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        영지(Ganoderma lucidum) 균사체의 액체배양에 의한 세포외 생물고분자의 생산조건과 특성

        이신영,강태수 한국미생물생명공학회 ( 구 한국산업미생물학회 ) 1996 한국미생물·생명공학회지 Vol.24 No.1

        새로운 생물산업소재의 탐색 및 개발연구의 일환으로 Ganoderma lucidum(영지1호) 균사체의 액체배양에 의하여 세포외 생물고분자의 생산을 위한 최적 생산조건을 검토하였고, 생성 생물고분자를 분획 정제하여 이의 성분특성을 조사하였다. 세포의 생물고분자 생산을 위한 최적 배양조건은 glucose 5%, yeast extract 0.5%, (NH_4)_2HPO_4 0.1% 및 KH_2PO_4 0.05%(w/v)를 함유한 배지에서 pH 5.0, 온도 30℃ 및 교반속도 100 rpm일 때 얻어졌다. 이들 조건하에서 7일간 플라스크 배양하였을 때, 최대의 균체 및 세포외 생물고분자 농도는 각각 15.2 및 18.8 g/l이었으며, 비생육속도, 비기질소비속도 및 비생산속도는 각각 0.039 hr^-1, 0.043 gg ^-1hr^-1이었다. 세포의 생물고분자는 실온의 물추출에 의하여 수용성 및 물불용성 다당류로 분획되었으며, 두 시료 모두 97% 이상의 당을 함유하였다. 수용성 생물고분자 분획(BWS)과 물불용성 분획(BWI)은 모두 glucose, galactose, mannose, xylose 및 fucose를 함유하였으며, 구성당의 몰비는 각각 3.6 : 1.5 : 2.1 : 0.5: trace 및 2.9 : 3.1 : 2.0 : 1.6 : 0.3이었다. For the screening and the development of the new bio-material, cultural conditions for the exo-biopolymer (EBP) production through the submerged cultivation of Ganoderma lucidum mycelium were investigated. Also, the fractionations and the purifications of the exo-biopolymer were carried out and the chemical compositions of the exo-biopolymer were examined. The optimal culture conditions for the exo-biopolymer production were pH 5.0, 30℃ and 100 rpm of agitation speed in the medium containing of 5% (w/v) glucose, 0.5% (w/v) yeast extract, 0.1% (w/v) (NH_4_)_2HPO_4, and 0.05% (w/v) KH_2PO_4. In the flask cultivation for 7 days under these conditions, the concentration of the maximum exo-biopolymer and the cell mass were 15.4 g/l and 18.8 g/l, respectively. The specific growth rate was 0.039 hr^-1. In addition, the substrate consumption rate, and the exo-biopolymer production rate were 0.043 gg ^-1hr^-1 and 0.025 gg ^-1hr^-1, respectively. The exo-biopolymer was fractionated into BWS (water soluble exo-biopolymer) and BWI (war insoluble exo-biopolymer) by the water insoluble exo-biopolymer) by the water extraction, and the sugar contents fo two fractions were higher than 97% (based on dry basis). The components sugar of BWS and BWI fractions were glucose, galactose, mannose, xylose, and fucose. Their molar ratios were 3.6:1.5:2.1:0.5: trace and 2.9:3.1:2.0:1.6:0.3, respectively.

      • SCOPUSKCI등재
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        단백질분해효소를 생성분비하는 호알칼리성 Coryneform bacterium TU-19의 분리 및 동정

        최명철,양재섭,강선철 한국미생물생명공학회 ( 구 한국산업미생물학회 ) 1996 한국미생물·생명공학회지 Vol.24 No.2

        토양으로부터 알칼리성 단백질분해효소를 생성분비하는 호알칼리성 미생물을 분리하였다. 이 균의 형태적 특징은 Gram 양성이었으며, 포자를 형성하지 않고, 운동성이 없으며, 불규칙적인 간균의 형태를 하고 있는 호기성 미생물이었다. 또한 기타 다른 형태적, 생리생화확적 특징과 종합적으로 비교해 볼 때 이 균주는 Coryneform 세균과 매우 유사하였다. 따라서 본 분리균주는 Coryneform bacterium TU-19로 잠정적으로 동정하였다. 그러나 화학적 분석 결과 및 부분적인 생리생화적 특징들에 있어서는 Coryneform bacteria의 어느 종과도 정확히 일치하지 않았다. An alkalophilic bacterium producing alkaline protease(s) was isolated from soil. It was a Gram-positive, non-sporulating, immotile, irregular rod, strictly aerobic, and weak acid-forming bacterium. The morphological, physiological, and biochemical characteristics of the isolate resembled those of the Coryneform bacteria. However, there was not any species within this genera to which microorganism can be closely matched. Therefore, it is provisionally identified as a Coryneform bacterium TU-19.

      • Production and Industrial Application of Bacterial Cellulose

        Joong Kon PARK 한국생물공학회 2021 한국생물공학회 학술대회 Vol.2021 No.10

        미생물셀룰로오스는 식물셀룰로오스(plant cellulose)와 달리 리그닌, 헤미셀룰로오스 등의 물질이 섞여 있지 않은 순수한 셀룰로오스로만 구성된 직경 50 나노메타 파이버의 매트릭스 형태로 존재한다. 나노구조의 특성으로 인하여 함수율이 면화 솜의 100 배 이상이 되며 수분 방출 속도가 매우 느린 장점이 있다. 미생물셀룰로오스는 식품, 마스크팩 화장품, 화상치료 생의약품, 옷감 등으로 사용 되고 있다. 미생물셀룰로오스는 대사회로 및 발효 조작 조건등을 개선하여 생산성을 높일 수 있으며, 복합체를 이룸으로서 항균성, 전도성, 투명성 등의 기능을 부여할 수있다. 미생물셀룰로오스의 생산성 향상, 기능성 부과, 산업적 응용을 위하여 20 여년간 축적된 연구 경험과 생물공학 교육 및 한국연구재단 공학단장으로 근무하여 쌓은 연구관리 경험을 발표하고자 한다.

      • SCOPUSKCI등재
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        식품내의 미생물 분리를 위한 dryfilm 방법의 평가연구

        하상도 한국미생물생명공학회 ( 구 한국산업미생물학회 ) 1996 한국미생물·생명공학회지 Vol.24 No.2

        본 실험에서는 식품내 미생물을 분리하는 불편한 전통적 agar 배지법을 대처하기 위하여 간편하고 정확한 3M Petrifilm^TM을 이용한 dryfilm 방법을 비교, 평가하였다. 총균수 분리배지인 standard method agar (SMA)와 Petrifilm^TM standard method (PSM, 3M)는 P<0.05 범위에서 우유, 간 쇠고기, 탁주, 밀가루, 어묵의 다섯 가지 식품으로 부터의 균분리 능력에 있어 유의적인 차이가 없었다. 우유와 육류로부터 분리된 coliform 수와 E. coli 수는 brilliant green lactose broth (BGLB)에 의한 MPN법과 Petrifilm^TM coliform count (PCC, 3M)법을 사용했을 때 그리고 EC broth에 의한 MPN법과 Petrifilm^TM E. coli count(PEC, 3M)법을 사용했을 때 각각 P<0.05 범위에서 유의적으로 차이가 없었다. 우유로부터 분리된 coliform 수는 P<0.05에서 violet red bile agar(VRBA)와 PCC(3M)간에 유의적 차이을 보이지 않았으나 육고기 시료를 사용하였을 때 PCC(3M)는 VRBA에 비하여 유의적으로 적은 수의 coliform을 분리하였다. 탁주 시료내의 효모와 밀가루 시료내의 곰팡이를 분리하기 위한 배지인 acidified potato dextrose agar(APDA)와 Petrifilm^TM yeast & mold count(PYMC)를 비교하였는데, 균 분리능력에 유의적 차이를 보이지 않았다. 이 결과로 3M Petrifilm^TM을 이용한 dryfilm 방법이 제조시간이 길고, 불편한 전통적 agar 이용법의 좋은 대처방법으로 사용될 수 있다는 것을 알 수 있다. Dryfilm method by using 3M Petrifilm^TM has been examined to replace conventional agar method for isolation of microorganisms from foods. The objectives of the present study were to evaluate suitability of dryfilm method as a microbilal isolation method and to determine the effect of antimicrobial agent on dryfilm for isolation of microorganisms from foods. Five different foods, milk, ground beef, fishery surimi, Takju and wheat flour were used to isolate the natural microflora in foods and inoculated Escherichia coli. Standard method agar (SMA, Difco) and Petrifilm^TM aerobic count (PAC, 3M) were used to isolate total microorganisms from foods. Violet red bile aga (VRBA), brilliant green lactose bile (BGLB) broth and Petrifilm^TM coliform count (PCC, 3M) were used to isolate coliforms from foods. E. coli broth (EC broth) and Petrifilm^TM E. coli count (PEC, 3M) were used to isolate E. coli from foods. Acidified potato dextrose agar(APDA) and Petrifilm^TM yeast & mold count (PYMC, 3M) were used to isolate yeasts and molds from foods. Total aerobic plate counts isolated from five different foods by SMA and PAC (3M) were not significantly different each other at P<0.05 level and were highly correlated each other (≥0.96). Mugwort extract as an antimicrobial agent did not affect microbial enumeratiion of Dryfilm. Significantly higher number of coliform colonies were formed on VRBA than PCC (3M) form ground beef, but they were not significantly different in coliform colonies from milk samples. PCC (3M) and BGLB were not significantly different for enumeration of coliforms in milk and beef samples. Significantly higher number of E. coli were isolated by EC broth than PEC from ground beef, but these were not significantly different for enumeration of E. coli from milk. Yeast and mold counts isolated from Takju and wheat flour by APDA and PYMC (3M) were not significantly different at P<0.05 level. These data indicate that dryfilm method by using 3M Petrifilm^TM can be successively used as an alternative to conventional agar method for enumeration of microorganisms in various foods.

      • KCI등재

        카탈라제를 생산하는 고초균 (Bacillus sp.)의 고정화 및 과산화수소 분해 특성

        한경아(Kyung-Ah Han),장윤희(Yun-Hee Jang),이종일(Jong Il Rhee) 한국생물공학회 2010 KSBB Journal Vol.25 No.6

        토양 미생물로부터 스크리닝한 미생물 중 카탈라제 생산량이 높은 세 가지 미생물 (Bacillaceae bacterium BKBChE-1, Bacillus sp. BKBChE-2와 Bacillus flexus BKBChE-3)을 배양하여 얻은 카탈라제 효소가 과산화수소를 분해하는 것을 확인하고, 미생물 균체를 천연제올라이트에 정전기적 흡착법으로 고정하였다. 주사전자 현미경을 통해 각각의 미생물이 지지체에 잘 흡착된 것이 관찰되었고, 10.5 mM의 과산화수소를 1시간 이내에 완전히 분해되는 것을 확인하였다. 과산화수소 분해 속도가 가장 빠른 Bacillus flexus BKBChE-3은 온도와 pH 영향성 실험을 통해 고온과 pH 10 이상의 강알칼리 조건에서도 30일 이후까지 미생물이 생존하는 것을 관찰하였다. 또한 고정화된 미생물의 경우 온도 25-40℃, pH 7-10의 조건에서 생균수가 계속하여 증가하는 것을 확인하였다. 본 실험을 통해 Bacillus flexus BKBChE-3이 생산한 카탈라제효소 뿐만 아니라 고정화된 균체도 과산화수소의 제거에 효과적임을 확인할 수 있었다. 이들 결과로부터 미생물 발효를 통해 생산된 효소의 생산량 증가와 미생물 개체 수 증가를 이용하여 산업폐수에 적용하면, 과산화수소의 제거 효율을 높이고 균체 재활용을 통한 공정비용을 절감할 수 있을 것으로 사료된다. In this work we have investigated the production of catalase from Bacillus sp. strains, which were screened and identified from soil. These strains were cultivated in shaking flasks with tryptic soy broth (TSB) at 30℃ and 200 rpm. Effects of the temperature and pH on the stability of the native catalase and whole cell viability were studied in the temperature range of 25-60℃ and the pH range of 7-13. Korean natural zeolite was added to culture medium and mixed with microorganisms for 24 hours. The native catalase maintained its activity over 50℃. The enzyme acitiviy of the catalase from Bacillus flexus BKBChE-3 was highest among the Bacillus sp. strains studied. Bacillus flexus BKBChE-3 and immobilized Bacillus cells have survived under extreme conditions of over 50℃ and pH 12. 60 mL of 10.5 mM H2O2 solution were entirely removed within 1 hour with catalase produced from Bacillus sp. on the flask. When Bacillus cells were immobilized on Korean natural zeolite, colony forming unit of Bacillus flexus BKBChE-3 was increased and high efficiency of hydrogen peroxide removal was observed.

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