농산폐기물(農産廢棄物)에서 발효사료(醱酵飼料)의 생산(生産)에 관(關)한 연구(硏究)[제4보(第四報)] -Aspergillus niger와 Trichoderma viride에 의(依)한 Cellulase의 생산성(生産性)에 관(關)하여-

이계호,고정삼,이강흡,Lee, Ke-Ho,Koh, Jeong-Sam,Lee, Kang-Hup 한국응용생명화학회 1976 Applied Biological Chemistry (Appl Biol Chem) Vol.19 No.3

전보(前報)에서 검토한 효소생산 최적조건에서 생성하는 cellulase의 특성(特性)에 대한 실험(實驗)을 행(行)하여 다음의 결과(結果)를 얻었다. 1. 조정제시(粗精製時)에 $(NH_4)_2SO_4$가 0.6포화도일 때 그리고 ethanol 농도(濃度)가 $80{\sim}90%$일 때 회수성(回收性)이 가장 좋았다. 2. 두 균주가 생산한 cellulase의 효소작용 최적 조건은 다음과 같다. Asp. niger-SM6 T. viride-SM10 최적(最適) pH 3.5 4.0 pH 안정성(安定性) $3.0{\sim}6.0$ $3.0{\sim}6.0$ 최적온도(最適溫度) $60^{\circ}C$ $60^{\circ}C$ 열안정성(熱安定性) $60^{\circ}C$이하(以下) $50^{\circ}C$이하(以下) 최적작용시간(最適作用時間) 30분(分) 60분(分) 최적기질농도(最適基質濃度) 3% 3% 3. CMCase에 대한 Km치(値)는 Aspergillus niger-SM6이 0.8%, Trichoderma viride-SM10이 1.01%였다. 4. Aspergillus niger-SM6은 xylanase 및 pectinase도 높은 활성(活性)을 가지고 있었다. In order to investigate the properties of enzymes from two strains of mold, reported in the previous paper, (1) studies have been made concerning the characteristics of cellulase of Aspergillus niger-SM6 and Trichoderma viride-SM10, and summarized as follows. 1. In the semi-purification the recovery of ${\beta}-glucosidase$ was the highest when 80-90% ethanol was used and 0.8 saturation of $(NH_4)_2SO_4$. 2. The characteristics of the semi-purified enzyme were as follows. Aspergillus niger-SM6 Trichoderma viride-SM10 Optimum pH 3.5 4.0 pH stability 3.0-6.0 3.0-6.0 Optimum temperature $60^{\circ}C$ $60^{\circ}C$ Heat stability below $60^{\circ}C$ below $50^{\circ}C$ Optimum reaction time 30 min. 60 min. Optimum CMC concentration 3% 3% 3. The Km values of CMCase were 0.8% and 1.01 for Aspergillus niger-SM6 and Trichoderma viride-SM10, respectively. 4. In the strain of Aspergillus niger-SM6, there were high activity of xylanase and pectinase.

Xanthomonas malvacearum 돌연변이주(突然變異株)의 Heteropolysaccharide 생산성(生産性)에 관(關)하여

이계호,김미선,박찬영,Lee, Ke-Ho,Kim, Mi-Sun,Park, Chan-Yung 한국응용생명화학회 1987 한국농화학회지 Vol.30 No.1

Xanthan gum의 생산력(生産力)이 있는 Xanthomonas SNUF-560 균주(菌株)에서 자외선(紫外線) 조사방법(照射方法)으로 생산능(生産能)이 우수(優秀)한 변이주(變異株)를 선택(選擇)해서 동결건조법으로 보존(保存)했으며 PDA배지(培地)에서 2주(週)마다 이식(移植)하여 생산실험(生産實驗)에 사용(使用)하였다. 최적발효배지(最適醱酵培地)의 검토(檢討)에서 탄소원(炭素源)으로 sucrose 40g/l, 질소원(窒素源)으로 glutamic acid 10mM, 유기산(有機酸)으로 succinic acid 10g/l, $PO_4\;^{-3}\;65mM$일때 각각 좋은 결과(結果)를 얻었으며, 최종적(最終的)으로 배지(培地) 1과 배지(培地) 2에서 각각 1,050cp(12g/l), 900cp(10.5g/l)를 얻었으며 조성(組成)은 다음과 같다. 배지(培地) 1 = sucrose 40g/l, glutamate 10mM, $PO_4\;^{-3}\;65mM(KH_2PO_4\;12.65g/l)$, citrate 2g/l, $MgSO_4{\cdot}7H_2O\;0.2g/l$, $H_3BO_3\;0.006g/l$, ZnO 0.006g/l $FeCl_2{\cdot}6H_2O\;0.0024g/l$ $CaCO_3\;0.02g/l$ 배지(培地) 2 : sucrose 40g/l, $(NH_4)_2SO_4\;2g/l\;PO_4\;^{-3}\;65mM\;(KH_2PO_4\;12.65g/l)$ succinate 10g/l, $MgSO_4{\cdot}7H_2O\;0.02g/l$ $H_3BO_3\;0.006g/l$ $FeCl_2{\cdot}6H_2O\;0.0024g/l$ $CaCO_3\;0.02g/l$. The mutant with high productivity, X. malvacearum SNUF 560-6, was acquired from the X. malvacearum SNUF 560 with low productivity by UV-light irradiation. It was preserved is lyophilized stock culture and it was transferred to PDA slant to maintain viability fortnightly. Fermentations were started by retransfering to MY agar slant from PDA stok culture. The experiments for optimal xanthan gum production were studied in a chemically defined medium. Of the carbon and nitrogen sources tested, 0.4% sucrose medium and 10mM glutamic acid medium yielded the highest xanthan gun production respectively. The addition of 10g/l succinic acid stimulated xanthan gum production. Also 65mM $PO_4\;^{-3}\;(12.6g/l\;KH_2PO_4)$ was effective on xanthan gum production. Finally, medium 1 and medium 2 which have high xanthan gum production potencies were achieved in this stud. The components of medium 1 and medium 2 were as follows: Medium 1 : sucrose 40g/l glutamate 10mM $PO_4\;^{-3}\;54mM\;(KH_2PO_4\;12.65g/l)$ Citrate 2g/l $MgSO_4{\cdot}7H_2O\;0.2g/l$ $H_3BO_3\;0.005/l$ ZnO 0.006/l $FeCl_2{\cdot}6H_2O\;0.0024g/l$ $CaCO_3\;0.02g/l$ Medium 2 : $Sucrose\;40g/l\;(NH_4)_2SO_4\;2g/l$ $PO_4\;^{-3}\;65mM\;(KH_2PO_4\;12.65g/l)$ Succinate 10g/l $MgSO_4{\cdot}7H_2O\;0.02g/l$ $H_3BO_3\;0.06g/l$ ZnO 0.006g/l $FeCl_2{\cdot}6H_2O\;0.0024g/l$ $CaCO_3\;0.02g/l$.

섬유질자원(纖維質資源)의 사료(飼料) 전환(轉換)

이계호,성창근,정규옥,Lee, Ke-Ho,Sung, Chang-Geun,Chung, Kyu-Ok 한국응용생명화학회 1984 Applied Biological Chemistry (Appl Biol Chem) Vol.27 No.suppl.

속성수로서 현재까지 이용연이 그리 넓지 못한 활엽수(闊葉樹)를 이용(利用)한 당화액(糖化液)으로 단세포단백질(單細胞蛋白質) 생산(生産)에 의(依)한 사료화(飼料化) 전환(轉換)에 관(關)한 기초적(基礎的)인 몇가지 실험(實驗)을 한 결과(結果)는 아래와 같다. Aspergillus niger sm-10, Irpex lacteus, Tricoderma viride sm-6 3균주(菌株)의 셀룰라아제 역가(力價)를 비교(比較)해 본 결과(結果) Tricoderma viride sm­6 의 역가(力價)가 가장 높았으며, 이들을 combination하였을 때에는 상조에 의한 역가상승(力價上昇)(Synergistic effect)은 보이지 않았다. T. viride sm-6의 배양학적(培養學的)인 면을 살펴본 결과(結果) 밀기울배지에 질소원으로서 proteose peptone, 유도제 (inducer)로서 Tween 80, cellulose를 첨가(添加)했을때 역가증가(力價增加) 현상(現象)이 나타났으며 이와 같은 배지에서 배양시(培養時) C.M. Cellulose와 Filter paper 분해 효소역가(酵素力價)는 120hr에 최고에 도달(到澾)했다. 기질(基質)에 효소(酵素)를 반응(反應)시켜 당화액(糖化液)을 생성(生成)하는데 있어서 전처리(前處理)를 한 기질(基質)은 대조주에 비해 약 40%의 환원당 증가(增加)를 보였고, 또한 기질입자(基質粒子)가 작을수록 환원당 증가현상(增加現象)을 보였으며 글루코스 등의 당(糖)은 반응액중(反應液中) 적은 농도(濃度)에서도 커다란 feed back inhibition현상을 나타냈다. 기질(基質)을 rehydralysis시에는 약 31%의 환원당 전환율(轉換率)을 보였다. 이때 당화액(糖化液)을 정량해 본 결과(結果) glucose : xylose의 양이 1.77:1로서 glucose의 양이 많았다. 여기에 단세포(單細胞) 단백질(蛋白質)을 생산(生産)할 목적(目的)으로 부식토, 퇴비, 수액, 토양등의 42점의 시료로부터 xylose 자화성 효모(酵母) 13균주(菌株)를 선별하였으며 그때의 우수균주(優秀菌株)로서 3개균주(個菌株)를 선발(選拔)하였다. 이들 분리주의 배양학적(培養學的) 특징(特徵)을 살펴 본 결과(結果)는 다음과 같다. 1. 분리주중(分離株中) CHS-2, CHS-3, ST-40, CHS -12, CHS-13 균주(菌株)가 당화액(糖化液)을 잘 자화함을 알았다. 2. 분리균주중(分離菌株中) CHS-13 균주(菌株)의 생육도(生育度)가 가장 양호하였으며 초기 최적 pH는 4.4이었으며 최적온도(最適溫度)는 $30^{\circ}C$이었다. 3. CHS-3 균주(菌株)의 specific growth rate는 $0.23\;h^{-1}$, generation time 은 3.01h이었다. 4. CHS -13균주(菌株)의 기질소비율(基質消費率)은 81%이었다. 5. CHS-13 균주(菌株)의 형태학적(形態學的) 배양학적(培養學的) 특성(特性)을 조사(調査)한 결과(結果) Candida guilliermondii var. guilliermondii 로 동정(同定)되었다. 6. CHS-13 균주(菌株)를 당화액(糖化液)에 배양(培養)시켰을 때 Lowry-protein 함량은 $0.72\;mg/m{\ell}$ 이었으며 , yeast extract 첨가(添加)하여 배양시(培養時)는 yeast extract 농도(濃度)가 증가(增加)함에 따라 단백질(蛋白質) 함량(含量)도 증가(增加)하였다. 7. CHS-13 균주(菌株)의 RNA 함량(含量)은 $4.92{\times}10^{-2 }\;mg/m{\ell}$이었으며 yeast extract 농도(濃度)가 증가(增加)함에 따라 증가(增加)하다가 농도(濃度) 0.2%에서 최대함량(最大含量)을 나타내고 그후는 감소(減少)하였다. To utilize several species of hard wood as raw materials of feed products, fermentation characteristics of cellulosic substrates to single cell protein was investigated, and results were summarized as follows. Among the microorganisms investigated, Tricoderma viride was selected as one of the most cellulolytic. Mixed culture of fungi did not show a synergistic effect on cellulose degradation. When the fungi were cultured at $28^{\circ}C$ for 7 days in a medium containing wheat bran 25 g, cellulose 0.25 g, proteose peptone 0.025 g and tween 800.025 g, cellulotic activities on carboxy methyl cellulose and filter paper reached maximum at 12 hr. The alkali treatment resulted in increased degradation of substrate from 13 to 18% when treated with enzymes for 12h, and reducing sugar formation increased with decreased size of substrates. Glucose was a very good feedback inhibitor of the enzyme from T.viride than that of xylose. When the substrate was rehydrolyzed, hydrolysis rate was 31% to reducing sugars within 12 hr. Quantative anlysis with HPLC showed the ratio of glucose to xylose in sugar syrups as 1.77 to 1. For the purpose of producing cellulosic-single cell protein from the sawdust of mulberry tree, 15 strains of xylose-assimilating yeast were isolated from 42 samples of rotten woods and compost soils and examined for their ability to utilize xylose. Then three strains were selected by their strong xylose-assimilating activities. The cultivative condition, the growth characteristics, and protein and nucleic acid productivities of three strains were investigated. The results obtained were, 1. Wood hydrolysate of mulberry tree was assimilated by 5 strains of CHS-2, CHS-3, ST-40, CHS-12 and CHS-13. 2. The optimum initial pH and temperature for the growth of strain CHS-13 were 4.4 and $30^{\circ}C$. 3. The specific growth rate of strain CHS-13 was $0.23h^{-1}$ and generation time was 3.01 hrs at the optimum condition. 4. CHS-13 strain assimilated 81 % of sugar in wood hydrolysate. 5. CHS-13 strain was identified as Candida guilliermondii var. guilliermondii 6. When the CHS-13 strain was cultured in the wood hydrolysate containing yeast extract, L-protein content was increased with yeast extract concentration. 7. The L-protein and nucleic acid yields from wood hydrolysate were 0.73 mg/ml and $4.92{\times}10^{-2}\;mg/ml$ respectively. 8. An optimal nucleic acid content of CHS-13 strain was observed in the medium containing 0.2% of yeast extract.

증류주(蒸溜酒) 숙성(熟成)에 관(關)한 연구(硏究) 제1보[第一報]-사과 증류주(蒸溜酒) 숙성(熟成)에 있어서 숙성통재(熟成桶材)로서 한국산(韓國産) 참나무 품종별(品種別) 이용적성(利用適性)에 관(關)하여-

이계호,Lee, Ke-Ho 한국응용생명화학회 1977 Applied Biological Chemistry (Appl Biol Chem) Vol.20 No.1

This research was carried as a part of the basic study, in which the aptitude of theKorean oak varieties as barrels for aging apple fine spirits was investigated, and thefollowing results were obtained. 1. Following was the result of the chemical analysis of the fruits which are now mass-produced and can be used as a substitute for raw materials for wine production. Apple (Malus pumila Miller var. domestica Schneider) : Total sugar. total acid, volatile acid and pectin of Jonathan (Hong-og) were 13.95%, 0.46%, 0.012%, 0.20% respectively. Total sugar, total acid, volatile acid and pectin of Ralls (Koog-kwang) were 13.35%, 0.43%, 0.011%, 0.45% respectively. 2. Because of low yield of apple juice due to cellulose, pectin, hemicellulose which are present besides sugars, acids in apples, the apple juice were treated with xylanase of Aspergillus niger SUAFM-430, cellulase and pectinase of Aspergillus niger SUAFM-6. This treatment increased the yield of apple juice. And the apple juice was sterilized by adding potassium metabisulfite $(K_2S_20_5)$ and Saccharomyces cerevisae var. ellipsoideus Rasse Johannisberg II (SUAFM-1018) as a cultivation yeast, which has a strong fermentation power was used to ferment. The yield of apple wine based on raw material was 86-87%. The amount of ethanol, extract and methanol obtained from Jonathan and Ralls were 13.5%, 5.4%, 0.04-0.05% respectively. 3. Wines were distilled for two times by the pot still method to make fine spirits. The yield of fine spirits from apple wine mash was 86.6%, and the pH of fine spirits from Jonathan and Ralls were 4.1, 4.2 respectively. 4. The oak chips made of inner part or outer part of 24 Korean oak varieties were used to select the barrel for aging fine spirits. Two oak chips (one oak chip: $1{\times}1{\times}5cm$) of the inner part or of the outer part of each oak variety were dipped into 300 ml of fine spirits, which was bottled in 640ml beer bottle, and followed aging. The colors, flavors and tastes of the fine spirits were checked during 6 months. A. As a criterion for the first screening of oak barrels for aging fine spirits, the rate five of color extraction was determined. The oak chips showed good results in their order as follows and the best 5 varieties were selected. Gal-cham: Quercus aliena Blume (Inner part), Gul-cham: Quercus variabilis Blume (Outer part), Gal-chain: Quercus aliena Blume (Outer part), Jol-cham: Quercus serrata Thumb (Inner and Outer part). Sin-gal-cham: Quercus mongolica Fisher (Outer and Inner part) Sang-su-ri: Quercus acutissima Carruthers (Outer and Inner part) B. To find out the influence of aging temperature on aging, apple fine spirits were aged by dipping each oak chip at room temperature $(24-25^{\circ}C)$) and $45^{\circ}C$. Aging at $45^{\circ}C$ gave the best result followed aging at $30^{\circ}C$ and then at room temperature. C. Apple fine spirits was aged for six months by dipping oak chips in Erlenmeyer flasks and was irradiated with U.V light. The U.V irradiation enhanced the aging effect by nearly two times, compared with the aging without U.V irradiation. D. In aging apple fine spirits by dipping two oak chips, it was observed that the extent of the extraction of most components of oak chips were strongly dependent upon the pH of fine spirits. E. Oak chips of five selected oak varieties and a Limousin white oak from France as a control were used. Each apple fine spitits was dipped by two oak chips, and was aged at room temperature $(24-25^{\circ}C)$, $30^{\circ}C$, $45^{\circ}C$, and with the U.V irradiation at room temperature shaking every week. After six months of aging, the panel test of these aged fine spirits (Young Brandy) showed the following result. Young brandy of apples aged at $45^{\circ}C$ by dipping oak chips of Gal-chain was almost as the fine spirits which were aged at room temperature by dippin 사과 증류주(apple One spirit) 숙성에 있어서 국산 참나무의 품종이 fine spirit숙성 술통재로서의 적성여부를 검토하는 기초적 연구의 일환으로 본 연구를 실행하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 양조 원료를 대체 할 수 있는 과실로서 현재 대량생산 되는 과실의 화학분석 결과는 다음과 같다. 사과 : (Apple) (Malus pumila Miller var domestica Schneider) 중 홍옥(Jonathan)은 총당 13.95%, 총산 0.46%, 휘발산 0.012%, pectin 0.20%, 국광(Ralls)은 총당 13.35%, 총산 0.43%, 휘발산 0.011%, pectin 0.455%이었다. 2. 사과중에는 당분과 산 이외에 cellulose, pectin, hemicellulose 등 때문에 사과즙수을이 떨어짐으로 Aspergillus niger SUAFM-430의 xylanase와 amylase, Aspergillus niger SUAFM-6의 cellulase, pectinase를 사과즙에 처리하여 사과즙의 수율을 향상시켰다. 그리고 이황산 처리로 과즙중 여러 미생물을 살균하고 배양효모로서 발효능이 우수한 sacharomyces cerevisiae var. ellipsoidens Rasse Johannisberg II (SUAFM-1018)을 사용하여 사과주를 양조하였다. 사과주(Apple wine)는 원료에 대한 수율이 $86{\sim}87%$이고 Jonathan, Ralls가 ethanol 13.5%, extract분 5.4%, methanol $0.04{\sim}0.05%$이었다. 3. 사과주의 증류수(fine spirit) 제조는 단식증류법(Pot still)으로 2회 증류로서 실험하였다. 사과(apple) fine spirit는 apple wine mash에 대한 수율이 86.6%이고, 홍옥(Jonathan) fine spirit는 pH 4.1, 국광(Ralls) fine spirit는 pH 4.2이었다. 4. 사과주를 증류하여 제조한 fine spirit를 숙성시키기 위하여 국산 참나무 24품종을 나무의 심재(心材) (Inner part)와 변재(邊材) (Outer part)를 사용하여 fine spirit의 숙성융통제를 선발하는 실험을 하였다. 참나무 24품종과 그의 심재, 변재 별로 참나무의 절편(oaa chip) $(1{\times}1{\times}5cm)$을 만들고 oakchip 2개를 각 fine spirit 300ml씩 들은 640ml용맥주병에 담그고, 6개월간 숙성시키면서 색, 향기, 맛 등을 조사하였다. A. 숙성용술통재 선발의 1차 screen결과로서 색추출속도가 우수한 참나무 품종은 다음 순서와 같다. 갈참나무(심재) Quercus aliena Blume(Inner part), 굴참나무(변재) Q variabilis Blume (Outer part), 갈참나무(변재) Q. aliena Blume (Outer part), 졸참나무(심, 변재) Q. serrata Thumb (Inner & Outer part), 신갈참나무(변, 심재) Q. mongolca Fisher (Outer & Inner part), 상수리 나무(변, 심재) Q. acutissima Carruthers (Outer & Inner part)의 순서등 5품종을 선정하였다. B. 숙성온도별 영향으로서 실온 $24{\sim}25^{\circ}C,\;30^{\circ}C,\;45^{\circ}C$ 별로 각 fine spirit에 oak chip을 넣고 숙성시킨 결과 $45^{\circ}C$에서 숙성시킨 것이 가장 숙성이 촉진 되었고 다음이 $30^{\circ}C$, 다음이 실온에서 한 순서의 경향이었다. C. 투명한 삼각후라스크에 각 fine spirit에 oak chip을 담그고 자외선 조사를 하여 3개월간 숙성 시켰드니 숙성효과가 contral구 보다 거의 2배가 촉진하는 흥미있는 사실을 확인하였다. D. 사과주에서 증류한 fine spirit 300ml에 2개의 oak chip을 담그어 숙성시킴에 있어 oak chip의 여러성분이 fine spirit에 용출되여 나오는 정도가 fine spirit의 pH에 중요한 관계가 있음을 알았다. E. 선정된 5개 품종의 oak chip과 블란서 참나무 술통재(Limousin white oak from France)를 control로 하여 각 사과주를 증류한 fine spirit에 2개의 oak chip($1{\times}1{\times}5cm$)을 담그고 실온, $(24{\sim}25^{\circ}C)$, $30^{\circ}C,\;45^{\circ}C$, 실온에서 자외선조사 하면서 각각 6개월간 매일주일 마다 진탕하면서 숙성시켰다. 6개월간 수성시킨 fine spirit(young brandy)의

메탄올 자화성 Candida boidinii YF-3의 분리와 단세포 단백질 (SCP)의 생산

李啓瑚(Ke-Ho Lee),裵星美(Sung-Mee Bae) 한국식품과학회 1987 한국식품과학회지 Vol.19 No.4

Streptomyces chibaensis가 생산(生産)하는 Inulase에 관한 연구(硏究) - 제2보(第二報). Streptomyces chibaensis의 Inulase 생산조건(生産條件)에 대(對)하여 -

정구영,박성오,이계호,Chung, Koo-Young,Park, Sung-Oh,Lee, Ke-Ho 한국응용생명화학회 1980 Applied Biological Chemistry (Appl Biol Chem) Vol.23 No.4

Using Streptomyces chibaensis, which produces a strong inulin-hydrolyzing enzyme, the optimum cultural conditions and composition of the medium for the production of inulase were studied. 1. The highest enzyme activity was obtained at pH 7.5 after 84 hours culture at $30^{\circ}C$. 2. None of carbon source better than inulin was found. 3. $(NH_4)_2HPO_4$ and corn steep liquor were favourable inorganic and organic nitrogen sources for the production of inulase. 4. $KCl,\;MgSO_4\;and\;FeSO_4$ as the metallic salts were effective for the enzyme production at their concentrations of 0.01, 0.05 and 0.0001%, respectively. 5. The highest production of inulase was obtained from the medium of inulin 1.0% and corn steep liquor 2.0% concentrations, respectively. 강력(强力)한 inulin 분해력(分解力)을 가진 Streptomyces chibaensis균주(菌株)를 이용하여, 효소생산(酵素生産)에 효과적인 배양조건 및 배지조성을 검토(檢討)하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 효소생산배지(酵素生産培地)의 최적 초기 pH는 7.5였으며, 이 조건하에서 $30^{\circ}C$에서 84시간 배양했을 때 가장 높은 효소역가를 나타냈다. 2. Inulase를 다량생산(多量生産)하기 위한 배지의 탄소원(炭素源)으로서는 다른 탄소원(炭素源)에 비하여 inulin이 가장 효과적이었다. 3. 무기질소원(無機質素源)으로는 $(NH_4)_2HPO_4$가 inulase생산(生産)에 가장 효과적(效果的)이었고, 유기질소원(有機窒素源)으로는 corn steep liquor가 효과적(效果的)이었다. 4. 무기염(無機鹽)으로 KCI 0.01%, $MgSO_4$ 0.05%, 그리고 $FeSO_4$ 0.0001% 첨가하였을 때 가장 효과가 컸다. 5. 탄소원(炭素源)(inulin) 1%와 질소원(窒素源)(corn steep liquor) 2%의 비율(比率)로 혼합(混合)하여 만든 배지(培地)에서 가장 효소생산(酵素生産)이 높았다.

수도체(水稻體)의 형성(形成)과 발육상(發育相)에 대한 영양학적(營養學的) 비교연구(比較硏究) - 제1보. 시비수준(施肥水準)과 재배시기(裁培時期)의 차이(差異)가 수도(水稻)의 품종별(品種別) 수량(收量)및 수량구성요소(收量構成要素)에 미치는 영향 -

임선욱,이홍석,이계호,Lim, Sun-Uk,Lee, Hong-Suk,Lee, Ke-Ho 한국응용생명화학회 1979 Applied Biological Chemistry (Appl Biol Chem) Vol.22 No.3

본(本) 연구(硏究)는 수도(水稻)의 파종(播種) 및 이앙기(移秧期)를 달리하고 시비량(施肥量)에 차이(差異)있는 조건(條件)에서 Japonica계(系) 품종(品種)과 통일계품종(統一系品種)을 대상(對象)으로 생육시기별(生育時期別) 수도체(水稻體)의 형성(形成)과 영양상태(營養狀態)를 주요성분(主要成分)의 화학분석(化學分析)을 통(通)하여 비교(比較) 검토(檢討)하고 소요(所要) 삼요소량(三要素量)을 추정(推定)하며 이들과 수도(水稻)의 수량(收量)및 수량구성요소(收量構成要素)와의 관계(關係)를 해명(解明)하여 안정(安定)된 증수(增收)를 위한 시비기술(施肥技術)의 기초적자료(基礎的資料)를 확립(確立)하고저 설계(設計)되었으며 그의 일부(一部)로서 수량(收量) 및 수량구성요소(收量構成要素)에 미치는 영향에 대하여 얻은 결과(結果)를 보고(報告)한다. 1. 간장(稈長)은 질소수준(窒素水準)이 높아짐에 따라 커지는 경향(傾向)이었으며 통일계품종(統一系品種)에서는 보통시비구(普通施肥區)와 다량시비구간(多量施肥區間)에 큰 차이(差異)가 없었다. 2. 수장(穗長)은 무비구(無肥區)에 비(比)하여 보비(普肥)및 다비구(多肥區)가 높았으나 그 경향(傾向)은 현저(顯著)하지는 않았다. 3. 질소수준(窒素水準)이 높아짐에 따라 수수(穗數)도 증가(增加)하였으며 Japonica형(型) 품종(品種)이 통일계(統一系)의 것보다 큰 반응(反應)을 보였다. 4, 수당입수(穗當粒數)는 통일계품종(統一系品種)에서는 무비(無肥)에 비(比)하여 보비(普肥)및 다비구(多肥區)에서 현저(顯著)히 높았으며 Japonica형(型) 품종(品種)에서는 그 변이폭(變異幅)이 좁았다. 5. 1,000입중(粒重)은 적기이앙(適期移秧)에서는 시비수준간(施肥水準間)에 유의성(有意性)이 없었으나 만기이앙(晩期移秧)의 경우에는 점차(漸次) 감소(減少)하는 경향(傾向)이 있다. 6. 등숙율(登熟率)은 적기이앙(適期移秧)에서는 질소수준간(窒素水準間), 품종간(品種間)의 어느 경우에도 유의성(有意性)이 없었으나 만기이앙(晩期移秧)에서는 질소수준간(窒素水準間) 및 품종간(品種間)에 고도(高度)의 유의성(有意性)이 인정(認定)되었다. 7. 수량(收量)에 대하여는 질소(窒素)의 수준간(水準間), 품종간(品種間)에 고도(高度)의 유의성(有意性)을 보였으며 통일계품종(統一系品種)에서는 다비구(多肥區)보다 보비구(普肥區)에서 더 높은 수량(收量)을 보였다. 8. 고중(藁重)은 질소수준(窒素水準)이 높아짐에 따라 커지는 경향(傾向)을 보여 통일계품종(統一系品種)에서는 보비구(普肥區)와 다비구간(多肥區間)에 큰 차이(差異)가 없었다. In order to establish fertilizing technique for the increase of grain yield and its stability, the total absorbed amount of nutrients and nutritional status of rice plants at different growth stages were studied with respect to the nutrient contents and its relation to grain yield and yield components. This experiment was carried at three different level of nitrogen fertilization; two different seeding and transplanting times, and eight cultivars including both Japonica-and Tongil-type. The results of a part of these experiments are summarized as fallows: 1. The culm length tended to Increase with increasing fertilizer amount, but no significant difference between ordinary and heavy fertilization was observed in Tongil-type cultivars. 2. The panicle length was some what longer in ordinary and heavy fertilization than non-fertilization. 3. As the N-fertilizer level increases, the number of panicles per plant increased with higher response in Japonica-type cultivars than in Tongil-type cultivars. 4. The number of grains per panicle increased significantly in ordinary and heavy fertilization, compared to non-fertilization, but the difference in grain number per panicle among fertilizer treatment was smaller in Japonica-type cultivars than Tongil-type. 5. The 1,000 grains weight showed no significant difference among fertilization levels in ordinary transplanting, but indicated gradual decreasing tendency as the transplanting delayed. 6. In percentage of ripeness, there was no significant difference in ordinary transplanting, but hightly significant in late transplanting among N-fertilization levels and cultivars. 7. In yield, highly significant difference was shown among N-fertilizer levels and cultivars In Tongil-type variety, higher yield was obtained in ordinary fertilization than heavy fertilization. 8. The straw weight showed the tendency to increase in higher nitrogen level, but no significant difference between ordinaly and heavy fertilization was observed in Tonsil-type cultivars.

Sporocytophaga congregata에 의(依)한 Cellulase 생산(生産) 및 그 효소특성(酵素特性)과 효모(酵母)와의 혼합배양(混合培養)

김창진,김상순,이계호,Kim, Chang-Jin,Kim, Sang-Soon,Lee, Ke-Ho 한국응용생명화학회 1986 Applied Biological Chemistry (Appl Biol Chem) Vol.29 No.1

In order to produce cellulosic single cell protein from the cellulose, 163 strains of cellulose assimilating bacteria were isolated from 95 sources and one of them was screened by its strong cellulose assimilating activity. and was identified as Sporocytophaga congregate A-7. The optimum temperature and pH for cellulase production were $30^{\circ}C$ and 6.0, and the optimum temperature, pH and heat stability of the enzyme were $50^{\circ}C$, 7.0 and below $55^{\circ}C$. When the bacteria was cultured in fermentor, the specific growth rate was $0.034hr^{-1}$ and when the bacteria was mixed cultured with Candida guilliermondii var. guilliermondii, the specific growth rate of the bacteria and yeast were $0.06hr^{-1}$ and $0.08hr^{-1}$ respectively and total cell dry weight was $4{\sim}5g/l$. 섬유소로부터 섬유소이용성 단세포단백질을 생산(生産)하기 위하여 전국에서 수집한 95점의 시료(試料)로부터 163주(株)의 섬유소자화세균(資化細菌)을 분리하고 이들 중 섬유소자화력(資化力)이 강한 1주(株)를 선정(選定)하고 Sporocytophaga congregata A-7으로 동정(同定)하였다. 최적 균생산(菌生産) 및 효소생산의 조건은 온도 $30^{\circ}C$, 초기 pH 6.0이었으며 효소반응의 최적조건은 온도 $50^{\circ}C$, pH 7.0이었고 효소의 열안정성은 $55^{\circ}C$이었다. 선발된 섬유소자화세균(資化細菌)과의 결합배양(結合培養)에 적합한 효모로는 Candida guilliermondii var. guilliermondii가 선정(選定)되었으며 혼합배양시(混合培養時) specific growth rate는 효모의 경우 $0.08hr^{-1}$이고 세균(細菌)의 경우는 $0.063hr^{-1}$로서 세균(細菌) 단독배양시의 $0.034hr^{-1}$에 비해 2배로 증가하였으며 48시간 배양후의 균체조건량은 약 $4{\sim}5g/l$ 정도이었다.

광합성 세균의 분리 동정 및 두부 유청 폐수에서의 배양조건 검토

지근억(Geun-Eog Ji),이계호(Ke-Ho Lee) 한국식품과학회 1993 한국식품과학회지 Vol.25 No.2

우리나라 벼 근권으로부터 분리한 Azospirillum 균주의 미생물학적 특성

김원곤,서현창,김종평,김창진,이계호,유익동,Kim, Won-Gon,Seo, Hyun-Chang,Kim, Jong-Pyung,Kim, Chang-Jin,Lee, Ke-Ho,Yoo, Ick-Dong 한국미생물학회 1994 미생물학회지 Vol.32 No.2

경기도, 충청남도 일원의 벼 근권에서 400~900nmol $C_2H_4/hr/vial$의 아세틸린 환원 활성을 갖는 질소고정균인 Azospirillum 15균주를 분리하였다. 이 분리균주들은 $1.0{\times}3.0{\mu}m$크기를 갖는 vibrioid 형태이었으며 액체배양시 monopolar single 편모를 가졌다. 이 분리균주들은 생리적, 형태적 특성에 따라 두 그룹으로 분류되었는데, 그룹 I 균주들은 탄소원으로 glucose를 잘 이용하였고 biotin 요구성인 반면, 그룹 II 균주들은 glucose를 전혀 이용하지 못하였고 biotin 비요구성이었다. 또한 semisolid 무질소 배지에서 48시간 배양할 때 그룹 I 균주들은 원래의 vibrioid 형태에서 좀 더 길어지면서 S자 모양으로 변하는 pleomorphic 특성을 보인 반면, 그룹 II 균주들은 원래의 모양과 운동성을 유지하였다. 이상의 결과로부터 그룹 I 균주들은 Azospirillum lipoferum으로, 그룹 II 균주들은 Azospirillum brasilense으로 동정하였다. Fifteen strains of the nitrogen fixer Axospirillum were isolated from the rhizosphere of rice collected from Kyonggi-do and Chungcheongnam in Korea. They had strong acetylene-reducing activity of 400 of 900 nmol $C_2H_4$ per hour vial had a similar morphology in succinate-malate medium: vibrioid cells having a diameter of 1.0 ${\mu}m$ and a monopolar single flagellum in liquid media. According to their physiological and morphological characteristics, they were divided into two distinct groups, group I and group II. Group I strain were, unlike group II, distinguished by their ability to use glucose as a sole carbon source in nitrogen-free medium, requirement for biotin, and formation of wider, longer, and S-shaped cells in semisolid nitrogen-free malate medium. On the basis of their characteristics, strains belonging to group I were identified as Azospirillum lipoferum, while those belonging to group II were identified as Azospirillum brasilense.