Involvement of Kupffer Cell in $CCl_4$ induced Liver Injury: The Role of Calcium

양미라,Yang, Mie-Rha The Korean Society of Pharmacology 1996 대한약리학잡지 Vol.32 No.1

사염화 탄소에 의한 과산화 지질 증가 및 간 손상에 calcium 및 Kupffer cell의 역할 및 calcium channel blocker의 간 손상에 대한 방어 효과를 연구하였다. 사염화 탄소는 (1 gm/kg, ig) 간의 malondialdehyde (nmole/gm liver) 및 혈중 AST와 ALT (lU/ml) 활성도의 현저한 증가를 나타내었다. 고 농도의 Retinol (250,000U/kg/day)로 인한 Kupffer cell의 활성 증가는 사염화 탄소에 의한 간 과산화 지질 증가 및 간 손상에 상승 작용을 나타낸 반면, $GdCl_3$ 전처리는 $CCl_4$로 인한 ALT의 증가를 감소시켰다. 한편 Retinol 처치군에 Diltiazem (10mg/kg/day)을 병행하여 처치한 결과, 사염화 탄소에 의한 혈중 AST 및 ALT의 증가를 Retinol 단독 처치군에 비하여 현저하게 억제시킬 수 있었다. 이 결과들이 Retinol 혹은 Diltiazem의 투여에 의한 사염화 탄소가 cytochrome P450에 의한 대사 활성 또는 GSH와 관련된 항산화 기전에 미치는 영향에 기인한 것인가를 규명하기 위하여 cytochrome P450, cytochrome P4502El 활성도, GSH reductase 및 GSH peroxidase 활성도를 측정하였다. 그 결과, Retinol 및 Diltiazem의 전처리는 이들 효소의 활성도에 미치는 영향은 대조군에 비하여 유의한 차이가 없었다. 이상의 실험 결과를 종합하여 보면, 사염화 탄소의 투여에 의한 간 손상은 세포내 calcium의 증가를 가져오며, 이는 이차적으로 Kupffer cell을 활성화 시켜 이미 손상된 간세포의 독성을 증가시켰으며, calcium channel blocker인 Diltiazem의 투여는 사염화 탄소의 간독성을 현저하게 감소시키는 효과를 나타내었다. The hypothesis that calcium provoke $O_2^-$ formation by Kupffer cells and may contribute to carbon tetrachloride $(CCl_4)$ induced liver injury was studied in SD rats. In $CCl_4-treated$ animals, hepatic malonaldehyde (nmole/gm liver) and plasma ALT (IU/ml) levels elevated significantly from $119.63{\pm}13.00$ to $268.97{\pm}14.82$ and from $17.3{\pm}0.18$ to $806.08{\pm}37.63$, respectively, compared to those in controls. Activation of Kupffer cells with high dose of retinol (250,000 IU/kg/day, po, for 7 day) significantly enhanced ALT levels, while inactivation of Kupffer cells with gadolinium chloride (7.5 mg/kg/day, ip, for 2 day) attenuated the increase of serum ALT level following $CCl_4$ treatment. Diltiazem (10 mg/kg/day, ip for 2 day) given in combination with retinol led to a marked decrease in ALT levels compare to the level in rats treated only with retinol against $CCl_4$ treatment. In order to determine any alterations in cytochrome P450 activities, the P450 content and the CYP2E1 activity were measured and all $CCl_4-treated$ rats showed significantly lower levels compared to those in controls and vehicle-treated animals. There were significant increases in glutathione peroxidase in all $CCl_4-treated$ rats except diltiazem treated groups. No difference was found among untreated and vehicle-treated rats. It is concluded that Kupffer cells contribute to $CCl_4-induced$ liver injury and that calcium antagonist attenuated the increased $CCl_4-induced$ liver injury due to activation of Kupffer cells.

사염화 탄소에 의한 간손상에 있어 Kupffer cell 칼슘의 역할

양미라(Mie-rha Yang) 대한약리학회 1996 대한약리학잡지 Vol.32 No.1

사염화 탄소에 의한 과산화 지질 증가 및 간 손상에 calcium 및 Kupffer cell의 역할 및 calcium channel blocker의 간 손상에 대한 방어 효과를 연구하였다. 사염화 탄소는 (1 gm/kg, ig) 간의 malondialdehyde (nmole/gm liver) 및 혈중 AST와 ALT (lU/ml) 활성도의 현저한 증가를 나타내었다. 고 농도의 Retinol (250,000U/kg/day)로 인한 Kupffer cell의 활성 증가는 사염화 탄소에 의한 간 과산화 지질 증가 및 간 손상에 상승 작용을 나타낸 반면, GdCl₃ 전처리는 CCl₄로 인한 ALT의 증가를 감소시켰다. 한편 Retinol 처치군에 Diltiazem (10mg/kg/day)을 병행하여 처치한 결과, 사염화 탄소에 의한 혈중 AST 및 ALT의 증가를 Retinol 단독 처치군에 비하여 현저하게 억제시킬 수 있었다. 이 결과들이 Retinol 혹은 Diltiazem의 투여에 의한 사염화 탄소가 cytochrome P450에 의한 대사 활성 또는 GSH와 관련된 항산화 기전에 미치는 영향에 기인한 것인가를 규명하기 위하여 cytochrome P450, cytochrome P4502El 활성도, GSH reductase 및 GSH peroxidase 활성도를 측정하였다. 그 결과, Retinol 및 Diltiazem의 전처리는 이들 효소의 활성도에 미치는 영향은 대조군에 비하여 유의한 차이가 없었다. 이상의 실험 결과를 종합하여 보면, 사염화 탄소의 투여에 의한 간 손상은 세포내 calcium의 증가를 가져오며, 이는 이차적으로 Kupffer cell을 활성화 시켜 이미 손상된 간세포의 독성을 증가시켰으며, calcium channel blocker인 Diltiazem의 투여는 사염화 탄소의 간독성을 현저하게 감소시키는 효과를 나타내었다. The hypothesis that calcium provoke O<Sub>2</sub>^- formation by Kupffer cells and may contribute to carbon tetrachloride (CCl₄) induced liver injury was studied in SD rats. In CCl₄-treated animals, hepatic malonaldehyde (nmole/gm liver) and plasma ALT (IU/ml) levels elevated significantly from 119.63 ± 13.00 to 268.97 ± 14.82 and from 17.3 ± 0.18 to 806.08 ± 37.63, respectively, compared to those in controls. Activation of Kupffer cells with high dose of retinol (250,000 IU/kg/day, po, for 7 day) significantly enhanced ALT levels, while inactivation of Kupffer cells with gadolinium chloride (7.5 mg/kg/day, ip, for 2 day) attenuated the increase of serum ALT level following CCl₄ treatment. Diltiazem (10 mg/kg/day, ip for 2 day) given in combination with retinol led to a marked decrease in ALT levels compare to the level in rats treated only with retinol against CCl₄ treatment. In order to determine any alterations in cytochrome P450 activities, the P450 content and the CYP2E1 activity were measured and all CCl₄-treated rats showed significantly lower levels compared to those in controls and vehicle-treated animals. There were significant increases in glutathione peroxidase in all CCl₄-treated rats except diltiazem treated groups. No difference was found among untreated and vehicle-treated rats. It is concluded that Kupffer cells contribute to CCl₄-induced liver injury and that calcium antagonist attenuated the increased CCl₄-induced liver injury due to activation of Kupffer cells.

관련성 위장질환 치료를 위한 계란항체 ( Immunoglobulin Yolk ) 의 기대 효과

노임환(Im Hwan Roe),남승우(Seung Woo Nam),양미라(Mie Rha Yang),명나혜(Na Hye Myung),김정택(Jung Taik Kim),신지현(Ji Hyun Shin) 대한소화기학회 2002 대한소화기학회지 Vol.39 No.4

Background/Aims: The importance of eggs as a source of specific antibodies (IgY) is well recognized. We investigated the efficacy of specific anti-Helicobacter pylori (H. pylori) IgY antibody against H. pylori infection. Methods: Specific anti-H. pylori IgY was obtained from the hens which were immunized with whole cell lysate (200 킽/mL) of H. pylori. Specific IgY was recognized by SDS-PAGE and the activity was determined by ELISA. After administration of specific IgY, the growth changes of H. pylori, the response of H. pylori-infected KATO III and AGS cell, and in vivo effect of IgY on H. pylori-infected gerbil model were determined. Results: Specific IgY inhibited the growth of H. pylori by 90% within 6 hours in contrast to no inhibitory effect on the growth of E. coli or L. salivarius. After treating with 10 mg/mL of specific IgY, H. pylori-infected (107 CFU/mL) KATO III and AGS cell did not proliferate. Bacterial adhesion was definitely decreased in H. pylori-infected AGS cell treated with 10 mg/mL of IgY. Oral administration of 10 mg/mL of IgY daily for 30 days remarkably inhibited gastric inflammation in H. pylori-infected gerbil, whereas 1 mg/mL of IgY did not reduce gastric inflammation. Conclusions: Specific anti-H. pylori IgY might provide promising effects on the H. pylori-associated gastric diseases. (Korean J Gastroenterol 2002;39:260-268)

급성 췌장염 동물모델에서 칼슘차단제인 Nicardipine의 항산화효과에 대한 연구

서정진(Jung Jin Seo),이형근(Hyung Geun Lee),박종권(Jong Kwon Park),김정택(Jung Taik Kim),박동국(Dong Kook Park),정민(Min Chung),노임환(Im Hwan Roe),양미라(Mie Rha Yang) 대한외과학회 1998 Annals of Surgical Treatment and Research Vol.55 No.4

백서에서 Sodium Taurocholate로 유발된 급성 괴사성 췌장염의 Oxidative Stress의 역할

전경철(Kyung Chul Jeon),이형근(Hyung Geun Lee),박종권(Jong Kwon Park),김정택(Jung Taik Kim),류진우(Jin Woo Ryu),박동국(Dong Kook Park),정민(Min Chung),양미라(Mie Rha Yang) 대한외과학회 1998 Annals of Surgical Treatment and Research Vol.55 No.2

Effects of Modulators of Cytochrome P450 IIE1 on Hepatic Lipid peroxidation and Glutathione Dependent Enzymes in Rats

Yang, Mie-rha 단국대학교 1994 論文集 Vol.28 No.-

Cytochrome P450 IIEI (CYP2E1)의 inducer인 ethanol 및 acetone의 glutathione (GSH) 관련 효소에 미치는 영향과 지질 과산화 반응과의 연관성을 총 열량의 36%를 ethanol 혹은 dextrin (대조군 및 acetone 처치군)을 함유 liquid diet를 주어 사육한 쥐에서 연구하였다. Ethanol 처치군의 경우 cytosolic GSH S-transferase, GSH peroxidase 및 GSSG reductase의 대조군에 비하여 유의성 있는 증가를 나타내었다. 지질 과산화반응의 marker로 thiobarbituric acid를 측정한 결과 이의 GSH 관련효소와 연관성은 나타나지 않았다. 그러나 본 실험의 결과, CYP2E1의 strong inducer인 acetone에 의한 antioxidant systems (GSH, GSH peroxidase, GSH S-transferase, GSSG reductase)의 현저한 증가는 CYP2E1의 induction에 따른 oxidative stress의 증가에 따른 adaptational changes로 중요한 의미를 갖음으로 사료된다.

위암 환자로부터 분리된 Helicobacter pylori 균주들의 cagA 유전자의 Mosaicism과 이에 따른 위암 발생 역할에 관한 연구

신지현,이종화,이문숙,남승우,김정택,노임환,양미라,유경애,안지인 대한소화기학회 2001 대한소화기학회지 Vol.37 No.1

Background/Aims: cagA gene might be implicated in the carcinogenesis of gastric adenocarcinoma. We studied the cagA status of Helicobacter pylori (H. pylori) isolates from the patients with gastric cancer and benign gastroduodenal diseases to investigate the mosaicism in cagA gene and its role in the carcinogenesis. Methods: cagA status was determined by polymerase chain reaction (PCR) using 3 different primer sets for cagA gene. The first cagA primer set amplified a 1318 bp fragment from the N-terminal (nucleotide 1059-2377). The second primer set and the third primer set amplified a 297 bp fragment (nucleotide 2288-2585) and a 1518 bp fragment (nucleotide 3086-4604) from the C-terminal of cagA gene, respectively. Western blot analysis was also performed for CagA protein. Results: The expected 297 bp PCR amplicons for cagA gene was identified in most of all H. pylori strains, and this fraction was not related with gastric cancer. The 1318 bp fragment amplified by the PCR was found in 90.3% (28/31 cases) of gastric cancer, 51.7% (15/29 cases) of gastric ulcer, 50.0% (17/34 cases) of duodenal ulcer, and only in 8.3% (3/36 cases) of gastritis. The 1518 bp PCR amplicon was only in 1.5% (2/130 cases) of all cases. The size of CagA protein in cagA positive strains was almost similar. Conclusions: It is suggested that mosaicism in cagA may exist and particularly, the distinct cagA gene fragment associated with gastric cancer may exist.