다. 의무고용 사업주의 의무고용률 3% 인상 방안은 의무고용률 상향 조정에 따른 미고용인원의 증가로 장애인의 일자리 수는 43,101개가 증가하고, 기금은 부담금이 1,709억원 증가하는 반면, 장려금은 293억원이 감소해 2,002억원의 수지개선 효과가 발생하는 것으로 나타났다. 의무고용 사업주가 고용하는 중증장애인을 2인으로 더블카운트 하는 중증장애인 가산제도의 도입은 의무고용 사업체의 장애인근로자가 67,261명에서 79,685명(1,2등급만 포함시 75,685명)으로 증가하여 고용률은 1.35%에서 1.60%(1.2등급만 포함시 1.52%)로 증가하고, 의무고용률 미달 사업체의 미고용 인원이 감소하여 2,745개의 일자리가 감소하였다. 그리고 기금은 부담금이 118억원 감소하는 반면, 장려금은 418억원이 증가해 536억원의 수지악화가 발생하는 것으로 나타났다. 의무고용률 미달 사업체의 고용유인을 위해 고용률 1.0%미만, 1.0-1.5%, 1.6-2.0% 미만에 대해 각각 20%, 10%, 5%의 할증률을 순차적으로 가중하여 부과하는 부담금 차등징수 방안(3차년까지의 효과임)은 1.0% 미만 사업주는 86만원, 1.0-1.5% 사업주는 64만원, 1.6-2.0% 미만 사업주는 58만원의 부담기초액을 부과할 때 고용률은 1.35%에서 1.53%로 증가(1.6-2.0% 미만 사업주는 의무고용률 2%를 달성)하고, 미고용인원의 감소로 장애인의 일자리는 8,836개가 감소하는 것으로 나타났다. 그리고 기금은 부담금이 58억원 감소하여 수지는 악화되었다. 이상의 네 가지 방안은 모두 장애인의 고용증대를 가져온다는 측면에서는 유효하지만, 장애인의 일자리 확대를 통한 중증장애인의 고용을 증대한다는 정책목표를 달성하는 데에는 한계점을 안고 있기 때문에 어느 한 정책만을 선택하기보다는 정책효과를 극대화하기 위해 정책결합(policy mix)을 이용하는 것이 바람직함을 제시해주었다. 즉, 의무고용 적용대상자 조정방안/의무고용률 상향조정 방안과 중증장애인 가산제도/부담금 차등징수 방안을 조합 또는 모두 동시에 선택하는 경우 의무고용 사업체의 장애인 일자리 수의 확대와 중증장애인 고용을 동시에 달성하고, 기금의 수지균형도 달성 가능한 것으로 나타났다. The mandatory employment quota system of Korea does not reflect the changing external factors such as the growing population of people with disabilities(PWDs) and the enactment of the Anti-discrimination Law for People with Disabilities. The current employment quota system focuses on people with mild disabilities thus excluding people with severe disabilities from employment. The purpose of this report is to propose a plan in order to increase employment opportunity for the severely disabled through the reform of the employment quota system. This report analyzes the following : (1) exclude grade 6 disability from mandatory employment quota (2) raise the employment quota from 2% to 3% (3) implement the double counting for employers that employ the severely disabled (4) differentiate the amount of levy collected from corporations that are unable to meet the quota. The aforementioned plans are useful in that they increase employment for people with disabilities. However, there are limitation to reaching the policy objectives by increasing jobs for people with severe disabilities. Therefore, to maximize the effects we should consider policy mix of these four policies. In other words, by mixing the policies of adjusting the employment quota target/raising the quota ratio and implementing the double count/differentiating the amount of levy, we can achieve the goal of increasing jobs for the severely disabled and maintain equilibrium between incomings and outcomings.

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