Adipogenesis관련 유전자발현감소와 Cell Cycle Arrest를 통한 EGCG와 Glucosamine-6-Phosphate의 Anti-Obesity 효과

김꽃별,장성희 한국영양학회 2014 Journal of Nutrition and Health Vol.47 No.1

널리 음용되고 있는 녹차의 EGCG과 우리나라 국민의 상당수가 복용하고 있는 건강기능성 식품 성분인 글루코사민은 이전의 연구들을 통해서 지방세포의 분화를 억제하는데 효과가있다고 보고되어왔다. 이 두 물질의 병합처리로 기대되어지는지방세포에서의 adipogenesis 및 지방축적감소에 대한 상승효과는 검증된 바 없으며, 효과에 대한 cell cycle 차원에서의 접근은 없었다. 본 연구 결과에서 EGCG와 Glucosamine 6-phosphate는adipogenesis 전사인자인 PPARγ, C/EBPα, SREBP1 에 대한 직접적인 발현 억제 뿐아니라, PPARγ, C/EBPα, SREBP1와매개된 FAS, ACSL1, LPL과 같은 adipogenic target 유전자의 발현 감소를 통하여 지방세포의 분화와 지방세포 내지방축적을 감소시키는 효과를 나타냈다. 그리고 HSL과 perilipin의발현조절을 통해 부분적인 lipolytic effet도 나타냈다. 또한 지방세포의 분화가 개시되는데 있어 중요한 DNA의remodeling 과정인 mitotic clonal expansion (MCE) 과정 중G0/G1 phase 단계에서 cell cycle 정지 유도와 그로인한 S phase 및 G2/M phase로 세포주기이행의 방해를 통해 지방세포가분화되는 것은 억제하였다. 이러한 효과들은 EGCG 농도가 높아질수록, 그리고 EGCG를 단독으로 처리한경우보다 Glucosamine 6-phosphate와 병합하였을 때 효과적이었다. 따라서EGCG 단독처리 및 glucosamine 6-phosphate와의 병합처리는 지방세포에서 adipogenesis와 adipogenic관련 유전자들의발현 억제 및 MCE 단계의 cell cycle arrest를 통해 지방세포의 분화를 억제하고 지방축적을 감소시켜 항비만 효과를 나타냈으며, 이러한 효과는 두 성분의 병합처리에서 조금 더 효과적이었다고 할 수 있다. 비록 두 성분의 병합처리가 기대했던 만큼은 아니었으나 항비만 효과에 대한 상승효과가 있다고볼 수 있다. Purpose: Several studies have proven that EGCG, the primary green tea catechin, and glucosamine-6-phosphate (PGlc) reduce triglyceride contents in 3T3-L1 adipocytes. The objective of this study is to evaluate the combination effect of EGCG and PGlc on decline of accumulated fat in differentiated 3T3-L1 adipocytes. Methods: EGCG and PGlc were administered for 6 day for differentiation of 3T3-L1 adipocytes. Cell viability was measured using the CCK assay kit. In ad-dition, TG accumulation in culture 3T3-L1 adipocytes was investigated by Oil Red O staining. We examined the expres-sion level of several genes and proteins associated with adipogenesis and lipolysis using real-time RT-PCR and West-ern blot analysis. A flow cytometer Calibar was used to assess the effect of EGCG and PGluco on cell-cycle progression of differentiating 3T3-L1 cells. Results: Intracelluar lipid accumulation was significantly decreased by combination treat-ment with EGCG 60 μM and PGlc 200 μg/m compared with control and EGCG treatment alone. In addition, use of com-bination treatment resulted in directly decreased expression of PPARγ, C/EBPα, and SREBP1. In addition, it inhibited adi-pocyte differentiation and adipogenesis through downstream regulation of adipogenic target genes such as FAS, ACSL1, and LPL, and the inhibitory action of EGCG and PGlc was found to inhibit the mitotic clonal expansion (MCE) process as evidenced by impaired cell cycle entry into S phase and the S to G2/M phase transition of confluent cells and levels of cell cycle regulating proteins such as cyclin A and CDK2. Conclusion: Combination treatment of EGCG and PGlc inhibit-ed adipocyte differentiation through decreased expression of genes related to adipogenesis and adipogenic and cell cycle arrest in early stage of adipocyte differentiation.

산화적 스트레스에 대한 여주 (Momordica charantia) 추출물의 항산화 효과 및 세포사멸 억제 기전을 통한 신경세포보호효과

김꽃별(Kkot Byeol Kim),이선아(Seonah Lee),허재혁(Jae Hyeok Heo),김정희(Jung hee Kim) 한국영양학회 2017 Journal of Nutrition and Health Vol.50 No.5

건 여주로부터 얻은 70%에탄올 추출물의 항산화 효과를 측정하고, H₂O₂에 의해 유도된 산화적 스트레스에 대한 신경세포 보호효과를 알아보기 위해 human neuroblastoma cell인 SK-N-MC세포를 이용하여 실험을 수행하였다. 여주 추출물의 총 폴리페놀과 플라보노이드 함량은 각각 28.51 mg gallic acid/extract g과 3.95 mg catechin/extract g 이었고, 추출물의 DPPH 라디칼 소거능 (IC50)은 506.95 μg/ml 이었다. 여주추출물을 신경세포에 전 처리한 후 H₂O₂을 처리하여 산화적 스트레스를 유도했을 때, 여주 추출물에 의해 세포생존율은 증가되었고 세포내 ROS는 감소되는 것을 확인하였다. 그리고 세포내 항산화 방어시스템인 항산화효소 (SOD-1,2와 GPx-1)의 mRNA 발현이 여주추출물 처리에 의해 control 수준으로 회복되거나 control 보다 증가되는 결과를 보였으며, ROS 의존적 세포사멸과 연관 있는 것으로 알려진 MAPK pathway 중 p38과 JNK의 인산화를 여주추출물이 억제하였다. 또한 cleaved caspase-3와 cleaved PARP의 발현도 여주추출물의 처리에 의해 감소되었다. 본 연구 결과에서 70% 에탄올 여주추출물은 항산화효능이 우수하여 ROS를 직접적으로 제거할 뿐 아니라 세포내 ROS 축적을 억제시키는 효과를 보여주었다. 그리고 신경세포 내 항산화효소들의 발현 증가 기전과 p38, JNK의 인산화 억제 및 cleaved caspase-3, cleaved PARP의 발현 억제를 통한 세포사멸 억제 기전을 통해 산화적 스트레스로부터 신경세포를 보호하는 효과가 있음을 제시하고 있다. 따라서 여주추출물은 산화적 스트레스에 의한 알츠하이머병이나 파킨슨병 등과 같은 신경변성질환 (neurodegenerative disease)에 대한 예방 및 치료제의 소재로써 이용가치가 충분한 것으로 사료된다. Purpose: Many studies have suggested that neuronal cells protect against oxidative stress-induced apoptotic cell death by polyphenolic compounds. We investigated the neuroprotective effects and the mechanism of action of Momordica charantia ethanol extract (MCE) against H₂O₂-induced cell death of human neuroblastoma SK-N-MC cells. Methods: The antioxidant activity of MCE was measured by the quantity of total phenolic acid compounds (TPC), quantity of total flavonoid compounds (TFC), and 2,2-Diphenyl-1-pycrylhydrazyl (DPPH) radical scavenging activity. Cytotoxicity and cell viability were determined by CCK-8 assay. The formation of reactive oxygen species (ROS) was measured using 2,7- dichlorofluorescein diacetate (DCF-DA) assay. Antioxidant enzyme (SOD-1,2 and GPx-1) expression was determined by real-time PCR. Mitogen-activated protein kinases (MAPK) pathway and apoptosis signal expression was measured by Western blotting. Results: The TPC and TFC quantities of MCE were 28.51 mg gallic acid equivalents/extract g and 3.95 mg catechin equivalents/extract g, respectively. The IC50 value for DPPH radical scavenging activity was 506.95 μg/ml for MCE. Pre-treatment with MCE showed protective effects against H₂O₂-induced cell death and inhibited ROS generation by oxidative stress. SOD-1,2 and GPx-1 mRNA expression was recovered by pre-treatment with MCE compared with the presence of H₂O₂. Pre-treatment with MCE inhibited phosphorylation of p38 and the JNK pathway and down-regulated cleaved caspase-3 and cleaved PARP by H₂O₂. Conclusion: The neuroprotective effects of MCE in terms of recovery of antioxidant enzyme gene expression, down-regulation of MAPK pathways, and inhibition apoptosis is associated with reduced oxidative stress in SK-N-MC cells.

한국 성인의 음주, 흡연, 운동 및 영양행태에 대한 군집별 특성 및 관련요인

김꽃별(Kkot-byeol Kim),은상준(Sang Jun Eun) 한국산학기술학회 2019 한국산학기술학회논문지 Vol.20 No.5

본 연구의 목적은 한국 성인의 건강행태군집 유형을 확인하고 이와 관련된 요인들을 파악하는 것이다. 이를 위해 2014년도 국민건강영양조사 자료를 이차분석 하였다. 음주, 흡연, 운동 및 영양 변수를 이용하여 19세 이상 성인을 대상으로 군집분석하였고, 이 유형들과 인구사회학적 특성 및 건강상태의 연관성을 확인하기 위해 SPSS WIN 22 복합표본설계 모듈을 이용하여 카이제곱 검정과 다항로지스틱 분석을 실시하였다. 한국 성인의 건강행태군집 유형은 흡연군, 식습관군, 건강 관심군, 수동적 태도군 그리고 음주군의 총 6개 유형으로 분류되었고 수동적 태도군의 빈도가 26.0%로 가장 높았다. 건강행태 군집의 타당성을 검증하기 위해 분류된 군집과 건강행태변수를 이용해 판별분석한 결과 타당한 것으로 나타났다. 건강행태 군집은 성, 연령, 교육 수준, 직업, 소득 수준, 결혼 상태 및 지역 규모등 인구 사회학적 특성별로 분포가 달랐으며, 고혈압 및 당뇨와 같은 일부 만성질환의 유무별로도 다른 것으로 나타났다. 인구사회학적 특성, 지역, 고혈압 및 당뇨는 수동적 태도군 보다는 나머지 건강행태군집에 속하는 것과 유의한 연관을 보이는 변수였다. 본 연구 결과는 건강행태를 개별적으로 접근하기 보다는 군집으로 접근하는 것의 유용성에 대한 근거 자료로 활용할 수 있을 것이다. The purpose of this study was to identify the type of health behaviors in Korean adults and to identify related factors. The data used in the analysis was the Korea Health and Nutrition Examination Survey 2014., which was representative of the Korean population. Cluster analysis was used to find the pattern of clustering of smoking, drinking, exercising and nutrition. Differences in the pattern of clustering was examined, first by bivariate chi-square test, and then by multinomial logit regression. Lastly, the association between the clusters of health behaviors and other behavioral risk factors was tested by chi-square test and logistic regression. The distribution of the clusters varied not only across socioeconomic characteristics and local size, but also between individuals with certain chronic diseases and those without. The results of this study can be used as a basis for the usefulness of approaching the cluster rather than individually approaching the health behavior.

Poster : Studies on the Reverse Cholesterol Transport Mechanism According to Risk Factors of Metabolic Syndrome

박미영,김꽃별,장수정,신은정,정미경,김선희,이계희,이명숙 한국지질동맥경화학회(구 한국지질학회) 2008 한국지질동맥경화학회 추계학술발표논문집 Vol.2008 No.-

Poster : The Changes of HDL Size and Enzyme Expression on RCT Metabolism in the Western Diet with NDGA-treated Apo E KO Mice

오현희,박미영,김꽃별,신은정,박성민,김선영,강인혜,이소연,이명숙 한국지질동맥경화학회(구 한국지질학회) 2009 한국지질동맥경화학회 추계학술발표논문집 Vol.2009 No.-

남녀 노인층에서 Alzheimer 위험 예측 인자로써의 Apo E4 Genotype에 관한 연구

오현희(Oh Hyunhee),신은정(Shin Eunjung),김현숙(Kim Hyunsook),임윤숙(Lim Yunsook),박미영(Park Miyoung),김꽃별(Kim Kkochbyul),김은미(Kim Eunmee),이명숙(Lee Myoungsook) 韓國營養學會 2007 Journal of Nutrition and Health Vol.40 No.7

Recent studies described the E4 allele of apoE confers a two-to fourfold increased risk for late-onset Alzheimer's disease (LOAD), but LOAD pathology does not all fit neatly around apo E. Therefore, the goal of this study was to find the association between Alzheimer and apo E4 genotype in the 107 elderly between 50 to 64 years old who visited to FHWC of Sungshin Women's University. We conducted the questionnaire survey (general & 24 hr dietary recall), anthropometerics (BP, waist & BMI) and blood biochemistry (FBS & lipid profiles). LDL-c and HOMA-IR were calculated by Friedwald's and Matthew's formulas. The apo E genotyping was performed by PCR-RFLP method and subjects were divided into three allele groups (ε3; wild, ε2 & ε4; mutants). The apo E allele frequencies were 7.0% for the ε2, 83.6% for the ε3 and 9.3% for the ε4. In comparison with biochemistry characteristics by apo E genotype, FBS was significantly higher in E4 029.2 ± 6.8) than that in the others (ε2: 117 ± 7.4, ε3: 107.3 ± 2.2) (p < 0.01). More than forty percents of E4 group shown the dyslipidemia [high TG (> 150 ㎎/㎗) & low HDL (< 40 ㎎/㎗: ♂ or < 50 ㎎/㎗: ♀) ]. The cytokines levels such as IL-1 β, IL-6 and TNF - α were not different among three apoE alleles. After the adjusting sex, age & dietary fiber, LDL-c level was significantly higher in ε4 (108.3 ± 7.7) than that in ε2 (100.4 ± 8.4) (p < 0.05). According to food intake and the recipe on the basis of 24 hr dietary recall, the elderly with ε4 allele took higher intake frequency of the light -colored vegetable (radish, onion & cabbage) and pan-fried foods (sauteed beef and vegetables, stir-fried vienna with vegetables) than the others. We knew that the elderly with ε 4 allele had been restricted the calories intakes with high dietary fiber (33.6+2.5 g/d) to maintain the normal level of FBS and LDL-c. On next study, the prevalence of Alzheimer's disease in this population who has E4 allele on the condition of calories restriction will be continually follow-up.