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Kyung Ho Han(한경호),Eun Young Choi(최은영),Yeon-Hee Hong(홍연희),Jae Yeong Kim(김재영),In Soon Choi(최인순),Sang-Suk Lee(이상석),Yun Jaie Choi(최윤재),Kwang Keun Cho(조광근) 한국생명과학회 2015 생명과학회지 Vol.25 No.4
소의 질을 평가하기 위해서는 중요한 인자인 근육내 지방(또는 마블링)을 조절하는 분자를 연구해야 한다. cDNA microarray를 사용하여 등지방 조직과 최장근의 유전자발현 차이를 비교하였다. 이 연구를 통해, 우리는 한우의 지방조직에 1211개, 근육조직에서 1346개의 특이 유전자를 확인하였다. bovine chip은 지방조직의 920개 유전자와 근육조직의 760개 유전자로 이루어진 1680개의 특이 유전자로 구성되어있다. 이 실험에서 Microarray 분석은 등지방조직(Cy3)과 최장근(Cy5)의 유전자 발현에 있어서 큰 차이를 보여준다. 차이를 보이는 많은 특이유전자 중에서, 12-리폭시게나아제 유전자와 프로스타글란딘 D 합성효소는 근육내 지방의 축적을 조절하는 중요한 효소이다. 본 연구에서, 일반적으로 발현되지만 한우의 근육과 지방 조직에서 차이를 보이는 많은 유전자를 hybridization 분석을 통해 발견하였다. 선택된 유전자의 발현 수준은 반정량적 RT-PCR을 통해 확인하였고, 그 결과는 cDNA microarray와 유사하였다. To investigate the molecular events of controlling intramuscular fat (or marbling), which is an important factor in the evaluation of beef quality, we performed cDNA microarray analyses using the longissimus dorsi muscle and back fat tissues. For this study, we constructed normalized cDNA libraries: fat tissues in native Korean cattle (displaying 1,211 specific genes), and muscle tissues in native Korean cattle (displaying 1,346 specific genes). A bovine cDNA chip was constructed with 1,680 specific genes, consisting of 760 genes from muscle tissues and 920 genes from fat tissues. The microarray analysis in this experiment showed a number of differentially expressed genes, which compared the longissimus dorsi muscle (Cy5) with back fat tissue (Cy3). Among many specific differentially expressed genes, 12-lipoxygenase (oxidizing esterified fatty acids) and prostaglandin D synthase (differentiation of fibroblasts to adipocytes) are the key candidate enzymes that should be involved in controlling the accumulation of intramuscular fat. In this study, differentially and commonly expressed genes in the muscle and fat tissues of native Korean cattle were found in large numbers, using the hybridization assay. The expression levels of the selected genes were confirmed by semi-quantitative RT-PCR, and the results were similar to those of the cDNA microarray.
Hong Gu Lee(이홍구),Young Cheng Jin(김영성),Hisashi Hidari,Yun Jaie Choi(최윤재),Seon Ku Kim(김선구),Teak Soon Shin(신택순),Byung Uuk Cho(조병욱),Yong Gyun Kim(김용균),Keun Ki Kim(김근기),Hong Joo Son(손홍주),Sang Mong Lee(이상몽) 한국생명과학회 2008 생명과학회지 Vol.18 No.7
본 연구는 정상으로 단백질을 급여한 거세면양에 있어서 에너지 첨가가 GHRP-2투여에 대한 혈장 IGF-1 및 IGFBPs에 대한 반응과, 고에너지 급여에 따른 GHRP-2투여가 hepatic GH 수용체에 미치는 영향을 검증하기 위하여 실시하였다. 시험 결과 HENP (CP 0.34 ㎏, TDN 1.83 ㎏/day DM intake)처리기간 동안 혈장 IGF-1 과 39-42kDa IGFBP-3수준은 LENP (CP 0.32 ㎏, TDN 0.87 ㎏/day DM intake)기간에 비하여 높게 나타났으나 (P<0.05), 혈장 34 kDa IGFBP-2와 24 kDa IGFBP-4는 영양처리에 의해 영향을 받지 않았다. 각 영양처리 기간동안 GHRP-2 (12.5 μg/㎏ body weight/day)투여는 혈장 GH 반응이 촉진되었으며(P<0.05), 혈장 GH 평균 함량과 AUC증가에 있어서는 LENP처리 기간에 비하여 HENP처리기간에서 유의적으로 높게 나타났다(P<0.01). 특히 HENP에서 7일간 GHRP-2투여에 의한 일중 혈장 IGF-1 변화양상을 조사한 결과 투여 2, 6 및 7일에서 뚜렷한 증가양상을 보였다(P<0.05). 이에 반하여 LENP에서는 오직 투여 3일째에서 Saline구에 비하여 유의적인 증가를 확인하였다(P<0.05). IGFBPs의 ligand blotting 결과 HENP구에서 혈장 39-43 kDa IGFBP-3의 수준의 증가가 투여 6일과 7일에서 관찰되었으나 혈장 IGFBP-2수준은 두 영양처리시기에서 유의적인 차이를 관찰하지 못했다. 아울러 HENP구에 있어서 간세포막에 <SUP>125</SUP>I-oGH의 결합력을 측정한 결과 GHRP-2투여에 의한 영향은 관찰되지 않았다. 이와 같은 결과는 거세면양에 있어서 단백질과 에너지 사이의 영양적 균형은 내인성 GH/IGF-1 axis는 물론 혈장 IGFBP-3수준의 변화에 영향을 미치고 있음을 시사한다. The purpose of this study was to determine the effect of energy supplement on responses of plasma insulin-like growth factor (IGF)-1 and IGF binding proteins (IGFBPs) to growth hormone-releasing peptide-2 (GHRP-2) administration in normal protein-fed wethers, and to observe the effect of GHRP-2 treatment on hepatic growth hormone (GH) receptor in well-fed wethers. Plasma IGF-1 and 39-42 kDa IGFBP-3 during the HENP (CP, crude protein 0.34 and TDN, total digestible nutrients 1.83 ㎏/day DM, dry matter intake) treatment period were higher than in the LENP (CP 0.32 ㎏ and TDN 0.87 ㎏/day DM intake) period (P<0.05). The response of GH was stimulated by GHRP-2 (12.5 ㎍/㎏ body weight/day) administration during both of the feed treatment periods (P<0.05). The area under curve (AUC) increment and average concentration of GH (0-180 min) with GHRP-2 administration was higher during HENP treatment than LENP treatment (P<0.01). During the HENP treatment period from day 1 to day 7 of twice daily GHRP-2 treatment, the plasma IGF-1 increment was increased on days 2, 6 and 7 of GHRP-2 administration (P<0.05). On the basis of ligand blotting, the proportions of plasma 39-43 kDa IGFBP-3 during the HENP treatment period only showed a significant difference on days 6 and 7 with GHRP-2 administration. No significant difference in the specific binding of 125I-labeled oGH to hepatic membranes was detected between the saline and GHRP-2 treatments of the HENP-fed wethers. These results suggest that the nutritional balance between energy and protein may affect the endogenous GH / IGF-1 axis as well as plasma IGFBP-3 levels.
미역부산물의 첨가가 홀스타인 비유우의 비유성적과 내분비생리에 미치는 영향
이홍구,홍중산,이철호,허성웅,김훈,김명국,이현준,최낙진,고태송,최윤재,Lee, H.G.,Hong, Z.S.,Li, Z.H.,Xu, C.X.,Jin, X.,Jin, M.G.,Lee, H.J.,Choi, N.J.,Koh, T.S.,Choi, Yun-Jaie 한국축산학회 2005 한국축산학회지 Vol.47 No.4
본 시험은 미역분말의 첨가가 홀스타인 젖소의 유생산과 내분비계에 미치는 영향을 규명하기 위하여 실시하였다. 기초사료에 미역분말을 1일 두당 800g 수준으로 급여하여 대조구와 비교하였다. 사료건물섭취량은 처리에 의한 영향을 받지 않았고 비유말기 산유량은 대조구에 비해 일일 6.25kg 이나 많게 유의하게 증가하였다(p<0.05). 하지만 유성분은 처리구간에 유의한 차이를 나타내지 않았다. 대조구의 체세포수는 유동적이었지만 처리구의 체세포수는 시험 종료 시 $10^5$개/ml로 시험개시에 비해 무려 53.77%의 감소효과를 보여 탁월한 체세포 감소효과를 나타내었다. 미역분말의 첨가가 혈중 면역글로부린의 함량에는 영향을 주지 않은 것으로 나타났다. 비유에 직접적인 영향을 미치는 IGF-1의 혈장농도는 미역처리구에서 유의성 있게 증가하였으며 비유와 직접적인 관련이 있는 또 다른 호르몬인 $T_3$ 와 $T_4$의 농도도 유의적으로 증가하는 양상을 나타내었다. 지질대사산물인 TC, HDL-C와 LDL-C의 농도는 모두 처리구에서 증가하는 양상을 나타냈다. 이와 같이 미역부산물의 사료 중 첨가는 유생산량의 증가를 보였는데 이는 혈중 비유관련 호르몬의 분비에 영향을 준 결과로 확인된 바 젖소사료자원으로서의 응용가치가 클 것으로 사료된다. This study was conducted to investigate effects of the brown seaweed waste(BSW) supplementation on milk production and related endocrine response in serum in Holstein dairy cows. A total of 14 Holstein dairy cows(initial mean live weight 625kg, average lactation days 225, Reproduction 2.4) were randomly allocated into control(basal diet) and treatment groups (4% BSW/basal diet) with 7 replications for 90 days. Dry matter intake was not affected by brown seaweed waste supplementation, but daily milk yield(kg) at the last experiment significantly increased (6.25kg) in treatment group compared with control group(p<0.05) at the last experiment. The plasma insulin-like growth factor(IGF)-1, triiodothyronine($T_3$) and thyroxine($T_4$) levels were significantly increased in treatment group compared with control group(p<0.05), although the concentration of plasma growth hormone(GH) was not significantly different. Milk composition was not significantly different between groups. The somatic cell count(SCC) in milk were significantly reduced in treatment group compared with control group(p<0.05), but antibodies(total IgG, G1, G2) were not significantly different between groups. Therefore we strongly believe that the increased milk yield is related to metabolic hormones as IGF-1, $T_3$ and $T_4$ and the mechanism of reducing SCC in milk must do more study related nonspecific immunsystem in the future.
반추가축영양 : 발효 미역부산물이 반추위 발효특성에 미치는 영향
홍중산 ( Zhong Shan Hong ),이홍구 ( Hong Gu Lee ),이철호 ( Zhe Hu Lee ),김영성 ( Yong Cheng Jin ),이상범 ( Sang Bum Lee ),강한석 ( Han Sck Kang ),최윤재 ( Yun Jaie Choi ) 한국동물자원과학회(구 한국축산학회) 2011 한국축산학회지 Vol.53 No.4
DS-01 균주 접종에 의한 미역부산물 발효산물이 분해 정도, 영양소 변화 및 미생물오염 정도에 관한 관찰과 반추위 발효성상에 미치는 영향을 관찰하여 미역부산물의 저장성 확보와 반추동물의 사료로서의 이용가능성을 발효단계에 따라 조사하였다. DS-01 균주와 함께 배양된 미역부산물은 발효 1개월부터 현저한 분해율을 보이기 시작했다. 미역부산물중의 영양성분 함량은 발효와 함께 커다란 변화를 나타내지 않았으며 모든 처리에서 반추동물에 병원성을 가지는 미생물은 검출되지 않았다. In vitro 실험에서는 발효시간 및 첨가농도에 따른 pH 변화, 암모니아태 질소와 휘발성지방산의 생성에 대한 영향을 조사하였다. pH의 경우 6% FBSW는 1개월 및 2개월 발효조건에서 대조구, 2% 및 4% FBSW 보다 pH 값이 증가한 것을 나타내었다. 암모니아태 질소의 생성에 미치는 영향을 보면 1개월 FBSW 경우 실험 3시간 경과 후가 대조구에 비해 높은 농도를 나타내었지만 시간이 경과에 따라 대조구보다 감소한 경향을 보인다. 2개월 FBSW의 경우 4% 첨가량만 24시간 경과 후 타 처리구에 비해 높은 농도를 나타내었다. 특히, 전 발효기간 동안 6% FBSW 처리구가 발효 3시간과 24시간 경과 후 타 처리구에 비하여 낮게 나타나는 경향을 보였다. 휘발성지방산의 경우 발효 1개월 미역부산물의 4, 6% FBSW 첨가구가 6시간 경과 후 총 VFA의 농도가 현저하게 증가하는 양상을 나타내었고(p<0.05), 발효 2개월 미역부산물의 2, 4% FBSW 첨가구가 9시간 경과 후 총 VFA 농도가 6% FBSW 첨가구에 비해 현저하게 증가하는 양상을 나타냈다(p<0.05). This study was conducted to investigate the effects of brown seaweed waste (BSW) fermented with DS-01 microbe on in vitro rumen microbial fermentation. In in vitro trial, three different diets supplemented with 2%, 4%, 6% BSW fermented with DS-01 either for one month or two months was tested at 3 h, 6 h, 9 h, 12 h, and 24 h incubation. The chemical composition (CP, EE, CF, and ash) between brown seaweed waste (BSW) and fermented BSW (FBSW) were not different. The contamination of pathogenic microbes was not detected in FBSW. The pH value tended to be higher with 6% level of supplementation of FBSW for one month than other treatments. The pH at 24 h was significantly higher in FBSW than that of treatments without FBSW (p<0.05). In FBSW for two months, the pH value in 6% FBSW at 3 h in vitro fermentation tended to be higher than 2% or 4% FBSW treatments (p=0.0540), but there were no differences in other fermentation times. Although the concentration of NH3-N of BSW fermented for one month was higher than control at 3h (p<0.05), the volatile fatty acid values were significantly increased in 4 and 6% FBSW fermented for one month at 6 h incubation (p<0.05). In BSW fermented for two months, the volatile fatty acid values were significantly decreased in 6% treatment at 9h (p<0.05). As a result of in vitro trial, it was recommended that the 2~4% supplementation level of brown seaweed waste fermented with DS-01 microbe for two months could be utilized for in vivo trial in ruminants.
생쥐 유선에서의 Bcl-2 family 결합 단백질의 클로닝과 특성 규명
최윤재 서울대학교 농업개발연구소 2001 농업생명과학연구 Vol.5 No.-
We have screened mouse mammary gland cDNA library to search for A1 or BLK interacting protein using yeast two-hybrid system and obtained genes, mouse ING1 homolog (mINGh) and mouse DNA amplified in mammary carcinoma 1 (mDAM1), respectively. Cell death of HC11 cells, induced with serum starvation, was enhanced by mINGhs and the action of mINGhs was inhibited by A1 protien. mDAM1 also promoted cell death on the condition of serum starvation and transient coexpression of mDAM1 and BLK showed increased cell death compared to BLK expression alone in NMuMG cells. These results indicated that A1 can inhibit cell death not only via well known pathway related to Bcl-2 family but also through direct interacting with mINGh in the mammary epithelial cells and mDAM1 promotes mammary epithelial cell death and pro-apoptotic function of BLK.