접촉성 Nd-YAG 레이져와 봉합사를 이용한 토끼의 미세난관 문합술에서 난관의 소통성과 임신율 비교

김진홍(Jin Hong Kim),류순원(Sun Won Yoo),조현희(Hyun Hee Jo),김현영(Houn Young Kim),김미란(Mi Ran Kim),권동진(Dong Jin Kwan),임용택(Yong Taik Lim),김장흡(Jang Heub Kim),이진우(Jin Woo Lee) 대한산부인과학회 2001 Obstetrics & Gynecology Science Vol.44 No.3

N/A Objective : Many different methods have been undertaken to increase the success rate of tuboplasty. The development of a new generation of surgical lasers has offered a possibility for the practical use of the laser technique in microsurgical fields. In gynecology, the laser beam has been reported to be a precise instrument for successful tubal surgery with minimal bleeding and postoperative reaction. The authors studied the effect of the infrared laser beam in the area of tubal reanastomosis. Methods : To compare tubal patency, pregnancy rate, and histologic difference in site of anastomosis, total 120 tubes of 60 rabbits were used for experimental tuboplasty. The study groups were divided according to the kinds of reanastomosis methods. Group I : 1 layer(right tube) and 2 layer(left tube) anastomosis without using splint, group II : 1 layer(right tube) and 2 layer(left tube) anastomosis with using splint, group III : reanastomosis using laser with splint(III-b) and without splint(III-a). Results : 1. The infiltration of inflammatory cell were observed in all group by optical microscopic examination. Group II revealed more fibrotic change and inflammatory cell without significant statistical difference and there was no significant difference between left and right tubes in each group. 2. The tubes of group II were significantly more patent(75%) than that of group I(50%). Especially the patency of group III performed Nd-YAG laser with splint was the highest(90%). 3. The pregnancy rates in groups without splint were 40%(one layer without splint, group I-right tube), 60%(two layer without splint, group I-left tube), 30%(Nd-YAG laser without splint, group III-a), were significantly lower than that of group with splint, 60%(one layer with splint, Group II-right tube), 60%(two layer with splint, Group II-left tube), 80%(Nd-YAG laser with splint, Group III-b). Especially the group IIIb showed the hightest pregnancy rate(80%). Conclusion : From the above results, it is considered that the tubal reanastomosis using splint and Nd-YAG laser will improve the pregnancy rate and could be the procedure of choice in the future.

인간 영양세포막과 탈락막에서의 표피성장인자, 변형성장인자-α와 표피성장인자 수용체의 발현

권동진(Dong Jin Kwon),류순원(Sun Won Yoo),김미란(Mee Ran Kim),정기욱(Gi Wook Chung),김진홍(Jin Hong Kim),김수평(Soo Pyung Kim) 대한산부인과학회 1999 Obstetrics & Gynecology Science Vol.42 No.9

저자는 각 5예의 임신 초기와 말기 태반의 파라핀포배 조직을 이용하여 영양막세포막과 탈락막에서 EGF, TGF-a와 EGFR 발현의 변화를 면역조직염색법으로 관찰하여 다음과 같은 결과를 얻었다. EGF의 발현은 임신 초기와 말기 조직에서 영양막세포막과 탈락막 모두에서 관찰되었다. 영양막세포막중 세포영양막은 임신 초기에서 말기로 갈수록 경증도에서 중간 정도로 발현이 강해졌으며 합포영양막은 임신 초기에서 말기로 갈수록 경증도에서 중간 정도의 유사한 발현 양상을 보였다. 그리고 탈락막은 임신 초기에서 말기로 갈수록 중간 정도에서 경증도로 발현의 정도가 약해졌다. TGF-a의 발현은 임신 초기와 말기 조직에서 영양막세포막과 탈락막 모두에서 관찰되었다. 영양막세포막의 경우 임신 초기에서 말기로 갈수록 중간 정도에서 발현의 정도가 강해졌으며, 탈락막의 경우도 임신 초기에서 말기로 갈수록 경증도에서 가장 강한 정도로 발현의 정도가 강해졌다. EGFR의 발현은 임신 초기와 말기 조직에서 영양막세포막과 탈락막 모두에서 관찰되었다. 영양막세포막의 경우 임신 초기에서 말기로 갈수록 중간 정도에서 경증도로 발현의 정도가 약해 진 반면, 탈락막의 경우 임신 초기에서 말기까지 중간 정도로 발현되었다. 이상의 결과를 볼 때 임신주기에 따른 영양세포막과 탈락막에서의 EGF, TGF-a와 EGFR는 영양세포막과 탈락막의 분화와 발달뿐 아니라 배아 발달에 자가분비 또는 측분비 형태로 중요한 작용을 하리라 생각된다. Objective: We studied the expression of epidermal growh factor(EGF) and transforming growth factor(TGF)-a and epidermal growth factor receptor(EGFR) in human trophoblast and decidua at the first and third trimester. Methods: To confirm the expression of EGF, TGF-a and EGFR immunohisochemically in human trophoblast and decidua, we used monoclonal antibodies to EGF, TGF-a and EGFR. Results: Immunohistochemical stainings using anti-EGF, anti-TGF- a and anti-EGFR antibodies showed a specific stainings in human trophoblast and decidua at the first and third trimester. The staining intensity of EGF in the trophoblast was light to moderate at the first trimester and moderate at the third trimester, and that in the decidua was light to moderate at the first trimester and light at the third trimester. The patterns of expression of TGF- a in the trophoblast and decidua were similar to that seen with EGF in the trophoblast and that of EGFR in trophoblast and decidua were similar to that seen with EGF in decidua. Conclusion: These findings suggest that EGF, TGF-a and EGFR may play an important role in human trophoblast and decidua during gestation.

긴장성 요실금 여성에서 vaginal cone을 이용한 골반저 근육운동에 대한 평가

김진홍(Jin Hong Kim),류순원(Sun Won Yoo),길기철(Ki Cheol Kil),천연희(Yeon Hee Cheon),최형주(Hyoung Ju Choi),이지은(Ji Eun Lee),조현희(Hyun Hee Jo),나종구(Jong Gu Rha),김수평(Soo Pyung Kim) 대한산부인과학회 2001 Obstetrics & Gynecology Science Vol.44 No.3

N/A Defective or inadequate pelvic floor function is important etiologic factor for urinary stress incontinence and uterine prolapse. Pelvic floor muscle exercise is the mainstream of the nonoperative treatment for female stress urinary incontinence. Especially Vaginal cones have been known as a simple and practical means of improving both pelvic floor muscle strength and genuine stress incontinence using biofeedback mechanism. Forty adult women suffering from mild and moderate stress incontincnce were instructed to exercise their pelvic muscles using vaginal cones. They retained cones of increasing weight in the vagina by contracting pelvic floor muscles for 15 minutes twice a day for 4 weeks. The comparison of pelvic floor muscle function before and after the exercise were assessed by the frequency of incontinence, vaginal digital palpation, vaginal pressure measurement and speculm lift test. The results were as follows ; 1. The frequency of incontinence was significantly reduced after the exercise using vaginal cone (P<0.001). 2. Vaginal digital palpation score (strength of vaginal levator muscle) was significantly increased after the exercise using vaginal cone (P<0.001). 3. The vaginal pressure by perineometer was significantly increased after the exercise using vaginal cones (P<0.001). 4. The vaginal lumen during contraction was significantly narrower after the exercise using vaginal cones (P<0.001). 5. The maximal cone weight which patients could hold over 1 minute was significantly increased after the exercise using vaginal cones (P<0.001).

터어키양 안장내 지주막 낭종에 의한 저성선자극호르몬성 저성선증

조현희(Hyun Hee Jo),여경아(Kyeong A Yeo),김진홍(Jin Hong Kim),길기철(Ki Cheol Kil),최형주(Hyoung Ju Choi),류순원(Sun Won Yoo) 대한산부인과학회 2000 Obstetrics & Gynecology Science Vol.43 No.7

Primary amenorrhea due to intrasella arachnoid cyst is a very rare disease and require careful and frequent evaluation because may produce intracranial hemorrhage, elevated intracranial pressure and rapid expansion. Surgical intervention is needed only when visual disturbance, hypopituitarism or enlarging lesion is shown. Thus, we present a case of primary amenorrhea due to intrasella arachnoid cyst which was resected through the transsphenoidal approach.

노화가 난소의 FSHR mRNA 발현에 미치는 영향

김장흡,김진홍,류순원,차정호,류기성,김미란,권동진,임용택,이윤진,조현희 대한산부인과학회 2002 Obstetrics & Gynecology Science Vol.45 No.4

난포의 성장과 배란에 중추적 기능을 하는 뇌하수체 호르몬인 FSH는 G 단백 결합 수용체군에 속하는 FSHR과 결합하여 작용한다. 난소의 노화는 난포의 수와 기능의 감소로 인한 estrogen과 inhibin 생성 감소의 결과로 FSH 상승을 유발한다. FSH 증가에도 불구하고 난소의 반응이 감소되어 있고 estrogen과 inhibin 생성이 저하되는 것이 폐경의 주된 기전으로 추정되므로 난포내 FSHR mRNA 발현 변화의 규명은 폐경 기전을 밝히는데 반드시 필요하다. 저자는 노화 및 혈중 FSH 상승에 따른 FSHR mRNA의 발현 변화를 in situ hybridization 및 QC RT-PCR을 이용하여 연구하였다. 실험 대상은 정상 월경주기를 가진 40세 이하, 40-44세, 45-49세, 50-54세 여성 각각 10명과, 그리고 폐경 이후 10명, 총 50예의 신선 난소조직과 혈액을 채취하여 실시하였다. In situ hybridization은 cloning된 FSHR의 DNA를 이용하여 digoxigenin이 부착된 약 800 bp의 ssRNA probe를 제작하고 파라핀 포매된 절편에서 시행하였으며, 염색정도를 FSH의 영향을 받지 않는 일차 난포 (primary follicle)에서 0, 1+, 2+ 등급으로 비교하였다. QC RT-PCR은 primer (antisense: 5’-GGCCCTGCTCCTGGTCTCTTTG-3’, sense: 3’-AACAGCGGGAGTACCTTCGG-5’)를 제작하여 799 bp의 PCR 산물을 생성토록 하였고, 목적 유전자와 경쟁적으로 작용하는 149 bp가 결실된 DNA competitor를 site-directed mutagenesis를 이용하여 제작한 후 목적 유전자와 함께 PCR하여 RNA 발현양을 비교 정량하였다. 결과는 Pearson 상관분석과 independent t-test를 이용하여 통계처리 하였다. 난포 수의 변화는 연령 증가 (r=-0.934, P=0.01)와 FSH 상승 (r=-0.713, P<0.001)에 따라 역상관 관계로 감소하였다. In situ hybridization에서 FSHR mRNA 발현 정도는 40세 미만에서는 비슷하게 발현되었으나 40세 이후에는 연령 증가와 FSH 상승에 반비례하여 (r=-0.744, P<0.001 과 r=-0.771, P<0.001) 감소하는 소견을 보였으며, 폐경 후의 난소에서는 발현을 볼 수 없었다. QC RT-PCR로 측정한 FSHR mRNA 발현량은 연령군에 따라 40세 미만에서 840.00±516.29, 40-44세에서 240.00±154.91, 45-49세에서 40.00±21.90, 50-54세에서 6.06±4.13, 폐경 후 여성에서 0.48±0.00 fg이었으며, 연령 증가와 FSH 상승에 반비례하여 (r=-0.857, P<0.001과 r=-0.771, P<0.001) 발현량이 감소하였다. 본 연구 결과 40세 이후의 FSH 상승은 난소 호르몬 변화뿐만 아니라 FSHR mRNA의 감소와도 연관되어 있으며, 일차 난포에서 연령에 따른 FSHR mRNA 감소는 FSH와 상관없는 난포 노화 때문이라고 생각된다. 따라서 폐경의 진행은 40세 이후에 이미 시작되며 여러 요인의 복합적인 작용 결과이지만, 그 주된 기전은 FSHR 발현 저하와 이에 따른 성선자극호르몬에 대한 난소의 반응저하로 추정된다. 폐경의 보다 정확한 기전 및 영향 인자 규명을 위하여 본 연구를 기초로 향후 더 많은 연구가 필요하리라 사료된다. FSH is the central hormone for the regulation of ovarian function and acts by binding with specific receptor, FSHR, which is one of the G-protein coupled receptor family. The aging of ovary decreases the number and the activity of follicle, which results in the increase of FSH by reduction of inhibin and estrogen. The study on FSH level and FSHR mRNA expression in the ovary of perimenopausal women is the crucial step for the understanding of the menopausal mechanism. We studied FSHR mRNA expression of ovarian follicle by using in situ hybridization and QC RT-PCR. The fresh ovarian tissues and blood samples were obtained from premenopausal women in mid-follicular stage and postmenopausal women. The experimental samples were grouped as below 40 years old women, 40-44 years old ones, 45-49 years old ones, 50-54 years old ones, and postmenopausal women as negative control. To localize FSHR transcripts by in situ hybridization, we synthesized digoxigenin-labelled ssRNA probe (about 800 bp) and measured the degree of staining as 0, 1+, 2+ in the primary follicles which were independent to FSH effect. To do QC RT-PCR, we synthesized oligonucleotide primers (antisense: 5-GGCCCTGCTCCTGGTCTCTTTG-3, sense: 3-AACAGCGGGAGTACCTTCGG-5) to form the 799 bp sized PCR products. We also synthesized 149 bp deleted DNA competitor by site-directed mutagenesis and then calculated the relative amount of target FSHR mRNA by comparing with competitor after PCR. There were significant reverse relationships between follicular number and aging (r=-0.934, P=0.01), and FSH level (r=-0.713, P<0.001). The similar amount of FSHR mRNA was expressed in the group of below 40 years by in situ hybridization. In the groups of above 40 years, the FSHR mRNA expression decreased progressively according to aging (r=-0.744, P<0.001) and FSH level (r=-0.771, P<0.001). But we could not find FSHR mRNA expression in menopausal ovaries. The amount of follicular FSHR mRNA was measured as 840.00±516.29 for the below 40 years group, 240.00±154.91 for the 40-44 years group, 40.00±21.90 for the 45-49 years group, 6.06±4.13 for the 50-54 years group, and 0.48±0.00 fg in the postmenopausal ovary. The amount of FSHR mRNA decreased with ovarian aging (r=-0.857, P<0.001) and FSH level (r=-0.771, P<0.001). These results demonstrate that the gradual increase of FSH and the decrease of FSHR mRNA expression in older than 40 years women are related to the changes of sex hormones. However the gradual decrease of the FSHR mRNA expression in the primary follicle may be due to the follicular aging itself. Therefore the menopausal transition already starts at the beginning of 40 years and one of the major cause of the menopause may be the reduction of FSHR mRNA expression followed the decrease of ovarian response to gonadotropins. The further studies should be required to elucidate the underlying mechanism and the associated factors of menopause.

여성 생식기에서 난포자극 호르몬 수용체 mRNA의 발현

김장흡,김진홍,류진희,류순원,정미영,손화정,김은중,류기성,차정호 대한산부인과학회 2002 Obstetrics & Gynecology Science Vol.45 No.4

난포의 성장과 배란에 중추적 기능을 하는 뇌하수체 호르몬인 FSH는 G 단백 결합 수용체군에 속하는 FSHR과 결합하여 작용한다. 일반적으로 FSH의 유일한 표적기관은 난소이고 FSHR 유전자 역시 난소에서만 발현된다고 알려져 왔으나 최근 실험 동물에서 난소 외 조직내 FSHR 유전자 발현이 보고되었으며 폐경기 여성의 암발생과도 연관이 있다는 주장이 제기되었다. 따라서 저자들은 인간의 여성 생식기 조직에서의 FSHR 발현 유무를 규명하고 그 의의를 알아보고자 본 연구를 계획하였다. 실험은 정상 월경주기의 난포기에 있는 5명의 여성을 대상으로 난소, 난관, 자궁 체부, 자궁 경부 조직과 함께 혈액을 채취하였다. FSHR mRNA의 발현은 in situ hybridization과 QC RT-PCR을 이용하여 연구하였다. In situ hybridization은 cloning된 FSHR의 DNA를 이용하여 digoxigenin이 부착된 약 800 bp의 RNA probe를 제작하고 파라핀 포매된 절편에서 시행하였다. QC RT-PCR은 primer를 제작하여 (antisense: 5’-GGCCCTGCTCCTGGTCTCTTTG-3’, sense: 3’-AACAGCGGGAGTACCTTCGG-5’) 799 bp의 PCR 산물을 생성토록 하였고, 목적 유전자와 경쟁적으로 작용하는 149 bp가 결실된 DNA competitor를 제작한 후 목적 유전자와 함께 PCR하여 RNA 발현량을 비교 정량하였다. In situ hybridization상 난소 조직에서는 (5예) 일차 난포에서부터 난포의 크기에 비례하여 FSHR mRNA 발현강도가 강해졌으나, 원시난포에서는 전혀 염색되지 않았으며, 난포가 성숙난포로 성장하면서 발현이 더욱 증가하였다. 난관 조직에서는 5예 모두에서 난관의 상피세포에서만 염색되는 소견을 보였고, 자궁 내막, 자궁 근층 및 자궁 경부 조직에서는 모두 발현되지 않았다. QC RT-PCR로 정량한 FSHR mRNA의 평균 발현량은 난소에서 840.00±516.29, 난관에서 240.00±154.91, 자궁 체부에서 6.06±4.13, 자궁 경부에서 5.48±5.00 fg이었다. 본 연구를 통하여 FSHR mRNA는 인간의 난소와 난관 상피에서 주로 발현되었지만 자궁 체부와 자궁 경부 조직에서도 소량의 발현이 관찰되었다. 난소외 여성 생식기에서의 FSHR 유전자 발현의 의의와 그 기능적 역할을 규명하기 위하여 더 많은 연구가 필요하며, 본 연구를 토대로 여성 생식기에서 FSH의 정확한 생리적 기능을 알 수 있을 뿐아니라 나아가서 폐경이후 양성 및 악성 종양화 과정과의 연관성도 밝힐 수 있으리라 사료된다. FSH is the pivotal hormone in the regulation of ovarian function and acts by binding to specific receptor, FSH receptor (FSHR), which is belong to the family of G-protein coupled receptor. It have been considered that ovary is the only target organ of FSH because FSHR mRNA was first detected in ovarian follicles. However expression of FSHR mRNA was also detected on fallopian tube in experimental animal study and it is related wih tumorigenesis in postmenopausal women. In this study, in order to understand the FSH function in female genital organs, the ontogeny of the production profile of FSHR and the pattern of its localization in female genital organs were studied. We obtained the fresh tissues of ovary, fallopian tube, uterine body and uterine cervix with blood samples during proliferative phase in women with regular menstrual cycle. To establish FSHR mRNA expression of human internal genital organ, we studied by using in situ hybridization and quantitative competitive reverse transcription polymerase chain reaction (QC RT-PCR). To localize FSHR transcripts by in situ hybridization, we synthesized digoxigenin-labelled ssRNA probe (about 800 bp) from the cloned FSHR cDNA. For QC RT-PCR, we designed oligonucleotide primers (antisense: 5’-GGCCCTGCTCCTGGTCTCTTTG-3’, sense: 3’-AACAGCGGGAGTACCTTCGG-5’) which produced 799 bp sized PCR products. Simultaneously we synthesized 149 bp deleted DNA competitor by site-directed mutagenesis to quantify target FSHR mRNA expression comparing as internal control. In situ hybridization with digoxigenin-labelled ssRNA probe showed no signal above the background in primordial follicles. FSHR mRNA was first detected in the single layer of cuboidal granulosa cells surrounding primary follicles. As follicular growth progressed, FSHR mRNA expression increased gradually in antral and graafian follicles. Similary, in fallopian tube, the epithelium stained intensly. But FSHR mRNA expression was absent in uterine body including endometrium and myometrium and uterine cervix. Total RNA was extracted and quantitated by QC RT-PCR. The amounts of FSHR transcript measured were 840.00± 516.29 in the ovarian tissue, 240.00±154.91 in the fallopian tube, 6.06±4.13 in the uterine body, 5.48±5.00 fg in the uterine cervix. These experiments demonstrated that FSHR mRNA is expressed in the ovary and fallopian tube, albeit only small amount was expressed in uterine body and cervix. In conclusion, the presence of FSHR mRNA in female internal genital organ with site specific pattern suggested that FSH may have some role in female genital organs during the adult reproductive cycle and may act as an factor in the tumorigenesis. Further study about the functional role and tumorigenesis of FSH should be performed in human internal genital organ.

재생 불량성 빈혈환자에서 동종 골수이식 후 난소기능 회복에 관한 연구

김미란,권동진,임용택,나종구,김장흡,류순원,정기욱,김진홍 대한산부인과학회 2000 Obstetrics & Gynecology Science Vol.43 No.3

목적: 재생 불량성 환자에서 동종 골수이식을 시행하여 높은 완치율을 보이지만 전처치로 실시되는 고농도 화학요법과 전신 방사선 요법등은 심각한 성선 기능 부전을 유발한다. 저자들은 골수 이식 후 전처치 방법에 따른 난소 기능 부전의 빈도 및 회복에 관여하는 주요 인자를 알기 위하여 본 연구를 계획하였다. 연구 방법: 재생 불량성 빈혈을 진단받고 골수이식을 받은 환자로서 단독 항암화학 요법군과 전신 방사선 조사 병합 처치군으로 나누어 이식 후 추적 관찰하였다. 지속적인 무월경시 조기폐경을 진단위해 혈중 FSH 검사를 하고 두군간의 무월경 회복 시기를 비교하였다. FSH 수치가 40mIU/ml 이상시 조기폐경으로 진단하고 호르몬 대체요법을 시행하였다. 통계 방법은 paried t-test를 사용하였다. 결과: 전반적인 난소 기능 회복율은 24명중 70.8% 였으며 모두 단독 항암 요법을 받은 군으로서 전신방사선 조사를 받은 군은 0% 였다. 회복된 군의 회복시기는 골수이식 후 중간값 7.5 개월이었다. 전처치로서 고용량 cytoxan 화학요법 시행시는 14개월까지 100%의 회복율을 보였다. 전신 방사선 조사를 시행한 7명은 모두 19-49개월의 추적관찰 기간까지 무월경 및 조기 폐경의 소견을 보였다. 난소기능 회복군과 비회복군 사이에 나이의 유의한 차이는 없었고 골수 이식시 나이와 회복 속도와는 상관관계가 없게 나타났다. 골수이식 후 12개월째 이후 월경이 돌아온 경우는 FSH가 평균 23IU, LH는 25IU을 보였고, 지속적인 무월경을 보인 경우는 FSH가 평균 67IU, LH는 89IU을 보여 유의한 차이를 나타냈다. 결론: 골수이식 성공률이 높아지면서 장기 생존율도 높아져 골수 수여자의 삶의 질을 향상시키기 위해서는 조기 폐경에 의한 여러 문제점이 예방되어야 한다. 본 연구에서 이식 후 가임기 여성의 난소 기능 회복에 가장 큰 영향을 끼치는 요인은 전신 방사선 투여의 여부이므로 이런 여성에서 골수 이식 후 자연월경을 기다리기 보다는 적극적인 평가와 저용량의 호르몬 대체요법을 시행함이 환자의 조기폐경에 의한 합병증을 줄일 수 있으리라 생각된다. Objective: Ovarian failure is often common complication by the conditioning protocol used for bone marrow transplantation (BMT). To determine the frequency of recovery of ovarian function after allo-BMT and the major factor that predict recovery, we monitored ovarian function in 24 premenopausal women Method: Twenty-four women met the inclusion criteria, which were (1) moderate to severe aplastic anemia before BMT, (2) disease-free at least 18 month after transplantation, (3) age younger than 40 years and more than 3 years after menarche at transplantation and (4) regular menstrual periods before transplantation. Recovery of ovarian function was determined by regular menses without menopausal symptom and sign. we divided conditioning regimen to two groups, Group I : cytoxan alone(n=17), Group II : cytoxan plus total body irradiation (TBI)(n=7). Results: All women became amenorrhea after BMT and the clinical characteristics were not significant between two groups. 17 patients who received only cytoxan all recovered ovarian function between 1 to 14 months(median : 7.28) after BMT. The median age at BMT of women with regained ovarian function was 26 years (range, 21 to 33) versus 30 (range, 21 to 37) for those who did not. The age at transplantation was not significant between two groups in our study and the most predictive independent factor in ovarian recovery is the presence of total body irradiation. None of women who received TBI regained ovarian function during 19-49 month follow up. Conclusion: Gonadal insufficiency due to pre-BMT conditioning is more severe in radiation based regimen than cytoxan alone. therefore, we recommend early hormone replacement therapy in radiation treated women to prevent the complication of premature menopause.