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정대균,유리나,Chung, Dae-Kyun,Yu, Ri-Na 한국식품과학회 1995 한국식품과학회지 Vol.27 No.6
김치의 발효 및 연부, 부패에 관여하는 미생물에 대한 대나무 추출액의 항균성을 측정하기 위하여 김치 초기 숙성균인 Leuconostoc mesenteroides, 김치의 산패에 관여하는 Lactobacillus plantarum, 김치 연부에 관여하는 것으로 알려진 Brettanomyces custersii, Klebsiella oxytoca, Pichia membranaefaciens 등을 사용하여 항균효과를 측정하였다. 먼저, 추출용매의 종류에 따른 대나무잎 추출물의 항균성을 조사하기 위하여, methanol, diethyl ether, acetone, ethyl acetate를 용매로 대나무잎을 추출하였다. 대나무잎 30g을 잘게 잘라서 각각의 용매에 3일간 침지한 후, 농축하여 얻은 추출물을 이용하여 김치발효 미생물에 대한 항균성을 조사하였다. 그 결과, ethyl acetate추출물의 항균활성이 가장 뛰어났으며, 특히, 김치의 연부에 관여하는 Brettanomyces custersii, Klebsiella oxytoca, Pichia membranaefaciens에 대하여 강한 항균력을 보였고, 이 항균력은 미생물의 생육 pH가 7일때보다 pH 5일 때 높은 것으로 나타났다. 또한, 대조구로 사용한 0.5%와 1% sorbic acid보다도 더 높은 항균력을 보여 주었으며, 일반 식품 오염 미생물인 E. coli, B. subtilis, S. aureus 등에 대해서도 높은 항균력을 보여주어 광범위한 항균 spectrum을 나타냈다. Antimicrobial activity of bamboo leaves extract on microorganisms related to kimchi fermentation was investigated. Bamboo leaves were extracted with several ogranic solvents such as methanol, acetone, ethyl ether, and ethyl acetate. The bamboo extract with ethyl acetate showed the strongest antimicrobial activity among them. Strong antimicrobial activities of the extract against microorganisms related to kimchi fermentation and food spoilage indicated that the extract had a wide range of antimicrobial spectrum. The antimicrobial activity was especially strong against Brettanomyces custersii, Klebsiella oxytoca, Pichia membranaefaciens which cause kimchi softening. In addition, the antimicrobial activity of bamboo leaves extract was higher than that of 0.5% and 1.0% sorbic acid, and moreover it was stronger in pH 5 compared to pH 7.
새로운 섬유소분해 균주 Trichoderma sp. C-4에서 분리한 Endoglucanase (F-I-III)에 대한 연구
설옥주,정대균,한인섭,정춘수,Sul Ok Ju,Chung Dae Kyun,Han In Seob,Jeong Choon Soo 한국미생물학회 2005 미생물학회지 Vol.41 No.1
One of the endoglucanases, F-I-III, was purified from the culture filtrate of T. sp. C-4 through procedures including chromatography on Sephacryl S-200, DEAE-Sepharose A-50, and Chromatofocusing on Mono-P (FPLC). The molecular weight of the enzyme was determined to be about 56,000 Da by SDS-PAGE, and pI of 4.9 by analytical isoelectric focusing. F-I-III showed the highest enzyme activity at $55^{\circ}C$, and the pH optimum of the enzyme was 5.0. There was no loss of activity when the enzyme was incubated at $50^{\circ}C$ for 24 hours. The specific activity of the enzyme F-I-III toward the CMC was 315.4 U/mg. The Km value for $PNPG_2$ of F-I-III was 2.69 mM. N-terminal sequence of F-I-III was analyzed to be QPGTSTPEVHPKKLTTYK. It showed $95\%$ of homology to that of EGI from T. reesei. The presence of some metal ions (1 mM) had only a little effect on CMCase activity. The treatment of the reducing agents resulted in the increase of endoglucanase activity. 국내에서 분리된 우수섬유소분해 균주인 Trichodema sp. C-4가 생성하는 endoglucanase 중하나를 $(NH_4)_2SO_4$ 침전, Sephacryl S-200 gel filtration, DEAE-Sepharose A-50 ion exchange, Mono-P chromatofocusing (EPLC)의 단계로 정제하고 이를 F-I-III라 명명하였다. 분리된 효소 F-I-III는 분자량 56,000Da, 둥전점 4.9로 측정된 단일 단백질이었다. F-I-III는 $55^{\circ}C$에서 가장 높은 활성을 보였으며, pH 5.0이 반응 최적 조건이었다. $50^{\circ}C$에서 24시간 동안 안정하였으며, pH 4-7의 범위에서 안정하였다. CMC에 대한 비활성은 315.4U/mg 이었으며, PNPG2에 대한 Km 값은 2.69 mM이었다. 이 효소는 같은 균주에서 분리한 다른 endoglucanase와 exoglucanase를 섞었을 때 결정형 섬유소인 Avicel분해에 대한 상승효과를 보였다. $Mg^{2+},\;CO^{2+},\;Fe^{2+},\;Ca^{2+},\;CS^+,\;Li^+$ 등의 이온은 1 mM의 농도에서 효소의 활성에 큰 영향을 미치지 않았고, 1 mM의 환원제 (cystein, EDIA, \beta-mercaptoethanol, dithiothreitol(DTT), L-ascorbic acid)들은 효소의 활성을 증가시켰다. E-I-III의 N-말단 서열을 분석하여 QPGTSTPEVHPKKLTTYK의 서열을 얻었다. 이는 Trichodema reesei의 endoglucanase인 EGI과 $95\%$의 유사도를나타내었다. 분리된 효소 F-I-III는 높은 비활성을 가지고 있어서 활용가치가 높을 것으로 사료되었다.
식용식물자원으로부터 활성물질의 탐색-XI -GC를 이용한 상추(Lactuca sativa L.)의 품종별 Phytol 함량 분석-
송명종,이진희,방면호,김지영,정대균,배동근,김인호,백남인,Song, Myoung-Chong,Lee, Jin-Hee,Bang, Myun-Ho,Kim, Ji-Young,Chung, Dae-Kyun,Pai, Tong-Kun,Kim, In-Ho,Baek, Nam-In 한국응용생명화학회 2004 Applied Biological Chemistry (Appl Biol Chem) Vol.47 No.4
An easy, sensitive and rapid method for the analysis of phytol, a strong ACAT (Acyl-CoA: Cholesterol Acyltransferase) inhibitory diterpenoid, was established. The pre-treatment of sample for GC analysis of phytol includes aq. MeOH extraction, partition of the extracts between EtOAc and water, and filtration of organic phase through Supelclean LC-Si SPE tube. The GC analysis of phytol for a variety of Lactuca sativa was carried out on DB-5 capillary column with flame ionization detector (FID). The consistency in phytol contents according to each variety was not shown. Especially, Jeoktoma, as RS-2 type, showed the highest phytol content.
한태운,정도원,조산호,이종훈,정대균,이형주,Han Tae Un,Jeong Do-Won,Cho San Ho,Lee Jong-Hoon,Chung Dae Kyun,Lee Hyong Joo The Korean Society for Microbiology and Biotechnol 2005 한국미생물·생명공학회지 Vol.33 No.4
선별마커로써 Lactococcus lactis ssp. lactis ATCC 7962 유래의 $\beta$-galactosidase 유전자를 포함하는 Lactococcus용 셔틀/발현 벡터 pWgall3T를 제조하여 Escherichia coli DH5$\alpha$와 고. Lactis MG1363내로 도입하였다. 이들 형질 전환체들은 X-gal을 포함하는 배지에서 파란색의 표현형을 보임으로써 쉽게 확인할 수 있었다. 또한, L. lactis MG1363 형질전환체로부터 $\beta$-galactosidase 활성을 측정한 결과 기존에 $\beta$-galactosidase를 활성을 지닌 L. lactis ATCC 7962에 비해 glucose를 포함하는 M17배지에서 4배정도 높은 활성을 보임으로써 선별마커로써의 효율성을 나타내었다. pWgal13T는 $\beta$-galactosidase 유전자 외에 L. lactis Wg2유래의 replicon과 외래 유전자의 발현을 위한 L. lactis ssp. cremoris LM0230의 promoter P13C, terminator를 포함하고 있다. 이 벡터의 이용가능성을 확인하기 위하여 외래 유전자 EGFP유전자를 P13C 아래에 삽입하여 E. coli와 L. iactis에서 발현을 확인하였다. 이 연구에서 제조된 Lactococcus용 발현 벡터 pWgal13T는 E. coli와 L. lactis에서 외래 유용 유전자를 생산을 위해 이용 할 수 있을 것이다. A new lactococcal shuttle/expression vector for lactococci, pWgal13T, was constructed using a $\beta$-galactosi-dase gene (lacZ) from Lacfococcus lactis ssp. lactis ATCC 7962 as a screening marker. The pWgal 13T was introduced into Escherichia coli DH5a and L. lactis MG1363, and was easily detected by the formation of blue colonies on a medium containing X-gal without any false transformants. Also, the quantitatively lacZ activity of pWgal13T was measured in L. lactis ssp. cremoris MG1363, and was found to be four times higher than that of L. lactis ssp. lactis ATCC7962 grown on a medium containing glucose, which shows that the lacZ gene of pWgal13T can be used for the efficient screening of L. lactis on general media. The pWgal13T was equipped with a lactococcal replicon of pWV01 from L. lactis Wg2, the new promoter P13C from L. lactis ssp. cremoris LM0230, multiple cloning sites, and a terminator for the expression of a relevant gene. The vee-tor pWgal13T was used for the expression of the EGFP gene in E. coli and L. lactis. These results show that the lactococcal expression/shuttle vector constructed in the present study can be used for the production of foreign proteins in E. coli and L. lactis.
식용 식물자원으로부터 활성물질의 탐색-V. -상추(Lactuca sativa L.)의 ACAT 억제 Diterpenoid, Phytol-
장태오,방면호,송명종,홍윤희,김지영,정대균,배동근,권병목,김영국,이현선,김인호,백남인,Jang, Tae-O,Bang, Myun-Ho,Song, Myoung-Chong,Hong, Yoon-Hee,Kim, Ji-Young,Chung, Dae-Kyun,Pai, Tong-Kun,Kwon, Byung-Mok,Kim, Young-Kuk,Lee, Hyun-Sun,Kim 한국응용생명화학회 2003 한국농화학회지 Vol.46 No.1
대두 가수분해물에서 분리한 UF - peptide가 in vivo에서 자발성 고혈압 흰쥐의 혈압 강하에 미치는 영향
유리나(Rina Yu),박수아(Soo-Ah Park),정대균(Dae-Kyun Chung),남희섭(Hee-Sop Nam),신재익(Zae-Ik Shin) 한국식품영양과학회 1996 한국식품영양과학회지 Vol.25 No.6
대두 가수분해물인 UF-peptide in vivo에서 혈압강하효과를 나타낼 수 있는지를 조사하기 위해, 실험동물로서 고혈압 모델인 자발성 고혈압 흰쥐(spontaneously hypertensive rat, SHR)를 대상으로 UF-peptide를 0, 3, 10%가 되도록 첨가한 식이 UF-peptide로 6주간 사육하여 SHR의 혈압강하에 미치는 영향, 혈중 지질 수준 및 혈관조직 중 angiotensin I converting enzyme(ACE) 활성 등을 조사하였다. 그 결과, UF-peptide는 자발성 고혈압쥐의 혈압을 강하시키는 효과가 있었으며, 이 효과는 혈중 총 콜레스테롤 및 중성지질 등의 지질 개선작용, 흉부동맥의 ACE 활성 저해작용을 통해 발현되는 것으로 추정되었다. Effect of soybean hydrolysate prepared by ultrafiltration(UF-peptide) was evaluated regarding its action on blood pressure, selected biochemical changes in spontaneously hypertensive rats(SHR). Male SHR were divided into three groups and fed diet with 0, 3, 10% UF-peptide for 6 weeks. Development of hypertension was determined by tail cuff method during the experimental period. After the experimental period, angiotension I converting enzyme (ACE) activity in serum and vascular tissue, and lipids level in serum were measured. Spontaneous elevation of blood pressure was suppressed by the UF-peptide supplementation after two weeks of feeding. After five weeks of feeding the development of hypertension was significantly inhibited in the UF -peptide administered groups compared to the control. In addition, the UF-peptide was effective for lowering serum lipids level such as triglyceride and total cholesterol, as well as ameliorating some pathological changes in SHR.