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윤소미,장준호,신일식,이종옥,이종수,Yun, So-Mi,Jang, Jun-Ho,Shin, Il-Shik,Lee, Jong-Ok,Lee, Jong-Soo 한국식품영양과학회 2007 한국식품영양과학회지 Vol.36 No.7
LC-MS/MS법에 의하여 설사성 패류독소 7종(okadaic acid, dinophysistoxin-1, -3, pectebotoxin-1, -2, -6, yessotoxin)의 동시 분석 조건을 확립하였고, 2006년 3월부터 9월까지 매월 5종의 이매패(굴, 진주담치, 반지락, 가리비, 개조개, 6월부터 9월까지는 가리비 대신 피조개)를 정기적으로 통영시장에서 구입하여 분석하였으며, 기존의 마우스 검사법과 비교하였다. 마우스 검사법으로는 총 35종 시료 중 3월의 굴과 진주담치에서 0.05${\sim}$0.1 MU/g의 독성을 나타내었으나, 이미 알려진 설사성 패류독소는 전혀 검출되지 않아 다른 성분에 의한 것으로 판단되었다. 한편, LC-MS/MS법에 의하여서는 6월 진주담치에서 dinophysistoxin-1(DTX1)이 0.05 ${\mu}g/g$ 검출되었으며, 8월의 모든 시료에서 okadaic acid(OA)가 0.01${\sim}$0.02 ${\mu}g/g$ 검출되었다. 이들은 외국의 기준치[0.05 MU/g(일본), OAs(OA+DTX1) 0.16 ${\mu}g/g$(EU)]보다 매우 낮은 함량으로 식품 위생상 안전하였다. Diarrhetic shellfish poisons (DSP) such as okadaic acid (OA), dinophysistoxin-1 (DTX1), pectenotoxin-1(PTX1), PTX2, PTX6 and yessotoxin (YTX) were determined simultaneously by LC-MS/MS and mouse bioassay in the shellfishes (oyster, mussel, Washington purple clam, ark shell, scallop and short necked clam) collected at Tongyeong, from March to September, 2006. Oyster and mussel were found to contain DSP (0.05${\sim}$0.1 MU/g) in March by mouse bioassay; however, no DSP components were detected on the LC-MS/MS. Also, a small amount of DTX1 (0.05 ${\mu}g/g$) in mussel (June) and OA (0.01${\sim}$0.02 ${\mu}g/g$) in 5 species of shellfishes(August) were determined by LC-MS/MS.
미역 추출물로부터 충치 원인균, Streptococcus mutans에 대한 항균물질의 분리 및 동정
윤소미,장준호,이종수,Yun, So-Mi,Jang, Jun-Ho,Lee, Jong-Soo 한국식품영양과학회 2007 한국식품영양과학회지 Vol.36 No.2
건조 미역 10.4 kg을 acetone으로 추출, 여과한 다음 액-액 분배, 각종 크로마토그라피를 통하여 충치원인균, Streptococcus mutans에 대한 항균물질의 한 성분을 분리, 정제하고(160 mg, 수율 $1.5\times10^{-3}$%) 물질을 동정한 결과는 다음과 같다. 건조 미역 30 g 상당량의 추출액을 기준으로 용매 획분별 항균활성을 조사하였을 때, $CHCl_3$층이 73.2%로 가장 강하였고, hexane층이 62.0%이었으며, BuOH층이나 물층은 거의 없었다. 알루미나 칼럼에서는 산성 획분인 1% $NH_4OH:MeOH(1:1)$용매 획분이 81.0%의 항균활성을 나타내었으며, 실리카 칼럼에서는 $CHCl_3:MeOH(95:5)$용매에서 가장 높은 95.5%의 항균성을 나타내었고, ODS칼럼에서는 85% MeOH에서 96.4%의 항균성을 나타내었다. 최종적으로 ODS칼럼에서 95% MeOH를 이동상으로 하여 3개의 물질 S1(10 mg), S2(90 mg), S3(60 mg)을 분리 정제하였다. TLC에서 각 성분은 동일한 Rf값 0.42를 나타내어 동일한 물질로 추정되었으며, 이들을 메칠 유도체화한 성분들은 Rf값이 0.95로 바뀌어 이들 물질이 carboxyl기를 가지는 지방산으로 추정되었다. GC분석에서 표품 지방산과 비교한 결과, 이들은 $C_{18:4,n-3}$ 지방산과 retention time이 일치하였다. 또한, 메칠 유도체의 mass spectrum 분석 결과, m/z 290에 분자 이온 peak가 관측되어 $C_{18:4,n-3}$ 지방산의 methyl 유도체의 분자량과 일치하여, 이 물질을 3,6,9,12-octadecatetraenoic acid(stearidonic acid, $C_{18:4,n-3}$) 지방산으로 동정하였다. An antibacterial substance to the Streptococcus mutans, a causative bacterium for decayed teeth, was isolated from the dried sea mustard, Undaria pinnatifida, and identified by GC and GC/MS. Acetone extract from the sea mustard (10.4 kg), was evaporated and partitioned to 4 fractions such as hexane, chloroform, butanol and water. The most active chloroform fraction were further purified through basic alumina, silicic acid and ODS column, successively, and finally, 3 antibacterial substances were isolated on the HPLC attached ODS column by using 95% MeOH and guided with UV detector (254 nm). Antibacterial substances (total 160mg, yield $1.5\times10^{-3}$%) had the same Rf value (0.42) on the TLC developed hexane diethyl ether acetic acid (80:30:1) and those methyl esters moved to 0.95. They were identified as the same unsaturated fatty acid, $C_{18:4,\;n-3}$ (3,6,9,12-octadecatetraenoic acid, stearidonic acid) compared relative retention times (15.5 min) with authentic fatty acid on the GC chromatogram. It was further confirmed unambiguously on the GC/MS giving molecular ion peak at m/z 290 which coincided with its methyl ester.
HPLC-PDA를 이용한 Amitraz의 분석법 확립 및 검증
윤형준,윤소미,이명헌,손성완,Yun, Hyeong-Jun,Yun, So-Mi,Lee, Myoung-Heon,Son, Seong-Wan 대한수의학회 2008 大韓獸醫學會誌 Vol.48 No.1
In veterinary medicine amitraz has been used as an insecticide to eliminates mites, lice, and ticks in dogs, cats, goats, swine and cattle. The objective of present study was to developed an analytical method using one-step extraction and determination of the amitraz in veterinary drugs by liquid chromatography (LC). The amitraz was analyzed by LC equipped with Waters XTerra RP18 ($4.8{\times}250mm;\;5{\mu}m;\;Waters,\;USA$) analytical column, using 75% acetonitrile (acetonitrile/D.W; 75/25) at 1.0 ml/ min. The UV-VIS detection of amitraz was made at 290 nm. Calibration graphs were linear with very good correlation coefficients ($r^2>0.9999$) from $80{\sim}120{\mu}g/ml$. The limit of detection was $0.09{\mu}g/ml $ and limit of quantification was $0.27{\mu}g/ml $. The method showed good intra-day precision (CV 0.05~0.09%) and inter-day precision (CV 0.06~0.18%).
HPLC-PDA를 이용한 정향(Eugenia caryophyllata) 중의 eugenol 분석법 확립 및 검증
윤형준,윤소미,이명헌,손성완,Yun, Hyeong-Jun,Yun, So-Mi,Lee, Myoung-Heon,Son, Seong-Wan 대한수의학회 2008 大韓獸醫學會誌 Vol.48 No.1
A method for the quantification of eugenol in the medicinal herb Clove was developed and validated. For preparation of sample solutions clove was dried at $60^{\circ}C$ for 2h and ground by mixer and extracted with 95% ethanol for shaking extraction. The elutes were analyzed by HPLC system included a reversed phase column, a isocratic mobile phase of 60% methanol and PDA detector set at 280 nm. Calibration graphs were linear with very good correlation coefficients ($r^2>0.9999$) from $0.0125~1{\mu}g/ml$. The limit of detection per sample injection ($20{\mu}l$) was $0.81ng/{\mu}l$ and limit of quantification was $2.47ng/{\mu}l$. The method showed good intra-day precision (%RSD 0.08 ~ 0.27%) and inter-day precision (%RSD 0.32 ~ 1.19%).
알칼리 처리 및 가열, 저장에 따른 진주담치의 마비성 패류독 성분 특성 및 제독
장준호(Jun-Ho Jang),윤소미(So-Mi Yun),이종수(Jong-Soo Lee) 한국식품영양과학회 2006 한국식품영양과학회지 Vol.35 No.2
독화된 진주담치(blue mussel, Mylilus edulis)를 pH 처리, 온도별 저장 그리고 가열에 의한 마비성 패류독의 독성과 독조성 특성 변화는 다음과 같다. pH 3으로 조절한 시료가 14.1 MU/g(100%)으로 가장 높은 독성이 검출되었고, pH5는 12.9 MU/g(92.1%), pH 7은 9.0 MU/g(63.8%)으로 검출되었으나, 마비성 패류독은 독성이 불안정한 알칼리 조건인 pH 9에서는 3.6 MU/g(25.5%), pH 10은 0.8 MU/g(5.7%)으로 독성이 검출되었다. 저장기간 동안의 독성은 pH(3, 5, 7, 9) 그리고 온도(30, -5, 20℃)에서 5일(19.9~65.3%)까지 현저하게 감소하였으나, 5일 후부터 30일까지는 약간의 독성이 감소하였다. 그리고 더 높은 온도에서 저장에서는 독성이 더 빨리 감소하였다. 대부분의 성분인 C군(C1, C2)과 GTX1,2,3,4, STX 그리고 dcSTX으로 8개의 성분이 검출되었고, 8개의 독성분 중에서 GTX1,4, STX 그리고 dcSTX는 모든 가공조건에서 독성이 감소함에 따라 제일 먼저 감소하였다. 독성이 기준 독성치(4 MU/g)보다 3배 이상이더라도 마쇄된 패류 육에 pH를 알칼리(pH 7이상)로 처리하고, 10분의 가열에 의해 독성을 완전히 제거할 수 있었다. Changes of paralytic shellfish poison (PSP) contents, toxicity and toxin composition with pH and storing periods at different temperature in toxic blue mussel, Mytilus edulis, were tested by using fluorometric HPLC method. Toxicity at pH 3 was the highest as 14.1 MU/g (100%) and showed 12.9 MU/g (92.1%) at pH 5, 9.0 MU/g (63.8%) at pH 7, 3.6 MU/g (25.5%) at pH 9 and 0.8 MU/g (5.7%) at pH 10 which suggested PSP was unstable at alkaline conditions. The decrease in toxicity during storage days was depend on pH and temperature. The toxicity markedly decreased until during the first 5 day storage (19.9~65.3%) at all pH (3, 5, 7, 9) and temperature (30, 5, -20℃), but, slightly decreased after then till to 30 days. C group toxin (C1 and C2) was the major components and other toxins such as GTX1,2,3,4, STX and dcSTX were detected. Among the 8 toxins, GTX1,4, dcSTX and STX were firstly decreased according to the decreasing the toxicity at all processing conditions. The toxicity in blue mussel (14.1 MU/g) were able to remove by heating over 10 minutes at pH higher than 7.