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        • 진행된 성문상부암에서 PCR-SSCP에 의한 p53의 변이 양상과 임상적 의의

          홍성언(Seong Eon Hong),강진오(Jin Oh Kang),백형환(Hyung Hwan Baik),윤경식(Kyung Sik Yoon) 대한방사선종양학회 2001 Radiation Oncology Journal Vol.19 No.2

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          목 적 :진행된 성문 상부암 환자에서 p53 유전자 변이 양상을 파악하고 이의 임상적 예후 인자로서의 관련성을 확인하고자 하였다. 대상 및 방법 :경희대학병원에서 병기 3 또는 4의 진행된 후두암으로 진단 받고 근치적 목적의 전 또는 부분 후두절제술을 시행 받고 4600 cGy 이상의 방사선 치료를 받은 환자 60례 중 적절한 조직을 확보 할 수 있었던 환자 26명을 대상으로 하였다. 조직 일부는 면역 염색을 시행하였고 일부는 p53 유전인자의 exon 5번 부터 8번까지 PCR-SSCP 시행후 PCR-SSCP 상 이상 소견이 있는 환자들의 DNA를 염기 서열 분석하였다. 이 결과를 임상적 소견과 비교 분석하였다. 결 과 :PCR-SSCP 검사 결과 exon 5∼8번에서 전체 26례 중 8례(31%)에서 변이를 나타내었다. 8례 모두 점돌연변이었으며 transition이 전체 8례 중 6례이었다. Exon 5번의 변이가 3례, exon 6번의 변이가 4례, exon 7번의 변이가 1예이었다. 전체 환자의 평균 생존 기간은 67.4개월 이었고 p53 변이가 없는 군이 70.2개월, p53 변이가 있는 군이 61.3개월로 p53 변이가 있는 군의 생존 기간이 감소되어 나타났으나 두 군간의 생존 기간의 통계적인 유의한 차이는 없었다(p=0.596). 환자를 병기 III과 IV로 나누어 SSCP상 변이의 차이를 비교하였는데 병기 III은 양성이 25%이었고 병기 IV는 36%로 나타나 병기 IV 에서 약간 높게 나타났으나 통계적 차이는 없었다(p=0.563). 임파절 음성인 환자 중 SSCP 양성은 25%이었고 임파절 양성인 환자 중 SSCP 양성은 42%이었으나 통계적 차이는 없었다(p=0.437). 결 론 : PCR-SSCP 를 이용한 p53 유전인자 변이의 검색은 생존 기간, 병기, 임파절 전이 등과 관련이 없으며 예후인자로서 유용하지 않은 것으로 판단하였다. Purpose : To determine the prognostic s ignificance of p53 mutations in advanced supraglottic cancer patients . Material and Methods : Twenty- s ix patients with pertinent tissue materials among 60 patients diagnosed as advanced supraglottic cancer in Kyung Hee univers ity hospita l a nd received total or partial laryngectomy followed by radiation therapy were enrolled. Immunohistochemical staining us ing DO7 monoclonal antibody was performed. Tumor specimens were analyzed for p53 mutations in exons 5 through 8 by us ing PCR- SSCP analys is followed by DNA sequencing of all variants . Results : p53 mutations were present in 8 cases among 26 patiets . Mutations within exon 5 were 3 cases , exon 6 were 4 cases , and exon 7 was 1 case. Mean survival time was 70.2 months in patients without mutations , 61.3 months with mutations but there was no statistically s ignificant differences (p=0.596). Mutations were 25% in stage III and 36% in stage IV but there was no statistically s ignificant differences (p=0.563). Mutations were 25% in lymph node negative group and 42% in lymph node pos itive group but there was no statistically s ignificant differences (p=0.437). Conclusion : The presence of a p53 mutation detected by PCR- SSCP is not associated with survival, stage and lymph node status.

        • SCOPUSKCI등재후보

          멜라토닌이 생쥐 소낭 세포 재생과 아포토시스에 미치는 영향에 대한 연구

          강진오(Jin Oh Kang),하은영(Eun Young Ha),백형환(Hyung Hwan Baik),조용호(Yong Ho Cho),홍성언(Seong Eon Hong) 대한방사선종양학회 2000 Radiation Oncology Journal Vol.18 No.1

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          목 적 : 멜라토닌의 방사선 장애 방어 효과와 기전을 밝혀 방사선 치료제로서의 기초 자료를 제공하고자 하였다. 방 법 : 168 마리의 생쥐를 방사선량과 멜라토닌 투약 여부에 따라 28개 군으로 나누어 실험하였다. 방사선량은 0, 8, 10, 12, 14, 16, 18 Gy를 조사하고 소낭의 생존 곡선을 보기 위하여 Withers와 Elkind의 방법을 이용한 microcolony survival assay를 시행하였고 아포토시스를 보기 위하여 TUNEL assay를 시행하였다. 결 과 : 멜라토닌의 방사선 장애 방어 효과는 전 선량군에서 확인되었고 특히 고선량군에서 방어 효과가 많은 차이를 보였다. Apoptosis index는 8 Gy 방사선 조사 후 대조군에서 18.4%, 멜라토닌 투여군에서 16.5%이었고 18 Gy 방사선 조사 후 대조군에서 17.2%, 멜라토닌 투여군에서 15.4%로 나타나 통계적인 차이를 보이지 않았다. 결 론 : 멜라토닌은 생쥐 소장의 소낭 세포에서 방사선 장애 방어 효과를 나타냈으나 이의 기전은 아포토시스 억제효과와는 관련이 없는 것으로 판단하였다. Purpose :To evaluate protective mechanism of melatonin against radiation damage and its relationship with apoptosis in mouse jejunum. Materials and Methods : 168 mice were divided into 28 groups according to radiation dose and melatonin treatment. To analysis crypt survival, microcolony survival assay was done according to Withers and Elkind's method. To analysis apoptosis, TUNEL assay was done according to Labet-Moleur's method. Result : Radiation protection effect of melatonin was demonstrated by crypt survival assay and its effect was stronger in high radiation dose area. Apoptosis index with 8 Gy irradiation was 18.4% in control group and 16.5% in melatonin treated group. After 18 Gy, apoptosis index was 17.2% in control group and 15.4% in melatonin treated group. Apoptosis index did not show statistically significant difference between melatonin treated group and control group. Conclusion :Melatonin shows clear protective effect in mouse jejunum against radiation damage but its protective effect seems not to be related with apoptosis protection effect.

        • 망막아세포종 세포주(Y-79)의 Arylalkylamine N-acetyltransferase 활성에 미치는 Dopamine의 영향

          김석민,정미영,윤경식,진병관,백행운,백형환,조용호 慶熙大學校 1997 論文集 Vol.26 No.-

          The arylalkylamine N-acetyltransferase(AA-NAT, EC 2.3.1.87) in vertebral pineal gland and retina is rate-limiting enzyme in the pathway of biosynthesis of melatonin. AA-NAT activities are remarkably increased during night with 10-150 folds. Neurohormone melatonin is thought to play roles in a broad range of physiological functions in human, primarily through effects on the biological clock in the suprachiasmatic nucleus of the hypothalamus, This rhythm reflects large changes in the activities of AA-NAT. So the important regulatory role of AA-NAT has made it central interest in research on melatonin biochemistry and neurochemical signal transduction. The neurotransmitter that regulates the AA-NAT activities is norepinephrine, which acts through a cyclic AMP mechanism. The effect of dopamine on AA-NAT in human retinoblastoma Y-79 cells was studied. the obtained results are as follows; AA-NAT activities in Y-79 cells were increased by cyclic AMP, and dopamine inhibited the AA-NAT activities stimulated by forskolin. The pattern of inhibition of dopamine on the AA-NAT activities in Y-79 cells was time and concentration dependent. The results suggest that dopamine participates in the regulation of the AA-NAT activities through the inhibitory mechanism in the human pineal and retinal tissues.

        • Escherichia coli(M15)을 이용한 serotonin N-acetyltransferase 유전자의 발현

          김용만,정미영,윤경식,진병관,백행운,조용호,백형환 慶熙大學校 1997 論文集 Vol.26 No.-

          AA-NAT cDNA was obtained by RT-PCR technique from total RNA of rat sacrified at night(02:00am). pCRNAT was cloned using the pCRII vector with insertion of AA-NAT cDNA(about 1.4 kb) at EcoRI site. For the expression of the gene, pQECNAT was subcloned, in which the coding region of AA-NAT was inserted into expression vector pQE30 at BamHI and HindIII sites. According to the experimental results, Escherichia coli strain M15, transformed by the expession vector pQECNAT, was selected as a host to express AA-NAT gene with the induction of isopropyl β-D-thiogalactoside(IPTG). Optimal condition for the expression of AA-NAT gene was achieve from the experimental results, showing that the expression of the protein was inducible much 19.800 ± 2,200 dpm per ml of culture volume in 4 hours at the concentration of 2 mM IPTG. Partial purification through the affinity column(Ni-NTA agarose) binding to the continuous 6 histidine residues of protein resulted in 5 times more increase in the specific activity of AA-NAT than that of the homogenate of bacterial pellet. These experimental results will provide basic data in further study for the enzymatic kinetics and antibody production of AA-NAT.

        • An Experimental Study on the Inhibitory Effect of Irradiation upon Ca^2+―Mg^2+―activated Adenosine Triphosphatase Activity in Brain Tissues of Albino Mouse

          Baik, Haing-Woon,Na, In-Gug,Baik, Hyung-Hwan,Cho, Yong-Ho 慶熙大學校 1989 論文集 Vol.18 No.-

          흰 생쥐의 뇌조직으로부터 분별원심법으로 분리한 supernatant 분획과 mitochondrial 분획내 Ca^(2+)-ATPase의 비활성도와 세포내 국재소를 정하였고, 방사선 조사가 이 효소의 비활성도에 미치는 영향을 관찰한 결과 다음의 성적을 얻었다. 1. 흰 생쥐의 뇌조직으로부터 분리한 supernatant fraction내에 함유되어 있는 Ca^(2+)-ATPase의 활성도는 92.6 unit였고, mitochondrial fraction의 것으로 504.2 unit였다. 2. 흰 생쥐 뇌조직내의 세포질에 용해되어서 부유상태로 있는 supernatant Ca^(2+)-ATPase에는 총활성도의 15.5 퍼센트, mitochondrial fraction에는 84.4 퍼센트가 분산되어 있었다. 따라서 흰 생쥐의 뇌조직내에 존재하는 Ca^(2+)-ATPase는 주로 mitochondrial 분획내에 존재한다. 3. 뇌조직내 supernatant Ca^(2+)-ATPase 비활성도에 미치는 방사선 조사의 억제적 영향은 방사선량을 증가할수록 비례적으로 상승하였다. 즉 dose-dependent 관계가 있었다. 4. Supernatant Ca^(2+)-ATPase 비활성도를 50 퍼센트로 억제하는 방사선 조사량(I50-치)은 약 2870 Rad이었고, mitochondrial Ca^(2+)-ATPase는 2584 Rad였다. 5. Supernatant와 mitochondrial Ca^(2+)-ATPase 비활성도에 미치는 방사선 조사의 억제적 영향은 통계학적으로 매우 높은 유의성을 보였다. 이상과 같은 실험결과로 보면, 휜 생쥐 뇌조직내의 supernatant 분획과 mitochondrial 분획내에 존재하는 Ca^(2+)-ATPase 비활성도에 미치는 방사선 조사의 억제효과에 대한 기전은 방사서이 주로 효소분자 중의 효소단백 부분을 파괴함으로써 나타나는 것이라 시사된다. 그러나 방사선 조사가 흰 생쥐 뇌조직내 존재하는 Ca^(2+)-ATPase 비활성도에 미치는 억제효과와, 뇌종양 치료에 사용되고 있는 방사선 조사량과의 관련은 앞으로 더욱 연구가 진행되어야 하리라고 본다. An Experimental Study on the Inhibitory Effect of Irradiation upon Ca^(2+) - Mg^(2+) - activated Adenosine Triphosphatase Activity In Brain Tissues of Albino Mouse.

        • A Biochemical Study on the Activity of Aspartate Aminotransferase in Bovine Retinal Pigment Epithelium

          Baik, Hyung-Hwan,Cho, Yong-Ho 慶熙大學校 1992 論文集 Vol.21 No.-

          소의 망막 색소상피세포를 분별원침법으로 수용성분획과 사립체 분획을 분리하여 세포내에 함유되어 있는 aspartate aminotransferase isozyme 의 활성도를 측정하고 두 분획내에 존재하는 효소를 부분정제하여 생활학적 성상을 관찰하였다. 또한 두 분획내에 존재하는 aspartate aminotransferase isozyme의 비활성도에 미치는 금속이온, 온도, pH, 효소 단백질량과 기질인 L-aspartate의 영향을 관찰한 바 다음과 같은 흥미있는 지견을 얻었다.

        • 백서 신장 조직내 Na^+-K^+ ATPase에 대한 Furosemide의 간접적 억제 기전

          백행운,윤경식,우태욱,김재욱,이재범,백형환,조용호 慶熙大學校 大學院 1994 高凰論集 Vol.15 No.-

          It is presented that the subcellular localization and distribution of the specific activity of Na^+-K^+ ATPase in whole homogenate, the soluble fraction and mitochondrial fraction of the renal tissues in normal adult rat isolated by differential centrifugal method were studied. The effect of furosemide compound on their enzymatic activity was evaluated by the Fiske SubbaRaw method. The specific activity of Na^+-K^+ ATPase of rat renal tissues was found to be about 92.2 umol/g protein/hr. The specific activity of microsomal fraction of rat renal tissue is showed approximately 1.5-fold higher than the value in the other fraction. The effect of furosemide was found to decrease proportionally the specific activity of Na^+-K^+ ATPase in rat renal tissue as the increment of the concentration of furosemide to luM in the microsomal fraction. The effect of the other diuretics is showed the same inhibition pattern. When the incubation time is increased from 15min to 60min in the same drug treated Na^+-K^+ ATPase, specific activity of Na^+-K^+ ATPase is increase but the inhibition rate of the enzyme is decreased. In view of the above finding, it is clear that the furosemide, well known as diuretic agent, selectively inhibits the activity of the microsomal Na^+-K^+ ATPase in accordance with dose-dependent effect. The mechanism of action appears to be due to indirect inhibition. Indirect inhibition means that the transport protein of cellularion in membrane is inhibited by the furosemide and so indirectly activity of Na^+-K^+ ATPase is inhibited by that. Consequently, the effect of the furosemide on the rat renal tissue Na^+-K^+ ATPase is non-specific inhibition by indirect inhibition of transport protein.

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