Site-specific and deletional mutagenesis for two regions of Verotoxin-2 A gene encoding enzymatically active domain

김용환,김상현,차인호,김경숙,이영춘,Kim, Yong-hwan,Kim, Sang-hyun,Cha, In-ho,Kim, Kyoung-shook,Lee, Young-choon The Korean Society of Veterinary Science 1997 大韓獸醫學會誌 Vol.37 No.3

There are two conserved regions with a significantly high amino acid sequence homology among the A subunits of STX, SLTs and ricin. To produce an inactive Verotoxin-2 (VT-2), two different mutants, pE167D and pDE5A, were constructed by site-directed mutagenesis, respectively, on the basis of the previous reports that two regions lie within the active-site clefts of the A subunits of ricin and STX family. The cytotoxicity ($10^3$ $CD_{50}/ml$) of VT-2 holotoxin with E167D mutation was reduced by $10^3$-fold compared with wild-type level. In addition, VT-2 with DE5A ($Trp_{202}GlyArgIleSer_{206}$) deletion mutation showed a significantly low cytotoxicity ($10^1$ $CD_{50}/ml$), resulting in $10^5$- and $10^2$-fold reductions, respectively, compared with the wild-type and E167D mutatant. SDS-PAGE for protein samples showed a 33-kDa band corresponding to the A subunit of VT-2. These results indicate that reduction in cytotoxic activity was affected not by amount of VT-2 protein produced but by mutation. VT2(Verotoxin-2)의 효소활성 영역에 해당되는 두 영역의 아미노산들에 대하여, 첫번째 보존영역의 Glu167을 conservative point mutation 시키고, 두 번째 보존영역의 구성 아미노산 5개 전부를 deletion mutation 시켜, 각 변이주에서 독성의 감소 정도를 wild type과 비교한 결과 다음과 같은 성적을 얻었다. 1. pKSC101을 Eco RI과 Pst I으로 절단하여 940bp insert를 통일 제한효소로 절단한 M 13mp19에 삽입하여 pEP19RF를 구축하였다. 이를 이용하여 dU-SSDNA template를 제조하고, mutagenic primer를 annealing 하여 변이를 도입하였으며, 변이가 도입된 insert를 acceptor plasmid에 삽입시켜 각각 발현 플라스미드 pOEX와 pDEX를 구축하였다. 각각의 mutant 단백질을 발현시키기 위하여 pOEX와 pDEX를 JM109에 형질전환시켜 mutant 재조합 균주인 POMUT109와 DEMUT109를 작성하였다. 2. POMUT109와 DEMUT109를 IPTG 유도 발현시킨 배양상층액을 Vero cell에 대하여 세포독성을 시험한 결과 wild type에 비하여 POMUT109의 배양 여액에서는 2000배, DEMUT109의 배양여액에서는 적어도 3000배 이상의 세포독성을 감소시켰다.

Al 함량과 열처리에 따른 Fe- 23 - 30 at . % 금속간화합물의 미끄럼 마모 거동 분석

김용환,김승현,김용석 ( Yong Kwan Kim,Seung Hyun Kim,Yong Suk Kim ) 대한금속재료학회 ( 구 대한금속학회 ) 1997 재료강도 심포지엄 Vol.- No.-

물질흐름 및 특허분석을 통한 주석 스크랩 재활용 기술 동향

김용환,손성호,최한신,한철웅,김태범,안재우,김홍인,이기웅,Kim, Yong Hwan,Son, Seong Ho,Choi, Han Shin,Han, Chul Woong,Kim, Tae Bum,Ahn, Jae Woo,Kim, Hong In,Lee, Ki Woong 한국자원리싸이클링학회 2014 資源 리싸이클링 Vol.23 No.3

주석은 땜납, 주석도금강판, 청동 합금, 투명전극용 타겟 및 화학첨가제 등에 널리 사용되고 있다. 최근 자원의 희소성 및 경제성으로 인해 주석 스크랩에 대한 재활용 기술이 연구되고 있다. 본 논문에서는 주석이 함유된 공정 스크랩, 슬러지, 도금 폐액 및 합금의 재활용 기술에 대하여 1970년부터 2013년까지 공개/등록된 한국, 미국, 중국, 일본, 유럽의 특허에 대하여 조사하였다. 특허는 키워드를 사용하여 수집하였으며, 기술의 정의에 의해 필터링 하여 연도, 국가, 출원인 및 기술에 따라 분석하였다. Tin has been widely used to solder, tin plated steel, bronze alloy, sputtering target for transparent electrode and chemical additives. It has been widely reported to the recycling technologies for tin scraps because of the scarcity and economic efficiency of the reserve. This study was analyzed by using open/registered patents KR, US, CN, JP and EP related to recycling technologies for processing scrap, sludges, waste fluid for plating process and spent alloy containing tin in between 1970 and 2013. Patents were collected using key-words searching and filtered by filtering criteria. The trends of the patents were analyzed by year, country, appliant and technology.

김박사의 파워농업(9) - '소규모 농가'의 생산성, 세계 식량안보의 기반

김용환,Kim, Yong-Hwan 한국작물보호협회 2012 자연과 농업 Vol.283 No.-

김박사의 파워농업(1) - 농업 2.0의 성공은 지속가능한 농업기술이 필수

김용환,Kim, Yong-Hwan 한국작물보호협회 2012 자연과 농업 Vol.275 No.-

농업2.0은 지구온난화의 영향이 미미할때, 비교적 예측 가능한 농업환경하에서 농산물 생산에 대비하자는 표현으로 핵심은 경제적, 사회적, 환경적 요소를 고려하면서 생산과정에서 탄소 발자국(Carbon footprint)을 얼마나 줄일 수 있는가이다.

2009 개정 교육과정에 따른 체육과 교육과정에서 여가활동 수업 방안

김용환(Kim, Yong-whan) 한국체육교육학회 2016 한국체육교육학회지 Vol.20 No.4

신체활동 가치 중심 교육과정에서 여가가치를 실현하기 위한 여가운동 지도방안을 규명하기 위하여 여가활동의 즐거움 찾기, 여가활동의 능력 기르기, 여가 실천하기를 연구 내용으로 하였다. 이러한 연구를 하기 위해서 여가활동을 행복을 느끼는 교육적 과정이라는 관점에서 인지적 정의적 학습을 강조한 좋은 수업모형을 토대로 수업 진행과정별로 의미와 특성을 이해 활동, 여가활동 능력 기르기, 여가 활동 실천하기 단계별로 필요한 여가 학습내용 프로그램을 긍정 심리학의 관점에서 분석하는 문헌 연구를 하였다. 그 결과 다음과 같은 결론을 얻었다. 첫째 여가의 의미와 특성의 이해단계에서는, 여가 가치를 실현하기 위해서 선택된 여가운동을 ‘왜 하는지’의 의미와 특성을 이해할 수 있고 인간의 내재된 유희성을 유발 시켜 움직임 즐거움을 느낄 수 있는 놀이나 게임 활동을 하여야 한다. 이러한 놀이나 게임은 여가와 여가에 대한 역사 철학적 배경지식과 긍정심리학적 지식을 토대로 프로그램이 만들어야 한다. 둘째 여가 활동 능력 기르기 단계에서는 ‘어떻게 하면 여가를 향상 시킬 수 있는지’ 여가 가치인 즐거움을 배가할 수 있는 활동 프로그램 기준은 신체활동의 본질성, 다양성과 새로움임을 알고 여가운동 가치인 의미를 이해하는 인지적 학습이 이루어져야 한다. 여가활동에서 즐거움 실현하기 단계 수업에서는 여가의 가치인 즐거움이 극대화 되도록 몸이 얼마나 다양하고 신체활동의 본질적인 가치에 몰두하는 활동이 이루어지도록 해야한다. 나아가 자신의 여가 활동조건에서 알맞도록 학습자가 스스로가 계획하고 실천해서 평생 여가를 위한 일상적 여가활동을 실천하는 능력을 기르도록 하는 학습자 중심, 사회적 수업이 진행되도록 해야 한다. Purpose: This study was to find the Humanistic approaches to teaching the value-based leisure in the best practice model for unit and lesson planning used for the novice students. Methods: Using Kim"s(2013) previous papers focused on a humanistic approaches of the best practice model for the study of the leisure lesson. The model had been exchanged a model for the teaching of leisure activities games to be in a way of educational conversation linking the mind and body through a delights to adapt to Korean classes to create units of the lesson in leisure activities. The Unit of Leisure Activities was analyzed by Positive Psychology. Conclusion: The implications associated with the finding are following. The approach to learning process required a learner to act the play or games on a base of philosophic and historic knowledge to understand the meaning and characters of leisure and acquire an delights of understandings to open mind by more student centered practice. The units to improve skil lof leisure made learner know the meanings and maximum happiness on criteria to measure and to express the critical delights to link the mind and body by the cognitive and reflective practice. The units to practice leisure required students to indulge the performance level of their leisure.

임도정공장 (賃搗精工場) 미곡 도정실태

김용환,서상룡,김성태,나우정,강화석,민영봉 ( Yong Hwan Kim,Sang Ryong Suh,Sung Tae Kim,Woo Jung La,Whoa Seug Kang,Young Bong Min ) 한국농업기계학회 1979 바이오시스템공학 Vol.4 No.2

주석 소재의 국내·외 품질기준현황 및 재활용 제품의 성능 비교

김용환,손성호,신호정,한철웅,박성철,이만승,Kim, Yong Hwan,Son, Seong Ho,Shin, Ho Jung,Han, Chul Woong,Park, Sung Cheol,Lee, Man Seung 한국자원리싸이클링학회 2019 資源 리싸이클링 Vol.28 No.6

The use of rare metals in increasing along with the growth of the Fourth industrials revolution and new energy industries, and the recycling of rare metals becomes more important as the used of rare metals increase. In this paper, the domestic and international quality standards of tin metal, one of the rare metals, and the performance test of recycled tin were investigated. As a results of the performance test, it was analyzed that there is no difference in performance between the natural and recycled tin.

평형식 진동탄환 암거천공기의 (暗渠穿孔機) 연구 ( Ⅳ) (Ⅴ) - 실기 설계 제작 및 포장실험 -

김용환,이승규,서상룡 ( Yong Whan Kim,Seung Kyu Lee,Sang Ryong Suh ) 한국농업기계학회 1977 바이오시스템공학 Vol.2 No.1

서울시 서초구의 클러스터경쟁력 분석에 관한 연구: 양재 R&D 클러스터 조성을 중심으로

김용환,임희정,최영석,김인중,Kim, Yong-Hwan,Lim, Hee-Jung,Choi, Young-Suk,Kim, In-Jung 산업클러스터학회 2010 산업클러스터 Vol.4 No.1

This study focused on the competitiveness analysis of industrial cluster using econometric method and competency analysis method to measure the situation of Seocho-gu industrial cluster and Yangjae R&D cluster at Seoul. The econometric method used the data such as the number of firms, the number of employee, GRDP. The competency analysis method measured the level of agglomeration of cluster for years through LQ(Location quotient) index. In addition, the characteristics and structure of each industry in Secho-gu and Yangjae-dong R&D cluster. The circumstance of location and business, the competency of potential ability of industries were analysed by SWOT. In sum, this study has the following conclusion. First, Seocho-gu and Yangjae-dong region has an advantage in the circumstance for R&D related industry and man power. Second, Seocho-gu and Yangjae-dong region has a good potential for development in R&D related industries. These region has a good relationship the four major R&D related industry of Seoul. Third, these region also has a advantage in the potential development of R&D related researchers in the corresponding industries. 서울시 서초구 산업클러스터 경쟁력을 분석하기 위해 계량분석과 역량분석을 실시하였다. 사업체수, 종사자수, GRDP 추계(전국, 서울시, 서초구, 양재동) 등 주요 산업경제지표를 계량분석하였고 LQ지수를 통한 클러스터 집적도를 연도별로 분석하였다. 서초구와 양재동 R&D 클러스터의 산업별 특징을 분석하였고 R&D 관련 산업구조 분석을 하였다. 그리고 입지여건, 비즈니스 여건, 산업잠재력의 역량을 SWOT 분석하였다. 연구분석한 자료를 종합적으로 분석하여 보면 다음과 같은 결론을 제시할 수 있다. 서초구 및 양재지역은 국내 최고의 R&D 클러스터의 인프라와 산업발전 역량을 보유하고 있는 것으로 분석되었다. 첫째, 서초와 양재지역은 R&D 관련 산업과 인력인프라가 매우 우수한 것으로 분석되었다. 둘째, R&D 관련 산업의 발전 잠재력 분석에서도 우수한 것으로 분석결과로 나타났다. 이는 서울시 4대전략산업의 R&D 관련 산업과도 가치사슬로 잘 연계되어 있다. 서초구 및 양재지역은 국내 최고의 R&D 클러스터의 인프라와 산업발전 역량을 보유하고 있다. 셋째, R&D 관련 산업 연구자수 발전잠재력 분석에서도 양재지역이 우수한 것으로 나타났다.