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Saccharomyces cerevisiae에서 Zymomonas mobilis 유래 Levansucrase의 발현과 분비
임채권,김이경,김광현,김철호,이상기,남수완 한국생명과학회 2004 생명과학회지 Vol.14 No.3
Zymomonas mobilis 유래 levansucrase 유전자(levU)를 GAL1 promoter 하류에 연결시킨 pYES-levU와 GAL10 promoter 하류에 Kluyveromyces marxianus exoinulinase의 분비 신호서열(INU1 ss) 하류에 연결시킨 pYInu-levU를 각각 구축하였다. 이들 plasmid를 invertase 결손 변이주(suc2-$\Delta$9)인 S. cerevisiae SEY2102에 형질전환시켜 고활성 형질전환주를 선발하였다. 효모 형질전환주를 galactose 함유 배지로 배양한 결과, pYES-levU 함유 형질전환주인 경우 levansucrase의 총활성은 7.17U/ml이고, pYInu-levU 함유 형질전환주인 경우 6.61U/ml에 도달하였다. 발현된 levansucrase 약 50% 정도가 배지와 periplasmic space에 존재하였고, INU1 ss에 의한 분비효율 증가는 관찰할 수 없었다. 또한, 효모에서 발현된 재조합 levansucrase는 과당쇄화된 형으로 생산되는 것으로 보여진다. Levansucrase gene (levU) from Zymomonas mobilis was subcloned downstream of GALl promoter in pYES 2.0 and pYInu-AT [GALl0 promoter+exoinulinase signal sequence of Kluyveromyces marxianus], resulting pYES-levU and pYInu-levU, respectively. The two expression plasmids were introduced into an invertase-deficient strain, Saccharomyces cerevisiae SEY2102, and then transformants showing high activity of levansucrase were selected. When each yeast transformants was cultivated in medium containing galactose, the extracellular and intracellular activities of levansucrase reached about 7.17 U/㎖ with the strain harboring pYES-levU and 6.61 U/㎖ with the strain harboring pYInu-levU. It was found that about 50% of levansucrase were detected in the medium and periplasmic space, and exoinulinase signal sequence didn't enhance the secretion efficiency. Furthermore, the recombinant levansucrase expressed in yeast seems to be produced as a hyper-glycosylated form.
인공지능 기술 규제에 관한 탐색적 고찰: 딥러닝 기술을 중심으로
임채권,김태윤 한국기술혁신학회 2022 기술혁신학회지 Vol.25 No.3
최근 인공지능 기술에 대한 관심은 폭발적으로 증대되고 있다. 그러나 연구자 간 기술이해도가 상이하여, 어떻게 인 공지능을 규제할지에 대한 합의는 이뤄지지 않고 있다. 이에 본 연구는 인공지능 기술에 대한 정부규제 방향을 탐색적 으로 고찰해 본다. 연구에서는 기존 문헌 및 각국의 규제 정책, 그리고 딥러닝을 포함한 인공지능 기술 분석을 기반으 로 인공지능 규제방향을 고찰한다. 먼저 인공지능 규제의 목표로 투명성·공정성·안전성·책무성을 도출하고, 규제 범 위로 시스템 자체, 개발과정 및 활용과정을 설정하며, 개발자와 이용자가 규제의 준수 대상임을 보인다. 이 후 시험 및 성능 검증, 시스템 오남용 금지 등 바람직한 인공지능 규제 방법을 고찰하고, 향후 인공지능 규제 도입 시, 규제 당국 이 고려해야 할 주요 사항에 대해 제언한다. 본 연구의 학술적 의의는 인공지능 현재 기술수준을 분석하여 이를 바탕 으로 향후 일관된 인공지능 규제 논의의 기반을 마련한 것으로 볼 수 있다. 하지만 본 연구는 총론적 관점에서 인공지 능 규제 방향을 고찰한 바, 향후 활용 분야별 규제에 실제 적용하여 그 실효성을 검증할 필요가 있다.
Ad hoc Networking을 위한 블루투스 스캐터넷 형성 프로토콜
임채권(Chaegwin Lim),허명선(Myung-Sun Huh),정구민(Gu-Min Jeong) 한국통신학회 2008 韓國通信學會論文誌 Vol.33 No.4A
본 논문에서는 multi-hop 블루투스 스캐터넷을 형성하는 BSFP (Bluetooth Scatternet Formation Protocol) 을 제안한다. BSFP는 각각의 블루투스 기기에서 독립적으로 수행되고, 초기단계에서 주변 기기들에 대한 정보를 요구하지 않으며, 모든 기기들이 블루투스의 통신 가능 범위 안에 위치하지 않아도 스캐터넷을 형성할 수 있다. BSFP는 1) 자신의 주위에 어떤 노드들이 있는지를 찾는 Init 단계, 2) 각각의 노드가 국부적 정보만을 가지고 스캐터넷을 형성하는 Ready 단계, 3) 연결된 링크를 이용하여 통신을 하는 Complete 단계로 구성된다. BSFP에서는 스캐터넷 형성을 완료할 때까지 걸리는 실행시간이 기기들의 수가 늘어나도 크게 변하지 않으며, 인접 기기들 간의 통신 링크의 수가 많은 스캐터넷을 형성하여 신뢰도 높은 mobile ad hoc network을 구성할 수 있도록 해 준다. This paper proposes BSFP (Bluetooth Scatternet Formation Protocol), which establishes a multi-hop bluetooth scatternet. BSFP independently operates on each bluetooth device, does not require any information on neighbor devices at the very beginning, and can establish a scatternet even though all the devices are spreaded beyond the bluetooth transmission range. BSFP is composed of the following three stages; 1) Init stage to investigate neighbor nodes, 2) Ready stage to establish a scatternet using gathered local information at each node, and 3) Complete stage to use the determined scatternet links. In BSFP, the scatternet formation time does not significantly affected by the number of bluetooth devices and a robust mobile ad hoc network is formed because BSFP formulates a scatternet with many adjacent links to neighbor devices.
Saccharomyces cerevisiae에서 Bacillus CGTase의 표층발현
김현철,임채권,김병우,전숭종,남수완,Kim Hyun-Chul,Lim Chae-Kwon,Kim Byung-Woo,Jeon Sung-Jong,Nam Soo-Wan 한국생명과학회 2005 생명과학회지 Vol.15 No.1
B. stearothermophilus 유래의 CGTase 유전자(cgtS)를 보유하고 있는 재조합 plasmid pCGTS (4.8 kb)을 효모 표면 발현용 vector인 pYDl (GAL1 promoter)에 subcloning 하였다. 구축된 재조합 plasmid, pYDCGT (7.2 kb)는 S. cerevisiae EBY100에 형질전환하였고, tryptophan이 결여된 SD 배지에서 1차 선별된 형질전환체들을 YPGS배지에서 배양 후 활성 염색을 통하여 CD가 생 성 됨을 확인하였다. 배양시간과 효소반응시간에 따른 반응 산물을 TLC로 분석 한 결과, 배양 12시간째부터 효소활성이 나타났고, 반응 10분 이후부터 CD가 생성되어 시간이 지남에 따라 CD 생성양이 증가하는 것을 확인하였다. 회분 배양한 결과 $25^{\circ}C$와 $30^{\circ}C$에서 CGTase의 최대 활성이 각각 21.3 unit/1 와 16.5 unit/1로 나타났고, plasmid 안정성은 각각 $86\%$와 $82\%$로 나타나 배양온도에 상관없이 plasmid는 비교적 안정하게 유지되었다. For the expression in Saccharomyces cerevisiae, Bacillus stearothermophilus cyclodextrin glucanotransferase gene (cgtS) in pCGTS (4.8 kb) was subcloned into the surface expression vector, pYD1 (GALl promoter). The constructed plasmid, pYDCGT (7.2 kb) was introduced into S. cerevisiae EBY100 cells, and then yeast transformants were selected on the synthetic defined media lacking tryptophan. The formation of cyclodextrin (CD) was confirmed with active staining of culture broth of transformant grown on starch medium. Enzymatic reaction products with respect to the culture time and the reaction time were examined by TLC analysis. The results indicated that the enzyme activity was exhibited after 12 h cultivation and CD was produced after 10min of enzymatic reaction. When the surface-engineered yeast cells were cultured on galactose medium, maximum activities of CGTase were about 21.3 unit/l and 16.5 unit/l at $25^{\circ}C\;and\;30^{\circ}C$, respectively. The plasmids stability showed about $80\%\;even\;at\;25^{\circ}C\;and\;30^{\circ}C$.