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          국내 미등록 유기인계 농약의 수입 농식품에 대한 다성분 잔류분석법

          전영환 ( Young Hwan Jeon ), 황정인 ( Jeong In Hwang ), 안지운 ( Ji Woon Ahn ), 김효영 ( Hyo Young Kim ), 도정아 ( Jung Ah Do ), 오재호 ( Jae Ho Oh ), 황인균 ( In Gyun Hwang ), 임무혁 ( Moo Hyeog Im ), 이중근 ( Joong Keun Lee ), 이영득 ( Yo) 한국환경농학회 2012 한국환경농학회지 Vol.31 No.3

          외국으로부터 수입되는 농식품에 대하여 국내에 미등록 된 유기인계 농약 aspon, chlorthion, chlorthiophos, crotoxyphos, demeton-O, demeton-S, demeton-S-methyl, dioxathion, heptenophos, iodofenphos, leptophos, methyl-trithion, propetamphos 및 sulfotep 등 14종에 대한 안전성 평가를 위하여 다성분 잔류분석법을 확립하고자 하였다. 잔류분석법은 식품의약품안전청에서 고시한 다종농약다성분 동시분석법-제2법에 잘 적용되었다. 수입 농산물의 대표 시료로 선정된 현미와 오렌지에 대한 유기인계 농약 14종 대한 잔류분석법의 밸리데이션을 실시한 결과 특이성, 직선성, 정확성, 정밀성 및 정량한계 수준을 만족시키는 것으로 나타났다. 단지 crotoxyphos의 경우는 기기상의 정량한계가 낮아서 저농도에서의 회수율은 좋지 않은 결과를 나타내었다. 따라서 본 연구에서 확립된 다성분 잔류분석법은 수입 농산물 중 crotoxyphos를 제외한 aspon외 12종의 유기인계 농약에 대해 적용 가능한 것으로 나타났다. BACKGROUND: For safety evaluation of imported agri-food in Korea, the multiresidue analysis method was establised for unregistered organophosphorus pesticides, aspon, chlorthion, chlorthiophos, crotoxyphos, demeton-O, demeton-S, demeton-S-methyl, dioxathion, heptenophos, iodofenphos, leptophos, methyl-trithion, propetamphos and sulfotep. METHODS AND RESULTS: The used method for multiresidue analysis in brown rice and orange used as representative samples of imported agri-food was the official method of Korean Food and Drug Administration. The results of validation test of 13 organophosphorus pesticides except crotoxyphos for multiresidue analysis method are compared to the criteria such as specificity, linearity, accuracy, precision and limit of quantification. CONCLUSION: The used method for multiresidue analysis of unregistered 13 organophosphorus pesticides except crotoxyphos in Korea can surely be used as an official method for routine analysis of imported agri-food.

        • KCI등재

          다양한 식품에서 Campylobacter jejuni 검출을 위한 real-time PCR과 배지배양법의 비교검증

          천정환(Jung-Whan Chon), 현지연(Ji-Yeon Hyeon), 황인균(In-Gyun Hwang), 곽효선(Hyo-Sun Kwak), 한정아(Jeong-A Han), 김무상(Moo-Sang Kim), 김종현(Jong-Hyun Kim), 송광영(Kwang-Young Song), 서건호(Kun-Ho Seo) 韓國食品科學會 2011 한국식품과학회지 Vol.43 No.1

          본 연구에서는 두 종류의 선택배지를 활용한 배지배양법과 realtime PCR의 C. jejuni 검출능력을 비교하였다. 소시지, 쇠고기 분쇄육, 무순에 C. jejuni를 접종하고 Hunt broth로 증균배양 하였으며, mCCD agar와 Preston agar에 배양액을 획선도말하여 미호기적으로 배양하였다. 동시에 증균배양액에서 1 ㎖을 채취하여 realtime PCR을 실시하였다. 실험결과, real-time PCR은 쇠고기 분쇄육과 소세지에서 두 가지 선택배지와 비교하여 동일한 검출력을 보였으나 무순에서는 훨씬 더 많은 양성을 검출하였다(p<0.05). 두 배지간의 비교에서는 Preston agar와 mCCD agar는 통계학적 유의차가 없는 민감도를 보였다(p>0.05). 결론적으로 real-time PCR 은 표준검출법인 배지배양법과 비교하여 동등하거나 우수한 민감도를 지닌 신속검출기법인 것으로 사료되며, 배지배양법에 앞서 선별검사로 사용할 경우 시간, 비용, 노동력 절감에 있어서 매우 유효한 방법이 될 것으로 판단된다. In this study, performances of culture methods using two selective media and real-time PCR were evaluated for detection of Campylobacter jejuni (C. jejuni) in various food samples. Sausage, ground beef, and radish sprouts inoculated with C. jejuni were enriched in Hunt broth and then streaked onto modified cefoperazone charcoal deoxycholate agar and Preston agar, followed by incubation under microaerobic conditions. The enriched Hunt broth (1 ㎖) was used in real-time PCR assay. No statistical differences were observed in sensitivity among the two selective media and real-time PCR for sausage and ground beef. However, the number of positives by real-time PCR in radish sprouts was much higher than the two selective media (p<0.05). It appears that real-time PCR could be used as an effective screening tool to detect C. jejuni, particularly in foods with a high number of background microflora such as fresh vegetables.

        • KCI등재

          해산식품과 채소에서 Vibrio parahaemolyticus 검출을 위한 배지배양법과 real-time PCR의 비교검증

          천정환(Jung-Whan Chon), 현지연(Ji-Yeon Hyeon), 황인균(In-Gyun Hwang), 곽효선(Hyo-Sun Kwak), 한정아(Jeong-A Han), 정윤희(Yun-Hee Chung), 송광영(Kwang-Young Song), 서건호(Kun-Ho Seo) 韓國食品科學會 2010 한국식품과학회지 Vol.42 No.3

          V. parahaemolyticus는 국내에서 여름과 가을철에 걸쳐 발생되며 생선이나 패류 등의 해산식품을 날것으로 섭취하거나 불완전하게 익혀 먹을 경우 식중독을 일으키는 병원균이다. 본 연구의 목적은 표준 검출기법인 배지배양법을 이용한 V. parahaemolyticus의 검출과 real-time PCR을 이용한 V. parahaemolyticus의 검출에 있어서 그 유효성과 효율성을 검증하는 것이다. V. parahaemolyticus의 발생기록과 발생가능성이 있는 여러 해산식품과 무순에 적절한 균량을 접종하고 APW로 증균배양하였다. 증균배양이 끝난 후 TCBS선택배지에 배양액을 획선도말하고, 동시에 증균배양액에서 1 ㎖을 채취하여 real-time PCR을 실시하였다. TCBS에서 초록색이 나온 집락을 1-3개 선별하여 TSI 배지에 접종하여 screening test를 거친 후 API 20NE strip을 사용하여 확인동정하였다. 또한 정상세균총이 목적균의 성장과 검출에 어느 정도의 영향을 미치는지 평가하기 위하여 25 g의 식품 내 정상세균총의 수준을 함께 측정하였다. 실험결과, 자체 제작한 real-time PCR서열은 V. parahaemolyticus를 특이적으로 검출할 수 있었고 검출한계는 PBS에서 10³ CFU/㎖ 였다. 또한, 식품 내 정상세균총이 높을 경우 증균배양 시 목적균의 성장에 영향을 미칠 수 있다는 것을 확인하였다. Real-time PCR은 180개의 전체 샘플 중 76개의 양성 결과를 보여 66개의 양성 결과를 낸 배지배양법에 비해 더 많은 양성 검출율을 보였으나 통계학적인 유의차는 발견되지 않았다. Real-time PCR은 표준검출법인 배지배양법과 비교해 볼때 동등하거나 우수한 검출력을 지닌 것으로 보이며 이러한 realtime PCR법은 24시간 이내에 확정동정까지 가능하여 시간과 노동력의 소모가 많은 배지배양법에 앞서 선별검사로 사용할 경우 시간, 비용, 노동력 절감에 매우 유효할 것으로 판단된다. Vibrio parahaemolyticus (V. parahaemolyticus), which is commonly found in raw seafood, causes gastroenteritis in humans. Rapid and effective methods have been developed as culture methods require up to 5-7 days. In this study, real-time PCR was compared with the standard culture method for detecting V. parahaemolyticus in seafood and radish sprout samples. Five hundred grams of the samples were artificially contaminated with V. parahaemolyticus then divided into 20 samples. The samples were incubated in alkaline peptone water and then streaked onto thiosulfate-citrate-bile saltssucrose agar. Biochemical tests for suspicious colonies were performed using the API 20NE strip. In parallel, real-time PCR was performed targeting the toxR gene using the enrichment broth. The real-time PCR was sensitive in discriminating V. parahaemolyticus from other foodborne pathogens. The detection limit of the real-time PCR was 10³ CFU/㎖ in phosphate-buffered saline. Although the real-time PCR detected more positive samples (76 out of 180, 42%) than the culture method (66 out of 180, 37%), there was no significant statistical difference (p>0.05) between the two methods. In conclusion, real-time PCR assays could be an alternative to the standard culture method for detecting V. parahaemolyticus in seafood and radish sprouts, which has many advantages in terms of detection time, labor, and sensitivity.

        • KCI등재

          시판 횟감어류에서의 Vibrio parahaemolyticus 분포 및 항생제 감수성에 관한 연구

          성창현 ( Chang Hyeon Sung ), 천정환 ( Jeong Hwan Cheon ), 현지연 ( Ji Yeon Hyeon ), 황인균 ( In Gyun Hwang ), 곽효선 ( Hyo Sun Kwak ), 윤상현 ( Sang Hyeon Yoon ), 이정수 ( Jeong Soo Lee ), 정윤희 ( Yun Hee Chung ), 송광영 ( Kwang Young) 한국수의공중보건학회 2010 예방수의학회지 Vol.34 No.3

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          Vibrio parahaemolyticus (V. parahaemolyticus) has been recognized as a significant food-borne pathogen around the world. In this study, we investigated the prevalence and antimicrobial resistance of V. parahaemolyticus isolated from raw fishes. A total of 64 samples of raw fishes purchased from a traditional seafood market in Seoul, Korea. were examined for the presence of V. parahaemolyticus using intestines, gills, and fins. Twenty five grams of all samples were enriched in 225ml of alkaline peptone water at 37℃ for 24h and then streaked onto thiosulfate citrate bile sucrose agar. Suspected colonies were inoculated into triple sugar iron agar for biochemical screening test and were finally confirmed with API 20NE strip. Antimicrobial resistance tests were performed with disc diffusion method in accordance with National Committee for Clinical Laboratory Standard. Thirty three V. parahaemolyticus strains were isolated from raw fishes among 33 out of 64 (51.6%). Among 33 isolates, 16 isolates (48.5%) were resistant to ampicillin, 7 isolates (21.2%) were resistant to amikacin, and all isolates were not resist to other antibiotics such as amoxicillin & clavulanic acid, sulfamethoxazole & trimethopenem, ciprofloxacin, cefotaxime and cefepime. Although the prevalence of V. parahaemolyticus was high in raw fishes compared to other studies, antimicrobial resistance rate of the isolates was relatively low. These results could be useful information for risk assessment of V. parahaemolyticus in raw fishes.

        • KCI등재

          소시지와 야채 샐러드에서 Yersinia enterocolitica 검출을 위한 배지법과 real-time PCR법의 비교

          김윤경(Yun-Gyeong Kim), 천정환(Jung-Whan Chon), 이재훈(Jae-Hoon Lee), 곽효선(Hyo-Sun Kwak), 황인균(In-Gyun Hwang), 서건호(Kun-Ho Seo) 한국식품과학회 2013 한국식품과학회지 Vol.45 No.1

          본 연구에서는 소시지와 야채 샐러드에서 Y. enterocolitica의 검출을 위해 배지법과 real-time PCR법을 비교하였다. 소시지와 야채 샐러드에 Y. enterocolitica를 접종하고 PSBB에서 증균배양 하였으며, CIN agar에서 선택배양하였다. 동시에 증균배양액에서 1mL을 채취하여 real-time PCR을 실시하였다. 실험결과, real-time PCR은 소시지에서 배지검출법과 비교하여 동일한 검출력을 보였으나 야채 샐러드에서는 훨씬 더 많은 양성을 검출하였다(p<0.05). 결론적으로 real-time PCR은 식품 시료와 관계 없이 표준검출법인 배지검출법과 비교하여 동등하거나 우수한 민감도를 지닌 신속검출기법인 것으로 사료되며, 배지검출법에 앞서 선별검사로 사용할 경우 시간, 비용, 노동력 절감에 있어서 매우 유효한 방법이 될 것으로 판단된다. The purpose of this study was to compare a conventional culture method and real-time PCR for the detection of Yersinia enterocolitica (Y. enterocolitica) in sausage and in vegetable salad. Food samples inoculated with Y. enterocolitica were enriched in peptone-sorbitol bile-broth, and swabs were then streaked onto cefsulodin-irgasannovobiocin agar. Biochemical tests for suspected colonies were performed with an API 20E strip. In parallel, real-time PCR was performed, targeting the 16S rRNA gene using 1 mL of enrichment broth. In sausage, the number of positive samples detected by culture method (49 out of 60) was similar (p>0.05) with that of real-time PCR (50 out of 60). However, the number of positive samples of real-time PCR (26 out of 60) was significantly higher (p<0.05) than that of the conventional culture method (6 out of 60) in vegetable salad. Real-time PCR could be an effective screening tool for detecting Y. enterocolitica, particularly in food samples with high levels of background flora, such as a vegetable salad.

        • KCI등재

          선식에서 분리한 Enterobacter sakazakii의 복합동정 및 RAPD를 이용한 genotyping

          최재원(Jae-Won Choi), 김윤지(Yun-Ji Kim), 이종경(Jong-Kyung Lee), 김영호(Young-Ho Kim), 권기성(Ki-Sung Kwon), 황인균(In-Gyun Hwang), 오세욱(Se-Wook Oh) 韓國食品科學會 2008 한국식품과학회지 Vol.40 No.1

          시판되고 있는 선식 원료를 수거하여 최근 새로운 식중독균으로 보고되고 있는 Enterobacter sakazakii 분리 실험을 실시하였다. 그 결과 총 23종의 선식 원료 중 8개의 선식 원료에서 E. sakazakii로 추정되는 콜로니를 분리할 수 있었으며 API 20E kit를 이용하여 1차적으로 동정한 결과 다시마 분말 멸치 분말 현미 분말 청국장 분말 및 멥쌀 분말에서 E. sakazakii를 분리할 수 있었다. 이후 3 종의 primer를 이용한 PCR을 실시하여 2차적으로 동정하였다. 또한 분리된 균주에 대한 RAPD-PCR을 실시하여 최종적으로 8종의 분리균으로 molecular typing을 할 수 있었다. Enterobacter sakazakii is implicated in severe forms of neonatal infections such as meningitis and sepsis. This organism has been isolated from a wide range of foods including cheese vegetables grains herbs and spices but its primary environment is still unknown. Generally dried infant milk formula has been epidemiologically identified as the source of E. sakazakii. Sunsik (a powdered mixture of roasted grains and other foodstuffs) is widely consumed in Korea as a side dish or energy supplement. Sunsik is consumed without heat treatment; thus lacking an additional opportunity to inactivate foodborne pathogens. Therefore its microbiological safety should be guaranteed. In this study the prevalence of E. sakazakii was monitored in 23 different sunsik component flours using FDA recommended methods; but E. sakazakii medium (Neogen) and Chromogenic E. sakazakii medium (Oxoid) were used as the selective media. In total presumptive E. sakazakii strains were isolated from 8 different sunsik powders. Subsequently an API 20E test was conducted and 15 strains from 5 different sunsik flours (sea tangle brown rice non-glutinous rice cheonggukjang dried anchovy) were confirmed as E. sakazakii. Fifteen strains were again confirmed by PCR amplification using three different primer sets (tDNA sequence ITS sequence 16S rRNA sequence) and compared to ATCC strains (12868 29004 29544 51329). They were once again confirmed by their enzyme production profiles using an API ZYM kit. Finally RAPD (random amplified polymorphic DNA)-genotyping was carried out as a monitoring tool to determine the contamination route of E. sakazakii during processing.

        • KCI등재

          한국형 총식이섭취조사(Total Diet Study, TDS) 모델 확립을 위한 농약섭취수준에 대한 접근

          양앤젤(An-Gel Yang), 심기훈(Ki-Hoon Shim), 최옥자(Ok-Ja Choi), 박종혁(Jong-Hyouk Park), 도정아(Jung-Ah Do), 오재호(Jae-Ho Oh), 황인균(In Gyun Hwang), 심재한(Jae-Han Shim) 한국농약과학회 2012 농약과학회지 Vol.16 No.2

          본 연구에서는 분석대상 농약의 선정, 분석대상 식품의 선정, 분석대상 식품의 수집, 추출방법의 최적화를 통해 잔류농약 섭취 수준 평가를 위한 한국형 총식이섭취조사(Total Diet Study, TDS) 모델을 확립하였다. 또한 총식이섭취조사 모델 확립을 위해 필요한 각각의 항목에, 기준을 설정하여 확립된 모델에 의한 잔류농약 수준을 모니터링 하였다. 모니터링은 1단계에서는 총 102종의 대표식품, 2단계에서는 총 70종의 대표식품, 3단계에서는 12종의 대표식단과 109종의 대표식품을 대상으로 98종 농약에 대해 GC-μECD, GC-MSD, 그리고 LC-MS/MS를 이용하여 분석을 실시하였다. 그 결과 검출된 농약들은 모두 잔류허용기준(Maximum Residue Limit, MRL) 이하의 잔류량을 보였으나 검출된 잔류농약이 해당 작물에 대해 잔류허용기준이 설정되어 있지 않은 경우도 있었다. 한국형 총식이섭취조사 모델을 확립함은 소비자들에게 안전한 먹거리 제공, 농산물의 안전성 확보 및 농산물 생산자들의 농약 사용에 대한 지속적인 정보 제공의 역할을 할 수 있는 자료를 제공하게 될 것이다. This study was carried out to establish Korean total diet study (TDS) model for estimating pesticide residue in food samples. In addition, pesticide residues of food samples were monitored by setting the standards of established Korean total diet study model. For monitoring, first step were selection of total 102 species food samples, second step were selection of total 70 species food samples, and third step were selection of total 12 representative diet and 109 species food samples. Ninety-eight pesticides were analyzed using GC-μECD, GC-MS, and LC-MS/MS after QuEChERS sample preparation method. The residue levels in detected food samples were below the maximum residue limit (MRL). Establishment of the Korean total diet study model means providing safe food for consumers, secure the safety of food samples and provide ongoing information to agricultural producers about use of pesticides.

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