Inflammatory reaction of Neutrophil in Ischemic/reperfusion model

조영덕 대한응급의학회 2013 대한응급의학회 학술대회초록집 Vol.2013 No.2

Background: 심정지 환자에서 심정지 후 자발 순환이 회복되면서 생기는 여러 문제들은 이환율 및 사망률에 영향을 미친다. 이러한 현상을 심정지 후 신드롬이라 하는데 이는 전신 염증 증후군과 유사한데 단핵구, 다핵성 호중구, 혈관 내피 세포 등과 그로 인한 여러 염증 매개체에 의한 것으로 초기 허혈-재관류로 인한 전신의 과도한 면역 염증 반응에 의해 조직 손상이 발생하며 이어서 과도한 염증 반응에 상응하는 면역 염증 반응 억제에 기인하여 감염 등 이차 손상에 취약한 것으로 알려져 있다. 염증반응은 손상부위에 생기는 숙주 방어 기전으로 철저히 조절되고 있다. 급성 염증기 시기에 첫 번째 세포 방어 반응은 호중구에 의해서 이루어진다. 심정지 후 치료 가이드 라인에서는 자발 순환이 회복 후 과도한 산소 투여를 피하라고 규정하고 있는 데 과도한 산소는 활성 산소를 증가 시켜 염증반응이 과도하게 일으키고 자가 조직 손상을 초래할 수 있기 때문이다. 본 연구에서는 실제 심정지 환자에서 나타나는 허혈성/재관류 손상에 따른 호중구의 염증반응을 생체 외 실험에서 저산소 자극 후 과산소 자극 모델을 통해 알아보고자 한다. 그리고 2차 감염에 따른 호중구의 염증반응을 LPS자극 모델을 통해 알아보려 한다. Methods: 건강한 지원자의 전혈을 채혈 후 modified Boyum 방법을 통해 호중구를 분리 한다. 대조군으로는 분리된 호중구를 정상산소 농도에서 배양 한 후 염증반응의 지표를 측정하였다. 실험군은 분리된 호중구를 저산소 농도에서 배양한 후 곧이어 정상산소 농도와 과산소 환경에서 각각 배양한 후 이 때 발생되는 염증반응의 지표를 측정하였다. 그리고 각 군에서 LPS로 이차 자극을 가한 후 염증반응의 지표를 측정하였다. 정상산소 환경는 실내공기(Fio2 0.21)을 가정하였고 저산소 환경은 Fio2 0.01, 고산소 환경은 Fio2 0.8로 가정하였다. 측정 항목: 염증반응의 지표 1) H2O2: H2O2, OH- and O-2 와 같은 ROS의 과다생산은 저산소/과산소 손상에서 호중구의 염증반응시 증가하며 중심 역할을 한다. 2) TNF- α: TNF- α의 중요한 역할은 면역세포 조절이다. 3) Apoptosis: Apoptosis 는 호중구의 life span 의 나타낸다. 호중구는 apoptosis 과정을 거쳐 사멸되며 이 과정이 지연될 경우 염증 반응이 장기간 지속될 수 있다. 4) TLR: TLR 는 pattern recognizing receptor로 그람 음성 박테리아 감염에서 LPS와 결합하여 선천성 면역의 활성화에 중요한 역할을 한다. 또한 허혈성/재관류 손상 후 염증반응 시작에서 시발 역할을 하는 것으로 알려져 있다. Results: 1) LPS 자극 없이 산소농도의 환경에 따른 호중구의 염증 반응 (1) H2O2: 저산소 후 고산소 자극 그룹에서 가장 높게 측정되었다. (2) TNF-alpha: 각 그룹간 측정된 양의 차이가 거의 없었다. (3) Apoptosis: 저산소자극 후 정상 산소에서 배양한 그룹에서 Apoptosis의 지연 시간이 가장 길었다. (4) TLR: 저산소자극 후 정상 산소에서 배양한 그룹에서 TLR 발현이 가장 많이 되었다. 2) LPS 자극 후 각 그룹에서 염증 지표의 발현 (1) TNF-alpha: TNF-alpha 에서는 정상 산소그룹에서 LPS 자극에 가장 민감한 반응을 보였다. (2) Apoptosis: 저산소 자극 후 정상 산소 배양에서 LPS 자극에 가장 민감하게 반응하였다. (3) TLR: LPS 자극 후 저산소 자극 후 정상 산소 배양에서 LPS 에 가장 민감하게 반응하였다. Conclusion: 1) 산소농도 환경에 따른 호중구의 염증 반응 (1) H202 Group A (27.8)에서 가장 적게 나왔으며 Group C (38.4) 에서 가장 많이 나왔다. 통계학적으로 의미는 명확하지 않으나 저산소 자극 후 고산소 자극을 받은 그룹에서 가장 수치가 높이 나왔다. 허혈성/재관류 손상 염증반응에서 중요한 역할을 하는 활성 산소가 호중구 염증 반응에서도 유사한 결과를 보였다. (2) TNF-α 산소농도 변화에서는 반응을 보이지 않았다. TNF-α염증반응의 조절은 산소농도 변화에 크게 영향을 받지 않는 것으로 보인다. (3) Apoptosis 알려진 바와 같이 저산소 자극에서는 apoptosis가 지연되었다. 저산소증이 호중구의 사멸을 억제하여 염증반응을 지속시킬 가능성이 있겠다. 그러나 저산소 후 고산소 환경은 오히려 호중구의 apoptosis 반응을 정상화 시키는 경향이 있는 것 같다. (4) TLR 4 LPS 를 detection 하여 선천성 면역반응을 활성화하는 TLR4 저산소 자극에서 증가되는 것으로 보아 감염 등 2차 손상이 발생할 경우 염증 반응을 증폭시킬 수 있겠다. 2) LPS 자극 후 (1) H202: 실험 진행 중 (2) TNF-α 산소농도 변화에서는 반응을 보이지 않았으나 LPS 자극시 증가되는 결과를 확인 할 수 있었다. 호중구에서 LPS 자극에 따른 TNF-α생성은 산소농도에 따른 환경 변화에 크게 영향을 받지 않는 것으로 보인다. (3) Apoptosis 저산소 자극에 의해 지연된 호중구의 사멸기전이 LPS 주입 시 사멸 지연상태가 더 길어지는 결과를 보였다. (4) TLR 4 LPS 를 detection 하여 선천성 면역반응을 활성화하는 TLR4 저산소 자극에서 증가되는 것으로 보아 허혈성 손상에서 염증반응 활성화에 역할을 하는 것 같다.

Simple Maturation of Direct-Converted Hepatocytes Derived from Fibroblasts

조영덕,윤상태,강교진,김요한,이승범,서대관,류기영,정재민,최동호 한국조직공학과 재생의학회 2017 조직공학과 재생의학 Vol.14 No.5

Target cells differentiation techniques from stem cells are developed rapidly. Recently, direct conversion techniques are introduced in various categories. Unlike pluripotent stem cells, this technique enables direct differentiation into the other cell types such as neurons, cardiomyocytes, insulin-producing cells, and hepatocytes without going through the pluripotent stage. However, the function of these converted cells reserve an immature phenotype. Therefore, we modified the culture conditions of mouse direct converted hepatocytes (miHeps) to mature fetal characteristics, such as higher AFP and lower albumin (ALB) expression than primary hepatocytes. First, we generate miHeps from mouse embryonic fibroblasts (MEFs) with two transcription factors HNF4a and Foxa3. These cells indicate typical epithelial morphology and express hepatic proteins. To mature hepatic function, DMSO is treated during culture time for more than 7 days. After maturation, miHeps showed features of maturation such as exhibiting typical hepatocyte-like morphology, increased up-regulated ALB and CYP enzyme gene expression, down-regulated AFP expressions, and acquired hepatic function over time. Thus, our data provides a simple method to mature direct converted hepatocytes functionally and these cells enable them to move closer to generating functional hepatocytes.

막부착성 자가팽창형 담도배액관의 장기간 추적관찰성적

조영덕,김영석,문종호,이문성,심찬섭 대한내과학회 1998 대한내과학회 추계학술발표논문집 Vol.1998 No.1

애매한 담도협착의 평가: 내시경 진단

조영덕 대한췌담도학회 2012 대한췌담도학회지 Vol.17 No.1

Noninvasive techniques including transabdominal US, CT, and magnetic resonance imaging (MRI) are extremely sensitive for detecting bile duct dilation. However, these techniques are less accurate for determination of the underlying cause when a mass lesion is not identified. Recent advances in endoscopic techniques have improved our ability to differentiate between benign and malignant lesions. IDUS, using an endoscopic approach, has the potential to aid in separating benign and malignant biliary lesions. EUS is used to assist in differentiating between benign and malignant strictures or in the staging of cholangiocarcinoma. Tissue sampling under EUS guidance should improve the diagnostic rate, depending of the origin of the stenosis. EUS-guided FNA is being used to diagnose and stage cholangiocarcinoma. This procedure is safe, and effective in evaluating proximal biliary strictures. When used in combination with ERCP, it helps distinguish benign from malignant strictures, and facilitates a definitive diagnosis by increasing tissue yield. Direct visualization of biliary mucosa using a peroral or percutaneous transhepatic cholangioscopy also helps separate benign from malignant biliary strictures.

내시경적 유두부 풍선확장술에 의한 총담관결석제거시 결석제거의 성공률 및 결석제거횟수에 영향을 미치는 인자의 분석

조영덕,김영석,문종호,이문성,심찬섭 대한내과학회 1998 대한내과학회 추계학술발표논문집 Vol.1998 No.1

담석을 동반한 간내 담관암과 담석을 동반하지 않은 담관암의 임상적 비교

조영덕 순천향의학연구소 2004 Journal of Soonchunhyang Medical Science Vol.10 No.1

Background/Aim: Hepatolithiasis are very common in Korea and hepatolithiasis is a risk factor for cholangiocarcinoma. The differences of clinical, laboratory or radiological features between intrahepatic cholangiocarcinoma associated with hepatolithiasis and cholaniocar-cinoma alone does not well known until now. Author performed this study to define the clinical, laboratory or radiological differences between intrahepatic cholangiocarcinoma associated with hepatolithiasis and cholangiocarcinoma alone. Methods: Sixty-one patients with intrahepatic cholangiocarcinoma associated with or without hepatolithiasis were analyzed retrospectively. There were 32 patients with cholangiocarcinoma associated with intraheaptic stones (group HC) and 29 cholangiocarcinoma patients without intraheaptic stones (group C). In group HC, there were 21 males and 11 females with a mean age of 63.4 years. Group C contained 17 males and 12 females with a mean age of 61.9 years. Results: Patients with cholangiocarcinoma associated with intrahepatic stones had a significantly longer duration of symptoms, a higher frequency of biliary surgery than cholangiocarcinoma alone. In group HC, the main symptoms were abdominal pain, fever, chilling, and jaundice. In group C, the main symptoms were abdominal pain and jaundice. Concordance rate of location of stones and tumor was closely related in 96% of patients with cholangiocarcinoma and hepatolithiasis. Segmental stricture and dilated intrahepatic ducts were the most common radiological features of both groups. Tumor mass observed on the imaging study was encountered significantly frequent in the group C (82% vs. 53%, p<0.05). However, hepatic atrophy was noted more frequent in the group HC than group C (46% vs. 10%, p<0.05). There were no statistical differences between the two groups in the laboratory findings such as liver function test or tumor marker. Preoperative diagnostic rate of cholangiocarcinoma was lower in group HC than group C (78.2% vs. 96.6%). Conclusion: If bile duct stricture or hepatic atrophy are noted in patients with intrahepatic stones, active effort for detection of concomitant cholangiocarcinoma will be needed.

증례토의 : 간담췌 ; 췌장암의 진단에서 Tumor markers와 Fine needle aspiration의 의의

조영덕,윤용범,김창덕 대한소화기학회 2002 대한소화기학회 세미나집 Vol.2002 No.-

응급센터에서의 수혈치료

조영덕,최성혁,윤영훈,김정윤,박상민,임채승 대한수혈학회 2013 大韓輸血學會誌 Vol.24 No.1

Background:Most patients requiring transfusion are admitted to the general ward; however, the number of patients visiting the emergency department for transfusion is increasing. In this study, we reviewed the transfusion therapies that are performed in the emergency department and analyzed their status. Methods:We conducted a retrospective review of the charts of patients who visited the emergency department in our hospital for transfusion therapy from October 1, 2008 to October 30, 2012. We collected and analyzed general information on the patients and divided them into groups according to the number and kind of blood products they received. Results:A total of 4,497 patients visited the emergency department for transfusion therapy during the study period. Among 4,497 patients, 2,925 patients were enrolled in the study and 1,572 patients were excluded. Out of 2,925 patients, there were 1,745 male patients (59.66%) and 1,180 female patients (40.34%), mean age was 61.24 (±17.49); 2,340 patients (80.00%) were admitted, 364 (12.45%) discharged, 44 (1.50%) expired, and 177 (6.05%) were transferred. The most common cause for transfusion was upper and lower gastrointestinal bleeding (928, 32%), followed by trauma (548, 19%), malignancy (376, 13%), anemia (294, 10%), infection (281, 10%), and gynecologic (137, 5%) respectively. Conclusion:Performance of transfusion therapy in the emergency department is not uncommon; therefore, proper protocols by cause of bleeding will be required for prevention of unnecessary complication that may occur during transfusion therapy. 배경: 수혈을 필요로 하는 대부분의 환자들은일반 병동으로 입원하나 최근에는 수혈 치료를위하여 응급센터를 방문하는 환자들의 수가 늘어가고 있다. 이 연구에서는 응급센터에서 수혈치료를 받은 환자들의 현황에 대한 조사 및 분석을하고자 한다. 방법: 본 연구자들은 2008년 10월 1일부터 2012 년 10월 30일까지 수혈치료를 위하여 본원 응급센터를 방문한 환자들의 차트를 후향적 연구로검토하였다. 환자들의 일반적 자료들을 수집했으며 수혈치료의 수와 종류에 따라 여러 그룹으로나눈 후 결과를 분석하였다. 결과: 연구 기간 동안 총 4,497명의 환자가 수혈치료를 받았으며 그 중 1,572명이 제외되고2,925명이 연구에 포함됐다. 총 대상 중 남자1,745명(59.66%), 여자 1,180명(40.34%), 평균나이61.24세(±17.49)였으며 2,340명(80.00%)이 입원, 364명(12.45%)이 귀가, 44명(1.50%)이 사망, 177 명(6.05%)이 전원 조치되었다. 수혈치료를 받은가장 흔한 원인은 위장관 출혈(928명, 32%)이었으며 그 뒤로 외상(548명, 19%), 종양(376명,13%), 빈혈(294명, 10%), 감염(281명, 10%) 그리고 산부인과적 출혈(137명, 5%) 등이었다. 결론: 응급센터에서 수혈치료는 쉽게 접할 수있으며 각각의 원인에 적합한 수혈치료 방법이치료 중 발생할 수 있는 합병증 예방을 위하여 필요할 것이다.

전혈과 혈청에서의 칼륨 이상소견 검사의 차이

조영덕,최성혁,윤영훈,박상민,김정윤,임채승 대한수혈학회 2012 大韓輸血學會誌 Vol.23 No.2

Background:Potassium, the most common cation in the intracellular space, plays a critical role in our physiology. Potassium imbalance may cause life-threatening problems, ranging from general weakness to cardiac arrest due to ventricular fibrillation. For emergency physicians, detection of such derangement within a short period of time is of critical importance. In this study, we wanted to determine whether analysis of whole blood samples can be used as a screening tool for potassium imbalance by comparative analysis of whole blood and serum samples. Methods:Two samples were drawn from 227 patients. The whole blood sample was taken from the radial artery and contained in a commercially available arterial blood collection syringe with a lithium-heparin coating. The serum sample was contained in a commercially available vacuum bottle in a non-additive silicone coated tube and transported to the laboratory. The study population was divided into three groups, patients with normal whole blood potassium, patients with decreased whole blood potassium, and patients with elevated whole blood potassium. Potassium levels for each group were coupled with serum potassium levels and compared. Results:No significant difference in potassium values was observed between whole blood and serum samples (P<0.05). Strong associations were observed among the three groups (normal range, hypokalemia, and hyperkalemia group). Compared to the normal group (r=0.851), the hyperkalemia group showed a stronger association between variables (r=0.897), and the hypokalemia group showed a weaker association (r=0.760). Their correlation coefficients were highly significant (P<0.05). Conclusion:Our study illustrates that point-of-care testing using whole blood with whole blood can be a reliable screening tool when treating patients with suspicious potassium abnormality, especially in hyperkalemia patients.

대청도 자생 순비기나무 토양환경특성과 번식

조영덕 한국토양비료학회 2006 한국토양비료학회 학술발표회 초록집 Vol.2006 No.10