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        연구논문 : 국내 개발 인공피부의 친염증성 싸이토카인 발현 평가

        조지훈 ( Ji Hoon Jo ),( Katharine Roque ),신소정 ( So Jung Sin ),조아랑 ( Ah Rang Cho ),허용 ( Yong Heo ) 한국동물실험대체법학회 2013 동물실험대체법학회지 Vol.7 No.1

        본 연구를 통하여 대표적인 친염증성 싸이토카인인 IL-1α, IL-8, IL-18이 국내 회사에서 개발한 인공 피부인 Keraskin™에서 발현되고 있음을 알 수 있었다. IL-1α는 각질세포이외에도 탐식세포, T 림프구, 호중구 등에서도 분비되는 것으로 알려져 있으며 염증 반응 유도에 관계할 뿐만 아니라 T 림프구의 TH17 세포로의 분화에 기여하는 것으로 알려져 있다 (Akdis et al., 2011). IL-8은 주로 탐식세포, 단핵구에서 생성되지만 각질세포, 림프구, 호중구, 간세포에서도 합성되는 것으로 보고되고 있다. 류마티스성 관절염 발병시, 세균 또는 바이러스 감염시 합성이 증가하는 것으로 알려져 있으며 염증 부위로 항원공여세포나 T림프구의 이동을 촉진하는 것으로 알려져 있다(Commins et al., 2010). IL-18은 주로 탐식세포에서 생성되지만 각질세포, 성교세포 (astrocytes), 수지상세포 등에서도 분비되며 IL-12의 도움을 받아 interferon-gamma의 합성을 촉진하는 것으로 알려져 있고 각종 염증성 질환에 합성이 증가되는 것으로 알려져 있다 (Akdis et al., 2011; Commins et al., 2010; Akdis et al., 2011). 이들 싸이토카인 중에서 IL-18은 사람 각질세포주인 NCTC2544 세포주에서 피부감작물질을 첨가하였을 때에 비감작물질을 첨가한 경우에 비해 생성 수준이 증가됨이 보고되었다(Galbiati et al., 2011). 또한 본 연구진은 마우스의 각질세포주인 HEL-30 세포주를 사용하여 피부 비감 작성물질에 비해 감작성물질 노출시 IL-1α 생성이 증가된다는 보고를 최근에 한 바 있다 (Son et al., 2013). 본 연구에서 IL-6 수준은 sandwich ELISA 방법으로 검출한계 (10 pg/㎖) 이하였다. IL-6는 탐식세포가 주 생성원이지만 각질세포, 림프구, 간세포 등에서도 분비되는 것으로 알려져 있다 (Commins et al., 2010). 본 연구진의 과거 연구에서도 사람 각질세포 주인 HaCaT 세포주에서 IL-6가 분비됨을 확인한 바 있다 (김 등, 2011 & 2012). 이에 본 연구진이 사용한 IL-6 sandwich ELISA 체계의 문제점은 아님을 알 수 있다. 본 연구가 한 롯트 (lot)의 Keraskin™ 조직만을 이용하였기 때문에 현재 시점에서는 Keraskin™ 조직 자체가 IL-6를 발현하지 않는다는 결론을 낼 수는 없을 것이다. 추가적인 롯트의 Keraskin™ 조직을 이용하여 실험함으로써 최종적인 판단을 할 수 있을 것이다. A reconstructed human epidermis, Keraskin™ developed in Korea, was evaluated for basal production of pro-inflammatory cytokines, interleukin (IL)-1α, IL-6, IL-8, and IL-18 in the absence of stimulators. Keraskin™ tissues in culture plate insert were incubated in 5% CO2 incubator in the presence of DMEM culture media containing 10% fetal bovine serum for 24, 48, 72, and 96 hours. Cutlure supernatants and Keraskin™ tissue lysates were obtained at the each incubation period. Level of each cytokine was determined using a sandwich ELISA method. Comparing production of IL-1α and IL-8 in culture supernatants after 24 hour incubation, level of these cytokines was significantly augmented at 48, 72, and 96 hours without statistical difference among these incubation periods. IL-18 production level in culture supernatants was the highest after 48 hour incubation. Levels of IL-1α, IL-8, and IL-18 in cell lysates were similar at the all culture periods. Level of IL-6 in both samples was below detection limit, which requires further investigation. Overall, Keraskin™ could be a valuable reconstructed human epidermis for alternative test for skin sensitization screening.

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        국내 개발 인공피부의 친염증성 싸이토카인 발현 평가

        조지훈 ( Ji Hoon Jo ),( Katharine Roque ),신소정 ( So Jung Sin ),조아랑 ( Ah Rang Cho ),허용 ( Yong Heo ) 한국동물실험대체법학회 2013 동물실험대체법학회지 Vol.7 No.1

        본 연구를 통하여 대표적인 친염증성 싸이토카인인 IL-1α, IL-8, IL-18이 국내 회사에서 개발한 인공 피부인 Keraskin™에서 발현되고 있음을 알 수 있었다. IL-1α는 각질세포이외에도 탐식세포, T 림프구, 호중구 등에서도 분비되는 것으로 알려져 있으며 염증 반응 유도에 관계할 뿐만 아니라 T 림프구의 TH17 세포로의 분화에 기여하는 것으로 알려져 있다 (Akdis et al., 2011). IL-8은 주로 탐식세포, 단핵구에서 생성되지만 각질세포, 림프구, 호중구, 간세포에서도 합성되는 것으로 보고되고 있다. 류마티스성 관절염 발병시, 세균 또는 바이러스 감염시 합성이 증가하는 것으로 알려져 있으며 염증 부위로 항원공여세포나 T림프구의 이동을 촉진하는 것으로 알려져 있다(Commins et al., 2010). IL-18은 주로 탐식세포에서 생성되지만 각질세포, 성교세포 (astrocytes), 수지상세포 등에서도 분비되며 IL-12의 도움을 받아 interferon-gamma의 합성을 촉진하는 것으로 알려져 있고 각종 염증성 질환에 합성이 증가되는 것으로 알려져 있다 (Akdis et al., 2011; Commins et al., 2010; Akdis et al., 2011). 이들 싸이토카인 중에서 IL-18은 사람 각질세포주인 NCTC2544 세포주에서 피부감작물질을 첨가하였을 때에 비감작물질을 첨가한 경우에 비해 생성 수준이 증가됨이 보고되었다(Galbiati et al., 2011). 또한 본 연구진은 마우스의 각질세포주인 HEL-30 세포주를 사용하여 피부 비감 작성물질에 비해 감작성물질 노출시 IL-1α 생성이 증가된다는 보고를 최근에 한 바 있다 (Son et al., 2013). 본 연구에서 IL-6 수준은 sandwich ELISA 방법으로 검출한계 (10 pg/㎖) 이하였다. IL-6는 탐식세포가 주 생성원이지만 각질세포, 림프구, 간세포 등에서도 분비되는 것으로 알려져 있다 (Commins et al., 2010). 본 연구진의 과거 연구에서도 사람 각질세포 주인 HaCaT 세포주에서 IL-6가 분비됨을 확인한 바 있다 (김 등, 2011 & 2012). 이에 본 연구진이 사용한 IL-6 sandwich ELISA 체계의 문제점은 아님을 알 수 있다. 본 연구가 한 롯트 (lot)의 Keraskin™ 조직만을 이용하였기 때문에 현재 시점에서는 Keraskin™ 조직 자체가 IL-6를 발현하지 않는다는 결론을 낼 수는 없을 것이다. 추가적인 롯트의 Keraskin™ 조직을 이용하여 실험함으로써 최종적인 판단을 할 수 있을 것이다. A reconstructed human epidermis, Keraskin™ developed in Korea, was evaluated for basal production of pro-inflammatory cytokines, interleukin (IL)-1α, IL-6, IL-8, and IL-18 in the absence of stimulators. Keraskin™ tissues in culture plate insert were incubated in 5% CO2 incubator in the presence of DMEM culture media containing 10% fetal bovine serum for 24, 48, 72, and 96 hours. Cutlure supernatants and Keraskin™ tissue lysates were obtained at the each incubation period. Level of each cytokine was determined using a sandwich ELISA method. Comparing production of IL-1α and IL-8 in culture supernatants after 24 hour incubation, level of these cytokines was significantly augmented at 48, 72, and 96 hours without statistical difference among these incubation periods. IL-18 production level in culture supernatants was the highest after 48 hour incubation. Levels of IL-1α, IL-8, and IL-18 in cell lysates were similar at the all culture periods. Level of IL-6 in both samples was below detection limit, which requires further investigation. Overall, Keraskin™ could be a valuable reconstructed human epidermis for alternative test for skin sensitization screening.

      • KCI등재

        국내 개발 인공피부 배양액 및 조직용해액내 염증매개단백질 발현 수준 평가에 대한 초기 연구

        조지훈 ( Ji Hoon Jo ),박정은 ( Jung Eun Park ),허용 ( Yong Heo ) 한국동물실험대체법학회 2015 동물실험대체법학회지 Vol.9 No.1

        Keraskin™-VM is a reconstructed human epidermis developed in Korea. Considering its use for development of skin sensitization or irritation alternative methods, basal expression level of cytokines or chemokines associated with inflammatory signals in skin was investigated. Culture supernatants of Keraskin™-VM incubated for 24 h or 48 h were used for determining the level of interleukin (IL)-1α, IL-6, IL-18, tumor necrosis factor(TNF)-α, monocyte chemotactic protein(MCP)-1, granulocyte macrophage colony-stimulating factor (GM-CSF), macrophage inflammatory protein(MIP)-1β, regulated on activation, normal T cell expressed and secreted(RANTES), or vascular endothelial growth factor(VEGF). Tissue lysates were obtained at 48 h. Key mediators for skin inflammation including IL-1α, IL-6, IL-18, and TNFα were well expressed both in the supernatants and the lysates. Except IL-18, the 24 h supernatants demonstrated higher expression levels than the 48 h supernatants. Major chemokines in the skin such as MCP-1, RANTES, and VEGF were more produced at 48 h than 24 h, wherein GM-CSF and MIP-1β were barely detected. Overall, Keraskin™-VM could be a valuable reconstructed human epidermis for developing skin sensitization alternative test method.

      • SCOPUSKCI등재
      • KCI등재

        정규 대장수술 후 예방적 항생제의 24시간 사용에 대한 효과

        조지훈(Ji Hoon Jo),이승현(Seung Hyun Lee),안병권(Byung Kwon Ahn),백승언(Sung Uhn Baek) 대한외과학회 2008 Annals of Surgical Treatment and Research Vol.74 No.2

        Purpose: Although the two or three-postoperative doses of prophylactic antibiotics are recommended, the tendency for surgeons to prolong the administration of prophylactic antibiotics after colorectal surgery is a well-known fact. The aim of this study was to assess the prophylactic efficacy of two or three-doses of prophylactic antibiotics over a 24 hour period after elective colorectal surgery. Methods: We reviewed the surgical complications in 69 patients who underwent elective colorectal surgery from April to Jun, 2006. All patients had preoperative mechanical bowel cleansing performed. As antibiotic prophylaxis, oral metronidazole was administered 2∼3 times on the day before surgery and second generation cephalosporin were administered intravenously 30 minutes before surgical incision. After surgery, second generation cephalosporin, aminoglycoside and metronidazole were given to all the patients, at 2∼3 doses for 24 hours. Wound conditions were checked on alternate days during the hospital stay and the patients were followed up for at least 30 days after discharge. Results: In 69 patients, the diseases were cancer in 64 cases (92.8%). The procedures were anterior resection or lower anterior resection in 38 cases (55.1%), hemicoloectomy in 16 cases (23.2%), segmental resection in 9 cases, and abdomino-perineal resection or Hartmann’s procedure in 6 cases. The wound complications were wound seroma in 3 cases (4.3%), wound dehiscence in 3 cases (4.3%) and anastomotic leakage in 1 case (1.4%). Conclusion: The wound complication rate was not high after antibiotic prophylaxis for 24 hours in patients who underwent elective colorectal surgery. Further studies are required to establish appropriate guidelines for antibiotic prophylaxis after elective colorectal surgery.

      • KCI등재

        연구논문 : 국내 개발 인공피부 배양액 및 조직용해액내 염증매개단백질 발현 수준 평가에 대한 초기 연구

        조지훈 ( Ji Hoon Jo ),박정은 ( Jung Eun Park ),허용 ( Yong Heo ) 한국동물실험대체법학회 2015 동물실험대체법학회지 Vol.9 No.1

        Keraskin™-VM is a reconstructed human epidermis developed in Korea. Considering its use for development of skin sensitization or irritation alternative methods, basal expression level of cytokines or chemokines associated with inflammatory signals in skin was investigated. Culture supernatants of Keraskin™-VM incubated for 24 h or 48 h were used for determining the level of interleukin (IL)-1α, IL-6, IL-18, tumor necrosis factor(TNF)-α, monocyte chemotactic protein(MCP)-1, granulocyte macrophage colony-stimulating factor (GM-CSF), macrophage inflammatory protein(MIP)-1β, regulated on activation, normal T cell expressed and secreted(RANTES), or vascular endothelial growth factor(VEGF). Tissue lysates were obtained at 48 h. Key mediators for skin inflammation including IL-1α, IL-6, IL-18, and TNFα were well expressed both in the supernatants and the lysates. Except IL-18, the 24 h supernatants demonstrated higher expression levels than the 48 h supernatants. Major chemokines in the skin such as MCP-1, RANTES, and VEGF were more produced at 48 h than 24 h, wherein GM-CSF and MIP-1β were barely detected. Overall, Keraskin™-VM could be a valuable reconstructed human epidermis for developing skin sensitization alternative test method.

      • KCI등재

        전문 음악교육을 위한 실용음악 정교사 자격증의 필요성에 대한 고찰

        조지훈(Ji-Hoon Jo),조태선(Tae-Seon Cho) 한국산학기술학회 2021 한국산학기술학회논문지 Vol.22 No.5

        TV 오디션 프로그램과 K-POP 열풍에 가장 큰 영향을 받는 많은 청소년들은 자신들의 진로를 음악으로 정하기 시작하였다. 그들은 학원이나 개인레슨을 통해 음악수업을 받았고, 이후 대학의 실용음악과에 진학하게 된다. 지원생들이 많아지면서 대학교 실용음악과의 경쟁률이 기형적으로 높아지는 현상도 발생하였다. 그에 따라 많은 학생들은 어린 나이부터 음악을 시작하였고, 학원 등 사교육 기관을 통해 음악을 배우게 되었다. 이후 실용음악 관련 고등학교가 생기기 시작하면서 고등학교를 실용음악 전문학교에 입학하는 학생들이 늘어나게 되었다. 하지만 실용음악 고등학교에도 큰 문제가 있었다. 바로 해당 음악을 전공한 전문교사를 찾기 힘들다는 점이었다. 이는 실용음악 전공자가 정교사 자격증을 취득하기가 매우 어려운 구조에서 비롯되었다. 교원 자격증을 취득 할 수 있는 방법은 여러 가지 방법이 있지만, 실용음악 전공자가 선택 가능한 방법은 교육대학원을 졸업하는 방법뿐이다. 그런데 교육대학원은 클래식과 국악에 한정되어 있어 입학 자체도 어려운 상황이다. 입학을 하여도 교육대학원 교과목의 대부분이 클래식과 국악교육에 관련된 수업으로 구성되어 실용음악전공자들에겐 매우 어려운 상황이다. 이에 본 논문에서는 실용음악 고등학교의 현재 상황과 정교사 2급 자격증이 왜 필요한지, 자격증을 취득하기 위해서는 어떻게 해야 하는지 등에 대해 연구하였다. Many young people, who are most affected by TV audition programs and the K-pop craze, have begun to choose careers in music. They attended music classes through academies or took private lessons, and then went on to a college’s practical-music department. As the number of applicants increased, competition for university practical-music programs increased abnormally. As a result, many students then started learning music at an early age through private educational institutions and academies. Afterwards, as high schools related to practical music began to appear, the number of students entering practical-music high school and technical schools increased. However, a big problem in practical-music high schools was difficulty in finding professional teachers who majored in music. This arose because it was difficult for someone with a practical-music major to acquire a full-time teaching certificate. There are many ways to obtain a teacher’s license, but the only option for practical-music majors is to graduate from the Graduate School of Education. However, since the Graduate School of Education is limited to classical and traditional music, admission itself is difficult. Even if someone is accepted by the school, most of the courses consist of classical music and traditional music education, which is very difficult for someone who majored in practical music. Therefore, in this thesis, we study the current situation in practical-music high schools, looking at why a regular Level 2 teaching certificate is needed and how to obtain one.

      • KCI등재

        자폐증 유사증상 발현 마우스의 점액 면역에 대한 연구

        황소련,조지훈,신경민,장윤영,김지연,여경욱,김형아,허용,Hwang, So Ryeon,Jo, Ji Hoon,Shin, Kyeong Min,Jang, Yun Young,Kim, Ji Youn,Yeo, Kyeong Uk,Kim, Hyoung Ah,Heo, Yong 한국환경보건학회 2012 한국환경보건학회지 Vol.38 No.6

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        Objectives: This study was undertaken in order to evaluate a potential mechanism involved in gastro-intestinal problems observed in autistic subjects and uses an animal model of autism investigation. Methods: BTBR T+tf/J, a mouse strain with typical socio-behavioral characteristics of autistic subjects and FVB mice with highly social behaviors as the control strain were used. Both genders of mice aged three weeks and six months were used from four separate litters for each strain. Serum was prepared following cardiac puncture, and mesenteric lymph nodes were collected for in vitro stimulation and enumeration of major immune cell proportion. Results: The level of serum IgA was significantly enhanced in six-month-old BTBR mice compared with three-week-old BTBR, which was not observed with the FVB control mice. The serum IgE level was also higher among BTBR mice than among age-sex matched FVB mice, respectively. Considering the ratio of interleukin-4 vs interferon-gamma production from mesenteric lymph node T cells, skewedness toward type-2 reactivities was observed. In addition, the proportion of B cells in mesenteric lymph nodes was significantly higher in BTBR mice than in FVB mice. Conclusion: Upregulation of mucosal immunity related with enhanced type-2 immune reactivity observed in BTBR mice could be involved with the etiology of gastro-intestinal abnormalities in autism.

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