밀기울배지를 이용한 Bacillus macerans의 Cyclodextrin Glucanotransferase 생산과 효소특성

선우양일(Yang-Il Sunwoo),안태진(Tae-Jin Ahn),김동환(Dong-Hong Kim),박인호(In-Ho Park),채기수(Ki-Su Chae),김광(Kwang Kim) 한국생물공학회 1994 KSBB Journal Vol.9 No.5

Dimethylnitrosamine이 흰쥐의 내분비에 미치는 영향

박기현,선우양일,Park, Ki-Hyun,SunWoo, Yang-Il 생화학분자생물학회 1981 한국생화학회지 Vol.14 No.1

1. 배란기 전에 dimethylnitrosamine (DMN)을 rat에 투여하면 progesterone과 estradiol-$17{\beta}$의 분비를 억제시키나 DMN처리 농도에 따른 hormone 분비양에는 큰 차이가 없었다. 2. 임신한 rat에 DMN을 투여하면 배란기와 착상초기 까지는 estradiol-$17{\beta}$의 분비를 억제시키고 착상기가 진행됨에 따라 분비를 촉진시킨다. 3. 또한 임신한 rat에 DMN을 투여했을 때 progesterone 분비에 미치는 영향은 estradiol-$17{\beta}$의 경우와 유사한 경향을 나타내었다. 1. When dimethylnitrosamine (DMN) was injected to Wistar female rat before the ovulation, the sercetion of progesterone and estradiol-$17{\beta}$ was substantially suppressed. However, the different levels of these hormone secretion according to the DMN concentration was not significant. 2. In the case of the pregnant rats, DMN inhibited the secretion of estradiol-$17{\beta}$ at the stage of ovulation and early implantation. In contrast with the above facts, the secretion of this hormone was enhanced during the progressive implantation. 3. A similar behavior with the one of estradiol-$17{\beta}$ was also observed in the secretion of progesterone for the case of the pregnant rats treated with DMN.

Saccharomyces cerevisiae의 감수분열 특이적 Protein Kinase인 Ime2의 역할

임선희,탁연수,선우양일,Leem, Sun-Hee,Tak, Yon-Soo,Sunwoo, Yang-Il 한국미생물학회 1999 미생물학회지 Vol.35 No.4

출아효모에서는 질소원의 고갈과 MATa/MAT${\alpha}$ 이배체 세포의 감수분열기 특이적인 유전자 발현에 의해 체세포분열기의 G1기에서 감수분열기로의 진행이 결정된다. 이러한 두 경로는 감수분열기 특이적인 IME 유전자군에 의한 전사조절에 의해 활성화되어 감수분열기가 시작된다. 본 연구는 IME2 유전자가 protein kinase 로서 감수분열기의 어떤 과정에 직접 관여하는가를 조사하기 위하여 먼저 PCR mutagenesis를 통하여 온도감수성 ime2 변이주를 분리하였다. 전체 62개의 온도감수성 변이주 중에서 온도에 따른 포자형성능과 감수분열기 재조합 빈도에 대하여 명확한 차이를 나타내는 3종류의 변이주들(ts ${\cdot}$ ime2-11, ts ${\cdot}$ ime2-12와 ts ${\cdot}$ ime2-13)을 선택하였다. 이러한 3종류의 온도감수성 변이주를 이용하여 제한온도에서 감수분열기 초기과정 중 결손을 조사하기 위해, FACScan analysis를 한 결과 IME2유전자가 감수분열기의 DNA 복제과정의 개시 및 완료에 관여함을 알 수 있었고, his4 혹은 arg4 locus에서 감수분열기 재조함 빈도의 측정으로 재조합 과정에 중요한 역할을 한다는 것을 알 수 있었다. 더욱이${\Delta}$mre4 파괴주에 IME2유전자를 과다발현시켜 그 영향을 조사한 결과, 감수분열기 특이적인 protein kinase 인 IME2와 MRE4가 감수분열기 초기과정인 재조합 과정에서는 동일한 경로에 작용한다는 것이 제시되었다. Entry into meiosis in the yeast Saccharomyces cerevisiae is regulated by two major factors: the cell type MATa/MAT${\alpha}$ and the nutriational state (starvation) of the cell. The two independent regulations act through IME1and IME2 expression to initiate meiosis. IME2 encodes a meiosis-specific protein kinase, and it enabled MATa/MAT${\alpha}$ diploid cells to undergo meiosis and sporulation. The PCR mutagenesis method was applied for the isolation of thermosensitive ime2 mutants. Among sixty two mutants isolated from the phenotype of defective spore formation under the restrictive temperature, three with the most easily observed temperature-sensitive phenotype (ts ${\cdot}$ime2-11, ts ${\cdot}$ime2-12 and ts ${\cdot}$ime2-13) were selected for further study. To understand the detailed functions of IME2, we examined the defects of these mutants in the early meiotic pathway including the premeiotic DNA replication and exhibited decreased level in meiotic recombination. These results suggest that the IME2 gene plays essential role in meiotic recombination pathway as well as premeiotic DNA replication. As the result of the IME2 overexpression in ${\Delta}$mre4. moreover, it was suggested that the IME2 and MRE4 genes act on the same pathway of initiation step in meiotic recombination.

갑각류 폐기물을 이용한 N - Acethyl -β- D - Glucosamine 생산

김광,전소영,선우양일 ( Kwang Kim,So Young Jun,Yang Il Sunwoo ) 한국화학공학회 1995 화학공학의이론과응용 Vol.1 No.1

연구발표초록 ( 생물화공 ) : 고정화 UASB Reactor 를 이용한 Mashed Red Bean 고농도 폐수의 biomethanation

이영상,이상록,김광,선우양일,박승조,이희선 ( Young Sang Lee,Sang Rok Lee,Kwang Kim,Yang Il Sunwoo,Seung Cho Park,Hee Sun Lee ) 한국화학공학회 1992 춘계학술발표회 Vol.- No.-

옥수수 분리 엽록체에서의 엽록소 형광의 소멸과 광계 2의 Quantum Yield

이진범,박인호,이혜주,선우양일,Lee, Chin- Bum,Park, In-Ho,Lee, Hae-Joo,Sunwoo, Yang-Il 생화학분자생물학회 1991 한국생화학회지 Vol.24 No.6

옥수수 엽육세포의 분리엽록체를 이용하여 환경요인(광 및 온도)에 따른 산소소비량과 방출되는 형광을 측정하여, 형광소멸 요인을 조사하고 이들과 광계 2의 quantum yield와의 관계를 알아보고자 하였다. 고등식물에 있어 틸라코이드 막은 흡수된 빛의 분포 및 소실을 조절하는 수개의 기작을 가지며, 이들은 내외의 여러 요인들에 의하여 조절되어진다(Horton et al., 1989), 'Light doubling techniques' 와 달리 DCMU처리에 의한 방법은 energy-dependent quenching(qE)을 확실히 구별할 수 있는 장점이 있다. 광의 세기가 낮을 때는 photochemical quenching(qQ)이 형광소멸의 주된 요인임을 알 수 있으며, 광의 세기가 높을수록 non-photochemical quenching(qNP)이 주된 요인이었다. qQ와 산소소비량에 대한 quantum yield$({\Phi}_s)$사이에는 nonlinear한 관계를 보였으며, 이는 높은 광에서 광계 2의 quantum yield(intrinsic yield, $({\Phi}_p)$의 감퇴를 나타낸다 하겠다. ${\Phi}_p$는 광도의 증가에 따라 감퇴하였으며, qE와 역비례 관계를 보였으나 ${\Phi}_p$의 감퇴는 qE의 상승에 기인하기 보다는 pH변화 등 다른 요인의 영향일 것이다. 온도상승에 따라 산소소비량은 증가하였으나, qE, qR 및 qNP는 계속적인 감소경향을 보였다. 한편, $(F_v){_m/F_m}$와 ${\Phi}_p$와의 관계는 변화양상이 매우 유사하여 linear관계를 가질 것으로 사료되며, 이와 같은 관계를 가질 경우, 안테나에서의 열손실이 중요한 요인으로 작용할 것이다. The relationship between quantum yield of photosystem II and quenching component of chlorophyll fluorecene has been investigated through a series of experiments on isolated maize mesophyll chloroplasts. The thylakoid membranes of higher plants possess several mechanisms that control both the distribution and the rate of dissipation of absorbed light. These mechanism allow regulation by external and internal factors. By using DCMU addition techniques, there is an advantage to be able to distinguish energy-dependent quenching (qE) from other components of non-photochemical quenching (qNP). At low light intensity, photochemical quenching (qQ) is major component of chlorophyll fluorescence quenching, while at high light intensity, qNP is major one, The relationship between qQ ans quantum yield of oxygen evolution $({\Phi}_s)$ with incident light intensity was showed. The nonlinear relation is indicative of the decline in the intrinsic yield of photosystem II $({\Phi}_p)$ at high light intensity. ${\Phi}_p$ declined as the light intensity increased, which was inversely proportional to qE. The oxygen evolution was increased gradually as the temperature increases, but over $45^{\circ}C$, decreased rapidly. qE, qR (the remaining quenching) and qNP were continuously decreased, while qQ was rapidly increased over $30^{\circ}C$. The changes of $(F_v){_m/F_m}$ on temperature may be presumably able to suggest that they are affected by the phophorylation of LHC II. And interestingly, the changes of $(F_v){_m/F_m}$ were very similiar with those of ${\Phi}_p$.

학술발표회 초록 ( 생물화공 (Ⅱ) ) : Bacillus macerans 의 밀기울 배지를 이용한 Cyclodextrin glucanotransferase 의 정제에 의한 Cyclodextrin 생성

안태진 (학),곽기영 (학),선우양일,김광 (정) ( Tae Jin Ahn,Ki Young Kwak,Yang Il Sunwoo,Kwang Kim ) 한국화학공학회 1993 추계학술발표회 Vol.- No.-

고정화 미생물의 기질 유효 확산

김광(Kwang Kim),선우양일(Yang-Il Sunwoo),박승조(Seung-Cho Park) 한국생물공학회 1989 KSBB Journal Vol.4 No.2

효모의 재조합 변이주를 이용한 인간 Centromeric Alphoid DNA Repeat의 안정성에 관한 연구

김광섭,신영선,이상엽,안은경,도은주,박인호,임선희,선우양일,Kim, Kwang-Sup,Shin, Young-Sun,Lee, Sang-Yeop,Ahn, Eun-Kyung,Do, Eun-Ju,Park, In-Ho,Leem, Sun-Hee,SunWoo, Yang-Il 한국미생물학회 2007 미생물학회지 Vol.43 No.4

Centromere는 채세포분열과 생식세포분열 등 맡은 주요 기능을 담당하는 고도로 분화된 구조이다. Alphoid DNA (${\alpha}$-satellite)는 인간뿐 아니라 모든 영장류의 염색체 내 centromere에서 발견되는 반복서열의 대부분을 차지한다. 인간 인공염색체(Human Artificial Chromosome, HAC)의 개발에서 가장 핵심적인 부분은 centromere의 분리 및 안정적인 유지에 있다. 이 영역은 출아효모에서 alphoid DNA 반복서열을 hook으로 이용하여 Transformation-associated recombination (TAR) cloning법을 사용하여 선택적으로 분리할 수 있다. 이러한 실험방법으로 먼저 repeat array를 rolling-circle amplication (RCA)를 통하여 약 5 kb까지 길이를 연장시킨 후, 효모내에서 상동성재 조합을 이용한 TAR cloning법을 사용하여 분리할 수 있다. 이렇게 분리된 35 kb-50 kb 길이의 4종류의 centromeric DNA repeat arrays (2,4,5,6 mer)를 사용하여, 반복서열의 안정성 유지를 조사하기 위해 상동성재조 합 변이주인 rad51, rad52, rad54를 사용하여 비교 분석하였다. 야생주, rad51과 rad54 변이주를 이용하여 형질전환을 수행한 결과, 반복서열의 크기에 있어서 많은 변화를 나타내었다. 반면, rad52 변이주는 야생주와 다르게 형질전환빈도가 매우 낮은 비율로 나타났으나, centromeric DNA repeat array의 안정성은 3배 이상으로 높게 나타냈다. 이러한 결과들을 미루어, rad52 변이주를 사용하여 centromeric DNA repeat arrays의 형질전환실험에서 발생하는 맡은 변이를 줄일 수 있을 것으로 보인다. 이러한 유전적 방법은 HAC 제작에서 반복서열의 유지에 훨씬 효율적으로 사용할 수 있을 것으로 사료된다. The centromere is a highly differentiated structure of the chromosome that fulfills a multitude of essential mitotic and meiotic functions. Alphoid DNA (${\alpha}$-satellite) is the most abundant family of repeated DNA found at the centromere of all human chromosomes, and chromosomes of primates in general. The most important parts in the development of Human Artificial Chromosomes (HACs), are the isolation and maintenance of stability of centromeric region. For isolation of this region, we could use the targeting hook with alphoid DNA repeat and cloned by Transformation-Associated Recombination (TAR) cloning technique in yeast Saccharomyces cerevisiae. The method includes rolling-circle amplification (RCA) of repeats in vitro to 5 kb-length and elongation of the RCA products by homologous recombination in yeast. Four types of $35\;kb{\sim}50\;kb$ of centromeric DNA repeat arrays (2, 4, 5, 6 mer) are used to examine the stability of repeats in homologous recombination mutant strains (rad51, rad52, and rad54). Following the transformation into wild type, rad51 and rad54 mutant strains, there were frequent changes in inserted size. A rad52 mutant strain showed extremely low transformation frequency, but increased stability of centromeric DNA repeat arrays at least 3 times higher than other strains. Based on these results, the incidence of large mutations could be reduced using a rad52 mutant strain in maintenance of centromeric DNA repeat arrays. This genetic method may use more general application in the maintenance of tandem repeats in construction of HAC.

연구발표 초록 ( 생물화공 (Ⅰ) ) : α- Amylase 고생산 균주에 의한 액화형 α- Amylase 의 정제

김광(Kwang Kim),박인호(In Ho Park),선우양일(Yang Il Sunwoo) 한국화학공학회 1991 춘계학술발표회 Vol.- No.-