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      • KCI등재

        화장품 광독성 평가와 동물대체시험법

        이종권 ( Jong Kwon Lee ),신지순 ( Ji Soon Sin ),김진호 ( Jin Ho Kim ),엄준호 ( Jun Ho Eom ),김형수 ( Hyung Soo Kim ),박귀례 ( Kui Lea Park ) 대한화장품학회 2005 대한화장품학회지 Vol.31 No.3

        화장품은 의약품과 달리 남녀노소를 불문하고 거의 평생에 걸쳐 사용하는 제품이므로 피부 및 인체의 안전성 확보는 중요한 문제라고 할 수 있다. 화장품의 안전성 평가는 화장품법에 식품의약품안전청장이 고시하도록 되어있어 현재 식약청고시 “기능성화장품등의 심사에 관한 규정”에서 정하고 있다. 자외선에 의한 피부독성은 피부노화, 피부홍반, 피부손상, 피부암 유발 면역계장애 등이 있으며, IARC (International agency for research on cancer)에서는 자외선을 사람에게 암을 유발하는 물질로 분류하고 있다. 자외선 노출에 의하여 설치류에 대한 피부암 유발보고는 많이 있고, 현재 전 세계적으로 자외선에 의한 피부 암화 과정에 대하여 활발한 연구가 진행되고 있다. 화장품이 광에 의한 영향을 평가하는 시험은 광독성시험으로, 국내에서 광독성에 대한 규정은 자외선에서 흡수가 없음을 증명하는 흡광도 시험자료를 제출하는 경우는 면제이고 그 외의 경우는 상기 고시에 의한 광독성 시험과 광감작성 시험을 실시하도록 되어 있다. 이 시험은 일반적으로 기니픽 또는 토끼를 포함한 적절한 동물로 실시하도록 규정되어 있다. 화장품 안전성 평가에 있어서 동물대체시험법의 요구는 3R (replacement, refinement, reduction) 운동으로 유럽을 중심으로 시작하여 이제는 전세계로 확대되어 있으며, 화장품 안전성심사에 있어 중요한 이슈로 대두되고 있다 화장품의 광독성 평가에 대한 대체시험법으로 3T3 NRU(neutral red uptake) 광독성시험이 2004년 4월 OECD 독성시험 기준으로 채택되었다. In vitro 광독성 시험법은 마우스 유래의 섬유아세포인 3T3 cell을 이용하여 광조사한 것과 광조사하지 않은 세포와의 세포독성을 NRU 시험을 이용하여 그 정도를 비교하여 그 차이(PIF, photoirritation factor)가 5배 이상이 되면 광독성 물질로 분류하는 평가방법이다. Safety is one of the key issue in the regulation of cosmetics. Cosmetic Act deals with it in Korea. The guidance for the testing cosmetic ingredients and their safety evaluation are prepared by Korea Food and Drug Administration. Ultraviolet radiation could Induce skin damage, edema, erythema, photoaging, immune dysfunction and skin cancer. Ultraviolet radiation is classified as Group 2A(probably carcinogenic to humans) by International Agenry for Reaserch on Cancer(IARC). The in vitro methodologies for evaluating the toxic potential of ingredients reported in the literature have not yet been sufficiently validated for use in areas other than the study for mutagenicity/genotoxicity, for pre-screening for severe irritancy, for screening of phototoxicity and for evaluating the percutaneous absorption. The 3T3 neutral red uptake photoxicity test (3T3 NRU PT) was accepted as OECD toxicity guideline in 2002. The 3T3 NRU PT is an in vitro method based on a comparison of the cytotoxicitv of a chemical when tested in the presence and in the absence of exposure to a non-cytotoxic dose of UVA/visible light.

      • KCI등재

        국립공원 내 파충류 자원의 효율적인 관리를 위한 PIT(passive integrated transponder) tag과 무선추적방법(radio telemetry)의 적용

        이정현 ( Jung Hyun Lee ),이헌주 ( Heon Joo Lee ),라남용 ( Nam Yong Ra ),김자경 ( Ja Kyeong Kim ),엄준호 ( Jun Ho Eom ),박대식 ( Dae Sik Park ) 한국환경생물학회 2009 환경생물 : 환경생물학회지 Vol.27 No.2

        본 연구는 PIT tag (passive integrated transponder)과 무선추적법(radio telemetry)을 오대산국립공원과 월악산국립공원에 서식하고 있는 파충류에 적용한 후, 이를 평가하여 효과적으로 국립공원 내 파충류 자원관리 방안을 모색하기 위하여 수행되었다. PIT tag은 현재까지 알려진 파충류 개체표시법 중에서 가장 효과적인 방법으로 2006년 3월부터 2008년 10월까지 오대산국립공원과 월악산국립공원의 조사지역에 출현한 모든 137마리의 뱀류를 대상으로 적용하였다. 무선추적 연구는 월악산국립공원에서 서식하고 있는 황구렁이(Elaphe schrenckii anomala) 2마리를 대상으로 2007년 9월부터 2008년 11월까지 실시하였다. 연구결과, 두 곳의 국립공원 지역에서 연구기간 동안 17마리가 재 포획되어 평균 12.40%의 재포획률을 보였으며, 재 포획된 개체들의 자료를 통하여 누룩뱀(Elaphe dione)과 쇠살모사(Gloydius ussuriensis) 성체의 SVL 증가를 성공적으로 확인하였다. 무선추적을 통하여 확인된 황구렁이 수컷의 행동권 면적은 MCP=389,600 m2, Kernel 95%=471,800 m2, 암컷은 MCP=162,500 m2, Kernel 95%=208,700 m2인 것으로 확인되었다. 국립공원 내에서 보호와 관리가 필요한 종 혹은 멸종위기대상 종인 파충류를 대상으로 PIT tag과 무선추적을 적용한다면 공원 내 파충류의 효율적인 관리 및 보존방안을 마련하는 데 중요한 기초자료를 제공할 수 있을 것으로 생각된다. To suggest effective ways of the management of reptiles in Korea national parks, we applied PIT (passive integrated transponder) tag and radio telemetry research methods in the monitoring of reptiles in Odaesan and Woraksan national parks. We implanted PIT tags into 137 snakes (six species) captured in both the national parks between March 2006 and October 2008 and also radio-tracked two Korean rat snakes (Elaphe schrenckii anomala) from September 2007 to November 2008 in the Woraksan national park. Of total 137 snakes which we had inserted the PIT tag, 17 snakes (12.40%) were recaptured. Based on the PIT tag data of the recapture, we successfully obtained the annual growth rate of Korean cat snakes (Elaphe dione) and Red-tongue pit-viper (Gloydius ussuriensis). Home range of the Korean rat snakes based on the data of radio-tracking was estimated as 389,600 m2 (MCP: Minimum convex polygon) and 471,800 m2 (Kernel 95%) for males and 162,500m2 and 208,700m2 for females. These results suggest that if we apply PIT tag and radio telemetry research methods to manage reptiles in Korea national parks, it could greatly increase our understanding about their basic ecology and as the result, it could allow us to develop better management and conservation ways of reptiles in Korea national parks.

      • KCI등재후보

        국소 림프절 시험법(Local lymph node assay)을 이용한 피부미백화장품 원료의 피부감작성 연구

        이종권(Jong Kwon Lee),박승희(Seung Hee Park),박재현(Jae Hyun Park),김형수(Hyung Soo Kim),엄준호(Jun Ho Eom),남기택(Ki Taek Nam),한범석(Beom Seok Han),장동덕(Dong Deuk Jang),최광식(Kwang Sik Choi),오혜영(Hye Young Oh) 한국독성학회 2003 Toxicological Research Vol.19 No.4

        The use of skin whitening agents has been recently increased in various kinds of cosmetic products, although there were some reports that whitening agents might cause allergic contact<br/> dermatitis. A murine local lymph node assay (LLNA) has been developed as an alternative to guinea pigs for contact sensitization potential. This study was carried out to investigate the skin sensitization potential of three whitening agents, arbutin, azelaic acid, and kojic acid, by LLNA using a non-radioistopic endpoint. Female Balb/c mice were exposed topically to a weak allergen, a-hexylcinnamaldehyde (HCA), and three whitening agents following LLNA protocol. Lymph node (LN) weight and cell<br/> proliferation in ears and auricular lymph node using bromodeoxyuridine (BrdU) immunohistochemistry were evaluated. LN weights were significantly increased at the HCA group compared to the vehicle control. A weak allergen, HCA elicited 3-fold or greater increase in cell proliferation of lymph nodes as well as increase in cell proliferation of ear as measured by BrdU immunohistochemistry. However, in the case of skin whitening agent groups, there were no significant changes in LN weight and cell proliferation in the ear and lymph node of mice treated with 5, 10 and 20% of three whitening agents compared to the vehicle control. These results show that these three skin whitening agents may not<br/> have contact sensitization potentials at tested concentrations in Balb/c mice by LLNA.

      • 새로운 면역독성시험법의 개발 및 확립(Ⅰ) : 자가면연질환 유발물질의 검색시험법 확립에 관한 연구 Assessment of autoimmunogenic potential of autoimmun disease inducing chemicals using the popliteal lymph node assay

        김형수,김진호,정승태,박재현,강선경,엄준호,김동섭 식품의약품안전청 2000 식품의약품안전청 연보 Vol.4 No.-

        자가면역반응은 다양한 자기항체나 자가반응성 T임파구에 의한 것으로 특징지을 수 있는 매우 심각한 딴역계의 이상반응으로.서 다양한 외인성 물질에 의해 환경적인 요인극 유전적인 요인 등이 복합적으로 작용하여 자기관용(self toleranc꼰에 이상이 발생하여 자신에 낄하근 면역반응을 일으켜 자기 항체와 자가면역 반응이 유되는 것으로 알려져 있으며, 그 발생기전은 조금씩 밝혀지고 있다. 미국과 유럽 등지에서는 의약품 등에 대하여 자가면역질환 유발리 관한 평가를 실시하고 있다. 자가면역질환을 유발시키는 물질 검색블 위한 다수의 시험법이 사용되고 있으나 헌재 가장 유력한 시험법으로는 흰쥐(Wistar rat)를 이용한 popliteal Iymph node assay가 정립되고 있어 른 연구에서는 자가면역질찬을 유발시키는 화학물질과 의약품의 검색을 위한 시험법을 확립하는 한편, 알레르겐(allergen)에 의한 반응도 양성으로 나타나는 같점을 보완하고자 flow rytometry를 이용하여 Iymphoc벌e 구성 subset의 변화를 분석하여 반영함으로써 자가면역반응만을 검색차는 개선된 방덥을 확립하여 의약품 등의 안전성 평가를 위한 전 임상시험에 적극 활용 가능한 시험법의 하나로 제시하고자 한다. 자가면.역을 운발하늘극것으로 알려진 chlorpromazine, hydrazine 딪 streptozotocin을 Wistar rat의 후지족적fl 투여한 후 슬와임파절의 무게지수 (weight fndex) 및 세포끈수(ce13u3af1y indef)를 측정하였고, flow c걋ometry를 이용하여 Iymphoc벗e subset의 변화를 측정하였다. Chlorprornasine,hyazine 및 streptozotocin의 모든 투여군에서 Iymph node의 무게왁 It·eight index는 용량 의존적으로 유의성 있게 증가하였으며, 세포수와 cellularity index도 용량 의존적으로 증가하여 유의적 결과를 보였다. Flow c번ometry를 이용한 Iymphoc번e 구성 subset의 변화를 분석한 결과, CDS"와 CD8b-세포는 chlorpromazine와 hydrazine의 투여군에서 용량 의존적으초 감소하는 경향을 보였으며,streptozotocin에서는 CD8b' 세포만 감소하였다. CBfiRA' 세포는 chlorpromafine와 hydrazine의 5mg 투여군에서만 증가하였고, CD4- 세포는 byafine와 streptozotocin의 0.Smg 투여군에서만 다소 증가하는 경향이 관찰되었다. NK 세포는 chlorpromazine와 hydrazine의 0.smg 투여군에서 증가하였다. 이상의 결과로 시험군페서 랫드 PLN의 Wl와 Cf가 유의적으로 존가하여 양성의 반응을 반영하였으나, 유발물질에 따라서 PLN를 구성하는 면역세포들이 서로 다른 변고양상을 나타내는 것으로 사료된다. 자가면역반응을 유발시킬 가능성이 있는 외인성 물질을 검색하기 꾸한 직접적인 PLNA 시험법을 확립하였으며, 추가적으로 flow cytometry에 의한 매개변수를 증강시컥 보다 정확한 해석방법을 모색하여 보았으나 추가적인 요소를 더 가피해야 할 것으로 사려된다. The llopliteal Iymph node assay (PLNA) was proposed to predict aotoirnmunogenic potetltial of xenobiotics. This study was conducted to establish the poplitealIymph node assay(PLIfA) and to investigate the measurement of Iymphocyte subsets can beutiliBed as an additional parameter in PLN,L. Chlorpromarine, hydrarine, and streptofotocin, havealready been reported to respond positive in the PLNA using ruce, and these chemicals alsocaused autoimmune disorders In humans as autoirnrnunogens. Wistar rats were injectedsubcutaneously with 500 of each test substance solution (10,30 and 100mg/saline Im4) into onefoot pad and vehitr(saline) only Into the contrataterat foot pad of the rats on day B. PLNweight and cellulfHy, and 3ymphocyte subsets were measured on day 7 after treatment ofchemicals. Comparison of the control PLN was used to calculate weight and cellularity indicesand in absolute weight and cell number rompared with PLNs injected with saline in both hindfoot pads of rats. The changes in Iymphocyte subsets were monitored by flow cytometry andimmunophenotyping of Iymphocyte subsets stained with a panel of monoclonal antibodies. Notonly the weight and cell numbers but also PLh cellularity and weight indices in PLNs treatedwith these compounds fose-dependently increased at 1.Smg/rat, Smg/rat groups- Treatment withchlorpromazine, hydrazine result in decrease in the percentages of CDSb+ and CD5- cells,however the proportions of CD45RA- subset in PLNs was increased. Treatment withstreptoBotocin result in the most decrease in the percentage of CD8b'cells at the lowestdose(0.Smg/rat) of the three doses, hou·ever this percentage recovered at Smg/rat fromdecrease. Proponions of NK cells were increased in every positive groups. These resuttssuggest that the PLNA may be an appropriate screening system for prediction of theautoimmunity-inducing ·eotentials of xenobiotics, and the measurement of 1)·mphocyte subse)5could be utilized as an additional parameter In PLNA for evaluation chemicals inducing thepotential autoimmune disease.

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