Estradiol Valerate에 의해 유도된 다낭성난소와 CHO세포에서 NGF발현

최백동,정순정,정문진,임도선,이수한,김승현,고아라,김세은,강성수,배춘식,Choi, Baik-Dong,Jeong, Soon-Jeong,Jeong, Moon-Jin,Lim, Do-Seon,Lee, Soo-Han,Kim, Seung-Hyun,Go, A-Ra,Kim, Se-Eun,Kang, Seong-Soo,Bae, Chun-Sik 한국현미경학회 2011 Applied microscopy Vol.41 No.2

다낭성 난소증후군(polycystic ovary syndrome, PCOS)은 내분비 및 대사장애로 호르몬 불균형 상태를 야기하여 가임기 여성의 불임 및 여러 합병증을 유발한다. 폐경기 여성의 호르몬대체 치료에 사용되는 estradiol valerate (EV)는 과다 투여 시 PCOS를 유발하는 것으로 알려졌다. 신경성장인자(nerve growth factor, NGF)는 발생 중인 신경세포의 생존과 성숙을 조절하는 인자로 난소에서도 합성되고, EV 처리에 의해 유도된 다낭성난소(polycystic ovary, PCO)에서 발현이 크게 증가하는 것으로 보고됐다. 따라서 본 연구에서는 난소유래 세포인 CHO 세포주와 다낭성 난소를 이용해 호르몬 불균형 상태인 PCOS 진단 시 NGF가 생물학적 표지인자로서 사용될 수 있는 가능성을 규명하고자 하였다. CHO 세포에 EV 2 mg과 3 mg 처리는 초기에 세포증식을 억제했으나 1 mg 처리는 영향을 미치지 않음으로써 실험 시 최적농도로 사용하였다. 하지만 농도별 EV 처리에 따른 CHO 세포의 형태학적 차이는 관찰되지 않았다. CHO 세포에 EV 처리 후 NGF mRNA 및 단백질 발현은 대조군에 비해 30분 후 크게 증가하였고, 다수의 난포낭이 관찰된 PCOS 조직에서도 정상군에 비해 크게 증가하였다. 따라서 이상의 결과들을 종합하면 EV 처리 후 난소에서 유도되는 NGF 과발현은 비정상적 난포발달을 유도하는 인자로 작용할 것으로 보이며, 다낭성난소 진단 시 표지인자로서 사용될 수 있을 것으로 생각된다. Polycystic ovary syndrome (PCOS) is hormonal imbalance condition as the endocrine and metabolic disorder that induces the infertility and various complications in reproductive age women. Estradiol valerate (EV) is used hormone replacement therapy in menopausal women and is reported that excessive administration of EV induces the PCOS. Nerve growth factor (NGF) is the factor to regulate the survival and maturation of developing neuronal cell and is also synthesized in ovary. And NGF is overexpressed in EV-induced polycystic ovary (PCO) as previously reported. Therefore, this study examined the possibility of NGF as can be used the biological marker in diagnosis of PCOS, the hormonal imbalance condition, using PCO and CHO (chinese hamster ovarian) cell lines. The concentration of EV treatment is optimized a 1 mg as not influence on the proliferation of CHO cell but 2 mg and 3 mg of EV treatment have the inhibition effect at initial stage. The morphological change was not observed in CHO cell after dose dependent manner treatment of EV. Expression of NGF mRNA and protein is significantly increased at 30 min after EV treatment in CHO cells compared to that of control. And NGF protein expression is strongly increased in PCO tissue, which observed many follicular cysts compared to normal ovary tissue. Taken together, overexpression of NGF may be act as a molecule to induce an abnormal development of follicle, suggesting that NGF can be used as a biological marker in diagnosis of PCOS.

Increased Protein of the Secretory Leukocyte Pretense Inhibitor (SLPI) and the Expression of Growth Factors in NIH3T3 Cells by LPS Stimulation

이상화,최백동,정순정,장현선,김병옥,임도선,박주철,왕관림,정문진,Lee, Sang-Hwa,Choi, Baik-Dong,Jeong, Soon-Jeong,Jang, Hyun-Seon,Kim, Byung-Ock,Lim, Do-Seon,Park, Joo-Cheol,Wang, Guan-Lin,Jeong, Moon-Jin Korean Society of Electron Microscopy 2006 Applied microscopy Vol.36 No.3

분비백혈구단백분해효소억제제 (SLPI)는 염증 부위에서 중성구 엘라스타제에 의한 손상 작용에 대해 조직을 보호하는 역할을 한다. SLPI의 새로운 기능에 대한 연구들은 단백질분해효소억제제 역할보다는 선천적 면역반응 작용에 주로 관여 할 것임을 보고하였다. 따라서 본 연구는 섬유모세포 세포주(NIH3T3)에서 박테리아성지질다당류(LPS)자극에 의한 SLPI의 기능을 확인하기 위하여 LPS처리에 따른 여러 성장 인자들과 비교하여 SLPI의 발현을 알아보았다. 역전사효소 중합반응(RT-PCR)과 면역학적 단백질 검출법 (Western blot)은 LPS 처리 후 SLPI와 몇몇 성장 인자들(VEGF, bFGF, PDGF)의 mRNA와 단백질의 검출을 위해 수행하였다. NIH3T3 세포주를 mL당 100ng의 LPS에 각각 30, 60, 90분, 24, 48시간 동안 노출시켰다. RT-PCR 결과 SLPI와 VEGF mRNA는 LPS처리와는 상관없이 강한 발현 양상을 보였다. bFGF mRNA는 대조군과 같이 약하게 발현하였고, PDGF mRNA는 LPS 노출 시간에 따라 점진적으로 증가하는 양상을 나타냈다. 그러나 세포질 용해액과 세포 배양액에서 SLPI단백질의 수준은 LPS처리에 의해 증가하였다. 또한 광학 현미경 관찰과 전자 현미경 관찰은 LPS가 NIH3T3세포주의 형태학적인 변화를 유발시킴을 증명하였다. 따라서 LPS는 NIH3T3세포에서 SLPI의 발현 증가를 조절하며, 분비된 SLPI는 세포분열과 이동을 자극할 것이라는 결론을 얻었다. SLPI가 세포분열과 세포이동에 어떻게 관여하는지는 아직까지 규명되지 않은 실정이므로-추후에 SLPI단백질이나 유전자 도입을 통하여 세포 이동에 관련된 실험이 진행되어야 할 것이다. Secretory leukocyte protease inhibitor (SLPI) involves tissue protection against the destructive action of neutrophil elastase at the site of inflammation. Several studies on new functions of SLPI have demonstrated that SLPI may play a primary role in innate immunity than protease inhibitor, To identify the function of SLPI by lipopolysaccharide (LPS) stimulation in the embryonic fibroblast (NIH3T3) cells. we studied the expression of SLPI compared to other growth factors involving the LPS treatment. To address this, we performed the reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR) and Western blots for the detection of mRNA and protein expression of the SLPI and some growth factors such as VEGF. bFGF, and PDGF-BB after LPS stimulation. NIH3T3 cells were exposed 100 ng/mL Escherichia coli LPS for 30min, 60min, 90min, 24h, and 48h, respectively. The result of RT-PCR showed that SLPI and VEGF mRNA was expressed strongly in NIH3T3 without related to LPS stimulation. mRNA of bFGF was weakly expressed such as the expression of the control. PDGF mRNA expression gradually increased follows at time course. However, SLPI protein level was increased in lysates and culture medium by LPS stimulation. Phase contrast microscopic and scanning electron microscopic observation showed that the increased cell number and cytoplasmic enlargement of the NIH3T3 cells. Therefore, it suggests that the LPS upregulates SLPI expression in NIH3T3 cells. Moreover, secreted SLPI may stimulate cell proliferation and migration.

Expression of Growth Factors and Secretory Leukocyte Protease Inhibitor (SLPI) in RAW264.7 Cells after Lipopolysaccharide (LPS) Stimulation

손욱희,최백동,정순정,왕관림,황호길,정문진,Son, Wook-Hee,Choi, Baik-Dong,Jeong, Soon-Jeong,Wang, Guan-Lin,Hwang, Ho-Keel,Jeong, Moon-Jin Korean Society of Electron Microscopy 2007 Applied microscopy Vol.37 No.2

분비백혈구단백분해효소억제제 (SLPI)와 여러 성장인자들은 상처 감염이나 박테리아 침입 시 일어나는 염증반응에 서로 관계가 있지만, 대식세포에서 LPS 자극시 SLPI와 VEGF, bFGF, PDGF 등과 같은 성장 인자들의 발현관계에 대해서는 아직까지 알려진 연구 결과가 없다. 따라서 본 연구는 대식세포 세포주로 알려진 RAW264.7 세포에 SLPI 발현의 적정농도인 LPS에 반응하는 SLPI 및 성장 인자들과 세포외부기질이 발현을 규명하고자 하였다. 역전사효소 중합반응(RT-PCR)과 면역학적 단백질 검출법(Western blotting)은 LPS 처리 후 SLPI와 몇몇 성장인자들 (VEGF, bFGF, PDGF)와 제1형 아교질 mRNA와 SLPI 단백질의 검출을 위해 수행하였다. RAW264.7 세포 주를 mL 당 100 ng의 LPS에 각각 30분, 60분, 90분, 24시간, 48시간동안 노출시켰다. RT-PCR 결과 SLPI mRNA는 시간이 지남에 따라 점점 발현 양이 증가하였고 VEGF와 PDGF mRNA는 초기에 높은 발현 양상을 보였다. 그러나 bFGF와 I형 아교질의 발현은 매우 미약하게 나타났다. SLPI 단백질 발현 역시 mRNA 수준과 마찬가지로 증가하는 양상을 보였는데, 배양액내의 SLPI 단백질양은 전체적으로 감소하는 경향을 보였다. 또한 광학현미경 관찰과 주사전자현미경 관찰결과, LPS가 RAW264.7 세포주의 형태학적인 변화를 일으킴을 확인하였다. 본 결과를 종합하면 SLPI 발현증가의 적정 농도라 생각되는 100ng의 LPS에 의해서 발현되는 VEGF나 PDGF는 SLPI의 발현에 관계가 있는 것으로 생각되지만 추후에 이들 인자들의 단백질이나 유전자 도입을 통하여 발현 관계를 명확히 확인해야 하는 추가실험이 진행되어야 할 것이다.하게 된다.토끼 면역항체를 선모충유충 조직항원에 반응시켰을 때 충체의 표피와 기저층 그리고 EIM 및 stichocyte의 ${\alpha}_0\;{\alpha}_1$ 과립에 황금입자가 표지되었다. 따라서 1일 동안 배설되는 분비배설항원은 선모충 유충의 표피와 stichocyte의 ${\alpha}_0\;{\alpha}_1$ 과립에서 유도되는 반면에 3일 동안 배설되는 분비배설항원은 표피와 stichocyte의 ${\alpha}_0$ 과립에서 유도되고, 선모충유충 감염후 1주, 4주에 실험쥐에서 형성되는 감염항체는 선모충의 표피와 기저층 그리고 EIM에서 분비되는 항원에 의하여 생성된다. 이상의 결과로 선모충의 분비배설항원과 감염항원은 선모충 유충의 표피와 EIM및 stichocyte의 ${\alpha}_0\;{\alpha}_1$ 과립에서 유도되며 이들은 45 kDa 단백을 포함하고 있는 것으로 생각된다.성하고 있는 세포들에는 세포질이 어두운 세포와 밝은 세포가 있었으며, 세포질내에는 전자밀도가 높은 분비과립이 관찰되었다. 전체적인 특징은 눈물샘분비세포 중 장액세포의 것과 비슷하였으나, 과립의 크기는 작았다. 분비관을 구성하는 세포들 사이에도 연접복합체가 매우 잘 발달되어 있었다. 샘포에서 사이관으로 이행되는 곳에서도 샘포세포와 사이관세포 사이에서도 연접복합체가 관찰되었다. 분비관세포의 분비과립 가운데는 중심부분에 전자밀도가 더 높은 중심을 가진 다른 모양의 과립이 관찰되기도 하였다. 의해 사망한 환자는 없었다. 결 론: 자궁경부암 환자에 항암화학요법과 동시에 외부 방사선조사와 고선량률의 강내조사를 시행한 결과 독성이 심하지 않고 국소제어율과 단기 생존율이 양호하여 안전하고 효율적인 치료방법으로 생각된다. Secretory leukocyte protease inhibitor (SLPI) was known as one of bacterial lipopolysaccharide (LPS)-induced products of macrophage. Macrophages play an important role in the development of inflammatory responses by secreting an array of cytokines and chemokines in a tissue microenvironment. To identify the function and relationship between potent growth factors and SLPI after LPS stimulation, we conducted reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR) and Western blots for the detection of mRNA and protein expression of SLPI and growth factors such as VEGF, PDGF, bFGF after 100 ng LPS stimulation on the RAW264.7 cells. The result of RT-PCR was showed SLPI mRNA expression was increased from 60 min to 48h in RAW 264.7 cells after incubation with LPS. VEGF and PDGF mRNA was expressed highly at initial stage by LPS stimulation. The mRNA of bFGF and type I collagen was very weakly expressed after LPS stimulation. SLPI protein level was increased likely the mRNA levels in RAW 267.7 cells. Additionally, phase contrast and scanning electron microscopic observation demonstrated that the LPS induce the change of morphology of the RAW264.7 cells. From these results, it suggest that expression of SLPI by LPS treatment may associate with VEGF and PDGF expression in RAW264.7 cells.

상처치유 과정에서 아미노산 수송계 L의 발현

정문진,김창현,최백동,정순정,박주철,김흥중,박경진,김도경 대한체질인류학회 2006 해부·생물인류학 (Anat Biol Anthropol) Vol.19 No.1

The continuous growth and proliferation of cells are essential for the wound healing process, and the amino acid transporters plays an important role in the continuous growing and proliferating cells. Among the amino acid transport systems, the amino acid transport system L, which is a Na+-independent neutral amino acid transport system, is a major route for providing living cells including tumor cells with neutral amino acids including several essential amino acids. In the present study, to elucidate the role of amino acid transport system L in the wound healing process, we investigated the expression pattern of LAT1 and LAT2 in the healing process after inflicting the wound on skin of rat. The expression of LAT1 was increased at 12 hours after inflicting the wound and was similar to the control group getting closer to 7 days. The expression of LAT2 was increased at 1 day and 3 days after inflicting the wound and was similar to the control group getting closer to 7 days. These results suggest that the LAT1 and LAT2 play important roles at the early stage and at the middle stage getting closer to normal skin in the wound healing process after inflicting the wound, respectively. 상처치유 과정에는 계속적인 세포성장과 증식이 필수적이며, 이러한 과정에 영양물질 수송체의 역할은 필수적이라고 할 수 있다. 아미노산 수송계 L은 중성아미노산을 수송하는 세포막 단백질로서 종양세포를 포함한 대부분의 세포에서 중성아미노산의 주 경로가 되는 아미노산 수송계로 알려져 있다. 본 연구는 상처를 유발시킨 흰쥐를 이용하여 상처치유 과정에서 아미노산 수송계 L의 발현양상 및 역할을 밝히고자 하였다. 동일조건 하에서 일정기간 사육한 흰쥐의 피부에 상처를 유발시킨 후, 12시간, 1일, 3일, 5일, 7일째에 조직을 적출하여 역전사-중합효소 연쇄반응과 면역조직화학적 분석 등을 이용하여 상처치유 과정에서 아미노산 수송계 L의 발현을 분석하였다. LAT1의 발현은 상처유발 후 12시간째에 증가가 있었으며, 1일, 3일, 5일 및 7일째로 경과하면서 대조군과 점차 유사해졌다. LAT2의 발현은 상처유발 후 1일과 3일까지 증가하였으며, 5일과 7일째로 경과하면서 대조군과 점차 유사해졌다. 본 연구의 결과로서 중성아미노산 수송계 L 중, LAT1은 세포손상 후 상처치유과정의 초기단계에서 중요한 역할을 하며, LAT2는 상처치유 기간에서 점차 정상으로 진행되어가는 중기단계에서 중요한 역할을 하는 것으로 사료된다.

Secretory leukocyte protease inhibitor reduces inflammation and alveolar bone resorption in LPS-induced periodontitis in rats and in MC3T3-E1 preosteoblasts

이승연,노태희,최백동,정순정,임도선,정문진 한국통합생물학회 2016 Animal cells and systems Vol.20 No.6

In periodontitis, alveolar bone resorption is induced by excessive host immune and inflammatory response against bacterial infection. Secretory leukocyte protease inhibitor (SLPI) has antibacterial and anti-inflammatory activity in inflammatory responses. SLPI inhibits joint inflammation and bone destruction, but the function of SLPI in periodontitis is unclear. Therefore, this study investigated whether SLPI inhibits the inflammatory response and alveolar bone resorption in LPS-induced periodontitis of rats. Micro-computed tomography and histological analysis showed that SLPI inhibited alveolar bone resorption by LPS-induced periodontitis. Immunohistochemistry revealed that SLPI decreased tumor necrosis factor-α (TNF- α) and interleukine-1β (IL-1β) expression in periodontitis tissue, and decreased mRNA and protein expression of TNF-α and IL-1β in LPS-stimulated MC3T3-E1 cells. The results indicated that SLPI reduced alveolar bone resorption in LPS-induced periodontitis and inhibited inflammatory cytokine, such as TNF-α and IL-1β, expression in LPS-stimulated MC3T3-E1 preosteoblasts. Therefore, SLPI could be a regulatory molecule by inhibiting alveolar bone resorption through the reduction of inflammatory cytokines, and inducing osteoblast activation for bone formation.

Estradiol valerate에 의해 유발되는 다낭성난소증후군의 Nerve Growth Factor 변화

김세은,임성철,정문진,최백동,김승현,고아라,서승용,강성수,문창종,김종춘,김성호,배춘식 한국임상수의학회 2011 한국임상수의학회지 Vol.28 No.4

A form of polycystic ovary (PCO) resembling some aspects of the human PCO syndrome (PCOS) can be induced in rats by a single injection of estradiol valerate (EV). An increase in sympathetic outflow to the ovary precedes, by several weeks, the appearance of cysts, suggesting the involvement of a neurogenic component in the pathology of this ovarian dysfunction. To test the hypotheses that the change in sympathetic tone is related to an augmented production of hippocampal and/or ovarian nerve growth factor (NGF), and that this abnormally elevated production of NGF contributes to the induction of PCOS induced by EV. The animals were sacrificed after PCOS induction and the ovaries and hippocampus were sectioned and compared to the normal control. The expression of NGF was measured by immunohistochemical staining and Western blot analysis in the ovaries and hippocampus. EVinduced PCOS showed significant increase of ovarian NGF expression. Immunohistochemical expression of NGF was confined to the follicular cells and interstitial cells. Hippocampal NGF expression was not significantly changed. In conclusion EV-induced PCOS was related to the ovarian sympathetic activation which was mediated by NGF.

NIH3T3와 NIH3T3(ras) 세포에서 Dynamin II 발현 및 형태적 비교

이철우,김수관,최정윤,최백동,배춘식,정순정,정문진,Lee, Chul-Woo,Kim, Su-Gwan,Choi, Jeong-Yun,Choi, Baik-Dong,Bae, Chun-Sik,Jeong, Soon-Jeong,Jeong, Moon-Jin 한국현미경학회 2005 Applied microscopy Vol.35 No.3

Ras 신호전달체계는 세포내 다양한 결합 분자들과 더불어 세포의 분열과 세포의 이동에 관여한다. Dynamin 단백질은 endocytosis와 분비과정에서 vesicle를 분리하는데 관여하는 것으로 알려져 있으며, 3가지 아형으로 구분된다. Dynamin I은 신경조직에서 만 발현되고, dynamin II는 모든 조직에서 발현되지만 dynamin III는 정소를 포함한 생식기계에서만 발현된다. 선행된 연구에서 NIH3T3 세포를 이용하여 ras과발현 세포주를 만들었으며, dynamin II와 ras의 신호전달체계에 있는 Grb2가 결합한다는 것을 보고하였다. 따라서, 본 연구는 ras 단백질이 과발현되는 세포 (NIH3T3 (ras))와 대조세포인 NIH3T3의 형태학적인 차이점을 분석하고, 이 두 세포들에서 dynamin II 단백질의 발현의 차이를 비교하고자 하였다. Dynamin II의 발현차이를 분석하기 위해 형광염색을 하여 공초점 레이저현미경으로 세포내 분석을 하였으며, western blot을 시행하여 생화학적인 발현차이를 보았다. 또한, 두 세포의 미세구조적인 분석을 위하여 SEM과 TEM을 사용하였다. Dynamin II는 NIH3T3 (ras) 세포에서 발현이 증가 하였으며, NIH3T3 세포에 비하여 좀더 방추형이 었으며, 작은 세포질 돌기가 세포막을 따라 다수 신장되어있음이 관찰되었다. 또한, NIH3T3 (ras) 세포의 endocytotic vesicle이 형성되는 부위에서 dynamin II의 발현이 증가하였다. 이러한 결과로 dynamin II는 ras신호전달체계의한 신호전달분자로서 작용을 할 것으로 사료된다. It has been known that ras signaling transduction leads to cell proliferation and migration including various adaptor molecules. Dynamin protein has been implicated in the formation of nascent vesicles in both the endocytic and secretory pathways. Dynamin was classified into three isoforms: dynamin I is only expressed in neuronal tissue, dynamin II is expressed ubiquitously in all tissue but that of dynamin III is confined to testis. We have reported in previous study that Grb2, binding to ras, was associated with dynamin II in NIH3T3 cells. Therefore we have tried to identify the relative expression of dynamin II according to overexpressed ras protein in ras oncogene transfected cells (NIH3T3 (ras)). For the detection of differential expression of dynamin II, we have used immunofluorescent staining and western blot methods in NIH3T3 and NIH3T3 (ras) cells. Next we have described the morphological differences between NIH3T3 and NIH3T3 (ras) cells using SEM and TEM. From these experiments dynamin II was highly expressed in NIH3T3 (ras) cells. NIH3T3 cells was transformed to more spindle shape with many cell process by transfection of ras oncogene. Moreover dynamin II was more concentrated in endocytotic membrane of the NIH3T3 (ras) cells compared to that of NIH3T3 cells. The present results suggested that dynamin II may involve the intermediate messenger in Ras signaling transduction pathway.

Effect of secretory leukocyte protease inhibitor on migration and invasion of human KB oral carcinoma cells

Guanlin Wang,임도선,최백동,박진주,정순정,김진수,김재덕,박정수,김응권,김병훈,함주현,정문진 한국통합생물학회 2011 Animal cells and systems Vol.15 No.2

Secretory leukocyte protease inhibitor (SLPI) plays an important role in promoting the invasion and metastasis of a range of cancer cells. However, there are no reports of the expression and function of SLPI in oral carcinoma cells. In this study, the oral carcinoma cell line KB was used to determine whether SLPI affects the proliferation, migration and invasion of oral carcinoma cells. RT-PCR and Western blotting revealed high levels of endogenous SLPI expression in KB cells as well as a strong increase in SLPI secretion after wounding compared to immortalized normal oral keratinocytes (INOK). The wound healing assay revealed more migration of KB cells than INOK cells,and the SLPI treatment increased the migration of KB cells. KB cell proliferation was increased significantly by the SLPI protein but decreased by SLPI-siRNA. SLPI strongly increased the migration and invasion of KB cells. On the other hand, SLPI-siRNA decreased the migration and invasion of KB cells. This suggests that SLPI plays an important role in the metastasis of oral carcinoma cells.

Age Determination by Tooth Wear and Histological Analysis of Seasonal Variation of Breeding in the Big White-Toothed Shrew, Crocidura lasiura

정순정,윤명희,최정미,김현대,임도선,박진주,최백동,정문진,Jeong, Soon-Jeong,Yoon, Myung-Hee,Choi, Jung-Mi,Kim, Hyun-Dae,Lim, Do-Seon,Park, Jin-Ju,Choi, Baik-Dong,Jeong, Moon-Jin Korean Society of Electron Microscopy 2010 Applied microscopy Vol.40 No.1

포획된 야생의 우수리땃쥐 Crocidura lasiura는 구치의 마모와 높이를 이용하여 3개의 연령군으로 분류하였고 번식과 생식기관의 계절적 변이를 조사하였다. 유수들은 구치에서 마모를 가지지 않았고 세 번째 구치 높이가 첫 번째와 두 번째 구치보다 낮았고 비번식상태만을 가졌다. 아성수들은 약간의 마모를 가졌고 세 번째 구치가 첫 번째와 두 번째 구치 높이에 도달했고 성수들은 구치에 깊은 마모를 가졌으며 아성수와 성수는 계절에 따라 번식 혹은 비번식상태를 가졌다. 조직학적 관찰을 근거로 아성수와 성수 수컷의 번식상태는 2월 초에서 10월 초까지 유지되었고 4월에 가장 높은 번식활동을 보였으며 암컷의 번식 상태는 3월 말에서 10월까지 유지되어, 수컷이 암컷보다 빨리 성적 성숙에 이르는 것으로 밝혀졌다. 반면 번식상태는 비번식기 동안 중단되며 이것은 식량자원인 토양 무척추동물의 부족때문이라 생각된다. 번식기의 아성수와 성수들은 많은 생식세포들로 채워진 확장된 세정관을 가지는 큰 정소와 많은 정자들을 가진 팽창된 부정소 미부를 가졌고 10.0 g 이상의 몸무게와 0.03 g 이상의 정소와 부정소 무게를 가졌다. 번식기의 암컷들은 4~6개의 새끼를 가진 임신상태이거나 난소에 성숙난포들과 황체를 가졌고 9.6 g 이상의 몸무게를 가졌다. Captured wild specimens of the big white-toothed shrew, Crocidura lasiura were classified into three age classes by tooth wear and height of molars, and seasonal variations of breeding and reproductive organs were examined. Juveniles had not tooth wear in molars and height of the third molars were lower than the first and second molars, and had only non-breeding condition. Young adults had little tooth wear and the third molars reached to the first and second molars, and old adults had heavy tooth wear in molars, young adults and old adults had breeding or non-breeding condition according to the season. On the basis of histological examination, seasonal variations of breeding were confirmed that breeding condition of young and old adult males were continued from early February to early October although the breeding activity was the highest in April, that of females were continued from the end of March to October, males reached sexual maturity earlier than females. Whereas the breeding condition seems to cease for non-breeding season because of the deficiency of food resources, soil invertebrates. Young and old adult males of the breeding season had large testes with enlarged seminiferous tubules that were filled with numerous germ cells, and expanded caudal epididymides with a vast number of spermatozoa, and were more than 10.0 g in the body weight and 0.03 g in the testis and epididymis weight. The females of the breeding season were pregnant condition with 4~6 litters or had the Graafian follicles and the corpus lutea in the ovary, and were more than 9.6 g in the body weight.

Ultrastructure of the Submandibular Gland in the Big White-Toothed Shrew, Crocidura lasiura

정순정,임도선,박주철,김흥중,정제오,최백동,윤명희,정문진,Jeong, Soon-Jeong,Lim, Do-Seun,Park, Joo-Cheol,Kim, Heung-Joong,Jeong, Je-O,Choi, Baik-Dong,Yoon, Myung-Hee,Jeong, Moon-Jin Korean Society of Electron Microscopy 2005 Applied microscopy Vol.35 No.2

The ultrastructure and histochemical characteristics of the submandibular gland was examined in the big white-toothed shrew, Crocidura lasiura. A submandibular gland of Crocidura lasiura was a mixed gland composed of serous and mucous acinar cells. Secretory granules from the acini were discharged through the intercalated duct, the granular duct and the striated duct into the oral cavity. Serous and mucous acinar cells and granular duct cells had large amount of rough endoplasmic reticulum, free ribosome and prominent Golgi apparatus at the basal cytoplasm of the cell, and many granules at the apical cytoplasm. Oval type serous granules had a homogeneously pale round shape of bead at the center. Mucous granules were distinct from those of the other mammalian species having variety patterns with several dense bands into homogeneous pale matrix. A serous-like secretory granules and myelin-like body were observed in the cytoplasm and the lumen of granular duct cells. The myelin-like body is a characteristic structure only reported in the salivary glands of two shrews, Suncus murinus and C. dsinezumi. Striated duct cell had numerous well-developed mitochondria but secretory granule was not shown at all. 악하선의 미세구조와 조직화학적 특성을 우수리땃쥐 Crocidura lasiura에서 연구하였다. 악하선은 장액선세포와 점액선세포로 구성된 혼합샘이었다. 이 샘포에서 분비된 과립들은 사이관, 과립관 그리고 줄무늬관을 거쳐 구강으로 분비되었다. 장액선세포, 점액선세포 그리고 과립관세포들은 많은 양의 조면소포체, 유리 리보솜 그리고 현저히 발달된 골지체를 기저부에, 많은 양의 과립을 정점부에 가지고 있었다. 타원형의 장액선 과립은 균질하게 밝은 구형 구슬모양을 중앙에 가지고 있었다. 점액선 과립은 균질하게 밝은 기질 내에 몇 개의 전자밀도가 있는 띠를 가짐으로서 다양한 문양을 가져 다른 포유류의 것과 구분되었다. 장액성의 분비과립과 땃쥐류, Suncus murinus와 C. dsinezumi에서 보고된 특징적 구조인 미엘린소체가 과립관세포의 세포질과 내강에서 관찰되었다. 줄무늬관세포는 많은 잘 발달된 미토콘드리아를 가지고 있었지만 분비과립은 전혀 관찰되지 않았다.