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Lentivirus를 이용한 형질전환가금 생산에 대한 연구
변승준,박철,전익수,박진기,손시환,김태윤,양보석,장원경 한국가금학회 2005 한국가금학회 정기총회 및 학술발표회 Vol.22 No.-
본 연구는 닭의 배반엽단계(stage-X) 수정란에 사람의 락토페린(LTF) 유전자와 닭의 OValbumin promoter(OVP)를 가지는 lentiviral vector를 도입하여 계란의 난백에 락토페린 단백질을 분비하는 닭을 생산하고자 한다.<br/> Lentiviral vector의 구축은 multisite-gateway system을 사용하여 닭의 OValbumin promoter에 락토페린 유전자를 가지는 OVP/LTF vector를 구축하였다. In vitro에서 락토페린 유전자가 대략 80 kDa의 락토페린 단백질을 발현함을 대장균 단백질발현 시스템에서 Western blot 분석 방법으로 검증하였고, OVP/LTF vector를 사용하여 293FT virus packaging 세포에서 lentivirus를 생산하였다. 향후 연구는 생산된 virus를 배반엽단계 수정란에 도입하여 형질전환닭을 생산하고자 한다.
배반엽단계 수정란에서 바이러스 titer가 제2세대 형질전환 닭 생산에 미치는 영향
변승준,김진아,김점순,김성우,김경운,전익수,김태완,류재규,박수봉 한국가금학회 2009 한국가금학회 정기총회 및 학술발표회 Vol.26 No.-
본 연구는 배반엽단계 수정란에서 바이러스 농도(titer)에 따른 제1대(G0) 그리고 제2세대(G1) 형질전환 닭의 생산 효율을 검증하고자 닭의 배반엽단계(stage-X) 수정란에 각각 10⁴, 10?과 10? cfu/㎖의 titer를 가지는 재조합바이러스 주입하고 대리난각을 이용한 수정란 인공배양방법으로 후보형질전환 병아리를 생산하여 검증하였다. 연구결과 바이러스의 농도가 10?과 10? cfu/㎖의 실험군에서 제1세대 형질전환 닭의 생산을 확인하였다. 그리고 생산된 제1세대 형질전환 닭을 이용한 제2세대 형질전환 닭의 생산은 10? cfu/㎖의 실험군이 10? cfu/㎖의 실험군보다 높은 비율로 생산됨을 확인하였다.