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Site - Directed Mutagenesis 에 의한 야생형 연장된 치오레독신의 선택적 대량생성
사재훈,백혜승,이희봉,백융기,임창진 ( Jae Hoon Sa,Hye Seung Baek,Hee Bong Lee,Young Ki Park,Chang Jin Lim ) 생화학분자생물학회 1992 BMB Reports Vol.25 No.6
An E. coli trxA mRNA contains two potential translation initiation codons, one of which initiate synthesis of a protein, called extended thioredoxin, 19 amino acid longer than thioredoxin. A mutant extended thioredoxin, which has leucine instead of methionine at its 20th position, was previously purified and charactered. In the present work, it was attempted to enhance the synthesis of wild-type extended thioredoxin without concomitant synthesis of thioredoxin. The Shine-Dalgarno (SD) sequence for the second ATG codon was changed to become non-functional by site-directed mutagenesis. The SD mutant trxA gene could normally produce wild-type extended thioredoxin but not thioredoxin. To increase the production of wild-type extended thioredoxin, the SD mutant trxA gene was put under T7 promoter. We could examine in vivo function of wild-type extended thioredoxin without interference of thioredoxin. Additionally, the selective overproduction of wild-type extended thioredoxin would make its purification much easier.
사재훈,김영선,신인철,심태흠,왕명현 한국생약학회 2004 생약학회지 Vol.35 No.3
산뽕나무의 생리활성 기능을 탐색하기 위하여 메탄올, 에탄올, 클로로포름, 80% 메탄올, 80% 에탄올 및 물 추출물을 조제하였고, 산뽕나무 뿌리의 80% 에탄올 추출물로부터 n-Hexane, CHCl, EtOAc, n-BuOH 및 water 분획물을 제조하였다. 얻어진 추출물과 분획물에 대하여 DPPH 자유라디칼 소거법에 의한 항산화성 효과와 UVB 및 UVA 영역에서의 자외선 흡수 효과를 검토하였다. 산뽕나무 추출물의 수소전자공여능(IC)을 측정한 결과, 추출물에서는 80% 메탄올 줄기 추출물, 80% 열매 추출물, 80% 뿌리 추출물, 80% 메탄올 잎 추출물에서 높은 항산화 활성을 나타내었다. 자외선 차단효과에서는 80% 에탄올 뿌리 추출물 및 80% 메탄올 추출물에서 매우 높은 자외선 흡수력이 높게 측정되었다. 항산화 효과 및 자외선 차단효능이 탁월한 산뽕나무 뿌리의 80% 에탄올 추출물을 대상으로 용매 분획물을 제조하였다. 에틸아세테이트 분획물(IC: 15.0 g/ml)이 가장 우수한 항산화 효과를 나타내었으며, 자외선 차단효과에서도 에틸아세테이트 분획물(E%cm: 223.4)이 자외선 B영역에서 매우 높은 흡수력을 나타내었다. 현재 산뽕나무 뿌리의 에틸아세테이트 분획물을 대상으로 활성물질의 분리 및 구조규명에 관한 연구를 진행중에 있다.사 사 본 연구는 2003년도 농림기술관리센터 첨단기술개발사업 공모과제 연구비에 의해 이루어진 것이며 이에 감사드립니다.
Site-Directed Mutagenesis에 의한 야생형 연장된 치오레독신의 선택적 대량생성
사재훈,백혜승,이회봉,백융기,임창진,Sa, Jae-Hoon,Baek, Hye-Seung,Lee, Hee-Bong,Paik, Young-Ki,Lim, Chang-Jin 생화학분자생물학회 1992 한국생화학회지 Vol.25 No.6
An E. coli trxA mRNA contains two potential translation initiation codons, one of which initiate synthesis of a protein, called extended thioredoxin, 19 amino acid longer than thioredoxin. A mutant extended thioredoxin, which has leucine instead of methionine at its 20th position, was previously purified and charactered. In the present work, it was attempted to enhance the synthesis of wild-type extended thioredoxin without concomitant synthesis of thioredoxin. The Shine-Dalgarno (SD) sequence for the second ATG codon was changed to become non-functional by site-directed mutagenesis. The SD mutant trxA gene could normally produce wild-type extended thioredoxin but not thioredoxin. To increase the production of wild-type extended thioredoxin, the SD mutant trxA gene was put under T7 promoter. We could examine in vivo function of wild-type extended thioredoxin without interference of thioredoxin. Additionally, the selective overproduction of wild-type extended thioredoxin would make its purification much easier. 대장균 치오레독신 유전자의 mRNA는 108개의 아미노산으로 구성된 치오레독신과 그보다 19개의 아미노산이 긴 연장된 치오레독신을 합성할 수 있는 두개의 가능한 번역 개시코돈을 포함하고 있다. 두번째 개시코돈에 존재하는 methionine대신에 leucine으로 치환된 변이형 연장된 치오레독신이 정제되어 그 성질이 보고된 바 있으나, 아직 야생형 연장된 치오레독신의 특성에 관하여 알려진 바 없다. 본 연구에서는 치오레독신의 동시생성 없이 야생형 연장된 치오레독신의 합성을 증가시키기 위하여, 두번째 ATG codon에 대한 Shine-Dalgamo(SD) sequence를 site-directed mutagenesis에 의하여 기능을 못하도록 변화시켰다. 제조된 SD mutant 치오레독신 유전자를 T7 promoter vector로 subcloning하여 그 생성물을 확인하였고, 치오레독신의 간섭없이 야생형 연장된 치오레독신의 생체내 특성을 일부 파악하였다. 야생형 연장된 치오레독신의 선택적 대량생성은 이 단백질의 정제를 보다 용이하게 할 것이다.
사재훈(Sa, Jae-Hun),이상희(Lee, Sang-Hee),김광용(Gim, Gwang-Yong) 한국IT서비스학회 2016 한국IT서비스학회 학술대회 논문집 Vol.2016 No.추계
최근 빅데이터, 알고리즘, 머신러닝 등 핀테크(Fintech) 기술이 발전하면서 컴퓨터가 최적화된 통계분석 기법을 이용해 자산을 관리하게 되었다. 즉, 로봇이 개인 맞춤형 자산 관리를 자문하는 로보어드바이저(Robo-advisor)시대를 맞이하게 된 것이다. 본 연구에서는 이러한 시대 속에서 로보어드바이저 서비스 더 효과적으로 활용하기 위해 로보어드바이저 서 비스를 사용하고자 하는 사용자들의 사용의도에 영향을 미치는 로보어드바이저의 특성과 사용자 각 개인의 특성에 대해서 알아보고자 한다.