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Candida fermentati SI의 exo-β-(1,3)-glucanase 유전자의 클로닝 및 그 특성
임유미 ( Yu Mi Lim ),김봉기 ( Bong Ki Kim ),김상준 ( Sang Jun Kim ),소재현 ( Jai Hyun So ),김원찬 ( Won Chan Kim ) 한국미생물생명공학회(구 한국산업미생물학회) 2016 한국미생물·생명공학회지 Vol.44 No.3
본 연구에서는 C. fermentati SI가 생산하는 isoflavone 배당체 가수분해 효소를 클로닝하여 염기 서열을 밝힌 뒤 P. pastoris X-33에 형질전환하여 재조합 효소의 과발현을 시켰고, 또한 재조합 isoflavone 가수분해 효소의 효소학적 특성을 조사하였다. 재조합 isoflavone 가수분해 효소의 분자량은 약 50.4 kDa이었으며, Meyerozyma guilliermondii ATCC 6260의 exo-1,3-β-glucanase와 96%로 가장 높은 homology 를 나타내었다. exo-1,3-β-glucanase의 ORF는 pPICZA 벡터로 클로닝 후 P. pastoris X-33으로 형질전환을 하였으며, His6-tag을 이용하여 효소를 정제하였다. 정제된 효소는 citrate phosphate buffer pH 4.5에서 최적 활성을 나타내었으며, 효소의 최적 활성 온도는 40℃로 나타났다. 40℃이상에서는 효소의 활성이 급격하게 감소함을 확인 하였으며, pH안정성을 조사한 결과 비교적 넓은 범위인 4-8 사이에서 80%이상의 활성을 유지하였다. 따라서, 재조합 효소의 과발현을 통해 isoflavone aglycone의 효율적인 생산에 이용할 수 있을 것으로 사료된다. An isoflavone glucosidase that catalyzes the hydrolysis of isoflavone glucosides into glucose and corresponding aglycones was purified from Candida fermentati SI. The N-terminal sequence was determined to be GLNCDYCN. We designed degenerate primers on the basis of these amino acid sequences and successfully cloned the full structural gene sequence of the isoflavone glucosidase using inverse PCR. The exo β- (1,3)-glucanase gene consists of 1227 base-pair nucleotides, encoding a 408-amino-acid sequence that shares 41-96% amino acid homology with other yeast exo-β-(1,3)-glucanases belonging to glycoside hydrolase family 5. The recombinant exo-β-(1,3)-glucanase was expressed in Pichia pastoris X-33, using a pPICZA vector system, and further characterized. The molecular mass of the purified exo-β-(1,3)-glucanase was estimated by SDS-PAGE to be 47 kDa. The optimal pH and temperature were pH 4.5 and 40°C, respectively. The Km values of the purified exo-β-(1,3)-glucanase for daidzin and genistin were 0.12 mM and 0.14 mM, respectively. The Vmax values of the purified isoflavone glucosidase were 945.03 U/mg for daidzin and 835.92 U/mg and for genistin.
임유미(Lim, Yu-mi),신주철(Shin, Ju-cheol) 우리말글학회 2012 우리말 글 Vol.55 No.-
한국어교육의 중ㆍ고급 단계에서와는 달리, 표현과 이해가 제한된 초급 단계에서 노래 가사를 활용해 수업을 하고자 할 때에는 언어적 측면에 대해 더 구체적이고 실효성 있는 고려를 해야 한다. 본고에서는 그 일환으로 나선형 접근의 응용을 통해 노래 가사에 등장하는 문형을 2차로 제시되는 것과 1차로 제시되는 것으로 구분하여 복습과 예습의 관점으로 교수-학습을 구성하여 보았다. 한국어교육에서 나선형 접근은 선형 접근과는 달리 교육 목적에 따라 항상 새로운 항목을 삽입할 수 있다는 점과 반드시 난이도와 빈도 순으로 열거된 문형을 학습하지 않아도 된다는 유용함을 가진다. 나선형 접근의 특징들을 응용하여 노래 가사를 활용한 수업을 할 경우 학습자는 노래가사에서 등장하는 이미 배운 문형에 대해서는 복습을, 그와 연계되어 있으나 교재에서 접하지 않았던 문형과 의미에 대해서는 심화 학습할 수 있다. 이처럼 노래 가사를 활용한 한국어 수업을 진행할 경우에는 등장하는 문형 중 학습 대상 문형을 정확히 선정해야 한다. 실제 수업에의 적용이 이루어지지 않았다는 한계점에도 불구하고, 초급 단계에서 빈번하게 접하는 문제임에도 논의가 미비했던 부분을 다루었다는 점에서 본고는 의의를 지닌다고 본다. 나아가 노래 가사 이외의 실제 텍스트, 이를테면 짧은 시나 수필 같은 문학 작품에도 본고에서 논의한 나선형 접근을 응용해 볼 수 있을 것이다. This essay aims to study how songs could be used practically in primary KFL classes. Nowadays various ways of teaching in KFL classes are developed to attract and enhance more participation of the learners instead of studying with textbooks alone. In particular, the foreign language learning using songs has proved its effectiveness. The songs used in the class must fit for the purpose and the choice of the songs need a full consideration. In order to reduce burdens from learning and heighten learning effect, it makes sense to arrange pedagogical contents in a repetitive and circulating sequence. Here, it is effective to make repetitive learning preparations on spiral structure-oriented educational methods. In this regard, the purpose of this research thesis is to propose effective and substantial spiral educational methods. But, it is significant in that this thesis offers substantial educational methods by structuralizing as spiral structure. It is expected that the study would be conducted in multiple ways and become conducted to an effective and substantial extent, in the real educational field.
고형돈분 처리 시 소나무의 생장반응 및 질소,인산 흡수에 관한 연구
염창호 ( Chang Ho Yeum ),임유미 ( Yu Mi Lim ),채승민 ( Seung Min Chae ),이창헌 ( Chang Heon Lee ) 전북대학교 농업과학기술연구소 2010 농업생명과학연구 Vol.41 No.2
Pinus densiflora Siebold & Zucc. was treated with dried swine excrement at various concentration levels, and their growth reactions and the contents of total kjeldahl nitrogen and total phosphoric acid were analyzed. The results are as follows; 1. When the plants were treated with 0.25% of dried swine excrement, the germination rate of specie was higher than that of the control. However, it showed a tendency to decrease when the treatment concentration got higher than 0.25%. 2. The growth rate of specie was highest when it was treated with 0.25% of dried swine excrement. It tended to decrease with higher treatment concentration than 0.25%. 3. The contents of total kjeldahl nitrogen and total phosphoric acid of Pinus densiflora got higher when the concentration of dried swine excrement increased. The content of total kjeldahl nitrogen got higher in the above ground parts of the plants and the content of total phosphoric acid got higher in the roots. 4. The contents of total kjeldahl nitrogen and total phosphoric acid in the soil were measured before and after the growth experiment of Pinus densiflora treated with dried swine excrement. The contents of nitrogen and phosphoric acid significantly decreased after the experiment. In conclusion, the contents of total kjeldahl nitrogen and total phosphoric acid accumulated in the plants increased as the concentration level of dried swine excrement got higher. The seed germination and plant growth rates were best at 0.25% of dried swine excrement. The treatment of dried swine excrement may bring high effects on increasing the plant growth rate but could damage the plants with higher concentration than they need. Different optimal concentration levels of dried swine excrement for different plants should be found before it is used as fertilizer.
이창헌 ( Chang Heon Lee ),양수지 ( Su Ji Yang ),임유미 ( Yu Mi Lim ) 한국임학회 2014 산림과학 공동학술대회 논문집 Vol.2014 No.-
본 연구는 무등산국립공원을 이용하는 탐방객들을 대상으로 국립공원의 서비스 만족도를 측정하기 위해 원효사, 증심사, 만연사 지구로 나누어 설문조사를 실시하여 분석한 결과이다. 서비스질을 측정하기 위해 신뢰성, 확신성, 유형성, 공감성, 대응성을 기반으로 23개 평가 문항을 구성하였다. 조사 결과 서비스 만족도는 보통(3.24) 정도였으며 증심사와 만연사가 같았고 원효사 지구가 낮았다. 탐방객들은 공원 청소 관리 상태, 문화자원에 대한 관리, 공원 관리자의 용모와 복장에 만족하고 있으나 공원 내 식당 및 기념품점의 가격, 주차료와 문화재 관람료 등을 따로 징수 등에 대하여는 불만을 나타냈다. This study is a result from the survey analysis of service satisfaction in the areas of Wonhyosa, Jeungsimsa and Manyeonsa of Mudeungsan Nat. Park. The survey asked the visitors about 23 questions based on reliability, assurance, tangibles, empathy and responsiveness. The service satisfaction level was middle (3.24). It was same in the areas of Jeungsimsa and Manyeonsa but low in the area of Wonhyosa. The visitors were satisfied with the cleaning status of the park, the culture resource management, and park rangers` appearance and attire. They complained about the food and souvenir prices of restaurants and shops in the park. They were also unhappy that they had to pay the separated fees for parking their vehicles and admission to the cultural assets.