미생물을 이용한 폐수처리 방안

구본탁,Gu, Bon-Tak 환경보전협회 1997 환경정보 Vol.19 No.2

대한민국 벤처 희망1번지, 대덕연구개발특구

구본탁,Gu, Bon-Tak 벤처기업협회 2005 벤처다이제스트 Vol.76 No.-

연구여적 - 무궁무진한 바이오시장을 향하여, 연구원 생활 접고 세계무대 도전

구본탁,Gu, Bon-Tak 한국과학기술단체총연합회 2002 과학과 기술 Vol.35 No.4

국내 농작물의 근부토양에서 분리한 Pseudomonas 내에서의 Bacillus thuringiensis 독소단백질 유전자의 발현

구본탁(Bon - Tag Koo),신병식(Byung - Sik Shin),박승환(Seung - Hwan Park),박호용(Ho - Yong Park),김정일(Jeong - Il Kim) 한국미생물생명공학회 1989 한국미생물·생명공학회지 Vol.17 No.4

Transposon Tn5에 의한 Bacillus thuringiensis 독소단백질 유전자의 Pseudomonas 내로의 도입 및 발현

신병식,구본탁,박승환,김정일 한국미생물 · 생명공학회 1991 한국미생물·생명공학회지 Vol.19 No.1

국내농작물의 근부토양으로 분리한 Pseudomonas의 염색체 DNA에 Tn5를 사용하여 Bacillus thuringiensis subsp. kurstaki HD73의 독소유전자(cp)를 도입하였다. Tn5의 중심부위에 있는 BamHI위치 (Tn5-cp)와 BglII 위치 (IS5OL-cp)에 각각 독소유 전자를 도입하였으며 두 종류의 Pseudomonas 균주에는 Tn5-cp로써 그리고 다른 세 종류의 Pseudomonase 균주에는 IS5OL-cp로써 transposition하였다. 면역학적 방법과 흰불나방 애벌레에 대한 살충성 검정으로서 독소유전자의 도입과 발현을 확인하였다. The crystal protein gene (cp) of Bacillus tizuringienszs subsp. liuvstaki (B.t.k.) HI173 was subcloned into HanzHI site of central region (Tn5-cp) or BglII site of IS50L region (IS50L-cp) in Tn5, and transposed into the chromosomal DNA of five strains of root-colonizing Pseudomonas. The expression of cp gene in Acwiomoncrs transconjugants was demonstrated by immunoblot analysis and bioassay against larvae of the Hyphantria cunea.

1,3,5,7-Tetranitro-1,3,5,7-tetraazacyclooctane의 합성연구에 대한 고찰

강정부,구본탁,이상국,이경희,오동영,J. B. Kang,B. T. Koo,S. K. Lee,K. H. Lee,D. Y. Oh 대한화학회 1980 대한화학회지 Vol.24 No.4

1,3,5,7-Tetranitro-1,3,5,7-tetraazacyclooctane (homocyclonite)의 합성에 있어서 부산물로 1,3,5-trinitro-1,3,5-triazacyclohexane (cyclonite)이 동시에 생성되는데, 본 연구는 반응메카니즘 측면에서 주 생성물 homocyclonite로 가는 중간생성물인 1,5-endomethylene-3,7-dinitro-1,3,5,7-tetraazacyclooctane (DPT)을 액체크로마토그래피로 추적하고 반응계내의 총 메틸렌대 아미노 N 비율을 결정하기 위해 반응중에 첨가되는 paraformaldehyde의 최적의 양을 찾기 위한 이론적인 식을 유도하였으며, (식 1 참조) 실제 실험에서 얻어진 결과와 비교함으로서 주생성물인 homocyclonite의 최대의 수율을 얻기 위한 반응조건을 확인하였다. 1,3,5,7-Tetranitro-1,3,5,7-tetraazacyclooctane (homocyclonite) is prepared simultaneously with 1,3,5-trinitro-1,3,5-triazacyclohexane (cyclonite) by nitrolysis of hexamethylenetetramine. The purpose of our study was to detect the existence of intermediate, 1,5-endomethylene-3,7-dinitro-1,3,5,7-tetraazacyclooctane (DPT), by liquid chromatography based on the reaction mechanism, to derive the theoretical equation which is determinated by the ratio of total methylene group vs. amino N, for the proper quantity of paraformaldehyde added in the reaction and to obtain the optimum condition for maximum yield and purity by comparing the experimental results with the theoretical equation.

알칼리 내성 Bacillus sp. YA-14에서 유래된 생육단계 조절 promoter의 발현

박영서,구본탁,박희경,유주현,김진만 한국미생물 · 생명공학회 1990 한국미생물·생명공학회지 Vol.18 No.4

The promoter isolated from chromosomal DNA of an alkali-tolerant Bacillus sp. YA-14 was subcloned and biochemically characterized. Also the relationships between the promoter activity and sporulation were investigated. In alkali-tolerant Bacillus sp. and Bacillus subtilis, the activity of promoter began to increase at the onset of sporulation with the same mode, and repressed in the presence of 1.0% (wtv) glucose. Among five spoO genes, three epoO genes (spoOB, spoH, spoOJ) were required for promoter expression. 알카리 내성 Bacillus sp. YA-14의 chromosomal DNA로 부터 유래된 promoter를 subcloning하여 그 생화학적 특성과 포자형성과의 관계를 조사하였다. 알카리내성 Bacillus sp.와 B.subtilis에서 promoter의 활성은 포자가 형성되기 시작하는 단계에서 증가하기 시작했다. 또한 배지내 glucose가 1.0(w/v) 첨가시 promoter 활성이 억제되었다. 5가지의 spoO 유전자 중에서 3가지 유전자 (spoOB, spoOH, spoOJ) 산물이 promoter 활성에 필요하다.

Integration and Expression of Bacillus thuringiensis Crystal Protein Gene in Chromosomal DNA of Pseudomonas Strains Using Transposon Tn5

Shin, Byung Sik,Koo, Bon Tag,Park, Seung Hwan,Kim, Jeong Il 한국산업미생물학회 1991 한국미생물·생명공학회지 Vol.19 No.1

국내농작물의 근부토양으로 분리한 Pseudomonas의 염색체 DNA에 Tn5를 사용하여 Bacillus thuringiensis subsp. kurstaki HD73의 독소유전자(cp)를 도입하였다. Tn5의 중심부위에 있는 BamHI 위치(Tn5-cp)와 IS50L의 BglII 위치(IS50L-cp)에 각각 독소유전자를 도입하였으며 두 종류의 Pseudomonas 균주에는 Tn5-cp로써 그리고 다른 세 종류의 Pseudomonas 균주에는 IS50L-cp로써 transposition하였다. 면역학적 방법과 흰불나방 애벌레에 대한 살충성 검정으로서 독소유전자의 도입과 발현을 확인하였다. The crystal protein gene(cp) of Bacillus thuringiensis subsp. kurstaki (B.t.k.) HD73 was subcloned into BamHI site of central region (Tn5-cp) or BglII site of IS50L region (IS50L-cp) in Tn5, and transposed into the chromosomal DNA of five strains of root-colonizing Pseudomonas. The expression of cp gene in Pseudomonas transconjugants was demonstrated by immunoblot analysis and bioassay against larvae of the Hyphantria cunea.

국내 식물시료에서 분리한 Bacillus thuringiensis 균주의 다양성

박승환,구본탁,신병식,최수근,정영미,반재구,김정일 한국산업미생물학회 1997 한국미생물·생명공학회지 Vol.25 No.2

국내 52지역 3,237 지점에서 채집한 식물시료에서 총 1,925주의 B.t.균을 분리하였다. 활엽수, 침엽수와 관목 등 모든 수종에서 B.t.균이 분리되었으며 다소의 빈도 차이는 있었으나 전국 어디에서나 B.t.균이 분리되었다. 토양시료에서 B.t.균을 분리하는 것에 비해 노력이 적게들고 분리되는 빈도도 높아 식물시료가 B.t.균 분리를 위해서는 좋은 분리원임을 알 수 있었다. 분리주의 특성을 조사하여 2단계 연구를 위한 자료를 만들기 위해 독소단백질 결정체의 모양, 독소단백질의 PAGE 패턴, plasmid 패턴, 분리균주의 생화학적 성질, 살충성 검정, serotyping 등 여러 측면에서의 분석을 시도하였다. 독소단백질 결정체의 모양에서는 bipyramid형의 결정체를 생산하는 분리주가 가장 많아 전체의 49.1%(945주)를 차지하였고, 무정형의 inclusion을 만드는 것이 33.1%(638주), 구형의 inclusion을 만드는 것이 7.1%(137주), 네모난 판자형의 inclusion을 만드는 분리주가 1.4%(27주)였고 나머지 9.2%(178주)는 작은 inclusion을 다수 생산하는 것들이었다. 1,644주의 B.t.분리주들에 대해 살충성을 검정한 결과 나비목 해충에 살충효과가 있는 분리주가 전체 분리주의 44.8%인 736주를 차지했고, 그 다음이 모기에 대해 살충성이 있는 분리주로 4.9%(94주), 그리고 딱정벌레목 해충의 하나인 오리나무잎벌레(Alder leaf beetle: Agelastica coerulea)에 대해 살충성을 나타내는 균주가 27주 분리되었다. 독소단백질의 PAGE 패턴, plasmid 패턴 또는 분리균주의 생화학적 성질에 의해서도 분리주들을 분류할 수 있었으며 또한 다양한 부류의 B.t.균들이 분리되었음을 알 수 있었다. 한편 선발된 22주를 대상으로 H-serotyping을 시도한 결과 aizawai(H7), amagiensis(H29), canadensis(H5a, 5c), darmstadiensis(H10a, 10b), galleriae(H5a, 5b), finitimus(H2), kurstaki(H3a, 3b, 3c), morrisoni(H8a, 8b)및 neoleonensis(24a, 24b)와 같은 다양한 아종이 있음을 확인하였고 3 분리주는 새로운 serotype H49(subsp. muju)로 분류되었다.c We collected 3,237 plant samples, mainly leaves of various trees, from many provinces in Korea and a total of 1,925 Bacillus thuringiensis isolates were obtained and characterized. The isolates were characterized in terms of crystal morphology, PAGE pattern of the toxin proteins, plasimids pattern, biochemical characteristics, and bioassay. The microscopic observaton showed that 49.1% of the isolates have bipyramidal shape crystals, 7.1% of spherical shape crystals, 1.4% of rhomboidal shape crystals, and others have small or amorphous inclusions. The insecticidal activities of the spore-crystal mixtures of isolates were tested against Plutella xylostella, Bombyx mori, Culex pipiens, and Agelastica coerulea. Bioassay showed that 51.3% of the isolates were shown to be active; lepidopteran-specific (44.8%), dipteran-specific(4.9%) and coleopteran-specific (1.6%). The remainder(48.8%) did not show any activity against the insects we tested. Interestingly though, some of these non-active isolates were shown to have bipyramidal crystals. By serotyping 22 isolates of our collection, we found that there are various kind of subspecies such as aizawai, amagines, canadensis, dermstadiensis, galleriae, finitimus, kurstaki, morrisoni and neoleonensis, and three isolates have been classified into a new serotype, H49, and one of them, the type strain, named subsp. muju. From his study it was found that phylloplane is a good source for the isolation of Bacillus thuringiensis, and Bacillus thuringiensis is distributed widely in Korea.

Expression of Developmentally Regulated Promoter of Alkali-tolerant Bacillus sp. Ya-14

Park, Young Seo,Koo, Bon Tag,Kim, Jin Man,Park, Hee Kyoung,Yu, Ju Hyun 한국산업미생물학회 1990 한국미생물·생명공학회지 Vol.18 No.4

알카리 내성 Bacillus sp. YA-14의 chromosomal DNA로부터 유래된 promoter를 subcloning하여 그 생화학적 특성과 포자형성과의 관계를 조사하였다. 알카리 내성 Bacillus sp.와 B. subtilis에서 promoter의 활성은 포자가 형성되기 시작하는 단계에서 증가하기 시작했다. 또한 배지내 glucose가 1.0%(w/v) 첨가시 promoter 활성이 억제되었다. 5가지의 spoO 유전자 중에서 3가지 유전자(spoOB, spoOH, spoOJ) 산물이 promoter 활성에 필요하였다. The promoter isolated from chromosomal DNA of an alkali-tolerant Bacillus sp. YA-14 was subcloned and biochemically characterized. Also the relationships between the promoter activity and sporulation were investigated. In alkali-tolerant Bacillus sp. and Bacillus subtilis, the activity of promoter began to increase at the onset of sporulation with the same mode, and repressed in the presence of 1.0%(w/v) glucose. Among five spoO genes, three spoO genes (spoOB, spoH, spoOJ) were required for promoter expression.