계지복령환(桂枝茯苓丸)의 배오(配伍)분석과 그 생리활성

김도회,정양삼,윤미정,윤유식,신순식,Kim, Do Hoy,Jung, Yang Sam,Yoon, Michung,Yoon, Yoosik,Shin, Soon Shik 대한한의학방제학회 2016 大韓韓醫學方劑學會誌 Vol.24 No.4

Objectives : We analysed Gyejibongnyeong-hwan's compatibility principle and investigated biological activities by categorizing with molecular level, cellular level, animal level and human level based on Korean study for this formula. Methods : Gyejibongnyeong-hwan's compatibiltity principle was examined by the system of chief, deputy, assistant, and envoy. We looked into studies that presented in Korea from 1956 to 2016 about Gyejibongnyeong-hwan through Korea Institute of Oriental Medicine, Korean medicine information system (OASIS). Then classify into molecular level, cellular level, animal level and human level to analyse. Results : According to the system of chief, deputy, assistant, and envoy, chief herb is Cinnamomi Ramulus, deputy herb is Persicae Semen, assistant herb is Moutan Cortex, Paeoniae Radix, Poria, and envoy herb is Mel. Biological activities can be detected in transcription factors, enzymes, and inflammatory mediators for molecular level. For cellular level, it can be determined in human uterine endometrial cancer cell, human hepatocarcinoma cell, and human platelets. In mouse and rats for animal level, in overian cystoma, menorrhalgia, quality of life improvement in postmenopausal women, and blood stasis with motor vehicle accident for human level, biological activities was caught. Conclusions : From above results, Gyejibongnyeong-hwan is composed in line with the system of chief, deputy, assistan, and envoy. Biological activities are effective to improvement of menorrhalgia, anti-cancer, anti-oxidative, anti-inflammation, improvement of atherosclerosis, analgesic, anti-convulsion, wound healing, and improvement of liver function.

Ob/Ob 비만마우스 모델에서 강지환(降脂丸)의 체중감량 효과

백송영,이혜림,박주혜,윤미정,윤유식,양희정,최영현,신순식,Baek, Song Young,Lee, Hye Rim,Park, Ju Hye,Yoon, Michung,Yoon, Yoosik,Yang, Heejung,Choi, Yung Hyun,Shin, Soon Shik 대한한의학방제학회 2017 大韓韓醫學方劑學會誌 Vol.25 No.2

Objectives : This study was designed to investigate anti-obesity effects of DF in a ob/ob mouse model. Methods : Fifteen-week-old ob/ob mice were divided into four groups: a normal lean group given a standard diet, an ob/ob control group given a standard diet, and DF(1) and DF(2) groups given a standard diet with DF(1) (300 mg/kg), and DF(2) (600 mg/kg), respectively. After 10 weeks of treatment, body weight gain, feeding efficiency ratio, blood lipid markers, fat weight and histology were examined. Results : Body weight gain and fat mass were significantly decreased in DF(1) and DF(2) groups compared with control. The extent of decreases was eminent in DF(2) group. Feeding efficiency ratio were significantly decreased in DF(2) group compared with control. Consistent with their effects on body weight gain and fat mass, circulating concentrations of LDL, total cholesterol, free fatty acid, and insulin were decreased in DF(2) group compared with control. The size of adipocytes were significantly decreased by DF(2) compared with control. Consistent with their effects on body weight gain, hepatic lipid accumulation and liver weights were reduced in DF compared with control. Conclusions : In conclusion, these results suggest that DF not only decrease feeding efficiency ratio, and blood anti-obesity biomarkers, but also reduce fat mass, contributing to the improvement of obesity. DF also inhibits hepatic lipid accumulation.

경사 증착 법으로 제작 된 은 나노 구조 표면 증강 라만 기판을 이용한 혈청 내 urea 검출

한윤아(Yun-ah Han),윤유식(Yoosik Yoon),김석민(Seok-min Kim) 한국생산제조학회 2012 한국생산제조시스템학회 학술발표대회 논문집 Vol.2012 No.4

辨證을 위한 설문지 및 프로그램에 대한 특허정보 및 논문을 통한 연구 동향 분석

문진석(Moon Jinseok),차민호(Cha Minho),윤유식(Yoon Yoosik),최선미(Choi Sunmi) 한국한의학연구원 2006 한국한의학연구원논문집 Vol.12 No.3

The Syndrome Differentiation(辨證) means to make diagnosises and to classify symptoms based oriental medicine theory. Questionnaires and clinical decision support system would assist the doctor checks up symptoms of a patient. We analyze about domestic and foreign patents and papers of these diagnosis tools and catch the trend. In patents, the system examines by telemedicine and offers medical information and prescriptions to patient. Papers was itemized fields ; theory, methods of analysis, clinical application, questionnaire, clinical decision support system The results of this research can be applied to develop the high-quality tool to support syndrome differentiation.

고지방식이를 섭취한 mouse에서의 유전자군의 발현양상 변화

차민호(Cha Minho),김경선(Kim Kyungseon),심웅섭(Sim Woongseop),윤유식(Yoon Yoosik) 한국한의학연구원 2002 한국한의학연구원논문집 Vol.8 No.2

화학요법제 5-flurouracil의 조혈 및 면역독성 억제를 위한 조성물 개발 연구

양동식(Yang Dongsik),홍민영(Hong Minyoung),성현제(Sung Hyunjea),윤유식(Yoon Yoosik) 한국한의학연구원 2002 한국한의학연구원논문집 Vol.8 No.2

생약조성물 투여가 지구력 향상과 항산화 물질에 미치는 영향

홍성길(Seong-Gil Hong),양동식(Dong-Sik Yang),강봉주(Bong-Joo Kang),이홍석(Hong-Seok Lee),윤유식(Yoosik Yoon) 한국식품영양과학회 2003 한국식품영양과학회지 Vol.32 No.7

근육은 지속적인 수축운동 과정상에서 근육 세포내의 에너지원인 ATP가 고갈되고, 근육피로를 나타내는 물질이 축적되어 근력이 약해지고 피로도가 증가하게 된다. 지구력을 향상시키기 위하여 ATP의 합성 증가 및 근육내 피로 물질의 축적 방지 등이 요구되어지는데, 본 연구에서는 전통 생약재로부터 추출 증류한 조성물 JR-22를 이용하여 지구력 향상 효과를 확인하고자 하였다. JR-22를 4주간 실험 동물에게 투여한 이후 체중의 4-8%에 해당하는 무게를 부가하고 강제수영 시간을 통하여 지구력 향상효과를 확인한 결과 JR-22의 투여로 인하여 지구력이 향상되는 효과를 확인하였다. JR-22에 의한 지구력 향상 효과의 기작을 관찰하기 위하여 체중의 4%에 해당하는 무게를 부가한 뒤 90분간 강제 수영시킨 실험 동물로부터 근육 피로 물질들과 근육내 ATP 함량을 측정한 결과 JR-22의 투여가 근육내 ATP 함량을 증가시키는 것으로 나타나 JR-22의 투여가 근육내 ATP를 증가시킴으로서 지구력을 향상시키는 효과를 나타내는 것으로 추측되었다. 또한 근육세포의 강화와 연관성이 있는 IGF-1과의 관련성을 알아보기 위하여 JR-22를 투여한 이후 혈액중의 IGF-1의 농도를 측정하였을 때도 JR-22에 의해서 유의성이 있는 IGF-1의 증가가 관찰되어 JR-22의 투여가 근력강화에 도움을 줄 수 있다고 추측되었다. 이러한 운동 과정상에서 발생하는 체내의 산화적 손상은 JR-22의 투여를 통해 완화되고 있음을 확인하여 JR-22의 투여가 체내의 항산화력 증진에 도움을 줄 수 있는 것으로 추측되었다. 한편 JR-22를 4주 이상 투여하였을 경우에도 간독성 지표인 GOT, GPT를 비롯한 각종 혈액 생화학적 수치들의 변화가 나타나지 않았으며, 기타 이상 소견이 발견되지 않아 JR-22의 식용으로서의 안전성에도 문제가 없는 것으로 판단되었다. 이상의 결과에서 JR-22는 IGF-1의 증가 및 근육내 ATP 농도를 증가시킴으로서 지구력을 강화시키는 효과가 있을 뿐 아니라 운동시 발생하는 부작용중 하나인 산화적 손상을 억제시키는 항산화 효과 또한 겸비하고 있는 것으로 판단된다. The effects of dietary supplementation of JR-22, formula containing distilled extracts of traditional herbs on maximal exercise performance and endurance were evaluated in mouse and rat model. In acute forced swimming test with 4%~8% of the body weight attached to the tail, it was shown that dietary JR-22 supplementation increased endurance in exercise performance. There was no change of blood lactic acid, ammonia, inorganic phosphorous ion and creatine kinase activity, however ATP concentration in muscle was increased by JR-22 supplementation. Also, insulin-like growth factor-1 (IGF-1) concentration in blood was significantly increased by JR-22 supplementation. In addition, the oxidative damage induced by exercise was reduced by JR-22 supplementation. In these results, we suggested that JR-22 supplementation enhanced maximal endurance exercise performance by the mechanism of increasing ATP and IGF-1 concentration and reducing oxidative damage.

3T3-L1 세포의 지방세포형성과정에서 Baicalin에 의한 유전자 발현 프로파일 분석

이해용(Haeyong Lee),강련화(Ryunhwa Kang),정상인(Sang-In Chung),조수현(Soo Hyun Cho),윤유식(Yoosik Yoon) 한국식품영양과학회 2010 한국식품영양과학회지 Vol.39 No.1

Flavonoid 계열의 한 종류인 baicalin은 항염증, 항암, 항바이러스, 항세균 등의 효능을 가진다. 본 연구진은 선행연구를 통한 이전의 보고에서 baiclain이 adipogenesis pathway(지방세포 형성 경로)의 anti-adipogenic(지방세포 형성억제)과 pro-adipogenic(지방세포 형성 유도) factor들을 조절함으로써 비만 및 adipogenesis를 억제함을 밝혔다. 본 연구에서는, microarray 기술을 이용하여 3T3-L1 세포에서 baiclain이 유도하는 지방세포 형성 억제 효과에 대한 분자적 기작을 보다 상세하게 연구하고자 하였다. 지방세포의 분화 시간(0일, 2일, 4일 및 7일)과 분화 시 baicalin의 처리유무에 따라 유전자 발현 양상을 분석하기 위해 해당 시료들을 microarray에 적용하였다. Microarray 결과로부터 2배 이상의 변화가 있는 3972개의 유전자를 확보하였다. 그 유전자들의 발현 양상을 좀 더 자세히 살펴보기 위해 hierarchical clustering 분석을 진행하였고 그 결과로 20개의 cluster를 분류할 수 있었다. 그들 중 4개의 cluster는 분화의 전반적인 기간에서 baicalin의 첨가에 의해 뚜렷하게 상승(cluster 8과 cluster 10)하거나 반대로 뚜렷하게 감소 (cluster 12와 cluster 14)하는 양상을 보였다. Cluster 8과 cluster 10에는 CHOP(CCAAT/enhancer-binding protein homologous protein), INSIG1(insulin induced gene 1), WISP2(WNT1 inducible signaling pathway protein 2), ADM(adrenomedullin), CCND2(cyclin D2), GRN(granulin) 및 TGFB3(transforming growth factor, beta 3)과 같은 세포 증식과 지방세포 형성 억제를 상승시키는 유전자들이 다수 포함되었다. 반대로 cluster 12와 cluster 14에는 세포 증식 억제, 세포 주기 억제 및 세포 성장 억제와 연관되거나 지방세포를 유도하는 유전자인 LTA(lympotoxin A), ACADSB(acyl-Coenzyme A dehydrogenase, short/branched chain), HMGCS2(3-hydroxy-3-methylglutaryl-Coenzyme A synthase 2), IGFBP7(insulin-like growth factor binding protein 7), MERTK(c-merproto-oncogene tyrosine kinase), RASSF2(ras association(RalGDS/AF-6) domain family 2), RHOU(ras homolog gene family, member U) 및 SESN1(sestrin1) 등이 포함되었다. 결론적으로 baicalin은 세포 증식 및 지방세포 형성과 연관된 유전자들을 조절함으로써 지방세포의 분화를 억제하는 것으로 사료된다. 이러한 결과는 baicalin이 유도하는 지방세포 형성 억제 및 비만 억제 효과의 분자적 기작에 대한 중요한 정보를 제시한다. Baicalin, a flavonoid, was shown to have diverse effects such as anti-inflammatory, anti-cancer, anti-viral, anti-bacterial and others. Recently, we found that the baicalin inhibits adipogenesis through the modulations of anti-adipogenic and pro-adipogenic factors of the adipogenesis pathway. In the present study, we further characterized the molecular mechanism of the anti-adipogenic effect of baicalin using microarray technology. Microarray analyses were conducted to analyze the gene expression profiles during the differentiation time course (0 day, 2 day, 4 day and 7 day) in 3T3-L1 cells with or without baicalin treatment. We identified a total of 3972 genes of which expressions were changed more than 2 fold. These 3972 genes were further analyzed using hierarchical clustering analysis, resulting in 20 clusters. Four clusters among 20 showed clearly up-regulated expression patterns (cluster 8 and cluster 10) or clearly down-regulated expression patterns (cluster 12 and cluster 14) by baicalin treatment for over-all differentiation period. The cluster 8 and cluster 10 included many genes which enhance cell proliferation or inhibit adipogenesis. On the other hand, the cluster 12 and cluster 14 included many genes which are related with proliferation inhibition, cell cycle arrest, cell growth suppression or adipogenesis induction. In conclusion, these data provide detailed information on the molecular mechanism of baicalin-induced inhibition of adipogenesis.

3T3-L1 세포에서 지방세포형성 유도조절자 및 억제조절자의 발현에 대한 platycodin D의 효과

이해용(Haeyong Lee),강련화(Ryunhwa Kang),조수현(Soo Hyun Cho),김성수(Sung Su Kim),김영식(Yeong Shik Kim),윤유식(Yoosik Yoon) 한국생명과학회 2009 생명과학회지 Vol.19 No.12

Platycodi radix의 주요 성분으로 항염증, 항고지혈 및 항종양 등 다양한 약리적 기능을 가지는 platycodin D는 최근 비만 및 지방세포형성(adipogenesis)을 억제하는 효과를 가진다고 보고되고 있다. 본 연구에서는 adipogenesis의 상위단계에 위치한 다양한 pro-adipogenic regulators와 anti-adipogenic regulators의 발현이 platycodin D에 의해 어떻게 변화되는지 분석하였다. Real-time PCR을 이용한 mRNA 발현의 정량적 분석에서 adipogenesis의 marker라 불리는 ADIPOQ와 GLUT4의 mRNA 발현은 platycodin D의 처리에 의해 유의적으로 감소되었다. 또한 terminal marker의 발현을 조절하는 PPARγ와 C/EPBα의 mRNA 발현 역시 platycodin D에 의해 유의하게 억제되었다. Platycodin D의 지방세포 억제 효과에 대한 상세한 분자적 메커니즘을 규명하기 위해, PPARγ와 C/EPBα의 상위 조절자들의 mRNA 발현 변화를 분석하였다. Pro-adipogenic regulators에 대한 platycodin D의 효과를 분석한 결과, C/EBPβ와 C/EPBδ의 mRNA 발현은 platycodin D에 의해 변화가 없었던 반면, KROX20과 KLF15의 mRNA 발현은 각각 초기 분화(2일)와 후기 분화(4일)에서 platycodin D에 의해 유의한 감소를 보였다. 또한, 대표적인 anti-adipogenic regulators인 CHOP의 mRNA 발현은 초기분화에서 platycodin D에 의해 유의하게 증가한 반면, 또 다른 anti-adipogenic regulators인 C/EBPγ의 mRNA 발현은 platycodin D에 의해 영향을 받지 않았다. 따라서 adipogenesis 과정에서 platycodin D는 pro-adipogenic regulators인 KROX20, KLF15와 anti-adipogenic regulator인 CHOP의 mRNA 발현에 영향을 주어 PPARγ와 C/EPBα를 조절하는 것으로 보여진다. 결론적으로, platycodin D에 의한 adipogenesis 억제 효과는 KROX20, KLF15 등의pro-adipogenic regulator와 CHOP 등의 anti-adipogenic regulator의 상호작용을 통해 나타나는 결과라 사료된다. Platycodin D, a major component of Platycodi radix, is known to have various activities including anti-inflammatory, anti-hyperlipidemic, anti-tumor activities and others. Recently, it was reported that platycodin D inhibits fat accumulation and adipogenesis. The aim of this study was to investigate whether various adipogenic regulators are modulated by platycodin D treatment during the adipogenesis of 3T3-L1 cells. mRNA levels of terminal markers of adipogenesis such as ADIPOQ (adiponectin) and GLUT (glucose transporter) 4, which were quantified by real time PCR, were decreased by platycodin D treatment. mRNA expression of PPAR (peroxisome proliferator-activated receptor) γ and C/EBP (CCAAT/enhaner binding protein) α, which are central transcription factors of adipogenesis, were also decreased by platycodin D treatment. To elucidate the detailed molecular mechanism of platycodin D-induced inhibition of adipogenesis, we analyzed mRNA expression of upstream regulators of PPARγ and C/EPBα. mRNA levels of the pro-adipogenic regulators, KROX20 and KLF (Kruppel-like factor) 15 were markedly down-regulated by platycodin D treatment. On the other hand, mRNA expression of CHOP (C/EBP homologous protein), an anti-adipogenic regulator, was significantly up-regulated by platycodin D treatment. mRNA levels of other pro-adipogenic regulators, C/EBPβ and C/EPBδ, were not affected by platycodin D treatment, and another anti-adipogenic regulator, C/EBPγ was also not affected by platycodin D treatment. Taken together, these results suggest that platycodin D-induced inhibition of adipogenesis is mediated by gene interactions including the down-regulation of pro-adipogenic regulators, KROX20 and KLF15, and the up-regulation of an anti-adipogenic regulator, CHOP.

Shikonin에 의한 지방세포형성 억제과정에서의 유전자 발현 연구

이해용(Haeyong Lee),강련화(Ryunhwa Kang),정상인(Sang-In Chung),조수현(Soo Hyun Cho),오동진(Dong-Jin Oh),윤유식(Yoosik Yoon) 한국생명과학회 2009 생명과학회지 Vol.19 No.11

천연생약 자초의 한 성분인 shikonin은 항염증, 항암 및 항비만 등 다양한 분야에 효과를 보여왔다. 이번 연구에서는 shikonin이유도하는 adipogenesis억제 과정에 어떤 인자들이 작용하는지 살펴보았다. Shikonin의 효과에 대한 분자적 메커니즘을 규명하기 위해, real-time PCR을 이용하여 C/EBPs, PPARγ를 포함한 다양한 adipogenesis 인자들의 mRNA 발현량을 분석하였다. 그 결과, 초기 분화의 주요 조절자인 C/EBPβ와 C/EPBδ는 shikonin에 의해 거의 변화가 없었으나, 후기 분화의 주요 조절자인 PPARγ와 C/EPBα의 mRNA 발현은 유의하게 감소하였다. Shikonin에 의한 adipogenesis억제의 메커니즘을 좀 더 자세히 밝히기 위해 adipogenesis과정의 상위 단계에 위치한 조절자들의 mRNA 발현을 분석하였다. C/EBPβ의 상위 조절자인 C/EBPγ, CHOP은 shikonin에 의해 영향을 받지 않았으나, KROX20의 경우 유의하게 감소하였다. 이러한 결과는 Pro-adipogenic 인자인 KROX20의 감소가 C/EBPβ에 영향을 주기 보다는 C/EBPβ와 독립적으로 그 하위의 인자들에게 영향을 줄 수 있음을 제시한다. PPARγ의 상위 조절자로 알려져 있는 KLF 들 중에서 pro-adipogenic 인자인 KLF15의 mRNA 발현은 shikonin에 의해 급격히 감소하였으나 anti-adipogenic 인자인 KLF2는 shikonin에 의한 변화가 거의 없었다. 또 다른 pro-adipogenic 인자인 KLF5의 경우, 주로 작용하는 초기 분화에서는 shikonin에 의해 거의 변화가 없었지만, 후기 분화에서는 조금 증가하였다. 이러한 후기 분화에서의 KLF5의 변화는 KLF15에 비해 전체 분화에 크게 영향을 주지 못하는 것 같다. 결론적으로, shikonin은 pro-adipogenic 인자인, KROX20과 KLF15의 조절을 통해 PPARγ 및 C/EPBα의 mRNA 발현을 억제함으로써 지방 세포의 분화를 저해한다고 사료된다. Shikonin, a component of Lithospermum erythrorhizon Sieb. et Zucc, exerts various characteristics such as anti-inflammatory, anti-cancer and anti-obesity functions. To elucidate the molecular mechanism of shikonin-induced inhibition of adipogenesis, we analyzed the mRNA expression level of various adipogenesis-related factors including C/EBPs (CCAAT/enhancerbinding proteins) and PPARγ (peroxisome proliferator-activated receptor γ). The data showed that mRNA expressions of C/EBPβ and C/EPBδwere only slightly changed by shikonin treatment, but mRNA expressions of PPARγ and C/EPBα were significantly down-regulated. Then, we tested whether upstream regulators of C/EBPβ and PPARγ were involved in anti-adipogenesis of shikonin. C/EBPγ and CHOP (C/EBP homologous protein), which are upstream regulators of C/EBPβ, were not affected by shikonin treatment. On the contrary, the mRNA level of KROX20 was markedly down-regulated by shikonin treatment. These results suggest that KROX20 might regulate downstream factors of adipogenesis through C/EBPβ-independent pathway. The expression of KLF15 (Kruppel-like factor15), which is a member of KLF family and is a upstream regulator of PPARγ, was dramatically decreased by shikonin treatment, but KLF2 was not changed. Shikonin had no impact on the expression of KLF5 in the early stage of adipogenesis, but shikonin increased expression of KLF5 in the late stage of adipogenesis. Even though mRNA expression of KLF5 was moderately changed by shikonin treatment, its effect may be small compared with the effect of KLF15, which was markedly inhibited. Taken together, these results suggest that shikonin inhibits adipogenesis through the down-regulation of PPARγ and C/EPBα, which is mediated by the down-regulation of two pro-adipogenic factors, KROX20 and KLF15.