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      • Phosphorylated Proteins of Mitogen Stimulated-Rat Peripheral Blood Lymphocytes

        주일로,고성수,안영수,Jou, I-Lo,Ko, Sung-Soo,Ahn, Young-Soo The Korean Society of Pharmacology 1993 대한약리학잡지 Vol.29 No.1

        흰쥐 말초 T림프구에 분열유발 물질인 PMA와 Con A를 투여하여 인산화되는 단백을 확인하고, PKC 억제제인 H-7, CaM kinase 억제제인 W-7을 전처치한 후의 인산화 변동과 시간 경과에 따른 인산화 변동을 관찰하였다. 그 결과 흰쥐 T림프구를 PMA로 자극하면 5개의 인산화 단백이 새로이 나타나고 7개 단백의 인산화가 증가 되었으며, Con A자극으로는 1개의 단백이 새로이 인산화 되고 7개 단백의 인산화가 증가되었다. PMA 및 Con A자극으로 인산화 되는 13개 단백은 kinase억제제 전처치에 의하여 3군으로 각각 구분되며, H-7 전처치로 24 kDa/pI 7.1, 24/7.2, 26/6.1, 74/6.2 단백의, W-7 전처치로 14 kDa/pI5.9, 28/6.8, 29/6.9, 28/7.0, 44/6.8, 58/6.2 단백의 인산화가 현저히 감소 되었으며, 18 kDa/p1 5.4, 25/7.3 및 54/5.2단백은 두 억제제에 의해 영향을 받지 않았다. 이들 인산화 단백은 대부분 세포의 soluble fraction에서 확인되며 자극후 반응 초기에 인산화 된 후 인산화가 감소하나, 침전물에서 관찰되는 소수의 인산화 단백은 지속적인 인산화를 보였다. 한편 Kinase 억제제 처리에 의하여 구분된 3군에 속하는 단백들의 시간에 따른 인산화 양상을 관찰한 결과 각 군에 따른 인산화 양상에 상호 연관성이 없었다. 이상의 실험결과로 보아 림프구 활성의 초기 단계에서 인산화 되는 단백에는 PKC, CaM kinase 및 다른 kinase에 의해 인산화 되는 3종류의 단백이 존재하며, 3종류의 kinase의 활성은 단계적인 활성이 아니라 독립적 또는 상호 협동적으로 작용하여 림프구 활성을 유발시키는 것으로 생각된다. This study was done to classify the proteins involved in the specific phosphorylation using the rat peripheral blood lymphocytes (rPBL) stimulated with mitogens, phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA) and concanavalin A (Con A). The lymphocytes were incubated with $^{32}P-orthophosphate$ before PMA or Con A stimulation. The migration patterns of the phosphorylated proteins of mitogen-treated rPBL in two dimensional electrophoretic fields were analyzed after autoradiography. The stimulation of the lymphocytes with PMA and Con A increased the phosphorylation of thirteen protein fractions. The phosphorylation intensities of the protein spots differ to the treatments of the cells with specific kinase inhibitors, H-7 and W-7. These protein fractions were grouped into 3 classes, namely, PKC-mediated, CaM kinase-mediated, and other kinase mediated proteins. The effect of the duration of the stimulation on the phosphorylated behaviors occurred concurrently, not sequentially, although each individual protein fraction had a different time for the peak phosphorylation during the stimulation period upto 30 minutes. The phosphoproteins found in the cytosolic soluble fraction were phosphorylated prior to those in the pellet, whose phosphorylations were sustained at a high level for over 10 minutes. The above results suggest that the early events in lymphocyte activation involve 3 different sets of proteins which are phosphorylated by CaM kinase, PKC and other kinases, and those kinases do not work sequentially, but rather, independently or cooperatively.

      • 흰쥐 말초 림프구의 분자량 22 kDa 인산화 단백질의 특성

        주일로,권혁춘,안영수 아주대학교 의과학연구소 1996 아주의학 Vol.1 No.1

        Lymphocytes were found to possess all of the enzymatic machinery needed to phosphorylate and dephosphorylate proteins. At least four groups of protein kinases participate in T cell activation and interact with each other in a complex and as yet unknown manner. Increased phosphorylation in lymphocytes following stimulation with mitogens or interleukin-2, and the pivotal role of protein kinase C(PKC) in the initial biochemical reaction have been reported. But the exact role of PKC in T cell activation and the substrate of PKC are not well known. This study was attempted to clarify the characteristics of 22 KDa phosphoprotein obtained from rat peripheral blood lymphocytes(rPBL) stimulated with phorbol 12-myristale 13-acetate(PMA), using various kinase inhibitors as well as kinase activators. The lymphocytes were incubated with ^(32)P orthophosphate before PMA stimulation. The migration pattern of the phosphorylated proteins of PMA-treated rPBL in the two dimensional electrophortic fields were analyzed after autoradiography. And the phosphorylation sites of 22 kDa protein were analyzed by high performance liquid chromatography(HPLC) and scintilation counting. The results are as follows: 1) Increased phosphorylation of 22 kDa protein was observed with PMA. 2) Forskolin, an activator of adenylyl cyclase, causes no significant change of phosphorylation of 22 kDa. 3) A 23187, a Ca^(2+) ionophore, has no noticed effect on the phosphorylation of 22 kDa protein. 4) Staurosporine, a potent PKC inhibitor, showed inhibitory action on PMA-stimulated phosphorylation of 22 kDa. 5) Calphostin C, specific PKC inhibitor inhibited the PMA-stimulated phosphorylation of 22 kDa. 6) Among trypic peptide fractions of 22 kDa by HPLC, one ^(32)P phosphopeptide peak was observed at about 20% acetonitrile. From the above results, it could be suggested that the 22 kDa phosphoprotein of rat peripheral blood lymphocytes would be a substrate of PKC, and has one phosphorylation on serine residue.

      • KCI등재

        동일성: "있음"인가, "되어감"인가 : 『아름다운 영혼의 고백』에 서술되어 있는 자기인식과 형성과정에 관한 분석

        주일 한국독일어문학회 2013 독일어문학 Vol.60 No.-

        Die vorliegende Studie richtet sich auf das Verstehen des Konzepts Goethes von der Bildung des Menschen, indem sie eine selbstbiographische Darstellung uber den Bildungsprozess einer Frau in seinem Roman Wilhelm Meisters Lehrjahre analysiert. Durch die Analyse der Bekenntnisse einer schonen Seele wird der Begriff "Werden" als das grundlegende Moment der IdentitAt eines Individuums bei Goethe aufgefasst. In diesem Zusammenhang ziehen in erster Linie neue Konzeptionen von der IdentitAt die Aufmerksamkeit auf sich, nAmlich die Systemtheorie und die Theorie von komplexen Systemen, denn Analolgien zwischen dem Goetheschen VerstAndnis von der Bildung und IdentitAt und dem der beiden neuen Theorien geben sich zu erkennen. Dann richtet die Studie den Blick auf Goethes Auffassung von Bildung der Natur im allgemeinen, indem sie naturwissenschaftliche Schriften Goethes uber die Morphologie und Metamorphose betrachtet. Dabei wird anschaulich, dass sein Konzept von der Bildung sowohl das "autopoietische" Vermogen jedes organischen Individuums als auch die "strukturelle Koppelung" zwischen dem sich bildenden Individuum und dessen Außenwelt betont. Die natur- und sozialwissenschaftlichen Theorien uber die Selbstorganisation und das soziologische System, die Analogien der heuristischen Prinzipien mit der Goetheschen Denkweise haben, verhelfen uns dabei zum Erkennen der Bedeutung des Bildungsprinzips fur Goethes IdentitAts- und Bildungsidee. Schließlich versucht die Studie die Frage zu beantworten, ob das naturwissenschaftliche morphologische Denken Goethes auch fur sein Konzept von der Bildung der Romanfigur gelten kann. Es geht ihm um eine prozessontologische VerstAndnisweise von der Bildung und IdentitAt, aber nicht um eine substanzielle.

      • KCI등재

        ‘살아있는 생각’과 ‘완전한 진리’ - 퇴를레스의 혼란이 지닌 의미

        주일 한국독어독문학회 2019 獨逸文學 Vol.60 No.3

        In der vorliegenden Arbeit geht es um die Frage, warum die Erkenntnis der Wirklichkeit im Roman Die Verwirrungen des Zöglings Törleß als eine zweidimensionale dargestellt wird. Um die Frage zu beantworten, beschäftigt sich sie zuerst mit zwei Motiven: ‘Talent des Staunens’ und ‘Schweigen’. Dieses Talent zwingt Törleß, alle Gegenstände so zu empfinden, dass er dabei das Gefühl sowohl einer unauflöslichen Unverständlichkeit als auch einer unerklärlichen, nie völlig zu rechtfertigenden Verwandtschaft hatte. Es ist seine zentrale Erfahrung, dass dieser Dualismus die Wirklichkeit schlechthin und überall bestimmt. Beim Sparziergang, den er im Park des Konvikts allein unternimmt, bemerkt Törleß plötzlich, wie hoch eigentlich der Himmel sei, und er assoziiert das mit dem mathematischen Begriff des Unendlichen, das mit Maeterlinks ‘Schweigen’ zusammenhängt. Das Resultat der Erkenntnis des den erinnerten Lebenssituationen gemeinsamen Schweigens ist eben jene Einsicht, dass die Worte die Dinge nicht so zu erfassen vermögen, wie sie sind. Es ist gerade das über den Boden fließende Licht der Lampe, auf das sich Törleß’ Aufmerksamkeit richtet. Dies soll eine Art Symbol für den Zugang zu einer fremden Welt darstellen, zu einer anderen Dimension des Wirklichen jenseits der Außenseite des Gegenständlichen. Seine Erkenntnisweise von Schatten, die etwas noch Unerkanntes in ihm zum Bewusstsein gebracht hat, wird anschließend in Betracht gezogen, um die Gründe seiner Verwirrungen sichtbar zu machen. Er hält diese Schatten, nämlich eine andere Wirklichkeit fälschlich für Wirklichkeit, und dies verursacht seine Verwirrungen verursacht. Schließlich rückt noch Musils Konzept von toten und lebendigen Gedanken in den Mittelpunkt, mit dessen Hilfe die volle Wahrheit ermöglicht wird. 이 글의 목적은 무질이 소설 『생도 퇴를레스의 혼란』에서 현실 인식을 두 차원으로 서술하는 이유를 밝히는 것이다. 따라서 이 글은 주인공이 현실을 어떻게 인식하느냐, 그리고 그 인식의 과정에서 어떤 혼란의 양상을 보이느냐, 그리고 그러한 혼란이 지니는 의미는 무엇인지 등을 분석하는 데 주로 집중하게 된다. 먼저 무질이 소설의 모토로 내세운 메테르링크 인용문의 분석을 통해, 진술했음에도 불구하고 여전히 진술되지 않은 채 남아있는 것이 실제로 ‘존재’하는 것인지에 관하여 밝힌다. 이어서 주인공 퇴를레스의 혼란의 양상을 현실 경험의 두 차원과 관련하여 분석한다. 이때 주목하는 것은 두 개 의 모티브인데 하나는 ‘놀람의 재능’이고 다른 하나는 ‘침묵’ 또는 ‘말의 거부’이다. ‘놀람의 재능’에 대한 분석은 주인공 퇴를레스가 무엇이든 인지하면 익숙함과 낯섦을 항상 동시에 인지하게 됨을 밝힌다. ‘침묵’은 퇴를레스가 인지한 내적인 것 또는 낯선 것을 말로 표현할 수 없기 때문에 혼란을 겪게 됨을 보여준다. 주인공이 이러한 혼란을 겪게 되는 원인은 ‘그림자’로 명명되기도 하는 ‘다른 현실’을 현실로 여기고 ‘다른 현실’을 인식하고 표현함에 있어서 현실을 인식하고 표현하는 방법을 적용하는 데 있었음을 밝힌다. 결국 ‘현실’과 ‘다른 현실’을 모두 올바로 인식하는 방법은 ‘살아있는 생각’을 통해서이며, 이는 ‘완전한 진리’에 관한 무질의 구상이 표현된 것이었다.

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