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- 저자 : Won Jay Song (검색결과 59 건)
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HBsAg양성 원발성간암에 있어서 HBV-DNA표지자의 PCR성적
이원길,김재식,김정철,서장수,강은자,이중원,김기연,송경은,양정선 慶北大學校 醫科大學 1997 慶北醫大誌 Vol.38 No.2
목적 : HBV-DNA를 정성적 그리고 정량적으로 검출함으로써 강한 전염성과 높은 유병율로 인해 사회적으로 문제가 되는 B형 간염과 원발성간암의 연관성을 알아보고자 하였다. 대상 및 방법 : B형 간염 표면항원(HBsAg)이 양성을 보이는 원발성간암 환자 38명을 대상으로 하였으며 HBV-DNA 중합효소연쇄반응법을 이용하여 정성적 검출 그리고 luminometry법을 이용하여 정량적 검출을 하였다. 결과 : HBV-DNA 중합효소연쇄반응법과 luminometry법의 양성율은 각각 57.9%, 39.5%를 보였다. 그리고 HBsAg과 HBeAg가 동시에 양성을 보인 11명에서는 HBV-DNA 양성율이 81.8%를 보였다. 결론: HBV-DNA 중합효소연쇄반응법의 양성율이 luminometry법에 의한 양성율보다 높은 결과를 보였고 HBV-DNA 검사는 B형 간염을 조기 발견하고 치료하여 만성간질환으로의 진행을 예방하고 특히 원발성간암의 병율을 낮추는데 많이 기여할 것으로 사료되었다. Background : Primary hepatocellular carcinoma(PHCC) is the most common malignant neoplasm in most countries of Asia and Africa. Hepatitis B virus is known to be strongly related to the pathogenesis of PHCC. HBV-DNA PCR and HBV-DNA quantitation assay were attempted to apply to 38 cases of HBsAg positive PHCC. Methods : The ordinary HBV markers(HBsAg, anti-HBs, anti-HBc(Ig-G and -M), HBeAg and anti-HBe) were examined with ELISA. Qualitative screening of HBV-DNA PCR and HBV-DNA quantitation-luminometric measurement were performed. Results : Among 38 cases of HBsAg positive PHCC, positive rates for HBV DNA-PCR and HBV DNA-quantitation were 57.9% and 39.5%, respectively. And 11 cases which were positive for both HBsAg and HBeAg showed 81.8% positive rate in HBV-DNA PCR. Conclusion : For 38 cases of HBsAg positive PHCC, the positive rate for HBV DNA-PCR was higher than HBV-DNA quantitation-luminometry. In HBV-DNA PCR, both HBsAg and HBeAg positive cases showed high positive rate.
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이미경,송경은,이원길,김재식,박의현,전재은 경북대학교 병원 1997 경북대학교병원의학연구소논문집 Vol.1 No.1
연구배경: 최근에 지혈응고 및 섬유소 용해기능의 손상이 허혈성 심질환의 병인론에 중요한 역할을 한다고 알려져 왔다. 이에 저자들은 허혈성심질환군과 정상대조군에서 PT, aPTT, 섬유소원, α2-antiplasimin, tPA, PAI-I, AT Ⅲ, protein C, XL-FDP를 측정하여, 이들이 허혈성심질환의 발병에 미치는 영향 및 중요성에 연구하고, 혈전용해제 투여전과 투여후의 결과를 비교 분석하여 이들의 검사지표로서의 임상적인 유용성에 관하여 알아보고자 하였다. 방법: 39예의 정상대조군과 급성 심근경색 및 협심증으로 진단된 40예의 환자군에서 platelet-poor-plasma를 얻어 PT, aPTT, 섬유소원은 ELECTRA 1000C(Medical laboratory automation, Inc., USA)를 이용하여 측정하였고, α2-antiplasmin는 색소법으로 SPECT-ROLYSER α2-antiplasmin(Biopool AB, Canada)kit를, tPA와 PAI-1은 면역효소법으로, Protein C는 응고법으로 Bioclot?? Protein C(Biopool AB, Canada) kit를 사용하여 측정하였다. XL-FDP는 라텍스응집법으로 DIMERTESTR Ⅱ Latex Kit(AGEN Biomedical Limited, Australia)를 이용하여 측정하였다. 결과: 환자군과 정상대조군의 비교에서 에서 PT, aPTT, 섬유소원, PAI-1 및 ATⅢ는 두 군간에 통계학적으로 유의한 차의를 나타내었고 환자군에서는 62.5%에 해당하는 25예에서 증가된 소견을 보여 주었다. 환자군에서 혈전용해제 투여전과 투여후의 결과비교에서 PT와 섬유소원에서 유의한 차이가 있었으며, α2-antiplasmin, PAI-1 및 protein C는 유의하지는 않았지만 감소하는 경향을 나타내었다. 혈전용해제 투여후 1 시간결과를 대조군과 비교해 볼 때 PT와 tPA는 유의하게 증가하였고 섬유소원과 ATⅢ는 의의있게 감소하였다. 7일째 결과는 모든 지수에서 정상대조군과 유의한 차이가 없었다. 결론: PT, 섬유소원의 검사가 허혈성 심질환의 진단과 경과관찰에 도움을 줄 수 있으며, tPA, PAI-1, ATⅢ등과 같이 관찰함으로서 진단뿐만 아니라 예후와 재발위험성에 대한 예측 등 임상적으로 중요한 검사지표로서의 가능성을 나타냄을 알 수 있었다. Background: Many studies have shown that thrombus formation has important role in the pathogenesis of ischemic heart disease(IHD) and impaired fibrinolysis is associated with an increased risk of myocardial infacrtion. Forty patients with IHD and 39 normal controls were studied about blood coagulation, fibrinolytic, inhibitory proteins to evaluate their usefulness in diagnosing, predicting prognosis and monitoring after thrombolytic therapy in IHD. Method: Platelet-poor-plasma were obtained from the 3.8% trisodium citrate treated blood and prothrombin time(PT), activated partial thromboplastin time(aPTT), firbrinogen, α2-antiplasmin, tPA,PAI-1, antithrombin Ⅲ(ATⅢ), protein C. crosslinked fibrin degradation products(XL-FDP) were measured by appropriate functional or immunological assays. Results: The IHD group showed significant increases in PT,aPTT, fibrinogen, PAI-I and XL-FDP and significant reduction in AT Ⅲ concentration. No significant changes were observed between myocardial infarction and angina pectoris subgroups in the IHD. After thrombolytic therapy, PT and fibrinogen showed significant changes. In comparsion with normal controls, post 1 hour results showed significant changes in PT, fibrinogen, tPA, ATⅢ but no significant changes in post 7 days results. Conclusion: Our findings suggest that measurements of PT and fibrinogen are helpful for diagnosis in patients with IHD. And combined with tPA, PAI-1 and AT Ⅲ, they may be useful test for monitoring after thrombolytic therapy, predicting prognosis and risk of recurrence in IHD patients.
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서상철,은상진,김한길,송경은,서장수,최성만,이원길,김재식,김중명 慶北大學校 醫科大學 1994 慶北醫大誌 Vol.35 No.1
목적 : 결핵균 동정을 위한 중합효소 연쇄반응을 임상병리검사로서 적용하기 위한 기초 실험으로 분석학적 예민도와 특이도를 알아보고 검토된 조건에 의한 중합효소 연쇄반응을 실제 임상 가검물에 적용하기 위함이다. 재료 및 방법 : Ziehl-Neelsen염색 양성인 객담, 뢰벤스타인-젠센(Loewenstein-Jensen) 배지에서 분리된 결핵균 및 M. tuberculosis H37Rv를 비롯한 항산균 표준균주 11주와 비항산균 10주를 사용하여 2가지 DNA의 분리법, 3set 프라이머, 3종류 중합효소, 2가지 미량 원심시험관 및 Easy-Cycler^R(Ericomp사, 미국)와 수조형으로 검사를 시행하여 DNA 증폭 산물을 비교하였다. 또한 이미 지일-닐슨 염색법에 의한 선별검사에서 음성을 나타낸 객담 53예, 소변 101예, 삼출액 128예, 뇌척수액 54예 등 총 370예의 임상가검물을 대상으로 하여 위에서 검토된 중합효소 연쇄반응 조건으로 검사한 성적과 지일-닐슨 염색법, 배양법 성적과 비교하였다. 결과 : DNA분리방법 2가지와 3가지 중합효소는 분석학적 예민도와 5fg로 나타나 차이를 발견할 수 없었으며, 프라이머 P1, P2쌍은 예민도가 5fg, 프라이머 INS1, INS2쌍과 프라이머 Pt3, Pt6쌍의 예민도는 0.5fg이었다. Easy-Cycler^R가 수조형에 비해 높고, 미량 원심시험관은 Robbins사 제품이 Sarstedt사 제품에 비해 높은 분석학적 예민도를 나타냈다. 프라이머 P1, P2쌍과 프라이머 INS1, INS2와 Pt3, Pt6 2쌍의 프라이머의 특이도에 있어서는 항산균 표준균주 중 M. tuberculosis H37Rv, M. tuberculosis ATCC 27294, M. bovis ATCC 29312의 3주에서 특이 증폭 띠를 관찰할 수 있었다. 그러나 비결핵성 항산균 8주에는 특이 증폭 띠를 나타내지 않았다. 또 비항산균 10주에도 특이 증폭 띠가 관찰되지 않았다. 따라서 Robbins사의 미량 원심시험관과 proteinase-K법에 의한 DNA분리방법에 Easy-Cycler^R를 사용하여 프라이머 INS1, INS2쌍으로 일차 중합효소 연쇄반응을 시행한 후 프라이머 Pt3, Pt6쌍으로 이차중합효소 연쇄반응을 시행하는 방법을 370예의 임상가검물에 시행하였고 지일-닐슨 염색법과 결핵균배양검사도 동시에 시행한 결과 중합효소 연쇄반응 양성은 106예(28.6%), 배양 양성은 27예(7.3%) 및 염색 양성은 18예(4.9%)였으며, 결핵환자는 141명(38.1%)였다. 370예의 임상 가검물로 시행한 중합효소 연쇄반응의 진단학적 예민도와 특이도, 양성결과 예측치 및 음성결과 예측치는 68.8%, 96.1%, 91.5% 및 83.3%로 각각 나타났다. 결론 : 결핵균 동정을 위한 중합효소 연쇄반응은 배양검사에 비해 신속하며, 분석학적인 예민도와 특이도가 뛰어나므로 결핵 진단을 위한 임상병리검사로서 유용하다고 사료됨. In this study, We investigated the optimal conditions of polymerase chain reaction(PCR) assay for the rapid identification of Mycobacterium tuberculosis in clinical specimens as routine laboratory test. So we have compared two DNA isolation methods, 3 polymerases, 2 set of primer, 2 kinds of thermocycler and 2 microtubes. We evaluated two DNA isolation methods, bead-beating method and proteinase-K method, the latter was more sensitive than the former. In comparision of two sets of primers, P1 and P2 primers detecting 123-base pair fragment of IS6110 made from Biosnthesis(U. S. A.) and INS1 and INS2 primers detecting 245-base pair fragment of IS986 showed equally sensitive results ie. 5fg. Specificity of primers were tested and INS1 and INS2 primers gave 245-base pair product from M. tuberculosis H37Rv, M. tuberculosis ATCC 27294 and Mycobacterium bovis ATCC 29312 but not from 8 nontuberculous mycobacterial strains such as M. kansasii ATCC 12478, M. terrae ATCC 15755, M. intracellurae ATCC 13950, M. avium ATCC 25281, M. gordonae ATCC 14470, M. fortuitum ATCC 6841, M. smegmatis ATCC 19420, M. scrofulaceum ATCC 19981. Coagulase-positive staphylococcus, coagulase-negative staphylococcus, streptococcus, Esccherichia coli, Serra-tia marcescens, Klebsiella pneumoniae, Enlerobacter aerogenes, Enterobacter cloacae, Acinetobacter calcoaceticus, Pseudomonas aerugonosa showed no 245-base pair amplification product. PCR by the P1 and P2 primers showed 123-base pair amplification product from M. tuberculosis H37Rv, M. tuberculosis ATCC 27294 and Mycobacterium bovis ATCC 29312 but not from 8 nontuberculous mycobacterial strains such as M. kansasii ATCC 12478, M. terrae ATCC 15755, M. intracellularae ATCC 13950, M. avium ATCC 25281, M. gordonae ATCC 14470, M. fortuitum ATCC 6841, M. smegmatis ATCC 19420, M. scrofulaceum ATCC 19981. Coagulase-postive staphylococcus, coagulase-negative staphylococcus, streptococcus, Escherichia coli, Serratia marcescens, Klebsiella pneumoniae, Enlerobacter aerogenes, Enterobacter cloacae, Acinelobacler calcoaceticus, Pseudomonas aeruginosa showed no 123-base pair amplification product. In comparision of polymerase, Taq DNA polymerase^R(Promega Co., U. S. A.) was more cost effective than Ampli Tag^R(Perkin-Elmer Cetus, U. S. A.), but these two were equally sensitive and specific in the detection of M. tuberculosis-specific DNA. Tac polymerase (Korea'Biotech, Korea) showed many nonspecific bands. In comparision of thermocycler, Easy-Cycler^R(Ericomp, U. S. A.) was more sensitive than water-bath type and in that of microtubes Robbin's were more sensitive than Sarstedt's PCR results were compared with results of culture for M. tuberculosis and Ziehl-Neelsen stain in 370 clinical specimens that were negative by initial Ziehl-Neelsen stain. There were 27 specimens(7.3%) that were positive for M. tuberculosis by culture, 18(4.9%) specimens that were positive by Ziehl-Neelsen stain, and 106 specimens(28.6%) that were positive for PCR and 141 cases that were positive for tuberculosis. Overall sensitivity, specificity, positive predictive value and negative predictive value were 68.8, 96.1, 91.5 and 83.3% respectively, for PCR; 19.1, 100, 100, and 66.8%, respectively for culture; and 12.8, 100, 100, and 59.0% respectively for Ziehl-Neelsen stain.
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